梨园块菌多糖提取工艺优化及其单糖组成分析

目的:本文以梨园块菌Tuber liyuanum为实验材料,优化和确定其多糖的提取工艺,并对单糖组分进行分析。方法:在单因素实验的基础上,采用正交试验设计、优化和确定水提醇沉法提取多糖的最适工艺条件;通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-menthy-5pyrazolone,PMP）柱前衍生化HPLC法分析梨园块菌单糖组分。结果:梨园块菌多糖的最佳提取工艺条件为提取温度90 ℃、提取时间60 min、料液比1:25 g/mL,在此条件下多糖得率为10.57% ± 0.31%。梨园块菌多糖主要由D-葡萄糖和少量的D-甘露糖、D-半乳糖组成,其物质的量之比为1:0.023:0.006。结论:采用水提醇沉法,在最佳提取工艺条件下能够获得较高的梨园块菌多糖得率,方法简单且稳定可行;使用柱前衍生化HPLC法测定梨园块菌多糖中的单糖组成,具有操作简便、可重复性和准确度高的优点,可为进一步研究梨园块菌多糖提供理论依据。     

兴化香葱加工废弃物葱白多糖的单糖组成分析

文章采用柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)法测定兴化香葱加工废弃物葱白多糖的单糖组成及摩尔比。采用Eclipse XDB-C18柱,以0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7)-乙腈(体积比为83∶17)为流动相,DAD二极管阵列检测器检测,检测波长为254 nm。柱前衍生剂为1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)。结果表明葱白多糖主要由甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)组成,它们的摩尔比约为0.10∶3.15∶2.26∶0.51。柱前衍生化HPLC分析葱白多糖中的单糖组成方法简便、快速、准确。     

GC和HPLC分析金银花多糖的单糖组成方法比较

目的:GC法和HPLC法分析金银花多糖的单糖组成,并对两种方法进行比较。方法:金银花多糖经2.0 mol·L-1的三氟乙酸水解后,用糖腈乙酸酯衍生化-GC法和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-HPLC法分别测定其单糖组成及其比例。结果:GC法检测出金银花多糖由鼠李糖(L-Rha)、阿拉伯糖(D-Ara)、甘露糖(D-Man)、木糖(D-Xyl)、葡萄糖(D-Glc)、半乳糖(D-Gal)组成;HPLC法检测到金银花多糖中含有甘露糖(D-Man)、鼠李糖(L-Rha)、葡萄糖醛酸(D-GlcA)、葡萄糖(D-Glc)、半乳糖(D-Gal)、阿拉伯糖(D-Ara)和木糖(D-Xyl),其中半乳糖(D-Gal)与阿拉伯糖(D-Ara)的色谱峰重叠。结论:两种方法均能检测出中性糖,HPLC法不仅能测中性糖,还能检测出葡萄糖醛酸,对金银花多糖的单糖组成分析GC与HPLC联合使用较为合适。     

莲藕多糖的单糖组成分析方法优化

采用柱前衍生化高效液相色谱法(PCD-HPLC)分析莲藕多糖的单糖种类及组成比例,并优化样品前处理方法以提高检测的准确性。考察衍生化温度、衍生化时间和多糖水解时间对HPLC色谱图中各单糖总峰面积的影响,优化莲藕多糖单糖组成分析的前处理条件为:衍生化温度70℃、衍生时间100 min、多糖水解时间为6 h。该优化方法具有良好的精密度、稳定性和重现性,用于分析武植2号莲藕不同部位多糖的单糖组成发现:藕皮、藕节和藕食用部位多糖的单糖组成基本相似,均主要由葡萄糖和半乳糖构成,且占单糖总质量的90%以上,但各单糖摩尔比存在较大差异。PCD-HPLC法可用于莲藕多糖的组成分析和质量控制。     

九蒸九制对黄精多糖单糖组成及其抗氧化性的影响

研究九蒸九制后的黄精多糖含量变化,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）为柱前衍生化试剂,结合高效液相色谱法（HPLC）测定九蒸九制后黄精多糖的单糖组成,并测定其多糖的体外抗氧化活性。结果表明,未蒸制的黄精多糖含量为14.36%,但随着蒸制次数的增加,黄精多糖的含量逐渐减少并趋于稳定,保持在4%左右;HPLC检测结果显示,黄精多糖主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,未蒸制时4种单糖的百分含量分别为52.47%、36.84%、7.32%、3.37%;随着蒸制次数的增加,甘露糖的含量相对减少,葡萄糖的含量先减少后增加,半乳糖和阿拉伯糖的含量相对增加;黄精多糖具有一定的抗氧化活性,未蒸制黄精的多糖抗氧化活性显著低于蒸制后黄精的多糖抗氧化活性（P<0.05）。本研究表明,蒸制过程会造成黄精多糖成分的流失,在高湿度和高温环境下,黄精多糖中会发生糖异构化,使其单糖组成发生改变。     

