淡豆豉提取物不同溶剂萃取物的抗氧化活性

目的：探究淡豆豉粗提物的不同溶剂萃取物的成分差异、抗氧化活性。方法：以70%乙醇为提取溶剂,利用超声波法对淡豆豉粉末进行提取,挥干溶剂后得粗提物,用水分散,依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到不同溶剂萃取物。测定粗提物与不同溶剂萃取物中总黄酮、总多糖含量;运用HPLC法测定大豆苷等6种大豆异黄酮含量,并分析其对DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基的清除作用。结果：乙酸乙酯萃取物中总黄酮含量最高,为(92.912±1.130) mg/g萃取物;正丁醇萃取物中总多糖含量最高,为(83.381±0.754) mg/g萃取物;正丁醇萃取物中异黄酮总含量高于粗提物及其他萃取物;淡豆豉粗提物及各溶剂萃取物均表现出体外抗氧化活性,其中正丁醇萃取物的体外抗氧化活性最强;总黄酮含量与5种大豆异黄酮含量和抗氧化活性呈显著相关性(P＜0.05)。结论：正丁醇萃取物对3种自由基表现出较强的清除作用,可作为天然抗氧化剂加以利用。     

大豆异黄酮提取纯化及其抗衰老作用初探

以大豆粉为原料,探讨大豆异黄酮提取纯化效果,并探讨了纯度10%的大豆异黄酮原粉对小鼠衰老指标的影响。结果表明,60%乙醇、物料比1:5,60℃水浴提取大豆粉4h,可得纯度1.61%的大豆异黄酮粗提物,粗提物经水解与大孔树脂层析分离可获得纯度约为10%的大豆异黄酮原粉;大豆异黄酮原粉可显著降低衰老小鼠全血过氧化脂质含量,提高谷胱甘肽过氧化物酶活性,并显著提高皮肤羟脯氨酸含量。显示大豆异黄酮具有一定的抗衰老作用。     

酱油渣中大豆异黄酮的提取及纯化工艺

以乙醇溶液为提取剂,研究以酱油渣为原料提取大豆异黄酮的工艺,并采用吸附树脂AB-8对大豆异黄酮粗提液进行纯化。通过单因素和正交试验可知,料液比对从酱油渣中提取大豆异黄酮提取的效果影响最大,提取时间的影响最小,获得酱油渣中大豆异黄酮提取的最佳条件是乙醇体积分数70%、提取温度80℃、提取时间3h、料液比1:35(g/mL),异黄酮得率为1.22%,经吸附树脂纯化后样品中大豆异黄酮的含量达到41.98%。通过高效液相色谱法对异黄酮产品进行组成分析,发现提取的异黄酮单体组分略有变化。     

涩柿树皮单宁的纯化及抗氧化活性

选用超声波法从涩柿树皮中提取单宁,溶剂法、大孔树脂法纯化粗提物,并考察了不同纯度的单宁对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和羟自由基（·OH）的清除作用。结果表明：涩柿树皮单宁的超声波提取率为5.6%;大孔吸附树脂纯化涩柿树皮单宁的最佳工艺参数为：以HPD-500树脂为吸附树脂,上柱流速1.5 mL/min,上样质量浓度1.2 mg/mL;洗脱流速1.5 mL/min,乙醇体积分数60%;粗提物、乙酸乙酯萃取物、大孔树脂纯化物、乙酸乙酯萃余物经大孔树脂纯化后产物、乙酸乙酯萃取物经大孔树脂纯化后产物的纯度分别为5.6%、11.5%、19.4%、47.4%、53.3%;当质量浓度为1 mg/mL时各纯度单宁对DPPH自由基有最大清除率,清除率分别为69.07%、80.19%、92.96%、94.02%、94.05%;清除DPPH自由基的IC50值分别为0.68、0.52、0.13、0.12、0.11 mg/mL;当质量浓度为0.9 mg/mL时各纯度单宁对·OH有最大清除率,清除率分别为43.04%、73.99%、83.00%、94.68%、96.23%。     

