植物源性食品DNA提取方法的建立及几种方法比较

以大豆和马铃薯植物源性食品为研究对象,比较了研究所建立的基于磁珠的DNA提取方法、3种商品试剂盒法和传统CTAB法共5种方法提取各种食品基因组DNA的效果;通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分析法、定性PCR和实时荧光定量PCR法对所提取的DNA进行检测,比较所得DNA的浓度和纯度,以及对下游检测的适用性。结果表明,与其他几种提取方法相比,研究所建立的方法提取到的DNA浓度稍低,但纯度较高,而且对于豆油和淀粉样品,可很好地提取到基因组片段,满足后续PCR检测要求。     

猪肉类罐头食品中总DNA提取方法的比较

以7种猪肉类罐头食品为研究对象,比较了EE101-02 DNA提取试剂盒、SDS法、CTAB法和异硫氰酸胍法对猪肉罐头食品DNA的提取效果。以4种方法提取的总DNA为模板,根据猪线粒体基因组(mt DNA)16s r RNA基因和Cyt b基因,利用3对通用引物分别扩增片段大小为244 bp(16s r RNA)、376 bp(Cyt b)、472 bp(Cyt b)的目的片段,以评价不同方法提取的总DNA的效果。结果表明:不同提取方法提取效果差异明显——异硫氰酸胍法提取效果最好,其提取的7种罐头的总DNA均可利用16s r RNA和Cyt b通用引物分别有效扩增出244bp、376 bp目的 DNA片段,CTAB法和SDS法次之,EE101-02 DNA提取试剂盒提取效果最差。另外绝大多数猪肉类罐头样品中未能扩增获得472 bp大小的目的片段,表明猪肉类罐头产品中DNA降解严重。     

生姜黄酮的提取方法比较

采用四种方法分别提取生姜的总黄酮，以紫外光度法测定其含量，确定最佳提取方法为索氏有机溶剂提取法。     

四川泡菜盐卤中微生物总基因组DNA提取方法的比较

了得到较高质量的基因组脱氧核糖核酸（DNA）,本实验采取了5种方法对四川泡菜盐卤总基因组进行提取,对其提取的浓度、纯度进行分析比较,并以此为模版进行聚合酶链反应（PCR）体外扩增。结果表明,F1所得的基因组DNA纯度及浓度最高,F4方法提取的基因组DNA浓度较高,但受到蛋白或酚类物质的污染,F2以及F5两种方法得到的基因组DNA浓度较低,F3所得的基因组DNA浓度低并且含有较多RNA杂质。因此,本研究采用的5种对四川泡菜盐卤进行总基因组提取方法中,方法F1最合理、高效。:     

橙皮苷提取方法的研究

陈皮富含丰富的橙皮苷,是一种抗氧化剂.应用配对比较试验和正交拉丁方试验的方法,以产量和纯度为指标,对3种市售陈皮和碱提酸析和醇提酸析两种提取方法进行比较和筛选.结果表明,从碱石灰和自来水出发的碱提酸析法是合适的橙皮苷工业化提取方法,并找到一种适于橙皮苷工业化的提取方法和来源广、成本低的陈皮原料.     

核桃油不同提取方法的比较研究

研究了核桃油压榨法提取、溶剂浸出法提取及超临界二氧化碳法3种提取方法。从油脂提取率、油脂的品质及理化性质几个因素综合考虑,超临界二氧化碳萃取法是比较理想的提取方法。     

葡萄皮花色素不同提取方法的比较研究

用不同的方法提取黑比诺葡萄果皮中的花色素，发现1％盐酸甲醇法、5％盐酸甲醇法和1％盐酸乙醇法适合于葡萄皮花色素的提取，而60％丙酮水溶液法、醋酸甲醇水(1：10：9)溶液法和pH=1溶液提取法不适合于葡萄皮花色素的提取。同时，用1％盐酸甲醇法、5％盐酸甲醇法和1％盐酸乙醇法提取赤霞珠、梅鹿特、黑比诺果皮花色素发现，对于不同品种，提取方法有所不同。从黑比诺果皮上提取的花色素总量显著少于其他2个供试品种。     