多糖HPLC和IR指纹图谱比较研究

该文通过比较不同检测方法(HPLC和IR)和统计分析手段,对指纹图谱控制多糖质量的方法进行了研究。通过对多糖进行酸水解和PMP衍生化,采用柱前衍生高效液相色谱法分析,建立一种多糖的HPLC指纹图谱,通过相似度计算比较样品间差异性。此外,利用红外检测方法,对共有特征峰进行主成分分析和聚类分析。结果表明:HPLC指纹图谱的相似度为0.964⁰.999,即多糖样品无差异;红外检测方法更为快捷、简便,借助主成分分析和聚类分析等统计学手段,能快速检测出异常多糖样品。该文可为多糖质量控制提供一种快速分析方法,从而确保以多糖为主产品的质量稳定性。     

高效液相色谱法测定油茶饼粕多糖组成

提出并对比了3种分析油茶饼粕多糖组成的高效液相色谱方法——氨基柱-折光示差检测器法、氨基柱-串级质谱法、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-C18柱-紫外检测器法（柱前衍生法）。综合考虑分离效果、灵敏度、仪器成本等因素,最终选定柱前衍生法。柱前衍生法可同时测定油茶饼粕多糖中的鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸,线性关系良好（线性系数>0.99）,检出限为0.02~0.29 mg/L,定量限为0.06~0.96 mg/L;单糖及糖醛酸的加标回收率分别为77.2%~111.9%、60.1%~87.0%;峰面积日内精密度为0.08%~3.77%,日间精密度为0.39%~17.15%。利用柱前衍生法检测油茶饼粕多糖样品,结果显示所检的4个样品中均含有5种或6种单糖及2种糖醛酸,且含量最高的组分均为葡萄糖。     

超声波法提取水溶性茯苓多糖工艺优化及其抗氧化活性探究

以九资河茯苓为原料,采用超声波法提取茯苓多糖。以茯苓多糖得率为响应值,采用单因素试验及响应面试验对超声波提取茯苓多糖的工艺条件进行优化,并对其抗氧化活性进行研究。结果表明,超声波提取茯苓多糖的最佳工艺条件为超声波功率200 W,料液比1∶34（g∶mL）,超声时间11 min。在此最优提取条件下,茯苓多糖得率为2.08%,较优化前（1.68%）提高16.85%。当茯苓多糖质量浓度为3.0 mg/mL时,总抗氧化能力最高,为0.22;当茯苓多糖质量浓度为2.5 mg/mL时,茯苓多糖对1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）自由基的清除率最大,为13%,但均低于阳性对照维生素C。     

刺参多糖中糖醛酸、氨基糖和中性单糖的同步测定方法研究

建立柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱法(HPLC)测定刺参多糖中糖醛酸、氨基糖和中性单糖的方法。刺参多糖用2mol/L三氟乙酸水解、PMP衍生化后,用反相HPLC检测,实现了糖醛酸,氨基糖和中性单糖的良好分离和测定。测定结果表明,刺参多糖含有甘露糖、半乳糖、岩藻糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖和葡萄糖醛酸6种单糖。该方法简便快捷,灵敏度高,重现性良好。     

