HPLC法有效测定发酵液中维生素B_(12)的含量

建立了一种更简便、快速、准确的测定谢氏丙酸杆菌发酵液中脱氧腺苷钴胺素(维生素B12)含量的检测方法,使用高效液相色谱直接检测.利用Apollo C18(5μm,4.6mm×25cm) 色谱柱;以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)作流动相;柱温25℃;检测波长260nm;流速1.0mL/min;恒速洗脱.在所选定的液相色谱条件下,脱氧腺苷钴胺素和杂质分离良好,维生素B12在20μg/mL80μg/mL范围内线性良好,线性方程相关系数为0.99995,平均回收率为99.92%,相对标准偏差RSD为0.12%.此方法重复性好,样品预处理方法简单,分析速度快,7min内即可实现目的产物和杂质的完全分离.适用于整个发酵过程条件的优化及发酵产物提取过程的监控.     

SPR技术对奶粉中维生素B_(12)检测方法的建立

目的利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,建立快速定量测定牛奶中维生素B12的方法。方法将钴胺素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面,并对竞争结合的维生素B12结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化,检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的维生素B12,利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线,并对市售10个奶粉样品进行检测。结果制备的芯片稳定,50个循环相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为0.54%,该方法的检测限为0.006μg/100 g,回收率为92.1%~104.1%。测得的10个牛奶产品中维生素B12含量与对应商品标签值全部在标准规定的范围内。结论所建立的方法可以在6 h内完成样品的前处理和检测,是一种简便、快捷的定量检测方法。     

维生泰B12的营养与食用量

一、维生素B12的结构 维生素B12一般是指具有氰钴胺素(维生素)相似活性的一类化合物的总称.     

维生素B12（之一）

维生素B12，又叫钴胺素、氰钴胺、动物蛋白因子、抗恶性贫血维生素，是一种由含钴的卟啉类化合物组成的B族维生素，也是唯一含矿物质的维生素，因其含钻而呈红色，又称红色维生素，是少数有色的维生素。     

SPR技术对奶粉中维生素B12检测方法的建立

目的 利用表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)技术, 建立快速定量测定牛奶中维生素B12的方法。方法 将钴胺素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面, 并对竞争结合的维生素B12结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化, 检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的维生素B12, 利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线, 并对市售10个奶粉样品进行检测。结果 制备的芯片稳定, 50个循环相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为0.54%, 该方法的检测限为0.006 μg/100 g, 回收率为92.1%~104.1%。测得的10个牛奶产品中维生素B12含量与对应商品标签值全部在标准规定的范围内。结论 所建立的方法可以在6 h内完成样品的前处理和检测, 是一种简便、快捷的定量检测方法。     

钛胶RP-HPLC法同时测定5 种维生素

采用钛胶反相色谱柱,建立高效液相色谱法同时测定5 种维生素：烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素含量的检测方法。研究5 种维生素的保留行为与磷酸缓冲盐pH值、缓冲盐类型及浓度、柱温和流速的关系,得出了最优色谱条件：于波长210 nm处检测生物素和钴胺素,于波长270 nm处检测烟酸、烟酰胺和叶酸,磷酸盐pH 7.0,浓度5.0 mmol/L,柱温50 ℃,流速0.8 mL/min。分析5 种维生素保留的热力学参数焓、熵和吉布斯自由能。烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素标准曲线线性良好（R2＞0.999 0）;烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素的检出限分别为6、10、20、22、8 ng/mL;5 种物质的相对标准偏差均低于1.36%;加标回收率范围为92.30%～107.20%。方法的精密度和准确度均可满足高效液相色谱法的测定要求。     

维生素B12检测方法研究进展

维生素B12作为一种生物活性物质,在贫血、神经系统疾病、出生缺陷、评价指标、营养强化等方面发挥重要的作用。由于维生素B12结构复杂,且含量很低,提升其检测手段具有重要的实际意义。该文对国内外维生素B12检测方法进行综述,主要包括液相色谱法,微生物方法,酶联免疫吸附测定法,原子吸收光谱法,电感耦合等离子测定法,电化学传感器方法,表面离子共振检测,荧光分子探针方法等,涉及光谱学、电化学、免疫学、色谱和微生物等学科。重点对维生素B12检测方法从技术原理、操作特点、分析效果以及应用范围作简单述评,最后对维生素B12检测技术手段的发展趋势进行讨论和展望。     

产B族维生素植物乳杆菌的来源及其在发酵食品中的应用

整理了与合成核黄素、叶酸以及钴胺素相关的基因,分析总结了国内外在产B族维生素植物乳杆菌的筛选、表达优化、合成机制、调控技术、食品加工中应用及植物乳杆菌调节肠道菌群改善宿主维生素缺乏效果等方面的研究进展,为开发富含B族维生素发酵食品,防治人体B族维生素缺乏提供参考。     

