菲律宾蛤仔糖蛋白的分离纯化与理化性质的研究

对菲律宾蛤仔全脏器中的糖蛋白进行分离纯化,并分析其理化性质.菲律宾蛤仔全脏器经热水煮提、DEAE-52 纤维素柱层析及Sephadex G-100柱层析分离纯化,所得纯化组分用SDS-PAGE鉴定纯度并测定其相对分子质量;用HPLC检测糖链的单糖组成,再用IR分析其基团结构.结果表明:菲律宾蛤仔经柱层析纯化得到1种中性糖蛋白(NGP)和3种酸性糖蛋白(AGP,主要组分为AGP-Ⅲ).NGP的相对分子质量为35000, 总糖及总蛋白质量分数分别为60.5%和18.2%,糖链部分主要是由木糖、葡萄糖、半乳糖组成.AGP-Ⅲ的相对分子质量为43 000,总糖与蛋白的质量分数分别为57.4%和22.0%,糖链部分主要含有木糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等.IR分析表明,NGP和AGP-Ⅲ均含有多糖的-OH、-COO-、-NH、-C-O-C等特征基团.     

墨鱼缠卵腺糖蛋白提取工艺优化及纯化

本文以墨鱼缠卵腺为实验原料,通过单因素实验及响应面试验优化墨鱼缠卵腺糖蛋白的提取工艺,随后对最优工艺下得到的糖蛋白进行分离纯化,电泳分析其纯度,并进一步研究其蛋白及总糖含量。结果表明,墨鱼缠卵腺糖蛋白提取最佳工艺为提取温度24 ℃,提取时间3.6 h,NaOH浓度0.4 mol/L,料液比1:20 g/mL,超声功率200 W。在此条件下进行验证试验,得出墨鱼缠卵腺糖蛋白实际得率为16.13%±0.16%;经DEAE-52纤维素离子交换柱层析、Sephacryl S-300HR柱层析分离后得到纯品糖蛋白,电泳分析表明所纯化的糖蛋白纯度达到电泳纯,其中蛋白含量为65.53%±0.8%,糖含量为31.74%±1.1%,得率为墨鱼缠卵腺去外层薄膜原料的0.91%。     

响应面法优化甘薯中糖蛋白提取的研究

以水为浸提剂,研究了浸提料液比、浸提时间、浸提次数对甘薯糖蛋白浸提率的影响,并采用Box-Behnken响应面法分析了三个因素间的交互作用;接着分别用甲醇、丙酮、乙醇三种有机溶剂沉淀糖蛋白,确定出最佳的沉淀剂;粗品分别经DE-22离子柱层析和Sephadex G-100柱层析得到纯化,最后测定纯化后甘薯糖蛋白中糖和蛋白的含量.结果表明甘薯糖蛋白提取纯化最佳条件为:浸提时料液比为1:6,浸提时间为60 min,浸提次数为3次;分别以0.05、0.1、0.5 mol/,L的NaHCO_3对DE-22层析柱进行阶段洗脱,最终测定试验用一窝红品种的甘薯糖蛋白中含多糖约81.4%,含蛋白质约27.7%.     

UAE鲍鱼糖蛋白工艺优化及HPLC测其葡萄糖含量

以三亚市鲍鱼肌肉为原料,采用超声辅助提取工艺,研究了提取溶剂、超声功率、料固比、提取时间和提取温度等因素对糖蛋白提取效果的影响,通过设计正交试验分析,确定最佳工艺条件为:料液比为1︰18(g/mL),超声浸提时间为20 min,超声功率为960 W,氯化钠溶液浓度为0.2 mol/L,鲍鱼肌肉糖蛋白提取率为0.51%,葡萄糖的含量为0.702 5 mg/kg,与传统提取方法相比超声提取能有效降低提取时间,提高提取效果。     

