来源于P.bacterium 1109的甘露醇脱氢酶的重组纯化及酶学性质研究

本文将来自P.bacterium 1109的甘露糖醇脱氢酶(MDH)表达并提取纯化,研究了该重组酶的酶学性质及其在甘露醇生产中的工艺条件。结果显示重组MDH是一个相对分子量为37 kDa的四聚体。氨基酸序列比对发现其与大多数MDHs的同源性小于40%。该酶的最适pH和温度分别为8.5和80℃,且当金属离子Zn2+存在时,重组MDH的活力提高到对照组的260%。此外,重组MDH在75℃孵育6 h后仍可保留超过85%的残留活性,热稳定性较高,比大多数MDHs的活性高。底物特异性研究表明其对D-果糖具有较高的专一性。重组MDH催化D-果糖的米氏常数(K_m)和催化效率(k_cat/K_m)分别为20 mmol/L和7.5 L/(mmol·min)。重组MDH在以400 mmol/L的D-果糖为底物的反应系统中,可将80%以上的D-果糖转化为甘露糖醇。通过对反应条件的优化,为后续工业化生产制备甘露醇奠定了基础。     

分离技术对直链麦芽低聚糖组分含量的影响

为了提高酶解产物中具有特定聚合度的直链麦芽低聚糖组分的含量,分别探究了膜分离、活性炭吸附、葡聚糖凝胶柱层析和不同离子交换树脂等分离技术对直链麦芽低聚糖组分含量的影响。结果显示,膜分离、活性炭吸附、葡聚糖凝胶柱层析、钠型/钙型离子交换树脂层析等技术均不适合直链麦芽低聚糖组分的连续化分离操作;相比而言,钾型离子交换树脂层析分离的效果较好,相比于初始酶解液,分离产物中目标组分G3～G6和G5+G6的比例分别提高了39.53%和8.13%,回收率分别达到78.11%和63.89%。在此基础上,以钾型离子交换树脂为固定相吸附剂,利用模拟移动床可进一步提高终产物中G3～G6和G5+G6的比例和回收率。     

超高压处理对苦杏仁分离蛋白结构和致敏性的影响

苦杏仁中含有多种生物活性组分和营养素，具有较高的营养价值，但苦杏仁具有致敏性，过敏人群食用含有苦杏仁的食品后可能会产生过敏的风险。为探究超高压处理对苦杏仁分离蛋白结构和致敏性的影响，对杏仁分离蛋白进行不同压力处理，并利用圆二色谱、外源荧光光谱和酶联免疫吸附实验对其空间结构和致敏性进行表征。结果表明：苦杏仁分离蛋白100~500 MPa压力处理苦杏仁分离蛋白900 s后，苦杏仁分离蛋白其二级结构未发生显著变化。随着压力强度和保压时间的增加，苦杏仁分离蛋白的三级结构展开，荧光强度增加，疏水性基团暴露，表面疏水性逐渐增大，致敏性显著降低。苦杏仁分离蛋白致敏性的降低，可能是苦杏仁的过敏原构象表位发生了变化。该研究结果对开发安全的苦杏仁食品和饮料具有重要意义。     

高效液相法同时检测谷物中玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A

该研究开发一种快速、灵敏同时检测玉米、小麦和稻米中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的高效液相色谱检测方法。将样品采用乙腈/水(80/20,体积比),200 r/min,30℃振荡提取30 min后,经Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化后,上样检测。该方法ZEN和OTA检测限(limit of detection,LOD)为3.7μg/kg和0.11μg/kg,定量限(quantification Limit,LOQ)为12.25μg/kg和0.38μg/kg,线性范围分别为10μg/kg^2000μg/kg和0.2μg/kg^200μg/kg,加标样品中不同浓度的ZEN和OTA回收率为83.0%~101.3%,日内精密度和日间精密度分别为3.12%~7.03%和3.57%~9.3%。该方法适用于玉米、小麦和稻米中ZEN和OTA的同时检测。     

细点圆趾蟹含肉下脚料酶解物中抗氧化肽的分离与鉴定

目的：从细点圆趾蟹含肉下脚料的胰蛋白酶酶解产物中分离鉴定具有高ABTS+·清除率的抗氧化肽。方法：通过超滤系统、Sephadex G-15和半制备型RP-HPLC，从细点圆趾蟹含肉下脚料酶解产物中分离制备抗氧化肽，用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱（UPLC-ESI-TOF-MS/MS）对肽的结构进行表征，再通过合成肽对其结构与ABTS+·清除率进行验证。结果：获得2个ABTS+·清除能力较强的抗氧化肽，其氨基酸序列分别为Tyr-Glu-Gly（YEG）和Tyr-Glu（YE）。合成肽YEG和YE的分子质量分别为367.35 u和310.30 u，纯度分别为98.52%和98.04%，清除ABTS+·的IC50值分别为0.456 mg/mL和0.184 mg/mL，且YE的IC50值比L-还原型谷胱甘肽高30.30%。结论：细点圆趾蟹含肉下脚料的胰蛋白酶酶解产物含有抗氧化活性的肽类成分，为其抗氧化肽的开发提供理论依据。     

