平卧菊三七中绿原酸的微波辅助提取及制备色谱法纯化

以平卧菊三七叶为原料,通过正交试验优化了微波辅助提取绿原酸的工艺条件,得到绿原酸粗提物。然后通过反相液相制备色谱柱(C_(18)柱70 mm×920 mm)分离纯化平卧菊三七粗提物,从流动相比例、上样量以及流动相流速3个方面来探索最佳的制备色谱纯化绿原酸的工艺条件。在流动相为甲醇-水(40:60,V/V)、进样量为10mL、流速为10 mL/min、检测波长为327 nm的条件下,分离得到绿原酸的单体纯度为93.24%,回收率为75.22%。该方法具有分离效率高、处理量大、产品安全性好、生产周期短等特点,为高纯度绿原酸的工业化生产提供了有效的技术支持。     

大豆卵磷脂中二亚油酰磷脂酰胆碱的分离纯化

以大豆粉末磷脂为原料,采用95%乙醇溶液提纯得到卵磷脂,再采用反相制备色谱系统分离纯化得到二亚油酰磷脂酰胆碱（DLPC）。探讨了洗脱剂种类、洗脱流速、上样量对分离纯化DLPC的影响。结果表明：以甲醇溶液作为洗脱剂进行洗脱时,在甲醇体积分数95%、洗脱流速28 mL/min、上样量0.5 g（以40 g C18柱填充材料为基准）时,DLPC纯度可达91.2%,得率为21.5%;以乙醇溶液作为洗脱剂进行洗脱时,在乙醇体积分数80%、洗脱流速28 mL/min、上样量0.75 g（以40 g C18柱填充材料为基准）时, DLPC纯度可达92.6%,得率为20.1%。从DLPC的纯度考虑,以乙醇溶液作为洗脱剂优于甲醇溶液。     

D-阿洛酮糖的分离纯化

通过生物法以D-果糖为原料生产D-阿洛酮糖,产物的分离纯化采用阴阳离子交换树脂脱色脱盐,再通过DTF-Ca2＋型离子交换树脂进行分离纯化。最佳分离条件：柱温60℃,10mL进样量,1mL/min流速。通过高效液相色谱测定,分离得到的D-阿洛酮糖纯度为98.3%。     

高纯度苏丹红单体的高效逆流色谱纯化研究

建立了两种高纯度苏丹红单体的高效逆流色谱分离纯化方法。采用1 000 m L逆流色谱分离柱,V(正己烷)∶V(乙腈)=1∶1体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为45 m L/min,上样量600 mg,经过一次分离纯化(40 min),即可将苏丹红Ⅱ样品的检测纯度(280 nm下)从97.01%提高到98.42%,得率为90.8%。在254 nm和500 nm下的纯化组分检测纯度也分别可以达到98.01%和99.79%。采用同样的色谱柱,V(正己烷)∶V(乙腈)∶V(乙酸乙酯)=5∶5∶1体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为20 m L/min,上样量900 mg,经过两步分离纯化,可以将苏丹红Ⅳ的检测纯度(280 nm下)从84.67%提高到96.6%,得率为48.8%。在254 nm和500 nm下的检测纯度可以分别达到97.16%和98.32%。该方法具有快速、高效、制备量大等特点,可以为高质量苏丹红标准样品的研制提供技术支持。     

茶多酚制备高纯度EGCG的工艺研究

选择聚酰胺为柱填料,以荼多酚为原料,考察洗脱剂pH值、温度、溶剂的不同比例、流速和不同上样量对纯化分离(-)-EGCG影响.获得的工艺条件是:在玻璃层析柱(规格500 mm×20mm)中,装填聚酰胺(粒径150 μm～75μm)树脂,上样量为42.9 mgTP/g树脂,用洗脱剂(甲醇:水=4:1),pH值3.5～4.5,温度为室温(或25℃),流速为4.0 mL/min的情况下洗脱,可以得到(-)-EGCG的纯度达93%以上,回收率达86.83%以上的产品.     