响应面法优化固相酸水解鲍鱼脏器多糖工艺

为了研究鲍鱼脏器多糖固相酸(732#阳离子交换树脂)水解条件与多糖水解率之间的关系及其降解产物的分子结构,首先通过单因素实验确定树脂用量、水解时间和水解温度对鲍鱼脏器多糖水解率的影响,然后应用响应面法对鲍鱼脏器多糖水解条件进行设计优化,最后采用 Sephadex G-25 凝胶柱对鲍鱼脏器寡糖混合物进行分离纯化,并使用红外光谱分析对寡糖结构进行测定。结果表明:对多糖水解率的影响程度依次是水解温度、水解时间和树脂用量,最佳水解条件为:树脂用量40 g,水解时间3 h,水解温度70 ℃。在此条件下进行3次平行验证试验,鲍鱼脏器多糖水解率为80.69%,接近且略高于预测值,表明应用响应面法优化鲍鱼脏器多糖的水解条件是可行的。凝胶层析法纯化结果表明,鲍鱼脏器寡糖混合物中有两个组分,且第1组分占大多数。红外光谱分析表明,鲍鱼脏器寡糖为α-型糖,含有吡喃环。鲍鱼脏器多糖固相酸水解工艺研究,提高了鲍鱼脏器加工的经济效益,为鲍鱼脏器的高值化利用提供了参考。     

黑木耳糖蛋白的提取及单糖、氨基酸组成分析

为获得优质的黑木耳糖蛋白,明确其单糖及氨基酸组成,本研究通过单因素实验和响应面法对超声波辅助碱法提取黑木耳糖蛋白的工艺条件进行优化,并采用AKTAgo纯化仪、DEAE GE Healthcare色谱柱对糖蛋白进行分离纯化,采用高效液相色谱(HPLC)法分析其单糖和氨基酸组成。黑木耳糖蛋白的最佳提取工艺条件为:超声时间90 min、料液比1:90 g/L、超声功率200 W、pH8.4、提取温度45℃,此条件下糖蛋白提取的综合评分为55.93分。经分离纯化得到糖蛋白的纯度为74.1%、蛋白回收率为37.5%,该糖蛋白中的单糖组成以葡萄糖(9.95 mg/g)、甘露糖(5.24 mg/g)为主,氨基酸以L-天冬氨酸/L-天冬酰胺(1.16 mg/g)、L-苯丙氨酸(1.14 mg/g)、L-谷氨酸/L-谷氨酰胺(1.10 mg/g)为主。因此,超声波碱法可有效提高黑木耳糖蛋白提取效率,且黑木耳糖蛋白中含有酸性杂多糖、必需氨基酸齐全,为黑木耳糖蛋白的深入研究及应用开发提供了科学参考。     

甘薯糖蛋白的分离纯化工艺研究

对甘薯中的活性成分糖蛋白提取纯化工艺进行了研究。结果表明,甘薯糖蛋白提纯的最佳条件为:室温条件下水浸提,料液体积比为1∶6,提取时间为1h,提取次数3次,上清液加无水乙醇沉淀,透析3d,经DEAE-52柱层析,进一步经SephadexG-100柱层析,经定性、定量分析得到了甘薯糖蛋白纯品,是一种切实可行的甘薯糖蛋白提纯生产方法。     

甘薯糖蛋白分离纯化工艺研究

该文报道对甘薯活性成分糖蛋白提取纯化工艺研究;结果表明,甘薯糖蛋白提纯最佳条件为:室温条件下水浸提,料液体积比为1:6,提取时间为1h,提取次数3次,上清液加无水乙醇沉淀,透析3 d,经DEAE-52柱层析,再进一步经Sephadex G-100柱层析,经定性、定量分析得到甘薯糖蛋白纯品,这是一种可行的甘薯糖蛋白提纯生产方法。     

河蚬免疫活性糖蛋白分离及结构初步分析

采用DEAE-52纤维素柱层析,SephadexG-75葡聚糖凝胶层析和RP-HPLC柱层析手段分离纯化,从河蚬中分离纯化得到一种酸性糖蛋白CFP。经RP-HPLC和SDS-PAGE测定,CFP纯度为94.74%,其相对分子量为19030D。经苯酚-硫酸法测定,CFP的含糖量为5.18%,蛋白质含量为93.22%。碱性β-消除反应表明,河蚬糖蛋白中存在O-糖肽键。经红外光谱分析,CFP具有多糖的特征吸收,含有吡喃糖β-型糖苷键。     

甘薯糖蛋白的纯化及SPG-4的性质测定

对甘薯糖蛋白进行提取,并利用DEAE-52纤维素柱层析和丙烯葡聚糖凝胶S300柱层析对其进行纯化,分别得到4个级分的纯品.对其中SPG-4的基本性质进行测定.利用电泳对甘薯糖蛋白SPG-4进行测定.其结果为一条带,说明SPG-4已经得到纯化.     

