酶解-乙醇辅助法提取灯笼椒中的辣椒籽油及其抗菌活性研究

该实验对酶解-乙醇辅助法提取灯笼椒中辣椒籽油的工艺进行了优化,同时考察了提取出的灯笼椒辣椒籽油的抗菌活性。结果表明,水酶-乙醇法提取辣椒籽油分的最佳工艺参数为辣椒籽粉的粒度为80目,料液比为1∶6、复合酶为0.8%的中性蛋白酶和1%的果胶酶,酶解体系的最适pH、最适温度、最适酶解时间分别为5.5、50℃和5.5h;在最佳工艺条件下,辣椒籽油的提取率可达21.57%。辣椒籽油对酵母菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、普通变形杆菌有较好的抑制作用;对黑曲霉、化脓性链球菌和鼠伤寒沙门氏菌无明显抑菌作用。该研究为辣椒籽油的初步应用提供了数据支持,为今后研发新型绿色食品添加剂提供了参考。     

32种食品添加剂对蜡样芽孢杆菌的协同抑菌作用

以常见食源性致病菌蜡样芽孢杆菌为研究对象,采用试管二倍稀释法测定常用的32种食品添加剂单用和复配对蜡样芽孢杆菌的最低抑菌浓度(MIC),筛选协同抑菌效果最好的组合,研究不同配比对蜡样芽孢杆菌的抑菌效果,以及在最佳抑菌组合条件下的杀菌动力学。结果表明:食品防腐剂和酸味剂对蜡样芽孢杆菌有较好的抑制效果,食品添加剂复配以壳聚糖季铵盐和ε-聚赖氨酸协同抑菌效果最好,分级抑菌浓度指数(FICI)达到0.03125。当壳聚糖季铵盐与ε-聚赖氨酸配比为1∶1复合时,协同抑菌效果最佳:作用4 h对蜡样芽孢杆菌的杀菌率为99.998%,作用96 h杀菌率达到100%。     

解淀粉芽孢杆菌Z16的产酶条件优化及应用

本文采用单因素实验和正交实验,对解淀粉芽孢杆菌Z16的产酶条件及水酶法提取樟树仁油工艺条件进行优化,并与枯草芽孢杆菌AS1.398的水酶法提取樟树籽仁油工艺进行比较。结果表明,解淀粉芽孢杆菌Z16的最佳发酵培养基为:玉米粉4.5%,麸皮2.5%,豆粕4.0%,Ca Cl_20.2%,KH_2PO_40.03%,Na_2HPO_4·12H_2O 0.4%,p H7.5,121℃灭菌20 min;解淀粉芽孢杆菌Z16的最佳发酵条件为:接种量2%,37℃、220 r/min,摇瓶培养44 h。在最佳产酶工艺条件下,解淀粉芽孢杆菌Z16所产中性蛋白酶活力为6984.3 U/m L,比产酶条件优化前提高了54.0%。解淀粉芽孢杆菌Z16水酶法提取樟树籽仁油的最适酶解时间为4 h、最适加酶量为20%(v/v),相应的樟树籽仁油得率为91.1%、樟树籽仁油的酸价升高值只有0.3 mg KOH/m L。解淀粉芽孢杆菌Z16的水酶法提取樟树籽仁油的效果显著优于枯草芽孢杆菌AS1.398(常用的中性蛋白酶生产菌)的效果。     

水酶法提取女贞子挥发油及其抑菌活性研究

以女贞子为原料,对水酶法提取女贞子油及其微胶囊化的工艺进行研究。通过响应面分析法确定水酶法提取女贞子油的最佳工艺,即液料比值为12.6(m L/g),中性蛋白酶添加量为1.4%,酶解温度为52.0℃,酶解时间为3.2h,女贞子油提取率达到10.3%。女贞子油对细菌、霉菌和酿酒酵母都有很强的抑制效果,女贞子油对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌的MIC为6.25%,对根霉和酿酒酵母MIC为12.5%,对枯草芽孢杆菌和黑曲霉的MIC为25%。     