食品中VB_(12)检测方法研究进展

VB12是重要的B族维生素,在食品中的含量很低。文中论述了近年来VB12检测方法的研究现状,分析了各种检测方法的特点,并根据食品特点对VB12检测方法的发展提出了展望。     

匈亚利婴儿食品中的维生素B

匈亚利对婴儿食品中的维生素B作了测定分析,所测定的食品包括肉、水果、蔬菜和果酱等,被测定的维生素B主要有硫胺素、核黄素、生物素、叶酸、吡哆醇、钴胺素和泛酸,并给出了测定结果,同时还就测定结果与6至12月龄婴儿的维生素B的推荐摄取量进行了比较。从测定情况看,婴儿食品     

纳他霉素效价测定方法的改良及含量的快速测定

为了确定固体发酵过程中纳他霉素含量快速测定和生物效价准确测定方法,本文采用高效液相色谱法、紫外分光光度法和管碟法测定了同一批褐黄孢链霉菌固体发酵产物纳他霉素的含量。其中高效液相色谱法和紫外分光光度法测定纳他霉素固体发酵产物含量分别为2351.52 mg/L和1979.87 mg/L,前者结果准确而稳定。后者测定准确率为96.97%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。适用于固体发酵过程中的纳他霉素含量的快速测定。管碟法测定纳他霉素平均效价为1979.87 mg/L。改良管碟法采用正己烷封盖纳他霉素溶剂甲醇后,测定的平均效价达到1990.29 mg/L,准确率由84.20%提高到84.64%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。采用正己烷封盖能有效控制纳他霉素溶剂甲醇的挥发性并提高管碟法的准确性和测定的浓度范围,而正己烷本身不具有抑菌效果。     

高效液相色谱法快速测定多维片中的维生素B12

目的建立高效液相色谱法快速测定多种维生素片中的维牛素B_(12)含量。方法样品用水作为溶剂经超声波提取,以0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH=2.5)和乙腈作为流动相采用高效液相色谱法测定,以外标法定量。结果本研究将检测波长改为546 nm,可减少多维片中其他组分的干扰。维生素B_(12)在0.5~10 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9999),在1、2和5 mg/L的添加水平下测得回收率分别为98.1%、97.2%和99.0%(n=6),相对标准偏差分别为3.6%、2.0%和4.6%,方法检出限为0.2 mg/L,定量限为0.5 mg/L。结论该方法快速、简便、准确且干扰少,可适合于多种维生素片中维生素B_(12)的定量分析。     

高效液相色谱法测定维生素片中维生素B12的不确定度评定

目的评定高效液相色谱法测定维生素片中维生素B_(12)的不确定度。方法维生素片中维生素B_(12)经纯化水超声提取,经色谱柱分离,流动相等度洗脱,使用紫外检测器550 nm检测,外标法定量来测定维生素片中维生素B_(12)的含量。依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,考察称量、标准溶液配制、样品和仪器重复测量等主要因素引入的不确定度,并对不确定度的各分量进行计算和合成。结果当维生素片中维生素B_(12)含量为0.408 mg/100 g时,在95%的置信区间下,其扩展不确定度为±0.0053 mg/100 g(k=2)。评定结果表明,实验过程中的不确定度主要来源于标准溶液配制、仪器重复测量。结论不确定度评定适用于高效液相色谱法快速测定维生素片中维生素B_(12)含量的不确定度分析,对检测结果准确度的提高具有指导意义。     

费氏丙酸杆菌发酵生产V_B_(12)

VB12广泛应用于医药业和食品工业,费氏丙酸杆菌是其主要的工业生产菌种。费氏丙酸杆菌发酵过程中会产生大量丙酸和乙酸,有机酸的积累会抑制菌体生长,延长发酵周期。通过改进发酵工艺来解除有机酸抑制,提高发酵产量是费氏丙酸杆菌发酵工艺的主要研究内容。VB12是费氏丙酸杆菌胞内产物,提取工艺对生产总收率具有重要作用。耦合发酵工艺改造和膜分离技术目前是费氏丙酸杆菌发酵VB12的研究热点。     

紫外分光光度法测定发酵液中克拉维酸含量的研究

利用克拉维酸与咪唑的衍生物在312nm下具有特征吸收的原理对其含量进行测定，回收率为99．1％～101．7％，衍生后的克拉维酸稳定性较好，增加了测量的准确性，并与高效液相色谱法进行了比较，实验表明该方法具有准确、简便、快速、操作系统简单等特点，对于成品及半成品两种方法测定结果一致，是一种用于检测发酵液中克拉维酸含量的简便、快捷的方法。     

Determination of water-soluble vitamins B1, B2, B6 and B12 in milk using HPLC]

Simple methods of determining the water-soluble vitamins B1, B2, B6 and B12 in milk by HPLC are described. Compared to existing procedures, the following improvements can be realized. The oxidation of vitamin B1 to thiochrome is stopped by the addition of sodium sulphite. This step significantly increases repeatability. Thiochrome is then extracted with butan-1-ol, which results in fewer co-extracts and greater selectivity. After the hydrolysis of the 5-phosphates of the vitamin B6 (pyridoxine, pyridoxal and pyridoxamine), these three vitamers are determined by isocratic HPLC as DDS-ion-pairs and with fluorimetric detection. As only microbiological methods have so far been used for the determination of minute quantities of vitamin B12 in milk, a new HPLC procedure is proposed with a detection limit of 0.2 micrograms vitamin B12/L milk.     

