半胱氨酸添加与溶氧控制及pH胁迫相结合促进产朊假丝酵母合成谷胱甘肽

采用产朊假丝酵母,在细胞高密度培养基础上,考察了半胱氨酸添加与溶氧控制及低pH胁迫对谷胱甘肽(GSH)合成的影响. 结果表明,细胞高密度培养结束时(45 h),一次性添加50 mmol/L半胱氨酸,第60 h时GSH产量达1534 mg/L. 添加半胱氨酸后的3 h内溶氧控制在5%,之后的12 h将溶氧控制在20%,可减少半胱氨酸添加量,而GSH产量却提高13%. 将30 mmol/L半胱氨酸分2次添加并与pH胁迫和溶氧控制相组合,发酵结束时(78 h),GSH终产量达1936 mg/L.     

卷烟烟气总粒相物诱导A549细胞的氧化应激研究

为研究卷烟烟气总粒相物(TPM)对人肺腺癌细胞(A549)的氧化损伤,捕集3R4F参比卷烟主流烟气的TPM,对A549细胞进行染毒,采用中性红细胞毒性法测试TPM与A549细胞存活率的剂量-效应关系,检测了细胞内谷胱甘肽(GSH)和细胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)两种氧化应激指标。结果表明:①TPM与A549细胞存活率之间存在良好的剂量-效应关系。②细胞发生氧化应激时,细胞内还原态谷胱甘肽和氧化态谷胱甘肽比值(GSH/GSSG)相对于阴性对照组有显著降低,且不随染毒时间的增加而变化;EC-SOD在染毒4 h后没有显著增加,但24 h后有显著增加。      

饲料氧化鱼油对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道谷胱甘肽/谷胱甘肽转移酶通路基因表达活性的影响

为了研究饲料氧化鱼油对草鱼肠道抗氧化防御能力的影响,以谷胱甘肽/谷胱甘肽转移酶(GSH/GSTs)通路为研究对象,以豆油、鱼油、氧化鱼油为饲料脂肪源分别设计豆油组(6S)、鱼油组(6F)、2%氧化鱼油(2OF)、4%氧化鱼油(4OF)及6%氧化鱼油(6OF)5组等氮、等能半纯化饲料,在池塘网箱养殖草鱼[平均体重(74.8±1)g]72 d。采用荧光定量PCR(RT-QPCR)的方法,测定了草鱼肠道组织中谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚(GCLC)、谷胱甘肽合成酶(GSS)和谷胱甘肽还原酶(GSR)以及谷胱甘肽S-转移酶的ω1(GSTω1)、PI-谷胱甘肽S-转移酶(GSTPI)和微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(MGSt1)的表达活性,并测定了肠道中谷胱甘肽GSH的含量。结果显示,2OF、4OF和6OF组草鱼肠道中GSH/GSTs通路基因表达均上调,其中6F组中MSGT1在肠道中表达显著上调(P0.05),4OF组中GSR和MGST1在肠道中表达显著上调(P0.05),6OF中GCLC和MGST1在草鱼肠道中表达显著上调(P0.05);GCLC表达活性与饲料中MDA含量呈多项式的关系,MGST1表达活性与饲料中AV和(EPA+DHA)呈多项式关系。结果表明,氧化鱼油使草鱼肠道GSH/GSTs通路基因表达活性上调,且GSH/GSTs通路基因表达活性对不同浓度氧化鱼油所引起的肠道氧化损伤具有不同的应对方式。     

聚果多酚抗衰老作用的实验研究

目的：观察聚果多酚的抗衰老作用。方法：将 32只18个月老龄大鼠随机分为2个剂量聚果多酚(50mg/kg和100mg/kg)、VE(35mg/kg)、老龄对照组,每日分别灌胃给与相应药物或生理盐水,连续给药16d,测定心肌脂褐素(LF) 、血浆超氧化物歧化酶 (SOD)、脂质过氧化物 (MDA)及血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果：给予聚果多酚大鼠血浆SOD和GSH-Px活力显著提高(p<0.01),而MDA和LF含量则明显下降(p<0.05)。结论：聚果多酚能抑制自由基损伤,防止脂质过氧化,具有明显延缓衰老作用。     