姜辣素不同提取方法的比较研究

对姜粉中姜辣素提取的不同方法进行了比较研究。分别采用了回流法、微波辅助法和超声波辅助法3种不同方法进行了提取。其中超声波辅助法的提取率最高,达到7.28mg/g。     

平菇基因组DNA提取方法的研究

以实验室自行培育的平菇为实验材料,分别使用CTAB法、SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取平菇基因组DNA,并通过紫外分光光度计、限制性酶切及PCR检测来衡量基因组质量。结果表明,使用CTAB法很难得到高质量的基因组DNA,OD260/280仅为1.5左右,而且伴有较多的杂质,电泳条带拖尾严重;使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析,效率较低,同时PCR检测不能得到有效扩增;而使用优化后的SDS-CTAB法及高盐酶解法提取平菇DNA,能够获得质量高、纯度好的基因组DNA,OD260/280基本保持在1.8～2.0之间,电泳条带较为清晰均一,使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析,酶切效果较好,并且DNA质量能够满足PCR检测的模板要求。说明SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取的平菇DNA能够满足分子水平操作的要求,两者相比,前者成本较低,后者产率较高。     

平菇基因组DNA提取方法的研究

以实验室自行培育的平菇为实验材料,分别使用CTAB法、SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取平菇基因组DNA,并通过紫外分光光度计、限制性酶切及PCR检测来衡量基因组质量。结果表明,使用CTAB法很难得到高质量的基因组DNA,OD260/280仅为1.5左右,而且伴有较多的杂质,电泳条带拖尾严重;使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析,效率较低,同时PCR检测不能得到有效扩增;而使用优化后的SDS-CTAB法及高盐酶解法提取平菇DNA,能够获得质量高、纯度好的基因组DNA,OD260/280基本保持在1.8～2.0之间,电泳条带较为清晰均一,使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析,酶切效果较好,并且DNA质量能够满足PCR检测的模板要求。说明SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取的平菇DNA能够满足分子水平操作的要求,两者相比,前者成本较低,后者产率较高。      

茶多酚的提取方法与应用进展

综述了国内外现有茶多酚的提取方法, 对溶剂法、沉淀法和树脂法各自优缺点进行了比较。并介绍了茶多酚在食品、医药和化妆品行业的应用     

转基因稻米DNA 提取方法的比较研究

目的：建立一种以水稻种子为原料,简便、快速、有效的基因组DNA 提取方法,作为转基因稻米的PCR 检测基础。方法：选择传统的CTAB 法、改良的碱处理法、高温水煮法,以转基因糙米、非转基因糙米、转基因精米为材料提取DNA,并对提取物进行检测。结果：改良的碱处理法提取的DNA 模板的完整性、纯度和PCR 反应方面与传统CTAB 法相近,且比CTAB 法的产率高、耗时短、成本低。结论：改良的碱处理法可以代替传统的CTAB 法用于转基因稻米检测中DNA 模板的制备。     

燕窝DNA提取方法比较

为建立不同燕窝样品有效DNA提取方法,分别用试剂盒法、改良CTAB裂解法以及改良试剂盒法提取燕窝总DNA,进行浓度纯度检测,并以此为模版,进行PCR扩增及凝胶电泳。结果表明,改良试剂盒法扩增结果条带明亮,信号较强,较改良CTAB裂解液法与试剂盒法,更适于燕窝样品DNA提取,可用于PCR模版DNA制备,为进一步鉴定燕窝真伪提供参考。     

