仙人掌多糖的分子量及单糖组成分析

对仙人掌多糖分子量及其单糖组成进行了研究。采用水提醇沉法提取多糖,DEAE-纤维素离子交换层析柱分离纯化,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定多糖分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成。结果表明:此法最终获得三个多糖组分OPS-1、OPS-2、OPS-3,相对分子量分别为124712、197943、43083。OPS-1含葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,摩尔比为1.5:12.9:1.0;OPS-2含甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,摩尔比为1.0:15.6:1.0:2.4:8.2:41.6:36.3;OPS-3含鼠李糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,摩尔比为1.0:2.4:1.4:1.4。为仙人掌多糖的进一步研究及开发提供了科学依据。     

洋甘菊多糖中单糖组分的高效液相色谱及高效毛细管电泳测定比较

目的建立两种色谱法测定洋甘菊多糖中单糖组分的方法。方法多糖样品经酸解为单糖后,均经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,分别采用高效液相色谱(HPLC)和高效毛细管电泳(HPCE)测定。分别对两种方法的线性、精密度、重复性、稳定性及方法回收率进行比较。结果 HPLC测定洋甘菊多糖中甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖与木糖的物质的量之比为1:1.51:2.23:3.53:6.61:2.98。HPCE测定洋甘菊多糖中甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖的物质的量之比为1:1.53:3.10:4.12:7.28:2.27:0.90。结论两种方法灵敏度均可,稳定可靠,都可作为洋甘菊多糖中单糖的含量测定方法并互为补充。     

衍生化气相色谱法测定亚麻胶的单糖组成

目的采用衍生化气相色谱法(GC)测定亚麻胶的单糖组成。方法从亚麻粕中提取纯化得亚麻胶,经酸水解、衍生化后,用气相色谱分析。结果亚麻胶样品中鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖的质量分数分别为12.13%,6.83%,4.30%,12.70%,3.75%,10.15%,15.30%。结论亚麻胶主要由鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖7种单糖组成,以半乳糖含量最高。     

高效液相色谱法分析地瓜儿多糖的单糖组成

研究分析地瓜儿多糖的单糖组成。采用水提醇沉法提取地瓜儿多糖,用三氟乙酸水解多糖成单糖,单糖产物经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化后,利用高效液相色谱法分析单糖的PMP衍生物。结果表明,地瓜儿多糖由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)和阿拉伯糖(Ara)8种单糖组成,是一种酸性杂多糖,其中以半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸为主,为进一步开发利用地瓜儿这一新的野菜资源提供了科学依据。     

柱前衍生化HPLC法分析真菌多糖的单糖组成

通过柱前衍生化HPLC法分析了6种真菌多糖的单糖组成。将6种真菌的胞外粗多糖及其菌体用1mol/L的硫酸水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,利用高效液相色谱法检测各单糖。结果表明,灵芝、树舌类真菌胞外多糖的产率均较高,胞外多糖产率在0.0921～0.1528g/100mL之间。胞外多糖主要以甘露糖为主,其次含有葡萄糖和半乳糖,并且一般含有少量的阿拉伯糖。胞内多糖中葡萄糖含量最高,其次含有甘露糖和半乳糖,个别菌种还含有少量的阿拉伯糖和葡萄糖醛酸。而虫草胞外多糖的组成依次为半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸,胞内多糖同样是主要含有葡萄糖,其次含有甘露糖、半乳糖和葡萄糖醛酸。     

柱前衍生高效液相色谱法检测8种枣水溶性多糖的单糖组成

建立了柱前衍生高效液相色谱法,对金丝小枣、大荔龙枣、晋枣、赞皇大枣、宣城圆枣、梨枣、无核小枣和骏枣中水溶性多糖的单糖组成及其比例进行分析比较。样品经清洗、烘干、粉碎、石油醚脱脂后,采用水提醇沉法得到水溶性多糖,经低温干燥后备用。水溶性多糖经三氟乙酸充分水解后,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作为衍生剂,HPLC法分析枣水溶性多糖的单糖组成。结果表明:柱前衍生高效液相色谱法检测水溶性多糖的单糖组成衍生方法简单、线性关系好,检测灵敏度高,单糖的最低检出限为0.14~0.33 nmol。8种枣多糖均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖6种单糖组成,其单糖组成比例存在很大差异。其中,甘露糖在各多糖中含量均较低,半乳糖醛酸含量普遍较高,葡萄糖除了在赞皇大枣和金丝小枣两种制干型枣中含量较低以外,在其余6个品种中含量较高。     