大孔树脂纯化乌饭树叶黄酮工艺研究

为了对乌饭树叶黄酮进行纯化,通过动态吸附与解吸试验,探讨上样体积、上样浓度、上样流速、洗脱剂、洗脱流速以及洗脱体积对乌饭树叶黄酮吸附及解吸效果的影响,然后利用蛋白质和多糖的脱除率以及HPLC谱图对纯化效果进行评价。结果表明:NKA-II树脂具有较高的吸附率、解吸率以及较短的吸附时间,确定NKA-II树脂作为乌饭树叶黄酮纯化的柱填料,大孔树脂NKA-II纯化乌饭树叶黄酮最佳工艺条件为:上样体积2.0BV(柱体积),上样浓度0.75mg/mL,上样流速1 mL/min,洗脱剂为50%(体积分数)的乙醇,洗脱流速1.0 mL/min,洗脱体积3BV。在该纯化工艺条件下,HPLC表明纯化后乌饭树叶黄酮纯度明显提高,蛋白质脱除率达76.32%,多糖脱除率达65.45%,黄酮纯度达48.92%。     

SP850树脂分离萝卜硫素

为了提高萝卜硫素的纯度,研究了大孔树脂分离纯化萝卜硫素工艺。通过静态吸附和静态洗脱实验,从8种不同性质的树脂中筛选出适合分离萝卜硫素SP850树脂,并对其动态吸附和动态洗脱条件进行了研究。结果表明:SP850树脂处理约20 BV(1BV=10mL)萝卜硫素溶液时才开始泄漏,并且动态吸附曲线可以用Bo-hart-Adams数学模型描述。SP850树脂纯化萝卜硫素的适宜的工艺条件为:上柱液体积为20 BV,上柱流速为5BV/h,洗脱液乙醇的体积分数为50%,洗脱液体积为6BV,洗脱速度为3 BV/h,在此条件下,吸附量为32.83 mg/mL树脂,洗脱率高达91.84%,萝卜硫素产品纯度可达88.7%。     

大孔吸附树脂分离纯化甘草酸的工艺

通过静态吸附从3种树脂(CAD-40、DM-130、860021)中选择吸附量较大和洗脱效果较好的CAD-40树脂作为纯化甘草酸的最佳树脂,考察动态吸附过程中各因素对CAD-40树脂吸附和洗脱甘草酸的影响.试验结果获得CAD-40树脂纯化甘草酸的最佳条件为:层析柱Φ2×30 cm,装柱径高比为1:10,上柱液浓度7.0 mg/mL、加样量为5.0 mL,洗脱最佳条件为:洗脱剂乙醇浓度95%,洗脱液流速1.0 mL/min.此条件下洗脱产物甘草酸纯度可达53.3%.     

大孔吸附树脂分离纯化软枣猕猴桃总黄酮

以总黄酮吸附率、解吸率为考察指标,研究大孔吸附树脂分离纯化软枣猕猴桃总黄酮的工艺条件。结果表明:HPD600型树脂对软枣猕猴桃总黄酮有较好的吸附性能,在上样液质量浓度0.5～0.6mg/mL、pH3～4、吸附流速2mL/min、上样量3BV条件下,以3BV的水冲洗树脂柱、用4BV 80%乙醇溶液以2mL/min流速洗脱,处理后的软枣猕猴桃总黄酮平均回收率可达86.5%,平均纯度为37.2%。HPD600型大孔吸附树脂适合对软枣猕猴桃黄酮进行分离纯化。     

大孔树脂吸附纯化火龙果茎黄酮类化合物的研究

以紫外分光光度法为检测手段,采用静态吸附分离法优选分离火龙果茎中黄酮类化合物的大孔树脂;并用动态吸附分离法对分离条件进行研究.结果表明D101大孔树脂对火龙果茎总黄酮有良好的吸附解吸分离性能,其动态分离纯化条件为:火龙果茎中总黄酮的上样液浓度为820mg/L,最大上样量为75mL(4倍湿树脂体积).吸附速度为2.0mL/min,用70%乙醇以2.0mL/min的速度洗脱,洗脱率可达99.21%,经纯化后的产物中总黄酮纯度为70.61%,为纯化前的5.11倍.     