不同来源酱油渣中大豆异黄酮苷元成分分析及抗炎活性研究

为进一步研究酱油渣来源大豆异黄酮苷元物质组成和生理活性,试验对不同来源酱油渣脱脂前后大豆异黄酮苷元进行成分分析,并以RAW264.7巨噬细胞模型评价其抗炎活性。结果表明不同来源酱油渣脱脂前后不影响大豆异黄酮苷元种类(p0.05),且公司②酱油渣大豆异黄酮苷元总量显著高于其他公司(p0.01)。经水洗、乙酸乙酯萃取以及中性氧化铝吸附后,公司②酱油渣大豆异黄酮苷元含量达到30.35%±1.34%。纯化后公司Ⅱ大豆异黄酮苷元能显著降低脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞产生的NO、TNF-α、IL-1β和IL-6,最高抑制率分别为80.65%、75.94%、78.52%和85.84%(p0.01),具有极显著抗炎效果。本项目初步研究不同来源酱油渣大豆异黄酮苷元组成和抗炎活性,对酱油渣大豆异黄酮苷元资源的进一步开发和利用提供理论基础。     

酱油渣中异黄酮提取工艺优化及其抗氧化性的研究

以脱脂酱油渣干粉为原料,采用响应面法优化酱油渣中异黄酮的提取工艺,并测定其抗氧化性.结果表明,最佳提取工艺条件为:以94%(v/v)乙醇为溶剂,液料比17:1(mL/g),提取温度60℃,提取时间2h.在此条件下酱油渣异黄酮的提取得率为1.14%(脱脂干基).酱油渣异黄酮提取物的ABTS+·清除能力及螯合金属离子能力显著高于黄豆异黄酮提取物,二者的DPPH·清除能力及还原力相当.     

超声波辅助法提取大豆酱渣饼中大豆异黄酮

以工业上生产酱油、大酱的酱渣饼为提取原料,采用乙醇为提取剂,超声辅助提取大豆异黄酮.通过单因素试验和正交试验,确定最佳提取条件为:乙醇体积分数50%,提取温度70 ℃,提取时间40 min,液固比25 ∶ 1,超声功率350 W.在最佳条件下大豆异黄酮提取率为 0.410%,异黄酮粗品纯度为10.2%.通过相对分子质量5 000的聚醚砜膜超滤可使异黄酮纯度提高到32.7%.     

醇沉法分离大豆糖蜜中大豆低聚糖的研究

以大豆糖蜜为原料,通过单因素试验及正交试验优化了醇沉法提取大豆低聚糖的条件,再利用饱和石灰水纯化大豆低聚糖粗提物,得到纯度较高的大豆低聚糖.结果表明:在液料比25:1,浸提温度50℃,乙醇体积分数95%,浸提时间2 h条件下,低聚糖粗提物得率为55.0%,粗提物纯度为66.3%;在室温下,用饱和石灰水纯化大豆低聚糖粗提物后得到纯度为84%的大豆低聚糖.     

大孔树脂纯化红松松仁膜衣黄酮的抗氧化活性研究

以红松松仁膜衣为原料,采用醇提黄酮,并用大孔树脂纯化,对纯化前后黄酮的抗氧化作用进行测定。采用分光光度法测定其总黄酮纯度;测定红松松仁膜衣黄酮对铁离子的还原能力、DPPH·的清除能力、总氧自由基捕获抗氧化参数(TRAP值)和氧自由基清除能力(ORAC值)。结果表明,红松松仁膜衣黄酮粗提物纯度为32.60%,经HPD-600的大孔树脂纯化后,其纯度提高至69.36%。红松松仁膜衣黄酮对DPPH·的清除能力、ORAC值和TRAP值均高于BHT,黄酮纯化物对铁离子的还原能力高于BHT,黄酮纯化物对铁离子的还原能力、DPPH·的清除能力、TRAP值和ORAC值均显著高于黄酮粗提物。     