金枪鱼制品中几种DNA提取方法的效果比较

金枪鱼种类繁多,市场上以次充好、以假乱真的现象时有发生。基于DNA的检测技术已经被广泛用于金枪鱼制品品种掺假检测。而DNA提取对DNA检测技术的运用至关重要。本研究以28份深加工金枪鱼产品为样本,采用3种DNA提取方法(SDS法以及2种市售试剂盒)进行DNA提取,并对DNA的质量、得率、PCR扩增及方法的可操作性等方面进行比较研究。结果表明,3种方法均可用于大多数金枪鱼制品的DNA提取。与其它2种市售试剂盒相比,SDS法提取的DNA得率较低,但纯度较好,A_(260)/A_(280)比值为1.89,盐残留少,对实时荧光定量PCR的抑制少,且成本相对价格经济,满足金枪鱼制品掺假检测的需求。     

不同提取方法对茶多酚理化性质的影响

以绿茶为原料,研究茶多酚的超声波提取、酶法提取、常规浸提、热回流提取以及纤维素酶协同超声波提取法,比较评价所得茶多酚的理化性质。结果表明：90℃热回流提取得到的提取率、产品纯度最高,但是过高的热回流提取温度导致产物抗氧化活性低;超声波在室温条件下提取茶多酚能获得较高的提取率和较好的产品纯度,产物抗氧化活性相对最强;酶法和纤维素酶协同超声波法提取能够获得较高的提取率,但是产品纯度和抗氧化活性低于超声波法所得结果。     

大豆及豆制品中DNA提取方法初探

为了满足转基因食品标签制管理的需要，必须从食品中提取DNA，并运用PCR方法检测外源基因的有无。本文初探了大豆及常见豆制品中DNA的提取方法，为转基因食品的PCR检测打下了基础。     

五花茶植物饮料微波灭菌技术研究

本实验采用微波灭菌技术,以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为指示菌,研究了不同时间和不同功率的微波对五花茶植物饮料的灭菌效果。结果表明,微波灭菌效果是随着时间和功率的增大而增强。以枯草芽孢杆菌为指示菌,800W、330s和110mL的组合为微波灭菌最佳组合。巴氏灭菌对照实验表明,微波存在非热效应。通过GC-MS分析,表明微波对五花茶风味物质仍存在一定影响。     

从颗粒污泥中提取DNA的几种不同方法比较

为了从颗粒污泥中提取出DNA,分别采用CTAB法、TENPC法、Takara试剂盒三种方法提取总DNA,通过提取的核酸总量、纯度、片段分布情况指标来评价不同的提取方法对颗粒污泥总DNA质量的影响,并考察了三种不同的溶液洗涤样品以及三种不同的细胞破壁方法对提取的DNA质量的影响.结果表明:采用脱腐缓冲液、PBSbuffer、EDTA buffer洗涤,液氮研磨破壁后TENPC法提取DNA的效果最好,提取的总量最多,大片段提取效果好,这种方法较适合从颗粒污泥中提取DNA.     

高温大曲中细菌总DNA提取方法比较

研究了5种基于不同裂解机理的提取方法对高温大曲中总基因组提取效果的影响.结果表明,基于SDS-酶法裂解原理的提取方法获得的结果最优,此方法获得的总基因组片段大约为21 kb;纯度为:A260/A80=1.762,A260/A230=1.587;并且能不经纯化直接用于16S rDNA的扩增.为利用16S rDNA分析等后续一系列的分子生物学技术操作打好基础,使得利用先进的分子生物学技术对大曲微生物的研究成为可能.     

动物明胶中3种DNA提取方法的比较研究

基于DNA水平的分子生物学检测方法,因其高特异性、高灵敏度且简便快速等优点,成为明胶动物来源鉴别检测的有效方法。但明胶的特殊加工工艺给DNA的提取带来了一定的困难。研究中选取了牛皮明胶、牛骨明胶和猪皮明胶等不同动物品种和不同动物组织来源的明胶产品,采用了试剂盒法、蛋白沉淀法和裂解抽提法等3种DNA提取方法,从DNA提取质量、提取效率及明胶动物种类来源PCR扩增等方面对3种方法进行了比较。研究结果表明,裂解抽提法所提取的明胶中的DNA质量优于前2种方法,且适合于进一步的PCR扩增检测,是适合于明胶DNA提取的有效方法。