地黄花多糖含量测定及其柱前衍生化HPLC指纹图谱分析

比较地黄花不同开花时期及盛花后期不同花部位的多糖含量差异;建立地黄花多糖部位柱前衍生化高效液相色谱（high-performance liquid chromatography,HPLC）指纹图谱,明确地黄花多糖的单糖组成,为地黄花的进一步开发提供理论依据。采用苯酚-硫酸比色法测定地黄花多糖的含量;将地黄花多糖水提液盐酸水解后采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP）衍生化,建立指纹图谱,分析地黄花不同开花时期及花盛期不同花部位的多糖中单糖组成。结果表明,地黄花花蕾期多糖含量为3.98%～4.93%,盛花期多糖含量为3.65%～3.78%,花蕾期到盛花期多糖含量出现先增加后降低趋势,在花蕾后期出现最大值,且花蕾期平均多糖含量高于盛花期;盛花期花裂片、花筒上部及花筒下部中多糖含量分别为3.84%、4.05%、2.93%,花筒上部平均多糖含量最高。地黄花多糖柱前衍生化高效液相指纹图谱共标定10个共有峰,指认了4个峰,分别为鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖和阿拉伯糖,不同开花时期和盛花期不同花部位多糖单糖组成相似,9批地黄花样品相似度均在0.95以上。地黄花花蕾期平均多糖含量高于盛花期,盛花期花筒上部平均多糖含量最高,花裂片其次,花筒下部多糖含量最少。地黄花作为地黄的非药用部位具有一定的药用和食用开发价值。     

纳他霉素效价测定方法的改良及含量的快速测定

为了确定固体发酵过程中纳他霉素含量快速测定和生物效价准确测定方法,本文采用高效液相色谱法、紫外分光光度法和管碟法测定了同一批褐黄孢链霉菌固体发酵产物纳他霉素的含量。其中高效液相色谱法和紫外分光光度法测定纳他霉素固体发酵产物含量分别为2351.52 mg/L和1979.87 mg/L,前者结果准确而稳定。后者测定准确率为96.97%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。适用于固体发酵过程中的纳他霉素含量的快速测定。管碟法测定纳他霉素平均效价为1979.87 mg/L。改良管碟法采用正己烷封盖纳他霉素溶剂甲醇后,测定的平均效价达到1990.29 mg/L,准确率由84.20%提高到84.64%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。采用正己烷封盖能有效控制纳他霉素溶剂甲醇的挥发性并提高管碟法的准确性和测定的浓度范围,而正己烷本身不具有抑菌效果。     

改良柱前荧光胺衍生化-高效液相色谱法测定猪肉中11种磺胺类药物残留

建立改良的磺胺类药物与荧光胺反应的衍生化方法,并应用于猪肉中11种磺胺类药物的高效液相色谱-荧光法测定.选用0.1 mol/L KH2PO4溶液(pH 3.0)0.8 mL、0.3 mg/mL荧光胺溶液0.2 mL与磺胺类药物发生衍生化反应,4℃避光反应40 min,得到磺胺-荧光胺衍生产物.该衍生化方法稳定、可靠,衍...     

高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸

通过对衍生试剂浓度、衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择,建立了一种高效液相色谱（HPLC）法灵敏检测发酵液中γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂,衍生时间5 min,衍生温度为室温,色谱条件为：检测波长228 nm,流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液（21∶79,V/V）,柱温30 ℃,流速0.8 mL/min。结果表明,在γ-氨基丁酸含量0.05 μg/mL～0.50 mg/mL范围内线性关系良好（相关系数R2=0.999 4）,平均加标回收率为91.87%～105.58%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为0.55%～3.74%（n=5）,检出限为0.02 μg/mL。采用该方法检测发酵液中γ-氨基丁酸含量,其含量范围在0.157～0.369 mg/mL之间。该方法操作简单、灵敏、准确可靠,适用于发酵液中γ-氨基丁酸含量的检测。     

玉米芯多糖的微生物发酵工艺及其单糖组成和体外益生活性研究

以玉米芯多糖含量为指标,对玉米芯发酵工艺进行优化,测定玉米芯多糖的单糖组成,并对其体外益生活性进行评价。确定最终发酵条件为:接种8%枯草芽孢杆菌,添加10%麸皮,纤维素酶添加量为500 U/g,料水比1:1.25(g/mL),发酵时间96 h,发酵温度35℃,该发酵条件下使用苯酚硫酸法测得玉米芯多糖含量为162.61 mg/g,较未发酵玉米芯多糖含量提高了20.16%。HPLC法分析单糖组成结果显示,发酵后玉米芯粗多糖中木糖、阿拉伯糖、半乳糖和甘露糖含量分别增加了152.17%、118.12%、64.73%、36.30%,葡萄糖含量降低57.29%;体外益生活性研究显示,在等量碳源的基础上,添加玉米芯粗多糖后对植物乳杆菌和嗜热链球菌的促生长作用显著优于仅葡萄糖作为碳源组(P<0.05),且添加发酵玉米芯粗多糖组对两种菌的益生作用比添加未发酵玉米芯粗多糖组显著升高(P<0.05)。综上所述,通过微生物发酵技术可增加玉米芯中多糖的含量并改变其单糖组成,同时提高其体外益生活性。     

高效液相色谱法检测粮油中黄曲霉毒素方法验证

该文报道验证同时检测粮食、植物油中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱方法.样品经甲醇-水(体积比为70∶30)提取,通过免疫亲和柱富集和净化,采用Cloversil C18色谱柱(4.6mm×150 mm,粒度5μm),以甲醇:水(50∶50)溶液为流动相,柱后光化学衍生,利...     