石莼多糖的单糖组成成分分析

目的:建立测定分析石莼多糖的单糖组成方法。方法:超声辅助提取石莼多糖,三氟乙酸(TFA)水解多糖,采用薄层色谱法(TLC)和1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成。结果:TLC法推断石莼多糖的单糖组成为甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖。PMP-HPLC法表明石莼多糖含有甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖,其摩尔比为:0.08∶0.08∶1.00∶0.97∶0.04∶0.68。结论:TLC法可以对多糖的单糖组成进行定性,但难以进行定量测定。PMP-HPLC法,操作简便,灵敏度高,分离效果好,可用于测定石莼多糖中单糖的组成定性、定量测定。     

苹果果皮和果肉多糖的组成及抗氧化活性比较

为探究苹果果皮和果肉多糖的差异,采用传统的热水浸提法,分别从苹果果皮和果肉渣中提取苹果果皮多糖(APP)和苹果果肉多糖(AFP),采用PMP柱前衍生高效液相色谱法对2种多糖进行单糖组成分析并通过体外抗氧化体系对其抗氧化活性进行比较。结果表明:APP和AFP均由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖这10种单糖组成,且主要由阿拉伯糖、半乳糖醛酸和半乳糖组成,但单糖比例存在很大差异。2种多糖均表现出很强的DPPH·和·OH清除能力和较弱的还原力,在相同的浓度下,APP的抗氧化活性显著高于AFP。     

枸杞提取物中糖的组成分析

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-2-pyrazolin-5-one,PMP)衍生,通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对枸杞提取物样本中单糖组成进行分析,为枸杞提取物的质量分析提供依据。自制7份枸杞多糖提取物均含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖及半乳糖醛酸;2份市售枸杞提取物几乎只有葡萄糖,和糊精的分析结果基本一致。自制枸杞多糖的总糖含量在32.09%～43.72%之间,酸性糖含量在47.31%～57.38%之间;2份市售枸杞提取物多糖含量均大于90%,而酸性糖含量显著低于自制枸杞多糖。通过分析单糖组成、酸性糖含量能为市售枸杞提取物及相关食品和功能食品的质量控制提供依据。     

银杏叶多糖的系统分离纯化与单糖组成研究

以水提银杏叶粗多糖为研究对象,利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱分离,得到电荷性质不同的4个亚组分PGBL_0、PGBL_1、PGBL_2、PGBL_3。利用Sepharcyl-300凝胶柱层析对PGBL_1和PGBL_2 2种主要组分进行进一步分离纯化,得到4种均一多糖PGBL_(1A)、PGBL_(1B)、PGBL_(2A)、PGBL_(2B),其重均相对分子质量分别为1.4×10~4、9.0×10~3、1.2×10~5和3.0×10~4。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生法对4种均一多糖进行单糖组成分析,PGBL_(1A)由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为2.13:1.00:2.50:6.88;PGBL_(1B)由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为1.00:3.50:1.00:1.50:6.75:11.50;P G B L_(2 B)由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为2.50:4.83:3.83:1.00:3.00:3.00;PGBL_(2A)由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸组成,摩尔比为2.19:1.57:1.00。     

具有抗氧化活性茶多糖TPS- Ⅱ的分离纯化及其性质研究

从六安炒青绿茶水提物中分离纯化得到具有抗氧化作用的茶多糖组分TPS-II,经电泳和FPLC 方法检测TPS-II 为均一组分;其总糖85.3%、糖醛酸28.0%、蛋白2.8%,分子量为1.01 × 105D;气相色谱法分析得知其单糖组成为L- 鼠李糖、L- 岩藻糖、L- 阿拉伯糖、D- 木糖、D- 甘露糖、D- 葡萄糖、D- 半乳糖,摩尔比为2.98:1.58:4.27:1.00:1.82:2.25:6.98;红外光谱分析显示TPS-II 呈现多糖吸收特征峰,β- 消去反应推断TPS-II 中多糖与蛋白的连接为非O- 型糖肽键。     

