热处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的去除作用

研究热处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的去除作用。测试不同温度、不同加热时间、不同pH值条件下热处理对DON和T-2毒素影响,采用高效液相色谱-质谱测定毒素及其衍生物,采用外标法定量。DON在中酸性条件下,121℃加热60 min,DON浓度保持稳定,碱性条件能促进DON的热降解。T-2毒素在中酸性条件下,105℃加热30 min开始降解,121℃处理pH值为7的1.0μg/mL T-2毒素溶液60min,T-2毒素去除率分别为(51.98±3.37)%,碱性条件能促进T-2毒素的热降解。在一定条件下,热处理对DON、T-2毒素具去除作用。     

微波处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的去除作用

研究微波处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的去除作用。测试不同功率微波、不同处理时间和不同pH条件下微波处理对DON和T-2毒素影响,采用高效液相色谱-质谱测定毒素及其衍生物,采用外标法定量。结果DON在中酸性条件下,700 W微波处理15 min,DON浓度保持稳定,碱性条件能促进DON的热降解。T-2毒素在中性条件下,700 W微波处理13 min开始降解,处理15 min时,T-2毒素去除率为15.70%±2.40%,碱性条件能促进T-2毒素的热降解。在一定条件下,微波处理对DON、T-2毒素具去除作用。     

食品添加剂对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素 体外去除作用研究

目的为了探索食品中单端孢霉烯族毒素残留的控制方法,研究了多种食品添加剂对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的体外去除作用。方法通过食品添加剂处理DON和T-2毒素,研究它们对DON和T-2毒素的体外去除作用。结果去除效果最显著是磷酸三钠、焦磷酸钠、碳酸钠,对DON的去除率分别为76.60%±3.70%、33.30%±3.10%、45.90%±3.30%,对T-2毒素的去除率分别为99.98%±0.01%、95.20%±2.10%、99.98%±0.01%,处理后毒素溶液中不含有已知产物,可能将DON、T-2毒素转化为新的未知产物。结论多种受试食品添加剂对DON、T-2毒素具有不同程度的去除作用。     

短波紫外线处理对3种链格孢毒素的降解作用研究

目的研究短波紫外线(UV-C)辐照对交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether, AME)和交链孢酚(alternariol,AOH)、腾毒素(tentoxin,TEN)3种链格孢毒素的降解效果。方法测定不同辐照时间、不同辐照距离、不同pH值条件下、不同照射强度下UV-C辐照对3种毒素的影响,采用高效液相色谱技术测定毒素含量。结果经过UV-C辐照过后, 3种毒素的浓度均随着辐照时间的延长而降低,随着辐照强度的增强而降低,但是辐照距离与毒素溶液的pH值大小与毒素的降解情况并无显著关联。在pH为5,毒素浓度为1.0μg/mL,UV-C灯功率为36 W、辐照距离为25 cm条件下照射120 min后, AME、AOH、TEN 3种毒素的降解率分别为16.10%、63.92%、89.99%。结论在偏酸性环境及长时间的UV-C辐照暴露下, UV-C对链格孢毒素有较为明显的降解作用。     

电子束辐照降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

采用高能射线电子束辐照处理脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）,并采用高效液相色谱法进行DON含量测定,以研究不同辐照剂量对DON溶液中毒素的降解效果和不同浓度DON溶液对辐照降解率的影响。研究结果表明：高效液相色谱法可以很好地对DON进行检测,高能射线电子束对DON溶液降解效果显著,辐照剂量增大,降解率增大。在相同的辐照剂量下,1～10 kGy时,DON溶液浓度越大,降解率越大;10～20 kGy时,浓度越小,降解率越大。     