纳豆芽孢杆菌TK-2产γ-聚谷氨酸发酵工艺优化

以γ-聚谷氨酸（γ-PGA）的产量为评价指标,在单因素试验基础上,利用正交试验法对纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）TK-2产γ-PGA的发酵工艺进行优化,并对其发酵产物进行高效液相色谱（HPLC）分析。结果表明,最佳培养基配方是葡萄糖2.5%,蛋白胨2.5%,味精2%,pH值7.5;最佳发酵条件是装液量70 mL/250 mL,接种量2%,发酵温度37 ℃,转速140 r/min,在此优化条件下进行验证试验,γ-PGA产量为11.48 g/L,提高了57.2%。HPLC分析表明,γ-PGA是谷氨酸的一种聚合物,其水解产物只有一种氨基酸。     

一种简便、快速测定发酵液中V_(B_(12))含量的方法

文中探索了一种不经氰化物转化而直接使用HPLC测定发酵液中维生素B12 (包括羟基钴胺素、脱氧腺苷钴胺素和甲基钴胺素 )的检测方法。将发酵液离心取菌体 ,样品预处理后进样分析 ,采用乙腈和醋酸钠缓冲液为流动相。此方法能够精确检测上述 3种钴胺素 ,并且重复性好、分析速度快 ,可应用于工业发酵生产维生素B12 的过程监控和检测。     

鲢鱼蛋白水解液的去腥及其产物研究

以鲢鱼为原材料,通过酶降解得到鱼肉蛋白水解液。采用酵母粉发酵去腥的方法,通过正交试验确定了该法去腥的最优工艺参数,并用高效液相色谱法测定了发酵液中15氨基酸的含量。结果表明,以硫代巴比妥酸值为指标,酵母发酵去腥的最优工艺参数为:酵母添加量3%,发酵时间1 h,加糖量4%;HPLC分析得发酵液的必需氨基酸含量是水解液的1.34倍,15种氨基酸含量是其1.46倍。因此,酵母发酵方法不仅能有效去除鱼肉水解液的腥味,同时还能提高产品中必需氨基酸的含量,具有较好的应用前景。     

发酵液中硫酸酯化茯苓多糖(SP)的制备及其结构改性的研究

茯苓菌株HD06-10进行液态发酵培养,获得的茯苓多糖进行硫酸酯化结构改性处理,制备硫酸酯化茯苓多糖(SP),并采用正交设计法优化其制备条件。采用柱层析纯化得到SP精制品,并通过紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳和红外光谱对SP进行纯度和理化、结构性质鉴定,结果表明:SP为多糖纯品,符合多糖及其硫酸根反应特征,分子量大约为5000～6000u;SP特性黏数降低,水溶性增加,IR分析有硫酸根的特征吸收峰,说明茯苓多糖的硫酸酯化成功。     

Proposing sequences for peptides derived from whey fermentation with potential bioactive sites

In fed-batch fermentation by Kluyveromyces marxianus var. marxianus, whey-soluble proteins were converted into oligopeptides. To assess whether bioactive peptides could be produced during whey fermentation, K. marxianus was cultured in batch in deproteinized media containing 5 or 15% (wt/vol) dehydrated whey for 20 h and then was in fed-batch mode for 50 h. After harvesting the biomass (25,000 x g, 15 min), at 6-h intervals, the wort was analyzed to determine protein consumption and oligopeptide production by HPLC. The proteins in the wort showed an oscillatory degradation with a constant increase in the production of oligopeptides. Four major peaks were collected and were analyzed by API mass spectroscopy. Sequences of fermented peptides were compared with sequences of known bioactive peptides. On the basis of their molecular weights, two amino acid sequences were proposed. The presence of sites containing the peptide sequence of beta-lactorphin (YLLF) suggests that these oligopeptides may have antihypertensive properties.