西青果提取物对a-葡萄糖苷酶抑制活性的研究（III）

研究西青果提取物对小肠α - 葡萄糖苷酶的抑制作用。西青果提取物在体外和小肠模型人类结肠Caco-2 细胞中,显示很强的麦芽糖酶抑制活性,而对蔗糖酶的抑制作用不显著。在体内实验中,西青果提取物能降低SD雄性大鼠进食麦芽糖30min 后的血糖,而对进食蔗糖后的血糖浓度没有影响。实验结果表明西青果提取物可以预防Ⅱ型糖尿病。     

大豆胚轴提取物体外对小肠黏膜蔗糖酶、麦芽糖酶及葡萄糖转运活性的影响

在体外比色法观察大豆胚轴提取物对大鼠小肠黏膜蔗糖酶和麦芽糖酶活性的影响,并用快速过滤法观察其对兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性的影响。结果表明,大豆胚轴提取物明显降低大鼠小肠蔗糖酶、麦芽糖酶活性和兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能力。提示,大豆胚轴提取物可延缓小肠对糖的消化和吸收,经常食用可能有助于延缓餐后血糖的持续升高。     

绿茶降糖作用机制的研究

给糖尿病大鼠口服蔗糖或淀粉和绿茶提取物后,观察其对糖尿病大鼠糖耐量及血胰岛素的影响,并用比色法测定对α-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.20)和α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)的抑制活性,用快速过滤法观察对兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性的影响.结果表明,绿茶提取物明显改善蔗糖或淀粉负荷糖尿病大鼠的血糖水平.绿茶提取物显示较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC50)值为0.13g/L;对α-淀粉酶的抑制活性则较弱,浓度为1g/L时,其对α-淀粉酶的抑制率为21%.绿茶提取物同时明显降低兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能力,其半抑制浓度(IC50)值为3.5g/L.提示,绿茶可延缓小肠对糖的消化吸收,经常食用可能有助于延缓餐后血糖的持续升高. C 3.2.1.1)的抑制活性,用快速过滤法观察对兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性的影响.结果表明,绿茶提取物明显改善蔗糖或淀粉负荷糖尿病大鼠的血糖水平.绿茶提取物显示较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC50)值为0.13g/L;对α-淀粉酶的抑制活性则较弱,浓度为1g/L时,其对α-淀粉酶的抑制率为21%.绿茶提取物同时明显降 兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能力,其半抑制浓度(IC50)值为3.5g/L.提示,绿茶可延缓小肠对糖的消化吸收,经常食用可能有助于延缓餐后血糖的持续升     

蜂胶不同体积分数乙醇提取物对小鼠肠道麦芽糖酶和蔗糖酶的抑制作用

为了研究蜂胶不同体积分数乙醇提取物对餐后血糖的控制作用,采用不同体积分数乙醇对蜂胶进行提取,测定其总黄酮和总多酚含量,并利用高效液相对其成分进行初步分析。并使用体外麦芽糖酶和蔗糖酶抑制模型,研究蜂胶不同体积分数乙醇提取物对来自小鼠肠道麦芽糖酶和蔗糖酶的抑制作用。结果表明:75%乙醇提取物的总黄酮含量最高,达到(697.36±6.15)mg芦丁/g蜂胶提取物,而25%乙醇提取物含有的总多酚含量最高,为(386.50±17.40)mg没食子酸/g提取物;蜂胶75%乙醇提取物对来自小鼠肠道的蔗糖酶半数抑制质量浓度最低,为(32.30±0.60)μg/mL;蜂胶水提取物对小鼠肠道的麦芽糖酶半数抑制质量浓度最低,为(32.60±0.20)μg/mL;与阳性对照组(阿卡波糖)相比,不同体积分数乙醇提取物对来自小鼠肠道蔗糖酶半数抑制质量浓度要小,存在着显著差异(P<0.05)。     