白背三七多糖的结构表征及α-葡萄糖苷酶的抑制活性

采用气相色谱、高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解和13C-NMR对白背三七分离多糖GDPs-1和GDPs-2的一级结构进行表征;通过刚果红实验和X射线衍射对其高级结构进行初步探究;并研究各种多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明：DPs-1由D-Fru、L-Rha、L-Ara、D-Xyl、D-Man、D-Glu和D-Gal组成,物质的量比为0.2:0.4:1:1:1:2:7;GDPs-2由L-Ara、D-Man、D-Glu和D-Gal组成,物质的量比为0.4:2:2:0.1;高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解和13C-NMR显示GDPs-1主链重复单元为α-(1→2)-Gal残基,支链由α-(1→3)-Xyl、α-(1→3)-Man、α-(1→2)-Glu、Me-α-Araf构成;GDPs-2主链重复单元为α-(1→3)-Man残基,支链由α-(1→2)-Glu和α-(1→6)-Glu组成;刚果红实验表明GDPs-2分子存在较为稳定的三股螺旋构象;X射线衍射显示2种多糖分子规整性不强,以多晶体无定形态存在;体外降血糖研究表明,白背三七粗多糖GDPs-1和GDPs-2对α-葡萄糖苷酶的抑制活性均极低,提示其并非通过抑制α-葡萄糖苷酶活性来实现降血糖功效。     

败酱草多糖的组成及抗疲劳与耐缺氧作用

目的：评价败酱草多糖（Herba Patriniae polysaccharide,HPP）抗疲劳和耐缺氧的活性。方法：采用水提醇沉法提取HPP,对其基本成分组成进行测定;同时建立小鼠负重游泳模型和耐缺氧模型,同时给予小鼠不同剂量的HPP水溶液,测定小鼠力竭游泳时间与耐缺氧时间以及血乳酸（blood lactic acid,BLA）、血尿素氮的浓度和肌酸激酶（creatine kinase,CK）活性、肝糖原和肌糖原的含量。结果：HPP是一种含蛋白质的多糖,蛋白质含量为13.26%,单糖主要由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖以物质的量比0.53∶0.35∶3.18∶1∶2.72∶1.27组成;服用HPP可使小鼠游泳力竭时间显著延长、肝糖原含量升高,而BLA含量和CK活性均不同程度下降,但耐缺氧时间变化不明显。结论：HPP具有抗疲劳的作用,但其对小鼠的耐缺氧作用不明显。     

桑叶多糖的组成及结构表征

利用高效凝胶色谱(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)分析桑叶多糖两个组分MPL1和MPL2 的重均分子质量分别为11800D 和7630D,利用GC 分析MPL1 和MPL2 是由D- 果糖(D-Flu)、L- 阿拉伯糖(L-Ara)、L- 鼠李糖(L-Rha)、D- 木糖(D-Xyl)和D- 葡萄糖(D-Glu)5 种单糖组成,其物质的量比分别为58:9.9:5.8:5.1:21.2和45:6.74:17.2:7.3:24.1。而通过高碘酸氧化和Smith 降解反应的方法得到MPL1 和MPL2 的主链是由1 → 3 位键合的糖基组成,支链为1 → 2 位键合的糖基组成。红外光谱分析桑叶多糖中存在α构型的C - H 吸收峰。     

鹰嘴豆非淀粉多糖的分离纯化及结构表征

提取鹰嘴豆中的粗多糖,通过酶处理和Sevag法除去多糖中的淀粉和蛋白质,经DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75凝胶柱分离纯化分别得到鹰嘴豆非淀粉中性多糖和酸性多糖,并通过紫外光谱、气相色谱、红外光谱、扫描电镜测定其性质和单糖组成。结果表明：鹰嘴豆非淀粉多糖在260 nm和280 nm波长处均无吸收峰,表明两种多糖均不含核酸、蛋白质以及肽类等;气相色谱测定表明鹰嘴豆非淀粉中性多糖单糖组成的物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.48∶1∶3.92∶0.87∶32.82∶18.79∶28.06,鹰嘴豆非淀粉酸性多糖单糖组成物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.22∶1∶3.92∶2.10∶5.92∶15.99∶8.57（均以岩藻糖为标准）;红外光谱测定表明二者均有多糖的特征吸收峰;扫描电镜显示鹰嘴豆非淀粉中性多糖呈线形结构而鹰嘴豆非淀粉酸性多糖呈卷曲的片状结构。     

