固相萃取串联高效液相色谱检测动物源性食品中甲巯咪唑残留

以动物源性食品中抗甲亢药物甲巯咪唑为研究对象,采用Cleanert S C18固相萃取柱对复杂动物源性食品进行基质净化,对上样溶剂、洗杂液、洗脱液等试验参数进行优化,建立固相萃取净化富集与高效液相色谱联用技术,实现对猪肾、猪肝、猪肉样品中的痕量甲巯咪唑准确、灵敏检测。在最优试验条件下,在3个添加浓度的猪肾、猪肝、猪肉样品中,分析物甲巯咪唑的回收率均大于85%,相对标准偏差(RSD,n=3)均小于5%,对3种样品中最低检出限(S/N=3)和最低定量限(S/N=10)分别为:猪肾0.59,1.97μg/kg;猪肝0.54,1.80μg/kg;猪肉0.49,1.63μg/kg。所建立的检测方法具有较高的准确度和灵敏度,可以满足对实际样品中甲巯咪唑的分析检测。     

市售猪肉、肝、肾中铅、镉含量的检测与分析

了解上海市两城区猪肉、猪肝和猪肾样本中铅、镉污染水平,为评估猪肉、肝和肾中铅、镉暴露量提供数据。按区域和品牌进行抽样,采样地点包括两个城区的超市、菜场和农贸市场,涉及的样本品牌有猪肉14个,猪肝13个,猪肾12个,共计78个样本。用微波消解仪进行样本的前期消化处理,后用电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)进行铅、镉含量测定。微波消解ICP-MS法测定铅、镉的检出限分别是1.11μg/L、0.21μg/L,样品加标回收率在81-114.75%范围内,可用于实际样品的测定;三类样本的铅、镉的检出率分别大于等于92.86%、95.83%,超标率分别小于等于7.69%、0;同一城区中猪肉样本中铅含量明显大于镉,猪肾样本中镉含量明显大于铅,表明不同器官对不同重金属元素的富集能力不同;此外,不同器官中铅、镉含量之间的差异与城区和品牌无关;对比10年前重金属含量情况发现现在各类样本中铅、镉含量都有了明显的降低,说明近年来相关部门的监督很有成效。     

液相色谱-质谱联用分析动物内脏和肌肉组织中的全氟化合物

建立液相色谱- 质谱联用检测动物内脏(猪心、猪肝、猪肾、鸡心和鸡肝)和肌肉(猪里脊肉和鸡胸肉)组织中11 种全氟化合物(PFCs)的分析方法。11 种PFCs 包括9 种常见PFCs 和2 种调聚酸。首先考察对比了WAX和MAX两种固相萃取小柱对11 种PFCs 的回收情况,最终选用WAX 柱对样品的萃取液进行净化。通过样品前处理方法的比较和优化,对动物内脏和肌肉组织分别采用离子对液液萃取和碱消解法。最后分析检测了农贸市场上的猪肝等多种实际样品,除了PFTA 和2 种调聚酸回收率较低外,其他8 种PFCs 的实际样品的加标回收都在80%～120% 之间,方法检出限为0.002～0.032ng/g。     

液相色谱—串联质谱法测定猪可食用组织中氨茶碱残留

目的:研究猪可食用组织中氨茶碱药物残留的定性定量测定方法。方法:建立固相萃取净化结合高效液相色谱—串联质谱法,试样中的氨茶碱药物残留被甲醇溶液提取后,经PRiME HLB固相萃取柱一步净化,随后用C₁₈色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈分别作为水相和有机相对氨茶碱进行色谱柱梯度洗脱,利用电喷雾正电压离子化并采用多反应监测模式进行化合物检测,空白基质匹配标准曲线外标法定量。结果:氨茶碱药物在3.5 min内完成仪器分析,不同基质的匹配曲线在0.005～0.1μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系(R>0.998 0),猪肉、猪肝、猪肾的方法加标平均回收率为87.2%～101.3%,相对标准偏差为0.7%～6.2%(n=6),方法检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。结论:该方法简便高效、重复性好、灵敏度高,适用于猪的可食用组织中氨茶碱药物残留的定性定量分析。     