γ-氨基丁酸的生理功能及其在食品中的应用研究进展

综述了γ-氨基丁酸(GABA)的生理功能及其在食品中的应用,并对它今后的研究方向进行了展望。     

混菌发酵酸面团对全麦面包风味与烘焙特性的影响

将食窦魏斯氏菌和马克斯克鲁维酵母进行混菌发酵,测定菌株生长曲线研究两菌种的共生作用,分析发酵24h后纤维素酶活力以及胞外多糖(EPS)产量,比较混菌发酵全麦面包与单菌发酵全麦面包烘焙与风味特性的差异。结果表明,相比于单菌发酵酸面团的菌落总数[乳酸菌9.51lg(CFU/g),酵母菌8.21lg(CFU/g)],混菌发酵酸面团体系(MBF)中的乳酸菌与酵母菌菌落数分别达到9.61,8.09lg (CFU/g),说明两株菌具有良好的共生关系。相比于单一乳酸菌发酵,含有马克斯克鲁维酵母的混菌发酵酸面团中纤维素酶活力增加,胞外β-葡萄糖苷酶酶活为13.59U/g,提高了128.40%。发酵24h后,体系中水溶性的阿拉伯木聚糖含量从0.77g/100g上升至1.89g/100g。此外,相比于其他两组单菌发酵的全麦酸面团,混菌发酵全麦酸面团产EPS能力最高,为7.54g/kg。相比未添加酸面团的全麦面包,含有混菌发酵全麦酸面团的面包(MBB)比容、弹性显著提高(P0.05),面包芯硬度下降,混菌发酵全麦面包比容显著增加。风味特性结果表明,混菌发酵全麦面包的风味强度明显高于单一乳酸菌发酵,赋予全麦面包更浓郁的酒香和果香,感官评定证实其整体可接受度更高。     

白藜芦醇多不饱和脂肪酸酯的合成

为增强白藜芦醇和多不饱和脂肪酸的稳定性和功效,采用化学法合成白藜芦醇和亚麻酸、花生四烯酸以及DHA等3种多不饱和脂肪酸的酯化产物。以草酰氯为酰化试剂,在N,N-二甲基甲酰胺催化下,将脂肪酸制成相应的酰氯,随后与白藜芦醇反应成酯,运用质谱、红外、氢谱、碳谱等测试手段确认4种白藜芦醇酯的结构。结果表明,白藜芦醇与亚麻酸反应主要生成两种单酯化产物:亚麻酸-3-白藜芦醇酯和亚麻酸-4'-白藜芦醇酯;与花生四烯酸和DHA反应主要得到三酯化产物:三花生四烯酸白藜芦醇酯和三DHA白藜芦醇酯。     

碎米荠蛋白制备工艺及抗氧化活性

以恩施堇叶碎米荠为原料,研究碎米荠硒蛋白的提取工艺,探讨碎米荠蛋白的抗氧化活性,结果表明:提取温度为50℃,料液质量体积比为1 g:40 mL,先后用去离子水和0.1 mol/L的NaOH溶液分别提取8 h。在此工艺条件下蛋白质得率最高,为75.4%,其中水提蛋白质质量分数为26.5%,硒质量分数为1 748μg/g;碱提蛋白质质量分数为52.3%,硒质量分数为1 513μg/g。碎米荠碱提蛋白经Sephadex G-100凝胶层析柱分离得到两个组分,分别为峰1和峰2,硒质量分数分别为668μg/g和650μg/g,通过研究碎米荠蛋白对羟自由基(·OH)和1-1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)的清除能力,发现碎米荠蛋白均有一定的清除自由基的能力。     

鮸鱼肌肉和副产物营养组成分析及评价

对鮸鱼肌肉和副产物营养成分进行测定,鮸鱼肌肉和副产物水分含量分别为79.65%与69.15%,蛋白质含量分别为18.65%与19.36%,粗脂肪含量分别为0.24%与3.90%,灰分含量分别为1.15%与3.75%。鮸鱼肌肉和副产物的氨基酸总量(TAA)分别为18.58%与15.47%,必需氨基酸(EAA)质量分数分别为7.65%与5.52%,但只有鮸鱼肌肉的EAA/TAA(41.17%)与EAA/非必需氨基酸(69.99%)符合FAO/WHO优质蛋白质标准。氨基酸评分和化学评分的结果表明鮸鱼肌肉和副产物的第一限制性氨基酸均为蛋氨酸。鮸鱼肌肉必需氨基酸指数(EAAI)为89.07,副产物的EAAI为61.78。鮸鱼肌肉和副产物都含有丰富的丁酸、棕榈油酸、油酸、神经酸、二十二碳六烯酸、Mg、Ca、K和Fe。鮸鱼肌肉和副产物是高蛋白质、低脂肪、富含矿物质的食品源。