鲍鱼内脏蛋白的提取及水解肽的抗氧化活性研究

以鲍鱼加工下脚料鲍鱼脏器为原料,探讨脏器蛋白的提取工艺及蛋白水解肽的抗氧化效果。以鲍鱼内脏蛋白提取率为指标,通过响应面法优化提取工艺;对蛋白进行酶解,以水解度和抗氧化能力为指标筛选抗氧化效果最好的工具酶,酶解得到具有较强抗氧化能力的肽段,进一步对抗氧化肽进行性质测定。结果表明,得到最优工艺:碱浓度为1.5%,超声波时间为14.5 min,提取时间35.5 min,提取温度81.5 ℃,该工艺条件下鲍鱼脏器蛋白提取率高达81.01%±0.43%;筛选得到木瓜蛋白酶为最适工具酶并对制备的蛋白进行酶解;水解肽分离纯化得到最强抗氧化能力肽段P1的羟基自由基清除率、DPPH自由基清除率及还原力分别为79.25%±1.12%、(90.45%±0.46%、0.598±0.05。综上,鲍鱼脏器水解肽具有较强抗氧化能力,可用于制备天然抗氧化剂。     

烤烟中直链-支链淀粉含量测定方法优化

为了建立烤烟中直链-支链淀粉的快速高效测定方法,以云烟85为原料,考察了高氯酸浓度、超声时间、超声功率和液固比4个因素对高氯酸超声提取-碘显色-双波长法测定烤烟中淀粉含量的影响。采用响应面Box-Benhnken实验设计原理及响应面分析方法优化了淀粉提取测定工艺。结果表明,烤烟中淀粉提取测定最佳工艺为：高氯酸质量浓度为49.00%,超声功率为400W,超声时间为8.50min,液固比为27mL/g。在此条件下,加标回收率直链淀粉为104.45%~107.48%,支链淀粉为96.42%~100.51%,相对标准偏差RSD(n=3)<3.5%。说明Box-Behnken 设计结合响应面分析法优化所得的淀粉测定方法具有较好的精密度及准确度,适合于烤烟淀粉含量测定。     

超声波辅助复合酶法提取松茸多糖的工艺研究

以松茸多糖得率为评价指标,采用单因素试验和正交试验,确定最佳提取工艺参数。结果表明,超声波提取优化工艺条件为超声温度90 ℃,料液比1∶15（g∶mL）,超声时间10 min。在此最佳超声提取条件下松茸多糖得率为11.18%。在超声波优化结果的基础上,进行复合酶处理,最佳酶解工艺参数为酶解温度50 ℃,酶解时间60 min,复合酶（木瓜蛋白酶∶纤维素酶∶果胶酶为1∶1∶1）添加量4.0%,酶解pH值6.0,此优化条件下松茸多糖得率为19.56%。复合酶超声辅助法比超声波法提取松茸多糖提高了8.38%。结果表明,复合酶超声辅助提取法提取松茸多糖是一种科学有效的方法,可显著提高松茸多糖得率。     

酶法提取鲍鱼内脏蛋白质工艺的研究

以鲍鱼内脏为原料,采用酶法工艺提取鲍鱼内脏中蛋白质。在单因素试验的基础上通过响应面试验探讨了料液比、酶的添加量、pH值、提取温度对总氨基酸态氮含量的影响,确定酶法提取鲍鱼内脏蛋白质的最佳工艺条件。结果表明,酶法提取鲍鱼内脏蛋白质的最佳工艺条件是料液比为1∶4（g∶mL）,胰蛋白酶的添加量为0.15%,pH值为7,酶解温度为 55 ℃,酶解反应时间为4 h,此时总氨基酸态氮含量为163 mg/100 mL。     

北五味子多糖提取条件及其抗氧化性能

运用响应曲面法优北化五味子多糖超声辅助乙醇提取条件,并对其抗氧化性能进行了研究。结果表明:乙醇浓度,料液比,提取温度对北五味子多糖提取率有显著影响,采用Box-Behnken响应面技术得到最佳提取条件为:乙醇体积分数(X1)=54.7%、料液比(X2)=1∶25、提取温度(X3)=58℃;其他条件为:超声功率200W,提取时间40 min,提取次数2次。在此条件下,北五味子多糖相对提取率为87.12%(n=3),优于传统的水提法和醇提法。北五味子多糖具有较强的抗氧化性能。     