惠州市售猪肉和猪肝中重金属元素残留的抽检检测报告分析

本文采用湿法消解,原子吸收火焰法测定猪肝中的铜,原子吸收石墨炉法测定猪肝中的镉和铬;采用干法灰化,原子吸收火焰法测定猪饲料中铜含量.通过对惠州地区市售的猪肝(30份)和猪肉(30份)进行检测,发现猪肝和猪肉中的镉含量为0.01～0.16mg/kg,铬含量为0.10～0.88 mg/kg,合格率均为100％;猪肝中铜含量为4.90～78.9 mg/kg,合格率仅为50.0％.猪肉中铜含量为0.23～0.87mg/kg,合格率为100％;生长育肥猪后期配合饲料中铜含量0.29～69.0 mg/kg,合格率95.0％.调查表明惠州地区市售猪肉中铜、镉和铬元素残留量合格,猪肝中镉、铬残留量合格,铜残留量较高;市售育肥后期猪饲料中存在铜严重超标的现象.     

ELISA法与LC-MS/MS法测定动物组织中克仑特罗残留

目的:比较酶联免疫法(ELISA)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定动物组织中克仑特罗残留量的准确度、精密度及检测限。方法:样品经过处理后,分别采用ELISA法和LC-MS/MS法进行测定;用ELISA法对组织样品进行初筛,测出阳性样品利用LC-MS/MS法进行确证。结果:应用ELISA法测定样品猪肉样品中克仑特罗的回收率为67.0%～99.6%,批内变异系数3.4%～8.7%,批间变异系数6.1%～9.6%,灵敏度为0.025μg/L,最低检测限0.025μg/kg;LC-MS/MS检测方法回收率88.62%～111.43%,批内变异系数4.4%～7.4%,最低检测限0.5μg/kg;用ELISA法对50份猪肉和50份猪肝样品进行检测,筛选出3个阳性样品,经LC-MS/MS确证为阳性,两种方法检测结果一致。结论:ELISA法灵敏度和准确度较高,样品处理方法简单,成本低,适合组织中克仑特罗残留大规模筛查;LC-MS/MS准确度高,适合于阳性样品精确定量。     

高分辨质谱定性筛查牛奶和奶粉中兽药残留

目的 建立高分辨质谱定性筛查牛奶和奶粉中兽药残留的高通量方法。方法 样品经乙腈、QuEChERS盐包提取, 采取改良的3种不同方式[QuChERS、高分辨质谱(high resolution mass spectrometry, EMR)、固相萃取(solid phase extraction, SPE)]净化提取液, 用液相色谱联用高分辨质谱(liquid chromatography-high resolution mass spectrometry, LC-HRMS)筛查了牛奶和奶粉中138种兽药残留, 建立兽药信息数据库, 并用截断值(Vcut-off, 判断阳性和阴性样品的临界值)作为评估筛查方法的指标。结果 改良的QuChERS可以获得更高的回收率, 当截断值(Vcut-off)设定为0.2时, 在2种加标水平下, 有109种兽药通过了筛查方法验证的要求, 假阳性和假阴性概率均低于5%。结论 此方法适用于牛奶和奶粉中多兽药残留的定性筛查, 一针进样可以得到109种兽药残留的筛查信息, 方法假阳性和假阴性概率在规定的目标物浓度下都低于5%。     