挂面加工中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的变化规律

以污染不同程度脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)毒素的3种小麦面粉为原料加工挂面并煮制,在和面时分别添加面粉含量0,0.3%,1.0%的碳酸钠(黄碱挂面)。采用高效液相色谱(HPLC)检测湿挂面、干挂面及熟挂面的DON毒素含量,探讨挂面加工及煮制对DON毒素的去除效果。通过DON毒素标准品与0.3%碳酸钠水溶液加热验证DON毒素的降解反应。结果表明:挂面煮制是去除DON毒素的主要过程。黄碱挂面煮制后对DON毒素的去除效果优于无碱及添加0.3%碳酸钠的挂面,其去除率增加10.0%~26.1%。无碱挂面与含碳酸钠0.3%的挂面煮制后DON毒素的去除效果无显著差别。其中,黄碱挂面干燥后对DON毒素有去除效果,而无碱及添加0.3%碳酸钠的挂面干燥后无去除作用。分析DON毒素标准品在0.3%碳酸钠溶液中加热后的HPLC图谱,DON毒素在碱性条件下降解并有新产物生成。     

碱性化学试剂润麦对赤霉病麦中DON毒素的影响

本文采用四种碱性化学试剂在实验室条件下对赤霉病率1.9%的扬麦158样品润麦处理20 h,然后研究其对扬麦158样品中的DON毒素影响规律,研究结果表明:3%NaHCO3、3%Na2CO3溶液去除小麦样品中的DON毒素的效果最佳,其次为2%NaHCO3+1%CaCO3溶液,0.3%NaOH溶液效果最差;同样理化指标和应用测试结果也证实3%NaHCO3溶液既具有较好的去毒效果,又能较好的保证面粉的加工品质。同时在车间生产条件下,选择3%NaHCO3溶液分别对扬麦158、烟农19、郑麦9023样品润麦,研究该碱性化学试剂对这三种小麦样品中DON毒素影响,测试结果表明:3%NaHCO3溶液不仅能有效地去除扬麦158样品中DON毒素,而且对烟农19和郑麦9023样品也具有良好的去除DON毒素的效果。     

辐射降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的研究

以60Co-γ射线辐照处理脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)溶液,并采用高效液相色谱法进行DON含量测定,研究γ射线辐照是否能降解溶液中的DON毒素。研究结果表明:高效液相色谱法可以很好的对DON进行定量,最低检测线为0.01μg/mL。60Co-γ射线辐照对DON降解效果显著,剂量为10 kGy时即可使0.5μg/mL DON溶液的降解率达到90%以上。初始浓度对DON降解率有影响,浓度越高,达到一定降解率所需的辐照剂量越大。     

挂面煮制方法对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的去除效果研究

本研究通过煮制水中加入碳酸钠分析被污染挂面中DON毒素的去除作用。首先确定了加碱量对熟挂面品质的影响并分析了微波炉、电磁炉煮制挂面对DON去除效果的影响,研究结果表明:煮制水中添加0.25%碳酸钠对熟挂面品质无显著不良影响,并增加了DON毒素的去除效果;微波煮制挂面对DON毒素的去除率优于电磁炉煮制,但效果不显著。其次,以不同污染浓度的挂面进行0.25%碳酸钠煮制,获得DON毒素去除效果的预测曲线:y=0.4546x-0.0377,R2=0.9605,通过曲线可知,加碱煮制挂面可将DON毒素含量由2.30 mg/kg降至国家标准(1 mg/kg),显著优于无碱条件下煮制对DON毒素的去除效果。在此基础上,借助四极杆-飞行时间串联质谱仪(Q-TOF)分析0.20%碳酸钠条件下DON毒素标准品的降解产物,发现可能存在的降解产物为C15H20O6(iso DON,lactone DON)、C15H20O5(nor DON D)、C14H18O5(nor DON A,B,C),其产物毒性显著降低。利用0.25%碳酸钠煮制挂面具有较好的DON毒素降毒作用。     

