玛咖生物碱通过调节小鼠免疫力抑制结肠癌细胞的成瘤能力

研究观察玛咖生物碱对小鼠结肠癌CT-26细胞成瘤能力的影响并初步探讨其可能机制。构建BALB/c小鼠CT-26细胞移植瘤动物模型,随机分为玛咖生物碱高剂量组、玛咖生物碱低剂量组及生理盐水模型对照组。连续灌胃用药27 d,绘制小鼠体重增长曲线及移植瘤体积增长曲线。第28 d处死小鼠,计算抑瘤率、相对肿瘤增殖率、脾脏指数;ELISA法检测血清IL-2、IFN-γ水平;HE切片观察移植瘤、脾脏、肝脏及肾脏组织学形态变化。结果表明,与对照组比较,实验组移植瘤重量明显降低（p<0.05）,抑瘤率分别为43.37%和45.26%,组织学观察实验组移植瘤坏死面积较对照组明显增大。实验组小鼠脾脏指数明显高于对照组（p<0.05）,且实验组脾脏白髓增生较显著。同时,血清IL-2及IFN-γ水平均明显高于对照组（p<0.05）。可见,玛咖生物碱可以通过提高小鼠免疫力抑制CT-26细胞的成瘤。     

麒麟菜多糖体内抗肿瘤机理研究

本文对麒麟菜多糖抑制小鼠体内H22肝癌细胞增殖的作用机理进行了研究。构建动物肿瘤模型,观察实验期内各组小鼠肿瘤体积及脏器指数的变化,并通过Elisa实验确定各组小鼠血清中肿瘤特异性抗体含量,流式细胞术检测小鼠胸腺、脾脏、外周血及实体肿瘤内T细胞亚群比例,HE染色和PI单染分析小鼠实体肿瘤内细胞状态。结果表明,灌喂600 mg/(kg?d)麒麟菜多糖可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,有效保护其胸腺和脾脏,并可显著增强胸腺发育分化CD4~+T细胞的能力(p0.05),提高小鼠血液中肿瘤特异性抗体的含量(p0.05)和T细胞亚群比例(p0.05);模型组和多糖组小鼠实体肿瘤浸润淋巴细胞中均主要是CD8~+T细胞,但多糖组小鼠实体瘤内细胞凋亡率显著升高(p0.05)。因此初步断定麒麟菜多糖可显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫水平,使CD8~+T细胞在CD4~+T细胞和肿瘤特异性抗体的辅助下有效抑制H22细胞体内增殖。     

大豆多糖对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用的免疫机制研究

从免疫学角度出发探讨大豆多糖的抗肿瘤作用。采用动物移植性肿瘤实验观察大豆多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长和免疫器官胸腺、脾脏的影响;MTT法测定T淋巴细胞增殖功能;流式细胞仪检测大豆多糖对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响;ELISA法检测荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-2含量。结果表明大豆多糖对S180肉瘤生长有抑制作用,且以高剂量最佳;各剂量组对脾脏指数均有显著性提高,但中、高剂量给药组对胸腺有抑制作用;能提高小鼠脾淋巴细胞的增殖活性,与阴性对照组相比,中、高剂量组差异显著。大豆多糖明显增强ConA刺激的淋巴细胞增殖,与阴性对照组比较,中、高剂量组差异显著;能够不同程度地提高S180荷瘤小鼠脾细胞CD4+细胞数,增加CD4+/CD8+细胞比值;能提高S180荷瘤小鼠外周血血清中IL-2的含量。大豆多糖通过提高T淋巴细胞的增殖活性,并促进IL-2等细胞因子的分泌,由此发挥抗肿瘤作用。     

乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用

探讨乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用。Balb/c小鼠随机分为6组,正常对照组,模型对照组,乳铁蛋白组(5、25、50、500 mg/kg)。连续灌胃给药27 d,第27天给药后除正常对照组外,其他小鼠均腹腔注射环磷酰胺80 mg/kg,继续灌胃至第30天,末次给药24 h后,放射免疫分析方法测定各组小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞。酶联免疫分析方法检测血清细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4,IL-10的变化。与正常对照组相比,模型小鼠外周血CD4+T、CD8+T百分率明显增加;血清IFN-γ明显降低(p<0.01),IL-4明显增高(p<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显下降(p<0.01);乳铁蛋白25、50、500 mg小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞百分率明显降低(P<0.01或P<0.05)。乳铁蛋白500 mg组小鼠血清IFN-γ较模型组明显增高(p<0.05),乳铁蛋白50、500 mg小鼠血清IFN-γ/IL-4比值趋于正常。乳铁蛋白能不同程度修复环磷酰胺所致小鼠免疫失衡状态,具有免疫保护作用。     

荔枝果肉乙酸乙酯粗提物对Th1/Th2细胞平衡的影响

本研究分析荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物对小鼠细胞因子分泌的作用,进而探讨其对Th1/Th2细胞平衡的影响。将30只BALB/C小鼠随机分成对照组(生理盐水)、乙酸乙酯部粗提物低剂量和高剂量组(4.6、9.2 mg/kg.bw.d),连续灌胃7 d,观察各组小鼠的胸腺和脾脏指数变化以及脾细胞增殖情况,用ELISA检测小鼠脾细胞以及血清分泌IFN-γ和IL-4的含量以及IFN-γ/IL-4比值。实验结果表明:乙酸乙酯部粗提物高剂量组小鼠的胸腺指数、脾脏指数显著提高。乙酸乙酯部粗提物低、高剂量都能显著提高小鼠脾细胞和血清IFN-γ分泌水平,同时,高剂量组小鼠脾细胞和血清IL-4的分泌水平也显著提高。低、高剂量的乙酸乙酯部粗提物都能显著提高小鼠脾细胞和血清IFN-γ/IL-4的比值。荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物诱导Thl/Th2平衡向Th1方向漂移,可能进而诱导机体的炎症性反应。     

山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180体内生长抑制作用

目的：探讨山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180的抑制作用。方法：噻唑蓝法及吞噬中 性红法测定小鼠脾淋巴细胞增殖能力及脾巨噬细胞活性;体内肿瘤抑制实验检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤 生长、脾脏指数和胸腺指数的影响;流式细胞术及酶联免疫吸附测定法检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞 亚群及血清细胞因子水平的影响。结果：山慈菇多糖可以增强淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞活性;同时,山慈菇多 糖也可以抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长,增加小鼠脾脏指数和胸腺指数;此外,山慈菇多糖还可以增加荷瘤小鼠CD4 ＋、CD8＋ T细胞浓度,提高CD4＋/CD8＋比值及白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ水平。结论：山慈菇 多糖具有明显的肿瘤抑制作用,其对肿瘤细胞生长的抑制作用与提高免疫能力有关。     

miRNA在牛乳过敏小鼠模型中的表达及嗜酸乳杆菌的干预作用

观察β-乳球蛋白(β-Lg)过敏小鼠模型中miRNA的异常表达和Th17相关细胞因子分泌的相关性,同时研究嗜酸乳杆菌的干预作用,探究益生菌缓解牛乳过敏的分子机制。BALB/c小鼠随机被分为正常对照组,β-Lg过敏模型组和低、中、高剂量嗜酸乳杆菌干预组,以ELISA法检测过敏小鼠血清中Th17相关细胞因子的分泌,RT-PCR法检测过敏小鼠脾脏组织CD4+T细胞中与炎症相关的miRNA基因表达,并对两者进行相关性分析。在此基础上研究嗜酸乳杆菌干预过敏模型对miRNA表达的影响。与正常对照组比较,过敏组小鼠血清IgE,ILI7,IL-6,TNF-α及IL-21水平显著增高(P0.05);其脾脏组织CD4+T细胞中miR-155,miR-21,miR-9和miR-146a mRNA表达量明显上调(P0.05),与Th17细胞的RORγt及IL-17mRNA表达水平呈正相关(P0.05)。嗜酸乳杆菌干预可显著下调过敏小鼠Th17细胞亢进,以及上述miRNA基因的异常表达(P0.05),具有剂量依赖性。以上结果显示,miRNA在β-Lg过敏中发挥重要作用,嗜酸乳杆菌缓解过敏的作用可能与其调节miRNA表达密切相关。     