高效液相色谱-串联质谱法研究猪组织中磺胺间甲氧嘧啶和磺胺二甲嘧啶的消除规律

目的 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测猪组织中磺胺间甲氧嘧啶(Sulfamonomethoxine ,SMM)和磺胺二甲嘧啶(Sulfadimidine ,SM2)残留的方法,并初步进行磺胺间甲氧嘧啶和磺胺二甲嘧啶的在猪组织中的消除规律研究。方法 通过饲喂实验获得样品,样品经乙腈提取、正己烷除脂,HPLC-MS/MS法检测。结果 磺胺间甲氧嘧啶和磺胺二甲嘧啶在1~200 ng/mL浓度时,线性良好,相关系数r≥0.999,检测限0.5 μg/kg、定量限1.0 μg/kg,在1、10、200 μg/kg浓度添加时,平均回收率在80.4%~92.4%;磺胺间甲氧嘧啶和磺胺二甲嘧啶在吸收上存在竞争关系,两种药物在猪肉和猪肝中残留量没有显著差异,停药28天后未能检出药物。结论 检测方法简便、快速,灵敏,能够大批量操作,磺胺间甲氧嘧啶和磺胺二甲嘧啶同时使用会造成磺胺间甲氧嘧啶利用率降低,停药28天后这两种药物均能完全代谢消除。     

猪肝中盐酸克伦特罗的快速检测研究

针对猪肉制品中"瘦肉精"超标问题,对随机抽取市售猪肝应用竞争性酶联免疫法进行了测定,采用醇提法及冷热处理工艺并对猪肝中瘦肉精的残留量的影响进行研究。结果表明,采用70%浓度的甲醇,热处理30min的熟肉制品瘦肉精残留少,去除瘦肉精更彻底。     

高效液相色谱串联质谱法测定猪肉和鸡肉中硫酸粘杆菌素药物残留

本方法通过甲醇三氯乙酸溶液提取,HLB固相萃取柱净化,用液相色谱串联质谱法对猪肉和鸡肉中多肽类药物残留硫酸粘杆菌素进行方法研究,硫酸粘杆菌素在猪肉、鸡肉中检出限分别为0.02mg/kg、0.05mg/kg,回收率均在70%以上;同时,对市面上猪肉、鸡肉进行了148批次的测试,分析不同基质硫酸粘杆菌素的本底范围。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定动物性食品中8 种抗病毒类药物残留量

建立同时测定鸡肉、猪肉、鸡肝和猪肝中阿比朵尔、金刚烷胺、金刚乙胺、泛昔洛韦、帕拉米韦、咪喹莫特、奥司他韦、拉米夫定8?种抗病毒药物残留的超高效液相色谱-串联质谱的检测方法。样品采用乙腈-0.1%甲酸溶液（9∶1,V/V）经一次性振荡提取,用MCX固相萃取柱净化,内标法定量。结果表明：8?种抗病毒药物的检出限均低于1.0?μg/kg,定量限均低于3.0?μg/kg,空白鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝中分别添加5.0、10.0?μg/kg和20.0?μg/kg,8?种抗病毒药物的回收率均在70%～120%之间。该方法基质干扰小、灵敏度高、回收率好,可用于日常动物性样品中抗病毒类药物的残留检测。     

基于UHPLC-Q-TOF/MS法同时检测猪肉中主要抗生素类兽药残留

建立了QuEChERS净化结合超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱（UHPLC-Q-TOF/MS）法同时筛查猪肉中10种抗生素类兽药残留量的分析方法。样品经过Na₂EDTA-Mcllvaine缓冲溶液-0.1%甲酸乙腈-NaCl-无水Na₂SO₄-C₁₈的提取净化。通过Infinity Lab Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱分离,在正离子多反应监测模式下分析。结果表明,10种兽药相关系数大于0.99,在5.0～100.0 μg/kg范围内线性关系良好,在5、10、20 μg/kg三个添加水平下平均回收率为72.3%～117.3%,日内相对标准偏差为（Relative Standard Deviation,RSD）0.9%～10.4%,日间RSD为1.1%～13.4%,检测限（Limit of Detection,LOD）为0.25～1.0 μg/kg,定量限（Limit of Quantity,LOQ）为0.5～5.0 μg/kg。采用本方法对市场购买的50份新鲜生猪肉样品进行检测,1份样品四环素呈阳性,其余样品均未检出。该方法操作简便、快速,具有良好的精密度和定量限,适用于猪肉中10种抗生素类兽药的快速检测。     

Antibiotic residues in edible tissues and antibiotic resistance of faecal Escherichia coli in pigs from Portugal.