抗菌肽cp1对蜡样芽孢杆菌的抑菌作用及在巴氏杀菌乳中的应用

目的 探究抗菌肽cp1对蜡样芽孢杆菌的抑菌作用,并进一步分析抗菌肽cp1在巴氏杀菌乳中的应用。方法 以蜡样芽胞杆菌为研究对象,通过测定抑菌圈直径(diameter of inhibition zone, DIZ)、最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)、最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)评价抗菌肽cp1对蜡样芽胞杆菌的抑菌效果。通过分析生长曲线、细胞内三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、膜电位、内容物渗出和细胞形态的变化,来揭示可能的作用机制。在此基础上,并探究抗菌肽cp1在巴氏杀菌乳贮藏中的应用。结果 当抗菌肽cp1浓度为10 ug/mL时,其对蜡样芽胞杆菌的DIZ为16.19 ± 1.29mm;抗菌肽cp1对蜡样芽孢杆菌的MIC、MBC分别为4 ug/mL和8 ug/mL;当抗菌肽cp1浓度为2 MIC时,蜡样芽胞杆菌几乎不生长;抗菌肽cp1导致细胞内ATP含量降低,细胞膜超极化,细胞液(包括核酸和蛋白质)漏出,细胞形态破坏;在巴氏杀菌乳中添加1 MIC抗菌肽cp1对乳感官均无显著影响,且4 ℃ 条件下可抗菌肽cp1有效抑制蜡样芽孢杆菌的生长,将其保质期至少延长到12 d。结论? 抗菌肽cp1对蜡样芽孢杆菌具有较强的抑菌效果,具有延长巴氏杀菌乳货架期的潜力。     

β-淀粉酶酶解甘薯淀粉条件分析

麦芽糖可以诱导枯草芽孢杆菌产生中温α-淀粉酶,甘薯淀粉的β-淀粉酶酶解产物主要为麦芽糖。应用高效液相色谱示差折光检测法对不同酶解条件下甘薯淀粉β-淀粉酶酶解产物进行分析。结果表明,液化酶加入量为5~10U/g干淀粉时,酶解产物中葡萄糖的含量最高可达0.94%±0.048%,其含量较低,不会对枯草芽孢杆菌产α-淀粉酶具有阻遏作用。酶解最佳条件为液化酶加入量5U/g干淀粉,β-淀粉酶最佳加入量为200U/g干淀粉,酶解最佳温度为60℃,最佳酶解时间为28h时,此条件下甘薯淀粉酶解产物中麦芽糖含量达75.8%±1.7%。甘薯淀粉β-淀粉酶酶解产物可以诱导β-淀粉酶酶解产物枯草芽孢杆菌发酵生产中温α-淀粉酶。研究对枯草芽孢杆菌发酵生产中温α-淀粉酶碳源优化具有重要意义。     

虾酱源芽孢杆菌的筛选及其益生特性

从市售农家制作传统虾酱中筛选分离5株芽孢杆菌，经鉴定后命名为解淀粉芽孢杆菌Y11、贝莱斯芽孢杆菌Y12、枯草芽孢杆菌Y13、沙福芽孢杆菌Y32和蜡样芽孢杆菌BI6Y。5株菌都可在10%的盐质量分数下正常生长，具有不同产蛋白酶和脂肪酶的能力以及抑菌特性。其中，蜡样芽孢杆菌BI6Y具有β溶血性，对氯霉素、万古霉素、诺氟沙星不敏感，不适合作为益生菌。其它4株芽孢杆菌具有γ溶血性，对氯霉素不敏感，自聚集率在25%~35%之间，可耐受酸和胆盐；分泌表面活性素surfactin；人工胃肠液处理后的存活率多数集中在50%~70%之间，枯草芽孢杆菌Y13在人工胃液(pH 2.0)的存活率最高为95.3%，沙福芽孢杆菌Y32在人工肠液中的存活率最高为85.1%；其菌体、无细胞提取液、细胞内容物分别具有不同的抗氧化活性，其中无细胞提取液可同时清除1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和羟自由基，清除率在40%~60%之间。研究结果表明:除蜡样芽孢杆菌BI6Y外，解淀粉芽孢杆菌Y11、贝莱斯芽孢杆菌Y12、枯草芽孢杆菌Y13、沙福芽孢杆菌Y32具有作为益生菌的潜力。研究结果为基于芽孢杆菌的益生菌产品开发提供了一定理论依据。     

