我国首例由丁酸梭菌引起婴儿E型肉毒中毒实验室诊断研究

目的对一起疑似婴儿肉毒中毒进行实验室诊断研究。方法对1例疑似婴儿肉毒中毒病例的粪便、食用过的食品和生活环境涂抹共计30份标本/样品进行梭菌分离鉴定及肉毒毒素检测,对分离菌株进行产毒试验。结果将患儿粪便标本培养物上清液腹腔注射小鼠后可致小鼠出现典型肉毒毒素中毒表现(竖毛、呼吸困难并出现典型的蜂腰、四肢麻痹),继而死亡,且培养物上清液经胰酶处理后毒性增强,表现为小鼠出现中毒及死亡时间较未处理组明显缩短。但培养物上清液经100℃加热处理后再次染毒动物,小鼠未出现中毒和死亡。混合型肉毒毒素诊断血清及单价抗E型肉毒毒素诊断血清可对小鼠起到保护作用。从患儿的粪便标本中分离到G~+芽胞杆菌,该菌在哥伦比亚血平板上呈不规则半透明扁平菌落,边缘根状生长,并携带E型肉毒毒素产毒基因,16S rRNA将其鉴定为丁酸梭菌,产毒试验结果显示该菌株可产E型肉毒毒素。结论该起婴儿中毒事件是由感染产E型肉毒毒素的丁酸梭菌引起。     

不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用

目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoV GⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 ,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoV GⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法 ;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoV GⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的检测,饮用水被NoV GⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。     

水产品中创伤弧菌检测方法建立与应用

目的建立一种水产品中创伤弧菌检测方法 ,并对北京市市售水产品中创伤弧菌污染情况进行监测。方法分别使用18株创伤弧菌菌株和水产品中常污染的背景杂菌,定量接种于检测创伤弧菌的选择性增菌液和4种选择性平板,优化出适合创伤弧菌检测的选择性培养基。采用聚合酶链式反应(PCR)法和增菌培养法分别检测样品中的创伤弧菌后进行方法对比,建立PCR和增菌培养法相结合的检测方法 ,并应用此方法研究北京市市售水产品中创伤弧菌污染状况。结果改良后的选择性增菌液适用于创伤弧菌的检测。北京市市售水产品中创伤弧菌检出率为15.7%(18/115),其中贝类、蟹类、鱼类和虾类样品的检出率分别为23.4%(15/64)、8.3%(1/12)、5.3%(1/19)和5.0%(1/20)。结论 PCR法与传统增菌培养法相结合,可有效提高创伤弧菌检测效率。北京市市售贝类等水产品中创伤弧菌污染率较高,需引起食品安全风险监测重点关注。     

RISK21分析工具在邻苯二甲酸酯类物质膳食暴露风险评估中应用研究

目的应用RISK21框架和工具分析我国2～6岁儿童邻苯二甲酸二(2-乙基)己基酯(DEHP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)7种邻苯二甲酸酯类物质(PAEs)的膳食暴露风险,为风险管理决策提供科学基础。方法以PAEs的毒性为纵坐标,以暴露为横坐标,以暴露限值(MOE)和不确定系数为参数,应用RISK21工具中RISK PLOT模块,通过矩阵计算,以图形展示2～6岁儿童暴露于7种PAEs的风险大小和等级。应用TTC PLOT模块,分析毒理学资料缺乏的DMP、DEP、DIBP 3种PAEs的暴露风险。结果 RISK PLOT表明一般人群7种PAEs均处于风险较低的绿色区域;高食物消费量人群7种PAEs暴露风险排序为DBP、DIBP、DEHP、DMP、DEP、DINP及BBP, TTC PLOT显示我国2～6岁儿童DMP、DEP、DIBP膳食暴露风险低于相应的毒理学关注阈值(TTC)。结论 RISK21框架和工具可应用于风险评估及其后期的管理决策, RISK21分析结果表明我国2～6岁儿童7种PAEs膳食暴露风险较低。     