柠檬桉树皮单宁的提取纯化及抗氧化活性

采用溶剂法对柠檬桉树皮中的单宁进行提取,用大孔吸附树脂法纯化粗提物,考察了不同纯度单宁的总抗氧化性以及对DPPH·和·OH自由基的清除能力。结果表明,提取柠檬桉树皮中单宁的最佳工艺条件为提取温度60℃、提取时间150 min、乙醇体积分数40%、料液比1:50 g·mL-1,此条件下单宁得率为13.67%。大孔吸附树脂纯化的最佳工艺参数为:以HPD826树脂为吸附树脂,上样流速1.0 mL/min,上样浓度1.33 mg/mL,洗脱流速1.0 mL/min,乙醇洗脱剂体积分数50%;乙酸乙酯萃取物、大孔树脂纯化物、萃余相经大孔树脂纯化物、萃取相经大孔树脂纯化物的纯度分别为39.91%、47.97%、72.43%、76.90%;乙酸乙酯萃取物的总抗氧化性最大,为单宁酸的116.88%;当质量浓度为10 μg/mL时各纯度单宁对DPPH·清除率达到最大,分别为62.53%、65.11%、58.80%、69.37%、79.63%;当浓度为1.0 mg/mL时,对·OH清除率达到最大,分别为83.08%、70.55%、77.53%、65.37%、77.46%。结论表明:乙酸乙酯萃取物、萃取相过大孔树脂纯化物、大孔树脂纯化物和粗提物的抗氧化能力较强,萃余过大孔相树脂纯化物的抗氧化能力较弱。     

An effective and green method for the extraction and purification of aglycone isoflavones from soybean

In this paper, an effective and green strategy was developed to obtain aglycone isoflavones from soybean through the extraction, hydrolysis, and purification steps. Firstly, a novel ethanol-alkaline extraction method was designed and optimized. The high extraction yield (94.34%) of isoflavones was achieved under the optimal extraction conditions of pH 9.0, 70°C, 60 min, ethanol concentration of 65%, and 1:15 of the solid to liquid ratio. Then, the cellulase (GC-220) was used instead of traditional β-glucosidase to hydrolyze the glycoside isoflavones into aglycone isoflavones which gave an excellent conversion of 95%. Finally, the crude aglycone isoflavones have been purified by an environmental-friendly procedure comprised of ethanol precipitation, ethyl acetate extraction, and water rinse. The final amount of aglycone isoflavones obtained was 1.279 mg for every gram of defatted soybean by this strategy, and the final recovery, and purity of aglycone isoflavones could achieve 80.38 and 87.21%, respectively.     

大豆异黄酮精制工艺研究

试验比较10种不同型号大孔树脂对大豆异黄酮吸附性质和不同溶剂萃取大豆异黄酮效果,确定HPD-600树脂吸附纯化大豆异黄酮最佳工艺条件如下:上样液浓度0.15mg/mL、上样液pH值4～5、上样量4.5BV、吸附流速1.0ml/min、静态吸附250min,用80%乙醇作为解吸剂,解吸流速为0.5ml/min,3.0BV解吸剂即可解吸完全。得到大豆异黄酮粗品含量为20.11%,比粗提物纯度提高7.18倍;同时得出丙酮沸点回流萃取可得到含量为42.91%大豆异黄酮产品,纯度比含量为20.11%原料提高2.13倍;乙酸乙酯和丙酮组合沸点回流萃取,可得到含量为70.36%大豆异黄酮产品,纯度比含量为42.91%原料提高1.64倍。     

Optimization of ethanol extraction and further purification of isoflavones from soybean sprout cotyledon