鲜罗汉果皂苷对小鼠血糖的调节作用研究

以正常动物小鼠为实验对象,分别在给药第1 d后30 min及连续给药7 d后30 min灌胃服用淀粉、蔗糖和葡萄糖;分别测定不同糖原对血糖生成指数、胰岛素水平和对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率,对鲜罗汉果皂苷调节血糖药效学进行了研究。结果表明:一次性服用鲜罗汉果皂苷对多糖类食物淀粉和蔗糖的血糖生成有显著的抑制作用;但单次给药对葡萄糖的血糖生成没有明显影响;连续7 d服用鲜罗汉果皂苷后,淀粉及葡萄糖的血糖生成均受抑制,血糖峰值或血糖生成指数(GI)显著下降;进食鲜罗汉果皂苷在餐后血糖升高时的胰岛素水平显著增加,对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用随浓度增加而增强。故鲜罗汉果皂苷对正常小鼠餐后血糖生成有显著的抑制作用,通过抑制食物葡萄糖转化和提高胰岛素水平是调节降低血糖的主要原因;与干罗汉果皂苷对比,提高餐后胰岛素水平作用鲜罗汉果皂苷比干罗汉果皂苷更显著,而对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用干罗汉果皂苷要比鲜罗汉果皂苷强。     

桑枝提取物体外对小肠粘膜蔗糖酶活性的影响研究

以桑枝为原料,研究其水提物对猪小肠蔗糖酶的抑制作用,主要研究pH、温度以及预孵时间对抑制剂活力的影响,并通过实验确定其抑制作用为竞争性抑制。     

蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

为了研究蜂胶对餐后血糖控制机理,本实验采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型研究蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法研究其动力学性质。结果表明,蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50)为(0.8260±0.1754)mg/mL,抑制常数(KI)为(0.0265±0.0060)mg/mL。动力学研究表明,蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为典型的非竞争性抑制。     

L-阿拉伯糖对α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外试验研究

目的探讨L-阿拉伯糖对小肠α-葡萄糖苷酶的抑制作用及与阿卡波糖的联用效应。方法利用体外实验,提取大鼠小肠粘膜上清液为α-葡萄糖苷酶粗酶液,分别以终浓度为60 mg/ml蔗糖、20 mg/ml麦芽糖/α-糊精为底物,建立最佳抑制反应体系,测定L-阿拉伯糖对α-葡萄糖苷酶抑制活性(IC50)及抑制作用类型;采用4×3析因设计,研究L-阿拉伯糖与阿卡波糖联用效果。结果以蔗糖、麦芽糖、α-糊精为底物时,L-阿拉伯糖对小肠α-葡萄糖苷酶活性均有一定抑制作用,但选择性较高地抑制蔗糖酶活性,当L-阿拉伯糖添加量为0.5%蔗糖浓度时酶活性抑制百分率>50%,最高酶活性抑制百分率约93%,且有良好剂量-反应关系,IC50为0.164 mg/ml,抑制类型为反竞争性抑制(Ki,0.558 mg/ml);与阿卡波糖联用二者有交互作用,尤其以蔗糖为底物时联用效果较明显,联合应用可能提高了抑制活性。结论 L-阿拉伯糖有抑制α-葡萄糖苷酶活性作用,尤其对蔗糖酶有良好的选择性抑制;在α-葡萄糖苷酶抑制作用方面,其与阿卡波糖有一定联用效果,L-阿拉伯糖在含糖食品中可能有较良好的实际应用前景。     