重要产毒镰刀菌合成白僵菌素和恩镰孢菌素研究进展

白僵菌素(beauvericin,BEA)和恩镰孢菌素(enniatins,ENNs)是由镰刀菌属的多种真菌产生的六酯肽类真菌毒素,该类毒素对上皮细胞、免疫细胞、卵巢细胞等具有很强的毒性作用。本文主要针对能产生BEA和ENNs的重要产毒镰刀菌的形态学特征、分子遗传学特征以及影响BEA和ENNs产生的环境条件如温度、底物等因素进行概述。重点阐述了产毒镰刀菌在两类毒素合成酶的基因水平和氨基酸水平的差异及影响产毒等主要因素,为BEA和ENNs及其产毒镰刀菌的预防和控制提供理论依据。     

我国熟制坚果与籽类食品中霉菌及其毒素污染状况研究

目的 调查我国熟制坚果与籽类食品中霉菌及其毒素污染状况，掌握该类食品中霉菌及真菌毒素污染风险的关联性。方法 通过采集市售商品，检测霉菌及其毒素，采用内转录间区（ITS）测序法对样品中污染的霉菌进行属鉴定。结果 19.32%（560/2 912）的熟制坚果与籽类食品霉菌计数>25 CFU/g。单一、混合坚果超过该限值的比例分别为14.78%（322/2 178）和32.56%（239/734），差异有统计学意义（P<0.05）。单一坚果中核桃超过该限值的比例最高，为24.10%（47/195），杏仁、巴达木和花生分别为17.44%（15/86）、16.81%（20/119）和16.22%（73/450），其余种类均在15%以下。对26份霉菌计数>25 CFU/g的样品进行真菌毒素检测，1份采自云南的花生检出白僵菌素污染量为16.37 μg/kg。ITS扩增子测序发现熟制坚果与籽类食品中主要污染曲霉属、交链孢霉属、念珠菌属等，和真菌毒素检出有相关性。结论 熟制坚果与籽类食品中霉菌污染较高，检出的霉菌属有产真菌毒素的风险，提示应加强该类食品中污染霉菌的监测、种属鉴定及产毒情况研究，掌握其污染途径和产毒规律，为开展风险评估，采取有效防控措施提供科学依据。     

济南市售生鸡肉中金黄色葡萄球菌污染状况及半定量风险评估研究

目的 了解济南市售生鸡肉中金黄色葡萄球菌污染状况和分离株肠毒素基因携带情况,评估生鸡肉产品对消费者的健康风险。方法 2021年3~11月对济南市主要人口密集区域的部分大型超市、农贸市场、肉制品零售店等流通环节及电商平台进行样品采集,依据GB 4789.10—2016《食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》要求对样品进行金黄色葡萄球菌检验;通过聚合酶链式反应（PCR）对分离株进行复核鉴定和5种肠毒素基因（sea、seb、sec、sed、see）的检测;使用Risk ranger风险评估软件评估济南市售生鸡肉中金黄色葡萄球菌对消费者健康的影响。结果 在采集的180份样品中,共55份样品检出金黄色葡萄球菌,其中大型超市、电商平台来源的冷冻鸡制品16份（16/61）;农贸市场,肉制品零售店来源的冷冻鸡制品30份（30/60）,鲜整鸡9份（9/59）。55株分离株中有9株携带至少一种经典肠毒素基因。半定量风险评估结果提示,济南市售生鸡肉中金黄色葡萄球菌导致消费者罹患食物中毒的风险等级为高风险水平,其中农贸市场、肉制品零售店来源的冷冻鸡制品风险值为53;鲜整鸡风险值为52;大型超市、电商平台来源的冷冻鸡制品风险值为49。结论 济南市市售生鸡肉中金黄色葡萄球菌污染水平较为严重。结合风险评估结果,建议有关部门加强监管力度,规范市售冷冻肉制品的运输和存放条件,降低冷冻鸡制品细菌污染的风险,保障消费者健康。     