Isoflavones from cotyledons of soybean sprouts were extracted with aqueous ethanol and further concentrated to obtain a product with a high concentration of isoflavone. The ethanol concentration, extraction time and reaction temperature were optimized by using response surface methodology (RSM). Isoflavones in aqueous ethanol were concentrated by a three-step procedure comprised of solid phase extraction (SPE) with Diaion HP-20 and Amberlite-XAD-2 adsorption columns, acid hydrolysis, and liquid–liquid extraction. The maximum amount of isoflavone in aqueous ethanol extracts (11.6 mg/g solid) was obtained when isoflavones in cotyledons (2.18 mg/ g solid) were extracted with 80–90% (v/v) aqueous ethanol above 90 °C for more than 100 min. The isoflavone extracts, obtained by SPE with a Diaion HP-20 column contained 100 mg/g solid. The liquid–liquid extraction (LLE) with ethyl ether further concentrated the extracts up to 229 mg/g solid, retaining 63% of the initial isoflavones.     

不同品种大豆异黄酮组分及体外抗氧化活性分析

为研究不同品种大豆异黄酮组分和含量以及抗氧化活性,测定了50个特色大豆品种的百粒重、色泽（L*、a*、b*）,通过高效液相色谱法（HPLC）测定异黄酮组分,评估不同品种大豆甲醇提取物的DPPH、ABTS自由基清除能力,并用相关性分析、主成分分析及聚类分析法对样品进行分析。结果表明:大豆的百粒重范围为7.05~47.46 g。不同种皮色大豆L*、a*和b*呈现显著差异（P<0.05）。HPLC分析结果发现糖苷型异黄酮含量是大豆中主要的异黄酮组分,占总异黄酮含量的90%以上。其中染料木苷含量最高。安豆115品种的大豆异黄酮的总含量最高,为2500.78 μg/g;靖江丝瓜青品种的大豆异黄酮含量最低,为888.86 μg/g。安豆115品种的DPPH和ABTS自由基清除能力较强,分别为（16.11±0.25）和（8.12±0.04）μmol V_C/g。糖苷型异黄酮含量与DPPH和ABTS自由基清除能力有较高的线性相关性（R2分别为0.903和0.867）。主成分分析表明6项指标可用2个主成分来表示（累计贡献率达66.3%）。聚类分析将50个品种的大豆分为4类:第一类中黄豆黄素和黄豆黄苷含量较高;第二类中大豆苷、大豆苷元、染料木苷和染料木素含量较高;第三类和第四类中其大豆异黄酮含量基本处于中等水平和较低含量。综上所述,不同大豆品种的异黄酮组成、含量和抗氧化能力存在较大差异,可为其进一步综合开发利用提供一定理论基础。     

罗望子果实黄酮类物质的提取纯化工艺

为了筛选出罗望子果实中黄酮类化合物的最佳分离纯化工艺,本文了采用正交设计试验筛选罗望子果实中黄酮类化合物的提取的最佳工艺.结果表明罗望子果实中黄酮类化合物最佳提取工艺为:使用75%乙醇溶液按1:30的料水比进行加热,在80℃恒温下2h回流提取,重复2次.罗望子果实中粗黄酮的进一步的精制方法为醇沉法和Diaion HP-...     

蒸汽爆破预处理对粉葛总黄酮及抗氧化性的影响

实验选取爆破压力1.0、2.0 MPa,维持压力时间30、40、60、80 s,对粉葛进行预处理。利用紫外分光光度法表征爆破前后总黄酮的变化,旨在探讨蒸汽爆破预处理对粉葛总黄酮及抗氧化性的影响。抗氧化活性利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）清除率进行评价。结果表明：经过蒸汽爆破预处理后,粉葛的总黄酮提取量、甲醇提取物得率和抗氧化性得到显著提高。在最优处理条件下,总黄酮（以葛根素计）提取量达到5.43 mg/g,是未经预处理粉葛提取量的2.32 倍;甲醇提取物得率为16.92%;抗氧化活性得到显著增加,DPPH清除活性的半数抑制浓度（50% inhibitory concentration,IC50）由30.65 g/L降低至10.10 g/L。将蒸汽爆破预处理应用于粉葛活性物质的提取,可实现提取量和抗氧化能力的有效提高。     