微波对小麦粉中蜡样芽孢杆菌的杀菌效果

该文以灭菌率及生长趋势为评价指标,研究了样品水分含量、微波功率、处理时间对蜡样芽孢杆菌灭菌效果的影响,并通过正交试验探索了微波处理对小麦粉中蜡样芽孢杆菌的最优灭菌条件。结果表明,随样品水分含量升高微波处理对蜡样芽孢杆菌的杀灭率呈现先升高后降低的趋势,且在样品水分含量为15%时,杀灭率最高;微波对蜡样芽孢杆菌的杀灭率随处理时间和微波功率的增加而提高,当微波功率达到581 W时,能够将小麦粉中蜡样芽孢杆菌含量降低到103CFU/g。正交试验结果表明,在处理时间7.5 min,微波功率700 W,样品水分含量15%的条件下,微波处理对蜡样芽孢杆菌的灭菌效果最佳,杀灭率可高达99%。     

不同提取工艺对川桂叶挥发油抑菌活性的影响

采用水蒸气蒸馏法、同时蒸馏萃取法和有机溶剂提取-水蒸气蒸馏法从川桂叶中提取挥发油,以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、曲霉、青霉等6种常见污染菌作为供试菌,通过体外抑菌实验研究了3种不同提取工艺对挥发油抑菌活性的影响.实验结果表明,川桂叶挥发油对6种供试菌都具有很强的抑制作用,其中对酵母菌的抑制作用最强.不同提取工艺对挥发油的抑菌活性有显著影响,同时蒸馏萃取法提取的挥发油抑菌活性最强,其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)是:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌MIC0.125%,MBC0.125%,酵母MIC 0.0625%,MBC 0.0625%,曲霉和青霉MIC 0.250%,MBC 0.250%.     

免疫磁珠技术分离检测熟制食品中的蜡样芽孢杆菌

目的 建立一种免疫磁珠技术分离富集熟制食品中的蜡样芽孢杆菌。方法 在一定量的蜡样芽孢杆菌体系中优化免疫磁珠与抗体用量以及最佳反应时间。在最佳实验条件下, 对免疫磁珠分离蜡样芽孢杆菌的敏感性和特异性进行实验, 并对实际熟制食品的蜡样芽孢杆菌进行分离。结果 最终确定了蜡样芽孢杆菌抗体添加量50 μg/mL、免疫磁珠添加量100 μL, 免疫磁珠与菌液最佳作用时间为15 min, 当菌液稀释度达到10?7, 免疫磁珠法仍然可以检出, 相应的细菌数为4 CFU/mL。结论 本实验制备的免疫磁珠技术灵敏性高, 特异性好, 节省了检测时间和费用, 适用于食品中的蜡样芽孢杆菌的检测。     

响应面分析优化酶辅助水提紫苏叶挥发油的工艺研究

对纤维素酶辅助提取紫苏叶挥发油的工艺进行优化。采用单因素试验考察酶解时间、酶解pH、酶解温度及酶用量对挥发油得率的影响,得到最佳工艺条件为酶解时间45min、pH 4.6、温度55℃、酶用量0.0202g/10g(紫苏叶),在最佳条件下挥发油的得率为0.409%。再利用Design-Experts 8.0进行响应面实验设计,研究了各变量交互作用及其对紫苏挥发油得率的影响。结果表明:pH和酶用量属于显著性影响因子,对pH和酶用量的进一步分析表明在实验空间中存在响应面,其极大值点为pH 4.84、酶用量0.0213g/10g(紫苏叶),在极大值点可获得最高紫苏油得率为0.4896%,较单因素的实验结果提高了19.7%。     