芹菜素对鼠肠α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

目的:明确芹菜素对鼠肠α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法:建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,测定芹菜素对α-葡萄糖苷酶、麦芽糖酶和蔗糖酶的抑制活性。进一步利用Lineweaver-Burk作图法,测定芹菜素对麦芽糖酶和蔗糖酶的抑制类型以及抑制常数。采用离体鼠肠进行体外模拟实验,考察芹菜素对麦芽糖酶和蔗糖酶抑制作用的稳定性。实验结果显示,芹菜素对鼠肠α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制活性,半抑制浓度为14.475μg/mL。芹菜素对鼠肠麦芽糖酶和蔗糖酶的半抑制浓度分别为165.35μg/mL和149.57μg/mL,抑制类型均为竞争性抑制,抑制常数分别为32.14μg/mL和40μg/mL。在60min内,芹菜素对离体鼠肠体系中蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制作用稳定。结论:芹菜素可竞争性抑制鼠肠麦芽糖酶和蔗糖酶的活性,可用于降低糖尿病患者的餐后血糖。     

酸角壳提取物对脂肪负荷大鼠血脂的影响

目的研究酸角壳提取物对脂肪负荷小鼠脂肪吸收的抑制作用。方法采用橄榄油负荷大鼠为实验系统,通过检测负荷后不同时间点血浆甘油三酯、游离脂肪酸、总胆固醇和游离胆固醇水平,探讨酸角壳提取物对脂肪负荷后血脂的影响;采用正常大鼠为实验系统,通过测定小肠黏膜和内容物胰脂肪酶活性,评价酸角壳提取物对小肠胰脂肪酶的抑制活性,以及给药后不同时间酸角壳提取物对小肠胰脂肪酶的抑制活性。结果酸角壳提取物能显著降低大鼠橄榄油负荷后4 h和6 h的甘油三酯水平(P0.01)。酸角壳提取物能明显抑制小肠上段和中段胰脂肪酶的活性,在给药30 min到1 h抑制活性最强。结论酸角壳提取物能显著降低橄榄油负荷后大鼠的甘油三酯水平,其作用可能与抑制肠道脂肪酶有关。     

金银花花蕾中3,5-二咖啡酰奎宁酸对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

本研究探讨金银花花蕾中3,5-二咖啡酰奎宁酸(3,5-DCQA)对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。通过色谱方法从金银花花蕾50%甲醇提取物中分离获得3,5-DCQA,并用质谱与核磁等光谱分析对其化学结构进行鉴定。分别选取大鼠小肠I型及酿酒酵母、面包酵母、嗜热脂肪芽孢杆菌的II型α-葡萄糖苷酶研究3,5-DCQA对不同α-葡萄糖苷酶抑制活性的选择性,结果表明该物质对α-葡萄糖苷酶的抑制作用与酶的来源有关,并选择性地抑制小肠α-葡萄糖苷酶的麦芽糖水解活性。动力学实验结果揭示3,5-DCQA非竞争性地抑制小肠麦芽糖酶活性(Ki:0.22 m M)。此外,物质结构与活性关系(SAR)的研究显示,3,5-DCQA中咖啡酰氧基团数目与活性有关,其中所含两个咖啡酰氧基团对α-葡萄糖苷酶的抑制活性起关键性作用。因此金银花花蕾中的3,5-DCQA可用于辅助降低餐后高血糖类功能食品的开发与利用。     

竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其机理研究

目的:研究竹叶椒乙醇提取物对α-糖苷酶的抑制作用。方法:本实验采用体外抑制模型评价竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶(酵母菌来源、小鼠小肠来源)和α-淀粉酶的抑制活性。并采用Lineweaver-Burk双倒数法研究α-葡萄糖苷酶的动力学性质。结果:竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶(酵母菌来源)的半数抑制浓度(IC50)为(0.660±0.145)mg·m L-1,对小鼠小肠内α-葡萄糖苷酶半数抑制浓度(1.944±0.078)mg·m L-1,α-淀粉酶的半数抑制浓度为(1.185±0.132)mg·m L-1。动力学研究表明,竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为典型非竞争性抑制。结论:竹叶椒乙醇提取物对α-糖苷酶活性的抑制效果显著,具有很好的开发利用价值。     