红薯叶黄酮分离纯化工艺及抗氧化性研究

本实验以红薯叶为原料,研究了黄酮类化合物分离纯化工艺,并研究了粗提物与纯化产物对羟基自由基、1,1- 二苯基-2- 苦基肼自由基(OPPH·)的清除作用。结果表明,红薯叶黄酮最佳提取工艺为60% 乙醇水溶液90℃回流提取60min,料液比1:40,粗提物中总黄酮含量为101.3mg/g。提取液用HPD500 大孔树脂进行纯化效果好,最佳纯化工艺为：吸附条件：上样原料液黄酮含量1.8mg/ml,pH3 上样流速为3BV/h;洗脱条件：50% 乙醇、流速3BV/h,流量4BV,在此条件下,纯化产品黄酮含量为488.7mg/g;粗提物与纯化产物均具有对自由基的清除作用,是一种有效的天然抗氧化剂新资源。     

Effect of biotic elicitors on enrichment of antioxidant properties and induced isoflavones in soybean

ABSTRACT:  The antioxidant properties of methanolic extracts from soybean obtained with germination, wounding, and application of biotic elicitors were evaluated. Also, the relationship between observed antioxidant properties and compositional changes in isoflavone content was determined. The 2 biotic elicitors used in this study were the food-grade fungus Aspergillus sojae and A. sojae cell wall extract. Isoflavone content was determined by C₁₈ reverse phase high-performance chromatography coupled with a photodiode array detector. Antioxidant activities of the extracts were measured using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging and β-carotene cooxidation in a linoleate system. Higher antioxidant activities were observed in wounded and elicitor-treated extracts when compared with nonwounded control extracts. In addition, the phenolic content was higher in extracts from wounded and elicitor-treated soybean. Germination for 3 d slightly decreased total isoflavone content (–4.3%); however, wounding increased total isoflavone content (25.8%). The soybean extracts from seeds treated with A. sojae biotic elicitors had the highest total isoflavone contents (9.8 to 11.6 mg/g extract) and displayed the highest antioxidant activities in both the DPPH and β-carotene assays. Also identified in the wounded and elicitor-treated extracts were the induced isoflavones glyceollins that contributed to the higher isoflavone contents observed.     

红托竹荪菌托黄酮的纯化及其抗氧化与抗疲劳活性研究

目的 研究红托竹荪菌托黄酮的纯化工艺, 及其抗氧化与抗疲劳活性。方法 采用大孔树脂法纯化红托竹荪菌托黄酮。以树脂吸附率和解吸率为评价指标, 对红托竹荪菌托黄酮的纯化工艺参数进行优化, 并研究红托竹荪菌托黄酮纯化前后对1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-bitter hydrazine, DPPH)自由基和羟基(OH)自由基清除能力的影响和对小鼠的抗疲劳效果。结果 红托竹荪菌托黄酮的最佳纯化工艺条件为: 吸附条件: 上样液质量浓度1.2 mg/mL、上样液流速1.5 mL/min、上样液pH为5, 上样液体积60 mL; 解吸条件: 乙醇浓度70%、洗脱流速1.5 mL/min、洗脱液体积120 mL, 经D101型大孔树脂纯化后, 红托竹荪菌托黄酮提取物中总黄酮的纯度由14.16%提高到57.64%, 对DPPH自由基和OH自由基的半数抑制浓度分别为0.16和0.78 mg/mL; 与粗提物相比, 纯化后的黄酮提取物可明显延长小鼠的负重游泳时间, 减少其运动后血清中血乳酸和血尿素氮的含量。结论 红托竹荪菌托黄酮经纯化后具有较好的抗氧化性和抗疲劳活性, 对红托竹荪菌托黄酮资源的开发利用提供理论依据。