高速逆流色谱分离纯化荷叶黄酮槲皮素

以含量为4.4%的荷叶黄酮粗粉为原料,在优化高效液相色谱分析荷叶黄酮槲皮素条件的基础上,通过对不同溶剂体系的优选及操作参数的优化,建立了高速逆流色谱分离纯化荷叶黄酮槲皮素的技术方法。结果表明,采用流动相甲醇和0.4%磷酸、梯度(0min90%甲醇→10min60%甲醇→20min40%甲醇→40min20%甲醇)洗脱、检测波长360nm、流速1.0mL/min、柱温30℃、进样量20μL的技术参数可作为高效液相色谱分析荷叶黄酮槲皮素的方法;采用氯仿:甲醇:水(体积比8:10:5)为溶剂系统(上相为固定相,下相为流动相)、流速2mL/min、转速850r/min、进样量150mg的高速逆流色谱操作技术参数,可分离制备荷叶黄酮槲皮素单体,其纯度大于99%。     

树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱

研究了树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱(L-α- GPC)的可行性,通过树脂筛选,确定D001大孔阳离子交换树脂为最佳纯化树脂,并对纯化工艺条件进行了优化.通过静态实验得到最优条件:上样质量浓度1.52 mg/mL,样品溶液pH为7,吸附时间300 min,解吸液为去离子水.在静态实验的基础上,进行了树脂柱色谱纯化L-α - GPC的动态实验,对吸附流速、解吸液和解吸流速进行优化.动态实验最优条件:吸附流速2 mL/min,解吸液为去离子水,解吸流速2 mL/min.依据动态实验最优条件,最终L -α- GPC的纯度为96％,回收率为54.1％,这表明树脂柱色谱纯化L-α - GPC的方法是经济、方便、可行的.     

无水乙醇萃取联合氧化铝柱层析制备高纯磷脂酰胆碱

以大豆粉末磷脂为原料,采用无水乙醇萃取和氧化铝柱色谱相结合的技术,研究了高纯度磷脂酰胆碱的制备方法。乙醇萃取后磷脂酰胆碱的纯度为62.00%,得率为31.94%。主要考察了柱层析过程中的固定相、洗脱液浓度、上样量、料液比及洗脱液流速对分离效果的影响。结果表明：当固定相为100～200 目三氧化二铝、洗脱液为90%乙醇、上样量为1 g/30 g、料液比为1∶12（g/mL）、洗脱液流速为3.0 mL/min时,磷脂酰胆碱的纯度可达到94.52%,回收率为83.71%。该研究结果为进一步探讨工业化制备磷脂酰胆碱的研究提供了技术支持和数据支撑。     

Separation of phospholipids from hen egg yolk by short packed silica gel column chromatography

Short packed silica gel column chromatography has been performed to optimize the production of phosphatidylethanolamine (PE) and phosphatidylcholine (PC) from hen egg yolk with very low or no toxic solvents. The effects of silica type, sample loading amount, dimension of the glass chromatotube, and mobile phase compositions were investigated and high separation efficiency was achieved: gradient elution as 200 mL ethanol followed by 300 mL 95% ethanol to fractionate PE and PC after neutral lipids (NL) removed by 120 mL ethyl acetate, 40 mm silica gel (54 to 74 μm) bed height of the chromatotube with 22 mm inner dia (ID), and 0.25 g sample loading amount. By this procedure, 3.69 g PE and 2.88 g PC per 100 g egg yolk lipids were obtained, respectively. The refined PE and PC were identified by high-performance liquid chromatography/ultraviolet detector (HPLC-UV) with purity over 96%. The fatty acids in egg yolk revealed that PE and PC characterized higher ratios of n- 6/n- 3 (PE, 7.41; PC, 8.99). 18:2 n- 6 of PC (15.21%) predominated over PE (10.29%), whereas the level of 20:4 n- 6 of PC (8.78%) was lower than PE (15.67%).     