超高效液相色谱-高分辨质谱法测定牛奶中7种有机磷酸酯类阻燃剂

目的 建立牛奶中7种有机磷酸酯类(OPEs)阻燃剂的超高效液相色谱-高分辨质谱分析方法。方法 基于乙腈-冷冻诱导液液萃取技术提取、净化和富集样品,以甲醇-水作为流动相,梯度洗脱程序,HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,高分辨质谱靶向单一离子监测模式测定,内标法定量。结果 7种OPEs在0.2～20μg/L范围内呈良好的线性关系(R²>0.99),方法检出限为0.01～0.21μg/L,定量限为0.04～1.72μg/L,3个不同加标水平的回收率为88.4%～118%,相对标准偏差为1.15%～7.15%。结论 该方法操作简便,重复性好,灵敏度高,可应用于牛奶中OPEs的痕量检测。     

我国食源性金黄色葡萄球菌耐药及遗传特征情况研究

目的 探究我国2020年食源性金黄色葡萄球菌的耐药性、毒力因子及分子分型特征。方法 采用微量肉汤稀释法对菌株进行药物敏感性试验,基于全基因序列分析多位点序列分型及重要耐药基因（mecA）和毒力基因。结果 224株食源性金黄色葡萄球菌对12类抗菌药物的整体耐药率为87.9%（197/224）,对青霉素的耐药率最高为82.6%（185/224）。多重耐药率为23.2%（52/224）,多重耐药菌中ST398占比最高为26.9%（14/52）,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为8.0%（18/224）。葡萄球菌肠毒素基因整体携带率为52.2%（117/224）,其中sea的携带率最高为24.6%（55/224）,携带肠毒素基因种类最多的ST型为ST1。共检测到31种ST型,其中ST7最多（12.9%,29/224）,ST398次之（10.7%,24/224）。中毒性休克综合征毒素编码基因（tsst-1）和杀白细胞素编码基因（lukF-PV和lukS-PV）的携带率分别为6.3%（14/224）和4.5%（10/224）。结论 我国食源性金黄色葡萄球菌耐药率和肠毒素携带率均较高,且检出了临床感染中重要的毒力基因,提示食品中金黄色葡萄球菌的潜在危害不容忽视。ST型与食品类别、耐药性和致病性存在一定相关性,可为了解我国食源性金黄色葡萄球菌的流行特征和风险防控提供数据支撑。     

边销茶中蒽醌污染状况及其暴露风险评估

目的 了解我国边销茶中蒽醌（以9,10-蒽醌为代表）的污染状况,评估我国边销茶饮用人群的暴露水平及健康风险。方法 用气相色谱串联质谱法（GC-MS/MS）测定边销茶样品中蒽醌（以9,10-蒽醌为代表）的含量,基于2016—2017年边销茶中9,10-蒽醌食品安全风险监测数据,结合内蒙古自治区、西藏自治区、青海省居民的边销茶消费量数据,通过简单分布评估法对当地居民通过饮用边销茶蒽醌的暴露量进行估计,并与每日允许摄入量（ADI,6.8 μg/kg·BW）比较后进行风险评估。结果 141份边销茶样品中蒽醌总检出率为75.18%,平均含量为0.029 2 mg/kg,我国尚未制定茶叶中蒽醌的限量标准,以2014年欧盟法规条例（EU）No 1146/2014中规定的茶叶中蒽醌最大残留限量0.02 mg/kg作为参考,总超标率为57.45%。定型包装和散装的边销茶蒽醌超标率分别为64.63%和47.46%。简单分布评估结果显示,我国内蒙古自治区、西藏自治区和青海省饮茶者全人群每日通过边销茶摄入蒽醌的平均水平为9.37×10^-4 μg/kg·BW,占ADI的0.013 8%;边销茶高消费人群的每日暴露量（P95暴露量）为3.12×10^-3 μg/kg·BW,占ADI的0.045 9%。不同性别-年龄组中,45~59岁女性组每日平均暴露量和P95暴露量最高,分别为1.41×10^-3和6.16×10^-3 μg/kg·BW,远低于ADI值。结论 内蒙古自治区、西藏自治区和青海省居民经边销茶摄入的蒽醌对人体造成的健康风险较低,处在可接受水平。但我国边销茶中普遍存在蒽醌污染,需要进一步对茶叶中蒽醌进行溯源分析并控制污染源。另外,为积极应对欧盟等国家和地区对我国出口茶叶的蒽醌含量限定,建议相关部门研究制定茶叶中蒽醌的合理限量规定。