The aims were to provide data on antibiotic residues in pig tissues and the trends in the occurrence of antibiotic resistance in Escherichia coli (a commensal bacteria that can colonize the intestinal tract of humans and animals) isolated from the animals studied. Muscle and kidney samples collected from freshly slaughtered pigs were tested for the presence of antibiotic residues using rapid screening tests. Ninety muscle and 90 kidney samples from the same animals, collected in the slaughterhouse of the central region of Portugal, were screened by microbial tests and only six samples did not fulfil the European Community regulations concerning maximum residue limits. When a more sensitive method was used for the detection of sulphamethazine, 36% of the animals contained residues of the antibiotic. This indication of a larger antibiotic occurrence than anticipated was confirmed by studying the susceptibility of their enteric E. coli. In all the animal faeces studied (n = 60), E. coli isolates resistant to amoxycillin, tetracyclines and sulphonamides were found. The majority of the faecal samples demonstrated a high degree of E. coli resistant to sulphonamides and tetracyclines, respectively 88% and 85%. These data raise important questions about the relevance of the detection of antibiotic residues as the only method to establish the quality and safety of animal products for human consumption.     

同位素稀释气相色谱-串联质谱法测定动物源食品中克霉唑残留量

建立了动物源食品（猪肉、鸡肉、猪脂肪、猪心、猪肝、猪肾）中克霉唑残留量的同位素稀释气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）测定方法。样品经加速溶剂提取后,用凝胶渗透色谱净化。采用HP-5 MS色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）进行分离,多反应监测（MRM）模式检测,同位素内标法定量。实验结果表明,克霉唑在1~100 μg/L浓度范围内线性良好,决定系数（R2）为0.9995,定量限（LOQ,S/N≥10）为2.0 μg/kg。在2.0、5.0、20.0 μg/kg加标水平下,回收率在82.6%~116.5%之间,相对标准偏差为5.2%~13.5%。该方法灵敏度高、准确性好,能够满足动物源食品中克霉唑残留量的确证和定量分析。     

固相萃取-高效液相色谱法测定猪肉与鸡肉中替米考星、泰乐菌素残留量

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定猪肉与鸡肉中替米考星、泰乐菌素残留量的检测方法.样品用乙腈提取,C18固相萃取小柱净化,采用高效液相色谱分离,二极管阵列检测器(PDA)检测,外标法定量.结果表明:标准校准曲线在30～1000μg/L的范围内呈良好线性关系,相关系数r＞0.999.样品中替米考星、泰乐菌素的添加水平分别为0.05、0.10、0.15mg/kg时,样品加标回收率为72.7％～90.8％,变异系数在2.6％～8.3％之间,替米考星和泰乐菌素方法检出限30μg/kg,定量限为50μg/kg.本法简便、快速、定量准确、精密度高,适用于猪肉和鸡肉中替米考星与泰乐菌素残留量的检测.     

3 种猪肉的品质分析

以恩施当地传统饲养黑内二元猪、全价配合饲料饲养黑内二元猪及全价配合饲料饲养三元猪为样本,分别测定3 种猪后腿肉和里脊肉的矿物质含量、质构、风味成分,以探讨不同品种及饲喂方式对猪肉品质的影响。结果表明：传统饲养黑内二元猪肉Se含量最高,且肉硬度最大;全价配合饲料饲养黑内二元猪肉的嫩度最大;3 个类型猪的生肉和熟肉均存在风味差异,可通过电子鼻进行区分。     