高效液相色谱法同时检测粮食中常见8 种真菌毒素的含量

建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时测定粮食中黄曲霉毒素B1（aflatoxins,AFB1）、黄曲霉毒素B2（AFB2）、黄曲霉毒素G1（AFG1）、黄曲霉毒素G2（AFG2）、赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）、玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）、呕吐毒素（deoxynivalenol,DON）和T-2毒素的检测方法。样品经乙腈-水提取后,用免疫亲和柱净化,Agilent Elipse Plus C18（100 mm×4 mm,3.5 μm）色谱柱分离,以甲醇-乙腈-水-乙酸为流动相,流速1 mL/min,柱温35 ℃,进样量20 μL,检测系统为可变波长检测器串联光化学衍生器串联荧光检测器。根据信噪比为3的峰响应值,确定各真菌毒素的检出限为：AFB1 0.446 ng/mL、AFB2 0.152 ng/mL、AFG1 0.523 ng/mL、AFG2 0.334 ng/mL、ZEN 7 ng/mL、OTA 0.7 ng/mL、DON 200 ng/mL、T-2毒素100 ng/mL。样品中各真菌毒素的平均加标回收率,玉米为80.0%～104.5%,小麦为83.2%～102.8%,方法精密度为2.6%～10.2%。从样品前处理到分析整个过程耗时约2 h。本方法简便、快速、灵敏度高,适用于粮食中多种真菌毒素的快速测定。     

低质量浓度T-2处理对马铃薯块茎苯丙烷代谢活性的诱导

由镰刀菌引起的干腐病是导致甘肃省马铃薯块茎贮藏期间的主要病害。以‘陇薯3号’马铃薯为试材,用1 μg/mL T-2处理马铃薯块茎切片,观察T-2处理对马铃薯块茎切片损伤接种硫色镰刀菌（Fusarium sulphureum）后,其对病斑直径的抑制效果,以及块茎切片苯丙烷代谢关键酶活性及产物积累的影响。结果表明,T-2处理有效降低了块茎切片损伤接种Fusarium sulphureum的病斑直径,提高了切片苯丙氨酸解氨酶和4-香豆酰-辅酶A连接酶的活性,促进了木质素、总酚、类黄酮及花青素的积累。由此表明,低质量浓度T-2处理可通过诱导马铃薯的苯丙烷代谢增强块茎对干腐病的抗性。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化产物的培养提取及制备

以禾谷镰刀菌Fusarium graminearum大型分生孢子定量接种大米培养物,制备毒素粗提液,采用硅胶柱一步洗脱分离、分段收集可同时获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）和乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇（acetyldeoxynivalenol,AcDON）,采用一步结晶法即可分别制备获得毒素纯品,并经红外光谱法、液相色谱-质谱联用技术及核磁共振氢谱等分析确证,液相色谱分析表明两种毒素纯度均大于98%。该培养提取及分离制备方法改变了常规多步骤繁琐过程,提供了一种切实有效的、大量制备纯化DON及乙酰化DON毒素的简便方法。     

In vitro removal of deoxynivalenol and T-2 toxin by lactic acid bacteria

Five strains of lactic acid bacteria were tested for their ability to remove deoxynivalenol (DON) and T-2 toxin from MRS broth. The ability of Lactobacillus plantarum strain 102 (LP102) was the strongest among 5 strains after incubation at 37°C for 72 h. The mode of removal was physical binding, rather than biotransformation. The abilities were not significantly different between when removing single toxin and when removing mixed toxins by viable cells of LP102. DON and T-2 toxin released from LP102 viable cell-toxin complexes were 28.22±1.55 and 35.42±2.02% of total bound toxins respectively after 3 times of wash with posphate buffered saline, respectively, those were 4.59±0.86 and 5.59±1.47% after incubation with simulated gastric fluid (SGF) at 37oC for 4 h, and 6.86±0.81 and 9.04±1.13% after incubation with simulated intestinal fluid (SIF) at 37oC for 4 h, respectively.     

重组大肠杆菌产脂肪氧合酶发酵条件优化

为进一步提高重组大肠杆菌（pET-23a-pse-LOX）产脂肪氧合酶（lipoxygenase,LOX）的酶活力,利用响应面法对其发酵条件进行优化。通过单因素试验确定诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间、诱导温度、接种量、培养基初始pH值和装液量对其发酵产酶的影响。在此基础上,采用Plackett-Burman试验设计从7 个因素中筛选出对LOX产量具有显著效应的因素为诱导时机、诱导时间和培养基初始pH值,并利用Box-Behnken试验设计和响应曲面法分析以确定其产酶的最优发酵条件,即诱导时机为菌液OD600 nm达到1.6、诱导时间34 h、培养基初始pH 7.0。在此条件下,LOX酶活力为（21 261.60±264.03） U/mL,比优化前的（13 553.96±46.64） U/mL提高了56.87%。     