香椿叶多酚的提取分离及其体外对糖尿病关键酶活性的抑制作用

本研究从香椿叶中提取分离多酚,研究多酚对糖尿病关键酶(猪胰腺α-淀粉酶、鼠小肠蔗糖酶和麦芽糖酶)活性的影响。采用活性追踪法,运用多种分离纯化技术和色谱学分析,逐级筛选活性强的部位以及单体化合物。研究发现香椿叶多酚粗提物具有显著的酶抑制作用,猪胰腺α-淀粉酶、鼠小肠蔗糖酶和麦芽糖酶的半数抑制率(IC50)值分别为0.45 mg/mL、1.29 mg/mL和1.41 mg/mL。乙酸乙酯萃取后的70%乙醇洗脱部位为主要活性部位,其对猪胰腺α-淀粉酶、鼠小肠蔗糖酶和麦芽糖酶抑制作用的IC50值分别为0.091mg/mL、0.97 mg/mL和1.00 mg/mL。从活性部位分离出2个单体化合物,分别鉴定为:1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖(PGG)和没食子酸乙酯(EG),其中PGG具有显著的α-淀粉酶抑制活性,IC50值为0.069 mg/mL;EG对蔗糖酶和麦芽糖酶具有一定的抑制活性,IC50值分别0.82 mg/mL和0.81 mg/mL。研究表明多酚化合物是香椿叶的有效降血糖功能成分之一,PGG和EG是主要的活性成分。     

紫甘薯花青素在模拟消化道条件下对蔗糖酶酶活性的抑制作用

主要研究紫甘薯花青素提取物对小肠蔗糖酶酶活性的影响。结果表明:紫甘薯花青素对蔗糖酶酶活性具有抑制作用,而且随着花青素加入量的增大和反应时间的延长,抑制效果增强,当花青素加入量为100μL,反应时间为180min时,抑制率达到54%,用米氏方程和Lineweaver-Burk双倒数作图确定其酶反应动力学参数:无抑制剂存在时Km值为4.04×10~(-2) mol/L,Vmax为0.7630mol/(L·min),有抑制剂存在时Km值为2.17×10~(-1) mol/L,Vmax为0.7658mol/(L·min),可推测抑制类型为竞争性抑制。     

蔗糖基聚合物对蜜橘的保鲜效果实验

利用蔗糖基聚合物对蜜橘进行采后的室温贮存保鲜实验,实验结果表明:与对照和单独使用0.25%果鲜灵处理的果实相比较,0.25%果鲜灵添加0.5%浓度蔗糖基聚合物水溶液处理可以降低果实的烂果率,促进蜜橘果实可溶性固形物含量的增加,有效抑制果实过氧化物酶(POD)活力和多酚氧化酶(PPO)活力,延缓果实衰老,保鲜效果更好.     

油茶果壳提取物及分级相对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:研究油茶果壳提取物及分级相对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其对糖尿病小鼠机体的抗氧化作用。方法:制得油茶果壳40%乙醇提取物及分级相(乙酸乙酯相、正丁醇相、水相),在体外建立微量酶反应体系,以阿卡波糖为参照,研究油茶果壳提取物及分级相对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。用链脲佐菌素(SPF)制造糖尿病小鼠模型,油茶果壳提取物分为低(150mg/kg)、中(300mg/kg)、高(600mg/kg)3个剂量组,连续灌胃2周。结果:油茶果壳提取物及分级组分对α-葡萄糖苷酶具有明显的抑制作用,且抑制效果强于阿卡波糖。动物实验中,与模型对照组比较,油茶果壳总提取物能显著提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性,降低肝脏中丙二醛(MDA)含量。结论:油茶果壳提取物及分级组分对α-葡萄糖苷酶具有明显的抑制作用,是潜在的降糖功能因子;油茶果壳提取物能提高糖尿病小鼠机体的抗氧化能力。     