不同提取方法对小麦麸皮多糖化学组分及免疫调节活性的影响

目的:以小麦麸皮超微粉为实验材料,分别用酸法、碱法、水提和酶法提取获得多糖,研究不同提取方法对小麦麸皮多糖得率、提取后麸皮残渣微观形态、糖醛酸含量、硫酸根含量、蛋白质含量、单糖组成及免疫调节活性的影响。方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,硫酸-间羟基苯酚法测定糖醛酸含量,BaCl₂-明胶法测定硫酸根含量,气相色谱法测定单糖组分;采用MTT检测细胞毒性,Griess法测定细胞上清液中NO含量,Western Blot法检测细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达。结果:碱提法获得的粗多糖得率最高,为31.73%,测定提取的粗多糖中多糖含量为57.79%;小麦麸皮多糖中糖醛酸和硫酸根的含量依次为:碱提法>酶提法>酸提法>水提法;不同提取方法的小麦麸皮多糖组分中所含单糖的种类为阿拉伯糖、木聚糖及葡萄糖;MTT法检测四种小麦麸皮多糖对细胞均无毒性,其中水提多糖能促进RAW264.7细胞分泌NO因子并能促进细胞诱导型一氧化氮合成酶和环氧合酶-2蛋白的表达。结论:四种不同提取方法所得到的小麦麸皮多糖的得率、化学组成成分及生物活性各不相同,采用传统水提法工艺提取多糖更利于维持多糖的免疫调节活性。     

薄层色谱法和气相色谱法分析2种侧耳多糖的单糖组成

目的分析阿魏菇和杏鲍菇2种侧耳多糖的单糖组成。方法阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖经完全酸水解后,用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)和气相色谱法(gas chromatography,GC)分析样品的单糖组成,并测定各单糖的摩尔比例。结果 TLC法和GC法均检测出阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖含有阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal)单糖组分,GC法测得阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖中各单糖的摩尔比(Ara:Man:Glc:Gal)分别为1.00:1.75:11.79:2.22和1.00:4.53:1.92:2.24。结论阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖的单糖组成类似,但二者的各单糖摩尔比例有差异,TLC和GC法适用于分析阿魏菇和杏鲍菇多糖的单糖组成。     

南瓜皮多糖PP1的提纯、组分分析及原子力显微镜技术观测研究

采用热水浸提法及十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB法)提取南瓜皮多糖PP1,紫外分光光度法和高效液相色谱法检测纯度,红外光谱分析其结构及气相色谱测定南瓜皮多糖PP1的单糖组分;通过乙醇固定、Ni2+搭桥固定两种制样方法,原子力显微镜(AFM)观测南瓜皮多糖PP1微观形貌。结果表明：热水浸提及CTAB法分离纯化南瓜皮多糖PP1的纯度较高,不含核酸及蛋白质,红外光谱分析证实南瓜皮多糖PP1具有糖类物质的特征吸收峰,存在吡喃环,由果糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,物质的量比为0.92:2.76:5.52:2.24,AFM观测其结构呈单链形排列,无分支状结构,采用乙醇固定法得到的多糖结构形态较细长,Ni2+搭桥固定法得到的多糖结构形态相对短粗。     

兰州肉苁蓉多糖的组成分析及抗氧化活性

对兰州肉苁蓉多糖进行组成分析和抗氧化活性研究。采用沙生植物兰州肉苁蓉肉质茎鲜样,使用传统水提醇沉法进行兰州肉苁蓉粗多糖（CLP）的提取,利用DEAE-纤维素阴离子交换色谱柱法对粗多糖CLP进行洗脱,得到中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2。用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）和高效液相色谱法（HPLC）对其分子量和单糖组成进行测定,通过DPPH自由基清除实验和总抗氧化能力实验进行抗氧化活性测定。根据HPGPC对分子量测定得出兰州肉苁蓉多糖有多个洗脱峰,其多糖分子量主要分布在0~10 kDa之间,为不均一的小分子量杂多糖;经过分级得到的中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2的单糖组成差异明显,CLP-1中较明显的单糖及占比分别为:甘露糖2.78%、半乳糖醛酸4.07%、葡萄糖88.62%、半乳糖1.80%、阿拉伯糖2.39%;CLP-2中为:鼠李糖5.79%、半乳糖醛酸7.78%、葡萄糖9.99%、半乳糖13.30%。根据抗氧化实验结果分析,CLP-1的抗氧化效果最好,2.0 mg/mL浓度下对DPPH自由基清除能力高达91.73%,IC₅₀为0.383 mg/mL,且同一浓度下总抗氧化能力高于CLP和CLP-2。本文对兰州肉苁蓉多糖进行初步分析,为兰州肉苁蓉的进一步研究提供基础的数据支撑。