竞争化学发光酶免疫检测动物源性食品中四环素残留

目的:建立一种准确度高、重复性好的检测四环素(tetracycline,TC)残留的竞争化学发光酶免疫测定法(competitive chemiluminescence enzyme immunity,CLEIA)。方法:通过选择适宜的偶联载体蛋白,优化反应温度、时间等条件,建立了一种测定四环素的竞争化学发光酶免疫测定法(TC-CLEIA)。结果:该方法的检测范围为0.0259~95.9478 μg/L,相关系数r为0.9998,检测限为0.0133 μg/L,准确度为99.17%,灵敏度为0.7305 μg/L,变异系数<10%,对氯霉素、青霉素具有极低的交叉反应;向空白猪肉、鱼肉、鸡肝中添加三种不同浓度的四环素标准品时,检测结果具有较高的准确度和重复性;建立的TC-CLEIA测定法检测了四环素小鼠中毒模型中肝脏、肾脏和肌肉中四环素残留的浓度,浓度大小依次为:肾脏 > 肝脏 > 肌肉。结论:本研究建立的TC-CLEIA检测法简便,检测限低,准确度、重复性、特异性均很好,适用于动物源性食品中四环素残留的检测。     

直接竞争ELISA法检测动物源食品中利巴韦林残留

本研究针对动物源食品中利巴韦林残留的问题,建立了直接竞争酶联免疫分析方法,快速高效地检测利巴韦林残留。采用活泼酯法将利巴韦林(RBV)与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备利巴韦林完全抗原(KLH-RBV),通过免疫新西兰大耳白兔得到多抗血清,经Protein A-Sepharose 4B凝胶柱纯化后得到纯化抗体,在此基础上建立直接竞争ELISA检测方法。该方法的IC₅₀为10.84 ng/mL,最低检测限达0.002 ng/mL,对鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝等实际样品进行检测,加标回收率为80.23%~90.07%。采用高效液相色谱法进行验证,两种方法测定结果呈现良好的线性关系(R2≥0.99)。本文建立的方法灵敏度高,简便快速,适合现场大批量快速检测动物源食品中利巴韦林残留。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中9种多肽类抗生素残留

建立了动物组织中9种多肽类抗生素残留的固相萃取-超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法。样品经甲醇-0.1 mol/L盐酸（7:3,v/v）混合溶剂提取,酸性氧化铝除杂、正己烷去除油脂,亲水-亲脂平衡（hydrophilic-lipophilic balance,HLB）固相萃取柱净化,以0.2%的甲酸水溶液和乙腈为流动相,经过C₈色谱柱（100A, 150 mm×2 mm, 3 μm）梯度洗脱分离,使用电喷雾正离子化和多反应监测模式检测。结果表明,万古霉素和去甲万古霉素、恩拉霉素A、恩拉霉素B、太古霉素在2～200 μg/L范围内,粘杆菌素A、粘杆菌素B、杆菌肽A在5～500 μg/L范围内,维吉尼霉素M1在0.1～20 μg/L范围内,各化合物定量离子的峰面积和样品质量浓度之间呈现良好的线性关系（R2>0.99）,方法的定量限（S/N=10）为1～20 μg/kg,检出限为0.3~6 μg/kg;以鸡肉、猪肉、猪肝、猪肾为基质,在加标水平为1～200 μg/kg时,各个化合物的平均加标回收率为74.2%～96.3%,相对标准偏差为4.3%～14.6%。该方法简便、灵敏、准确,可用于动物组织中多肽类抗生素残留的同时测定。     

屠宰猪中大肠杆菌毒力基因检测及耐药性分析

为了解屠宰猪中大肠杆菌的毒力因子、种群分型以及耐药性情况,分析潜在的食品安全问题,为食品安全和临床用药提供理论依据,对来自屠宰猪中77?株大肠杆菌,包括陕西53?株、重庆16?株及河南8?株,进行毒力基因、种群分型及耐药性的检测。结果显示,iutA基因的检出率最高,优势群系为A群系;且菌株的耐药情况严重,12?种常见抗生素中对四环素、甲氧苄啶/磺胺甲二唑的耐药性普遍高。大多数菌株耐3～9?种药（90.91%）,最高可对11?种抗生素耐药。屠宰猪中存在耐药性菌株的污染,且极有可能是通过猪肉生产过程进入到食物链中,对消费者的健康存在一定的潜在危害,需要加强卫生监督。