抗呋喃唑酮单克隆抗体的制备及其应用

为实现呋喃唑酮（furazolidone,FZD）的快速定量检测,本研究制备了抗FZD全抗原的单克隆抗体,建立了抗FZD的单克隆抗体酶联免疫检测方法。结果表明,FZD单克隆抗体在质量浓度为10～500 ng/mL范围具有较好的线性,IC50值为0.06 μg/mL,最低检测限为6.92 ng/mL,对于其他硝基呋喃类抗生素及其代谢物均不存在交叉反应。该方法重现性较好,平均误差为6.54%,回收率为76.84%～88.31%。     

辐照对核桃果实冷藏生理与品质的影响

以‘辽核2号’核桃果实为材料,经0（对照）、0.1、0.3、0.5、1.0 kGy不同剂量60Coγ射线辐照处理后,采用青皮果实60 d＋脱皮鲜坚果30 d两步法贮藏于（0±1）℃的冷库中,监测其在贮藏期间色差、褐变指数、裂果率、乙烯释放量、气体成分、蛋白质含量、脂肪含量、脂肪酸含量、过氧化值与羰基价的变化。结果表明,辐照处理显著降低了核桃果实贮藏期间的裂果率和乙烯峰值,保持了较低的过氧化值和羰基价,延缓了脂肪氧化速度;0.3 kGy和0.5 kGy处理的感官品质较好,以0.3 kGy延缓核桃果实衰老的作用突出。该剂量条件下核桃果实裂果率和乙烯峰值最低,必需脂肪酸总量维持在较高水平,贮藏末期脂肪含量最高,过氧化值最低,确定0.3 kGy为核桃果实冷藏适宜辐照剂量。     

Removal of common Fusarium toxins in vitro by strains of Lactobacillus and Propionibacterium

This study was conducted to examine the ability of selected strains of Lactobacillus and Propionibacterium to remove common Fusarium toxins, trichothecenes, from liquid media. The trichothecenes studied were deoxynivalenol (DON), 3-acetyldeoxynivalenol (3-AcDON), nivalenol (NIV), fusarenon (FX), diacetoxyscirpenol (DAS), T-2 toxin (T-2) and HT-2 toxin (HT-2). The Lactobacillus rhamnosus strain GG (LGG), Lactobacillus rhamnosus strain LC-705 (LC-705) and Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii JS (PJS) were incubated in PBS buffer containing 20 µg toxin ml -1 for 1h at 37°C, and after centrifugation the concentration of the toxins was measured in the supernatant fraction. Both viable and heat-killed forms of LGG and PJS were more efficient than LC-705 in removing the toxins from the liquid media. LGG and PJS removed four of the seven tested toxins (the removal varying from 18 to 93%) and LC-705 two toxins (10-64%). Of the toxins, 3-AcDON was not removed by any of the bacteria; HT-2 was removed by the non-viable LGG and also slightly by non-viable LC-705; DAS was removed by all three bacteria tested. Binding is postulated as the possible mechanism of the removal, since no difference was observed between the ability of viable and heat-killed bacteria in removing the trichothecenes, and no degradation products of the toxins were detected by gas chromatography (GC)-mass spectrometry (MS) analysis. It is concluded that significant differences exist in the ability of the bacteria to bind trichothecenes in vitro.     

纳豆激酶高产菌株的选育及固态发酵技术

以枯草芽孢杆菌为出发菌株,选用超声波和紫外线进行诱变处理,根据致死率、突变率与诱变剂量的关系选择合适的诱变剂量,以筛选高产纳豆激酶的优势菌株。实验表明：最佳诱变条件为：超声波45 kHz、280 W,时间60 min,紫外线照射距离30 cm,时间120 s。经多次初筛、复筛,选育出一株命名为BSCZ-4的优势菌株,其纳豆激酶酶活力为原始菌株的1.96 倍。对该菌种进行连续20 代培养,测得其溶解圈直径稳定在18～19 mm之间,表明该突变株遗传特性稳定。并采用Box-Behnken响应曲面法优化其固态发酵工艺条件,结果为：魔芋精粉添加量5%、接种量8%,34 ℃发酵24 h,纳豆激酶活力可达（4 087.83±93.75） U/g。