沙枣不同果、叶中多酚类物质抗氧化能力比较的研究

采用丙酮温浸法对尖果沙枣和大果沙枣果、叶中多酚物质进行提取并研究其抗氧化活性。通过测定不同材料多酚提取物对羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2-·）以及2,2二苯代苦味肼基（DPPH·）的清除率,并利用硫代巴比妥酸法（TBA法）测定其对脂质过氧化的抑制作用。结果表明：八种实验材料中,尖果沙枣青果和嫩叶多酚提取物对·OH、O2-·、DPPH·均具有较好的清除作用,且清除率均高于50%,同时对脂质过氧化的抑制作用明显高于其余实验材料。尖果沙枣较大果沙枣具有更好的体外抗氧化活性。     

西青果多酚对甲基苯丙胺诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的:研究西青果多酚对甲基苯丙胺(Methamphetamine,METH)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤的保护作用及机制。方法:实验分为对照组、模型组(3 mmol/L METH)和不同浓度西青果多酚组(25、50、100、200 μg/mL西青果多酚+3 mmol/L METH),给药处理24 h后检测细胞存活率、细胞凋亡、细胞DNA损伤、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活力以及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量等。结果:与对照组相比,3 mmol/L METH能极显著降低PC12细胞存活率(P<0.01),显著降低SOD和GSH-Px活力(P<0.05),显著增加胞内MDA含量(P<0.05),极显著增加细胞凋亡率、ROS含量和DNA损伤(P<0.01);与模型组相比,50~200 μg/mL西青果多酚能极显著抑制METH诱导的PC12细胞存活率和SOD活力的降低(P<0.01),显著抑制GSH-Px活力下降(P<0.05),极显著抑制METH导致的细胞凋亡、DNA损伤、胞内MDA和ROS含量增加(P<0.01)。结论:西青果多酚对METH诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与西青果多酚抑制METH诱导的氧化应激,缓解DNA损伤相关。     

维药材小檗果提取物的体外抑菌实验研究

观察小檗果不同极性提取物的体外抑菌活性。采用微孔板法和对倍稀释法研究小檗果不同极性提取物对变异链球菌和大肠杆菌生长及其生物膜形成的影响。结果显示,乙醇、水、乙酸乙酯和正丁醇提取物对变异链球菌生物膜的形成有一定抑制作用,其中乙醇和水提取物抑制作用很强;乙酸乙酯提取物对大肠杆菌的生长有一定抑制作用,正丁醇、乙酸乙酯、氯仿提取物对大肠杆菌生物膜的形成有一定抑制作用,其中氯仿提取物的抑制活性最强。小檗果含有有效抑制供试菌生长及其生物膜形成的活性成分,值得进一步研究开发。     

不同燕麦产品对正常小鼠消化酶及Na~+-K~+-ATP酶活性的影响

探讨了不同的燕麦产品对正常小鼠胃肠道消化酶和小肠黏膜Na+-K+-ATP酶活性的影响.将实验动物随机分为空白对照和分别饲喂燕麦面粉、燕麦麸皮、燕麦片、燕麦β-葡聚糖计5组,饲喂3周,测定血清胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶以及小肠黏膜Na+-K+-ATP酶活性,并测体重、进食量等指标.结果显示:饲喂3周后,面粉组小鼠体重和进食量与对照组基本一致,其他实验组小鼠体重下降,进食量减少,与对照组相比差异显著(P<0.05).燕麦产品对小鼠消化酶活性的抑制作用也很明显,除面粉组外,各实验组血清淀粉酶活性与对照组相比均差异显著(P<0.05);各实验组胰蛋白酶、脂肪酶和Na+-K+-ATP酶活性与对照组相比显著降低(P<0.05).实验表明:燕麦产品可抑制小鼠消化酶和小肠黏膜Na+-K+-ATP酶的活性,降低营养物质的利用率,降低体重,减少进食量.其变化过程与不同燕麦产品中β-葡聚糖含量呈正相关.