超临界CO_2流体色谱分离α-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮

采用超临界CO2流体色谱分离α-紫罗兰酮与β-紫罗兰酮2个异构体,考察了改性剂浓度、柱温、柱压对容量因子和分离度的影响,确定了较佳的分离条件:硅胶柱(250mm×4.6mmI.D.6μm);流动相:V(CO2):V(异丙醇)=99:1;流速:2mL/min;柱温:40℃;柱压程序:起始压力8MPa,以300kPa/min的速率升至12MPa;紫外检测波长:254nm;进样:2μL浓度为480mg/mL的α-紫罗兰酮与β-紫罗兰酮2个异构体的二氯甲烷溶液,此时,分离时间约10min,分离度达到3.3。     

玫烟色拟青霉中过氧麦角甾醇的高速逆流色谱法分离纯化及质谱分析

采用高速逆流色谱法分离纯化玫烟色拟青霉菌丝体中的过氧麦角甾醇。溶剂系统为V(正己烷):V(乙腈):V(三氯甲烷)=5:5:1,上相为固定相,下相为流动相,转速为850r/min,流速为2mL/min。所得产物纯度经高效液相色谱分析为98.5%(峰面积归一化法),经高分辨ESI-MS质谱确认其精确分子量。     

以6-姜酚肟为内标测定生姜及其制品中6-姜酚的含量

建立了一种以6-姜酚肟代替6-姜酚为标样,采用高效液相色谱法,精确测定生姜及其制品中6-姜酚的方法。采用的色谱柱为Diamonsil C_(18)柱,流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长280nm。结果表明:6-姜酚在10.55～2700βg/mL、6-姜酚肟在10.43～2670μg/mL时峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9983和0.9998。6-姜酚的检测限为2.12μg/mL,6-姜酚肟的检测限为2.09μg/mL。6-姜酚对6-姜酚肟的相对校正因子为1.285,相对保留时间为1.728。6-姜酚肟的加标回收率为96.3%～102.2%,相对标准偏差<2.4%。用内标法和外标法测得的结果无显著差异,测得鲜姜、干姜和姜酒中6-姜酚含量分别为1.86、3.04、0.115 mg/g。用6-姜酚肟做内标测定6-姜酚的方法准确可靠,可用于生姜及其制品中6-姜酚的测定。     

二混蜜中钾的离子交换柱层析法分离和回收

在制糖工业中钾是一种影响糖分回收的造蜜剂.提出以离子交换柱层析分离和回收二混蜜中钾盐的新思路,研究了钾在离子交换层析柱上的分离和洗脱工艺条件.结果表明,实验条件下BK001树脂在层析柱中吸附K+的最佳的工艺条件为:操作流速2 BV/h、锤度50°Bx、温度60℃、高径比为8:1;各工艺条件对钾的分离影响大小顺序是:高径...     

半制备高压液相色谱法制备罗汉果苷Ⅴ标准品

目的：通过半制备高压液相色谱分离技术,建立一种快速、稳定、高效制备高纯度罗汉果苷Ⅴ标准品的方法。方法：先采用树脂吸附脱色技术进行前处理,再通过半制备高压液相色谱分离制备罗汉果苷Ⅴ,色谱条件为Eclipse XDB-C18 色谱柱(9.4mm × 250mm,5μm) ,流动相为乙腈- 水,采用梯度洗脱,流速4mL/min,检测波长210nm,进样量36mg,柱温38℃。结果：分离得到的罗汉果苷Ⅴ的纯度为99.1%。结论：本方法具有操作简单、快速、稳定和产品纯度高等优点,可应用于实际样品的检测。