高效液相色谱法同时测定保健食品中泛酸、烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定保健食品中泛酸、烟酰胺、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6的含量。方法样品经0.2%磷酸溶液超声提取,经Alltima-C18柱分离,以乙腈-5 mmol/L庚烷磺酸钠溶液为流动相进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器(diode array detector,DAD)同时在200 nm、280 nm波长处进行检测。结果泛酸、烟酰胺、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6能实现较好的分离,在各自线性范围内线性关系良好,平均回收率为93.9%~103.2%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.4%~1.8%。结论该方法操作快速简便、精密度和重复性好,可适用于保健食品中泛酸、烟酰胺、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6含量的同时测定。     

高压液相色谱法检测饮料中维生素 B6

目的 建立饮料中维生素 B6 含量的高压液相色谱检测方法。方法 饮料样品经稀释、过滤后, 用高 压液相色谱仪进行测定, 测定结果与 GB/T 5009.154-2003《食品中维生素 B6 的测定》比较。结果 浓度范围 内线性关系良好, 相关系数 R 均在 0.999 以上。本方法的检出限(S/N≥3)为吡哆醇 15 μg/kg、吡哆醛 13 μg/kg、 吡哆胺 16 μg/kg。平均回收率为 98.9%~99.5%, 相对标准偏差为 0.88%~1.05%。使用高压液相色谱法测定饮料 中维生素 B6 含量与使用微生物方法检测得到的数据一致, 而高压液相色谱法所用时间比微生物法要短得多。 结论 高压液相色谱法测定饮料中维生素 B6 灵敏度高, 值得在实验室的日常检测中推广。     

pH对高效液相色谱法测定保健食品中维生素B12含量结果的影响

摘 要： 目的通过高效液相色谱法研究原料中包含较高含量碳酸钙的复合维生素片且样品溶液pH>7.0不同pH条件下维生素B12 检测结果的差异性并探究其原因。方法 选取原料中添加较高含量碳酸钙且样品溶液pH>7.0的复合维生素片,调节样品溶液pH为4.0~4.5、5.0~5.5、6.0~6.5时测定样品中维生素B12的含量并记录;检测并记录pH分别为4.02、5.01、6.05水稀释得到的标准中间液维生素B12的检测结果. 记录并分析pH为4.0~4.5、5.0~5.5、6.0~6.5的样品和碳酸钙溶液60min内pH的变化。结果不同pH样品溶液维生素B12测得的结果值有显著性差异,调节pH为4.20~4.50时测得的结果值与样品实际结果值相符;维生素B12标准中间液在不同pH下测得的检测结果相同。样品和碳酸钙溶液的pH在60 min内随着时间的变化发生改变,调节溶液pH>5.0时,溶液的酸碱性较不稳定,在10~20 min内溶液会由酸性变为碱性;调节溶液pH<5.0时,溶液在60 min内较稳定始终为酸性,碳酸钙溶液的酸碱性与样品溶液有相同的变化趋势。结论在保健食品维生素B12的检测中需要关注样品中原辅料的种类和配比对样品溶液检测过程中酸碱性的影响,对原料中含较高含量碳酸钙且样品溶液pH>7.0的样品在维生素B12检测中需用柠檬酸调节溶液pH为4.2~5.0之间。     

基于模糊数学法和响应面法优化藜麦发酵浓浆发酵工艺

目的研究五台山藜麦发酵浓浆达到最佳感官品质时的发酵工艺。方法以藜麦酶解液为发酵基质,选用植物乳杆菌、干酪乳杆菌按一定比例混合进行混菌发酵,在单因素试验基础上,采用响应面分析方法,考察接种量、发酵时间、菌种比例3因素对感官品质的影响,以感官评分为响应值确定最优发酵工艺参数。为避免感官评价方法的主观性和片面性,采用模糊数学法得到各样品感官评分。结果经Design-Expert V8.0.6软件对结果进行分析,确定藜麦发酵浓浆生产的最优工艺参数为:接种量2.83%,发酵时间10.04 h,菌种比例2.08:1。在此优化条件下得到的藜麦发酵浓浆最终感官得分为92.5分,与模型预测值基本相符。结论响应面试验设计可用于藜麦发酵浓浆发酵工艺优化。藜麦发酵浓浆组织状态良好,酸味爽口且口感细腻爽滑,满足人们对其感官品质的需求。