酪蛋白酶解物中抗菌肽的抑菌性及稳定性研究

对酪蛋白胰蛋白酶酶解物中抗菌肽的抗菌性及稳定性进行研究。实验通过以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌为指示菌,验证了抗菌肽的抑菌性,并以大肠杆菌为指示菌,研究了酶解物中抗菌肽在不同温度、不同pH值、不同储藏时间条件下的抑菌稳定性。结果表明:此抗菌肽能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌的生长,具有广谱抗菌活性;碱性及中性条件下,此抗菌肽对大肠杆菌抑菌活性稳定,酸性条件下,抑菌活性随pH值下降而增强;此抗菌肽冻干样品在室温下可长期储藏。     

蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶发酵条件的优化

目的:优化蜡样芽孢杆菌发酵生产新型中性蛋白酶的培养条件。方法:采用Plackett-Burman试验设计,筛选影响蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶酶活力的关键因子;通过Box-Behnken响应面试验设计获得新型中性蛋白酶发酵的最佳工艺条件。结果:筛选出影响蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶的主要因子为葡萄糖、蛋白胨和pH值。获得的最优化发酵培养基组成和培养条件:葡萄糖35 g/L,蛋白40.38 g/L,氯化钠15 g/L,硫酸镁1.5 g/L,Tween-8010 g/L,装液量50 mL/250 mL,pH 7.15,菌龄12 h,发酵时间36 h。在上述条件下,蜡样芽孢杆菌发酵生产新型中性蛋白酶的酶活力高达696.51 U/mL,是未优化前的1.93倍。结论:研究结果为新型中性蛋白酶的产业化生产和应用提供了良好基础。     

杜衡挥发油微波辅助提取及气相色谱-质谱联用分析

在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计对杜衡挥发油微波提取工艺中的液料比、微波功率和微波时间3因素进行研究,分析各因素与得率的关系,得出优化组合,并建立数学模型。结果表明:最佳的工艺条件为液料比(mL/g)8.3:1、微波功率309W、微波时间154s;在此条件下做验证实验,得出杜衡挥发油得率7.96%,与理论值7.90%基本一致,说明回归模型能较好地预测杜衡挥发油提取得率。采用气相色谱-质谱联用技术对杜衡挥发油成分进行分离鉴定,分离出25种成分,共确认了其中19种,采用峰面积归一化法确定了各成分的相对含量。本方法可为杜衡的进一步开发和利用提供参考。     

辣木籽提取物提取工艺优化及其对乳中蜡样芽孢杆菌的抑制作用

为了探究辣木籽提取物对乳中蜡样芽孢杆菌的抑菌活性及抑菌稳定性。以抑菌圈为参照,采用单因素和响应面优化辣木籽抑菌成分的提取工艺条件,以温度、pH、紫外线照射衡量抑菌稳定性,并探究辣木籽提取物在液态乳贮藏中的应用。结果表明,辣木籽抑菌成分的最佳提取工艺条件为:以水为溶剂,pH3.1,料液比1:70 g/mL,浸提温度50 ℃,浸提时间2.5 h,在此工艺条件下,辣木籽提取物的抑菌圈大小为(27.23±0.58) mm,最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）分别为1.25、5 mg/mL,不同pH及紫外线照射时间处理对辣木籽提取物抑菌活性影响不显著（P>0.05）,以100 ℃加热30 min后其抑菌活性仍可保留空白组的50.97%。在经巴氏杀菌的全脂乳和脱脂乳中添加MIC辣木籽提取物对乳风味、色度和黏度均无显著影响（P>0.05）,且4 ℃条件下可有效抑制蜡样芽孢杆菌的生长,相较普通巴氏杀菌乳可将其保质期由7 d至少延长到14 d。因此,辣木籽提取物对乳中蜡样芽孢杆菌有高效、稳定的抑菌效果,具有应用于液态乳贮藏保鲜的潜力。     