高产谷胱甘肽酵母菌株的选育和培养条件的初探

以Saccharomyces cerevisiaeG796-2为出发菌株,通过紫外线照射结合乙硫氨酸平板筛选,连续两代诱变筛选分离得到高产突变株Saccharomyces cerevisiae SE-2;摇瓶试验胞内谷胱甘肽含量达到2.2%,较出发菌株G796-2提高62.9%,传代试验表明其遗传性能稳定。对SE-2的培养条件进行了研究。采用正交化实验和双碳源实验对培养基进行优化,结果表明,最佳初糖浓度6%,葡萄糖/糖蜜=3.5:1,半胱氨酸的添加浓度5mmoL?L?1较为适宜。在优化的培养条件下培养39h,SE-2谷胱甘肽总量达180mg?L?1以上,较G796-2提高81.2%。     

米糠发酵生产谷胱甘肽的工艺

以米糠为原料,利用米曲霉,研究了液体和固体两种发酵方法生产谷胱甘肤(GSH)的工艺.通过研究发酵生产谷胱甘肽的影响因素,温度、相对湿度、培养时间、接种量和培养转速.确定了液体发酵生产谷胱甘肽的最佳条件为:温度28℃、培养转速130 r/min、培养时间2 d、接种量5%;固体发酵生产谷胱甘肤的最佳条件为:温度28℃、相对湿度90%、培养时间3d、接种量5%.     

大孔吸附树脂分离纯化谷胱甘肽(GSH)的研究

研究大孔型弱酸性丙烯酸系阳离子树脂（D001）分离纯化谷胱甘肽（GSH）的工艺条件。考察固定床D001离子交换树脂对谷胱甘肽（GsH）的静态吸附量及pH值,流速等因素对分离纯化GSH的影响。根据试验结果确定最佳工艺条件为：上柱液pH为5．0,树脂柱高度15cm,流速为3．5ml／min。收集液浓缩,真空冷冻干燥后检测产品GSH,所得GSH纯度提高90．9％,GSH的平均收率为70．6％,说明此分离纯化GSH工艺可行。     

酵母中还原型谷胱甘肽的提取方法研究

采用热水和乙醇提取啤酒酵母中的还原型谷胱甘肽（GSH）。研究表明,在室温条件下,按菌体与乙醇比例1：2（W／V）加入50％N乙醇,200r&#183;min-1,搅拌2h,能有效地提取GSH,干酵母谷胱甘肽含量2．01％。与热水提取法比较,乙醇提取液量少,过滤,浓缩时间短,所得样品纯度较高,从而大大减少了后续纯化的工作量,并且乙醇可回收重复使用,因此乙醇提取法是一种有效的提取方法。     

丙酮酸钠促进S腺苷蛋氨酸和谷胱甘肽联合高产及其生理机制

为了考察丙酮酸钠对S-腺苷蛋氨酸(SAM)和谷胱甘肽(GSH)联产发酵的影响,本文通过在不同培养时间向摇瓶中添加不同浓度丙酮酸钠,发现0 h添加2 g/L丙酮酸钠最有利于SAM和GSH生物合成。在该条件下进行分批发酵培养,结果表明:SAM和GSH联产量在27 h时达到最大值402.3 mg/L,比不添加丙酮酸钠的对照提高了35.1%。进一步地,对酵母胞内SAM合成酶、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、己糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性以及NADH和ATP含量进行测定,结果发现:丙酮酸钠添加不仅提高了SAM和GSH代谢途径中的关键酶活性,还提高了胞内能量代谢物质的水平,最终提升了SAM和GSH的合成能力,实现了SAM和GSH的联合高产。该研究结果为类似耗能合成化合物的高效生产提供了一种可行的思路。