超声辅助酶法提取中华鳖裙边胶原蛋白及其热稳定性能

以中华鳖裙边为原料,采用单因素试验探讨加酶量、超声时间、超声功率、料液比对胶原蛋白的影响,通过Box-Behnken响应面方法建立数学模型,求得最佳酶提工艺,比较常规酶提和超声辅助酶提胶原蛋白的热稳定性能。结果表明,在提取溶剂为乙酸（0.5?mol/L）、料液比1∶20（g/mL）的条件下,采用超声酶提胶原蛋白的最佳工艺参数为加酶量0.8%、超声时间43?min、超声功率176?W,此条件下胶原蛋白得率为74.50%;差示扫描量热实验结果表明,超声酶提胶原蛋白的热稳定性显著优于常规酶提胶原蛋白。该研究可为中华鳖裙边胶原蛋白的精深加工及其应用提供一定科学依据。     

超声辅助提取毛酸浆籽蛋白质的工艺优化

以毛酸浆籽为原料,以蛋白质提取率为指标,在超声功率、提取温度、提取时间和提取液pH等单因素实验基础上,通过正交试验优化超声辅助提取毛酸浆籽蛋白质的最佳提取工艺条件,并分析了该蛋白质的溶解性、乳化性和起泡性。结果表明:影响毛酸浆籽蛋白质提取率的各因素的主次顺序为:提取温度>超声功率>提取液pH>提取时间;当料液比为1:15（g/mL）时,超声辅助处理提取毛酸浆籽蛋白质的最佳工艺条件为:提取温度50 ℃,超声功率300 W、提取液pH 9.0,提取时间50 min,此工艺条件下,毛酸浆籽蛋白质的提取率可达90.45%±0.16%。超声辅助提取的毛酸浆籽蛋白质在pH为10.0时,溶解性和乳化性最好,其氮溶解指数为58.32%,乳化性达到68.94 m2/g,在pH 7.0时其起泡性最好,为43%。该提取工艺能高效地提取毛酸浆籽中蛋白质,为该蛋白质的进一步应用提供了理论依据。     

超声辅助提取黑松松针多糖的工艺优化及其抑菌性研究

采用超声辅助水提法提取黑松松针多糖,苯酚-硫酸法测定提取的多糖含量。在单因素试验基础上,通过正交试验对黑松松针多糖的提取工艺进行优化。采用抑菌圈法考察了提取的松针多糖对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌效果。结果表明:松针多糖的最佳提取工艺条件为浸提时间2 h、液料比80∶1(m L/g)、浸提温度90℃、超声功率为130 W,在此条件下,黑松松针多糖得率为2.47%。提取的黑松松针多糖对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌具有一定的抑制作用。     

芝麻蛋白酶法制备工艺优化

为了提高芝麻蛋白的纯度，以脱脂芝麻粕为原料，采用超声波辅助碱提法耦合碱性纤维素酶和碱性果胶酶酶解技术制备芝麻蛋白。以芝麻蛋白纯度为指标，通过单因素实验对芝麻蛋白的提取工艺条件进行了优化。结果表明，芝麻蛋白制备的最优工艺条件为匀浆处理时间15 min、碱溶时间1.0 h、酶用量0.1%、酶处理超声功率密度0.5 W/cm²、酶解时间2.0 h,在此条件下芝麻蛋白提取率为74.8%,纯度为89.8%,与未耦合酶法提取的芝麻蛋白纯度(75.6%)相比提高了14.2百分点。综上，超声波辅助碱提法耦合酶法可以获得高纯度的芝麻蛋白。     

胭脂果多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为了考察超声辅助水提法对胭脂果多糖得率的影响,本研究应用单因素实验对超声功率、超声时间、提取温度和液料比展开了研究。在此基础上,采用响应面法优化了工艺参数,并分析了胭脂果粗多糖的体外抗氧化活性。结果表明,当胭脂果多糖最佳提取工艺为超声时间6 min、超声功率97 W、提取温度86℃、提取时间150 min和液料比40 mL/g时,粗多糖得率可达12.55%±0.31%,仅低于预测值0.23%,而且其中多糖含量达到了(413.75±0.41)mg/g,说明该模型能较好地预测实际得率。胭脂果多糖对DPPH·和·OH以及总还原能力与质量浓度呈量效关系,对DPPH·和·OH的IC₅₀分别为0.0203、1.44 mg/mL。因此,响应面法优化超声辅助水提法提取胭脂果多糖工艺方便可行,得到的多糖有较好的体外抗氧化活性,可为进一步的合理开发利用提供理论依据。