我国食源性蜡样芽孢杆菌毒力基因和药物敏感性研究

目的 了解我国不同地区食源性蜡样芽孢杆菌的毒力基因携带特点及其对抗生素的敏感性,为食源性食物中毒的防治提供参考依据.方法 采用PCR方法对2011年我国不同地区收集的238株食源性蜡样芽孢杆菌10种毒力基因进行检测;采用微量肉汤稀释法测定其抗生素敏感性.结果 溶血素BL基因、肠毒素T基因和细孢毒素K基因是我国食源性蜡样芽孢杆菌的主要毒力基因,至少携带一个毒力基因的菌株达到检出菌总数的87.4％;蜡样芽孢杆菌对庆大霉素、万古霉素、环丙沙星、复方新诺明的敏感率为100％,对红霉素、四环素、氯霉素、克林霉素的敏感率分别为88.8％、90.2％、99.6％、87.1％,对氨苄西林和头孢噻肟的敏感率仅为0.4％和5.4％.结论 我国食源性蜡样芽孢杆菌毒力基因携带率较高,对食品安全和公共健康构成潜在的威胁;蜡样芽孢杆菌对氨苄西林、头孢噻肟的敏感性差,不应作为经验用药和预防用药.     

莪术挥发油酶法提取工艺及抗氧化活性研究

试验旨在研究纤维素酶辅助水蒸气蒸馏法提取莪术挥发油的工艺,并探究其抗氧化活性。在单因素试验结果基础上,以酶添加量、酶解pH及酶解时间为自变量,挥发油得率为响应值,利用Box-Behnken响应面法进行工艺优化。以DPPH和羟自由基清除率为指标考察莪术挥发油的体外抗氧化活性。纤维素酶酶解提取莪术挥发油的最佳工艺为酶添加量1.6%、酶解pH 4.6、酶解时间2.1 h、酶解温度50℃、料液比1∶10 g/mL,此条件下挥发油得率为5.24%,显著高于水蒸气蒸馏法得率2.17%。莪术挥发油对DPPH和羟自由基具有较强的清除作用,半数抑制浓度分别为0.783 mg/mL和0.814 mg/mL。纤维素酶辅助提取法可显著提高莪术挥发油得率,工艺简便可行,获得的莪术挥发油具有抗氧化活性。     

Bacillus cereus胞外胶原蛋白酶水解牛骨胶原蛋白的动力学

针对从细菌蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MBL13中提取得到的胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白的动力学性质进行研究。考察底物质量浓度、时间、温度、酶质量浓度、pH值5个因素对酶解水解度的影响,优化酶解的条件;并对酶解过程的动力学进行分析。结果表明:最佳的酶解工艺参数为底物质量浓度30g/L、时间6h、温度45℃、初始酶液质量浓度为0.35g/100mL、pH8.0。在此基础上推导出酶解动力学方程为:V=9.3633[S]/(114.785+[S])。并在波长230nm和570nm处对酶解过程动态变化进行测定,表明胶原多肽含量不断增加的动态变化。     

原料乳中蜡样芽孢杆菌部分致病基因的鉴定及毒力评价

研究原料乳中蜡样芽孢杆菌的潜在威胁,对我国10 个省市原料乳中蜡样芽孢杆菌的污染状况进行调查,并利用PCR 扩增技术及血平板检测的方法分析乳源性蜡样芽孢杆菌中的毒性分布。结果表明,原料乳中蜡样芽孢杆菌检出率为33%,检出水平为1 × 103～1 × 106 CFU/ml,检出的蜡样芽孢杆菌中25 株(75.8%)能产生溶血素BL,24 株(72.7%)含有bceT 基因,至少产生一种毒素的菌株有31 株占检出菌总数的93.9%。研究结果证实我国原料乳中的蜡样芽孢杆菌污染状况不容乐观,严格监控原料乳中的蜡样芽孢杆菌污染,对生产出优质乳制品具有重要意义。     

蛋白酶酶解红花籽粕的工艺条件研究

研究了蛋白酶酶解红花籽粕的工艺条件。首先研究了超声处理前后对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和枯草芽孢杆菌中性蛋白酶的酶活力的影响,结果表明,经超声处理对蛋白酶酶活力影响最大的是木瓜蛋白酶,酶活力提高了2.95倍。然后采用单因素和正交试验,确定最佳的工艺条件:超声时间10 min,超声温度65℃,pH 6.5,酶用量1.9%,在此条件下,水解度为51.1%,还原力的吸光度值为0.428。