仿刺参雌性生殖腺皂苷的免疫增强活性研究

目的:以仿刺参雌性生殖腺皂苷（gonad saponins from female of Apostichopus japonicus,AGS）为研究对象,探究其免疫增强活性。方法:通过对巨噬细胞吞噬能力和细胞因子的测定,研究AGS的体外免疫调节活性;通过对免疫低下小鼠胸腺、脾脏指数,碳廓清指数与吞噬指数,腹腔巨噬细胞增殖活性,脾细胞增殖活性,自然杀伤细胞（natural killer cell,NK cell）活力,T淋巴细胞亚群水平及小鼠血清细胞因子的测定,分析AGS在小鼠体内的免疫调节活性。结果:体外实验表明,AGS能提高小鼠体外巨噬细胞吞噬能力,促进TNF-α、IL-6、IFN-γ的分泌,且各组与正常组相比差异显著（P<0.05）;体内实验表明,与模型组相比,中剂量组和高剂量组AGS均能显著提高小鼠胸腺、脾脏指数、碳廓清指数和吞噬指数（P<0.05）,显著增强腹腔巨噬细胞和脾细胞增殖活性（P<0.05）,显著增强NK细胞的活性（P<0.05）,显著提高CD4+/CD8+水平（P<0.05）,显著促进TNF-α、IL-6、IFN-γ的分泌（P<0.05）。结论:AGS在体外和体内都表现出增强免疫的活性。     

牛磺酸对顺铂所致H22荷瘤小鼠免疫器官及淋巴细胞损伤的保护作用

目的：研究牛磺酸对顺铂化疗荷瘤小鼠免疫器官和淋巴细胞损伤的保护作用。方法：H22荷瘤小鼠随机分为5 组：模型对照组、顺铂（1.5 mg/（kg·d））化疗组、顺铂＋高剂量（640 mg/（kg·d））牛磺酸组、顺铂＋中剂量（320 mg/（kg·d））牛磺酸组和顺铂＋低剂量（160 mg/（kg·d））牛磺酸组,末次用药24 h后眼球放血处死小鼠,测定小鼠体质量、瘤质量、脾脏指数、胸腺指数以及血清白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）水平,胸腺依赖性淋巴细胞（thymusdependent lymphocyte,T细胞）、骨髓依赖性淋巴细胞（bone marrow dependent lymphocyte,B细胞）增殖能力的变化情况。结果：顺铂化疗组小鼠体质量和瘤质量均明显低于模型对照组,抑瘤率为36%,顺铂＋中、高剂量牛磺酸组小鼠的体质量显著高于顺铂化疗组,抑瘤率分别达到51%和68%;顺铂化疗组小鼠的脾脏质量和脾脏指数明显低于模型对照组,而顺铂＋各剂量牛磺酸组小鼠的脾脏质量和脾脏指数均高于顺铂化疗组;顺铂化疗组小鼠的胸腺质量和胸腺指数明显低于模型对照组,顺铂＋高剂量牛磺酸组小鼠的胸腺质量和胸腺指数明显高于顺铂化疗组;顺铂化疗组小鼠血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的分泌水平明显低于模型对照组（P＜0.01）;而顺铂＋各剂量牛磺酸组血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平均高于顺铂化疗组;顺铂可明显抑制荷瘤小鼠对丝裂原刺激的T细胞和B细胞的增殖,顺铂＋高剂量牛磺酸组小鼠的T细胞刺激指数明显高于顺铂化疗组（P＜0.05）;而顺铂＋低、中剂量牛磺酸组小鼠的B细胞刺激指数则高于顺铂化疗组。结论：牛磺酸可协同顺铂发挥抑制肿瘤的作用,其机制与保护顺铂导致的动物免疫器官和淋巴细胞功能损伤有关。     

黑酵母β-1,3-1,6-葡聚糖对小鼠肿瘤及免疫功能的影响

目的:探讨黑酵母β-1,3-1,6-葡聚糖对S180腹水移植瘤荷鼠瘤体生长以及免疫功能的影响。方法:建立BALB/c小鼠S180腹水移植瘤模型,每日给予β-1,3-1,6-葡聚糖干预,并测量瘤体积。21d后,检测小鼠血清中10种细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-α、TNF-β和G-CSF的水平,以及CD4、CD8、补体C3、IgG和IgM的含量。结果:β-1,3-1,6-葡聚糖能显著抑制S180移植瘤的生长(P<0.01)。与空白对照组比较,多糖灌胃组小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α、TNF-β、IFN-γ和G-CSF水平显著上升(P<0.01,P<0.05)。CD4、CD8、CD4/CD8、补体C3、IgG和IgM含量也明显增加(P<0.01,P<0.05)。结论:β-1,3-1,6葡聚糖对S180腹水移植瘤生长具有明显抑制作用,其机制可能是通过促进细胞免疫和体液免疫的功能而实现的。     

长双歧杆菌BBMN68诱导的树突状细胞对小鼠牛乳β-乳球蛋白过敏的缓解作用

为研究益生菌缓解食物过敏的作用机制,本实验以牛乳β-乳球蛋白(BLG)为过敏原构建小鼠食物过敏模型,灌服长双歧杆菌BBMN68(BBMN68),采用ELISA方法检测小鼠血清及细胞培养上清中抗体和细胞因子含量,流式细胞术分析小鼠体内树突状细胞(DCs)亚型及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量的变化。结果表明,BBMN68调节了BLG小鼠体内的Th1/Th2细胞失衡,缓解了过敏反应。与过敏组小鼠相比,BBMN68显著提高了派氏淋巴结DCs中CD103表达(p0.05),并降低了CD86和MHC-II表达(p0.05);提高了派氏淋巴结,肠系膜淋巴结和脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量,分别增加41.91%、71.16%和61.25%。分离BBMN68组小鼠派氏淋巴结的DCs与BLG过敏小鼠的CD4+T细胞共培养,发现Foxp3+Treg细胞比例显著增加,调节性细胞因子TGF-β和IL-10分泌显著增多(p0.05)。以上结果说明BBMN68缓解小鼠牛乳β-乳球蛋白过敏的机制与其调节DCs功能,促进其介导的免疫抑制有关。     

铁皮石斛提取物对小鼠慢性束缚结合睡眠剥夺模型免疫功能的影响

目的 通过网络药理学和动物实验探讨铁皮石斛的茎与花部位提取物对慢性束缚结合睡眠剥夺小鼠模型免疫功能的影响。方法 首先通过网络药理学预测石斛激活免疫细胞的靶点及通路;然后建立慢性束缚结合睡眠剥夺动物模型;采用石斛茎、花提取物(0.5 g/kg)对小鼠进行灌胃给药。31 d造模给药后,检测小鼠体能状态、小鼠自然杀伤(natural killer,NK)细胞、巨噬细胞活性、小鼠外周血中免疫细胞亚群(CD19+CD3e- B细胞、CD19-CD3e+ T细胞、CD4+CD3e+ Th细胞、CD4+CD3e- NK细胞)比例以及小鼠血清中细胞因子(白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平。结果 筛选出铁皮石斛14个潜在活性成分及 429个作用靶点, 与 884个作用于免疫细胞的靶点取交集得到 125个靶点,通过基因本体(gene ontology, GO) 功能富集分析得到直接参与免疫细胞调控的相关条目 25个,铁皮石斛可能通过促进B细胞、T细胞增殖分化,IL-6受体结合来激活免疫细胞,京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)通路富集析12条,铁皮石斛激活免疫细胞与T细胞受体信号通路、B细胞受体信号通路、细胞周期信号通路等有关。铁皮石斛茎(Dendrobium officinale stem, SDO)、花(Dendrobium officinale flower, FD)组小鼠与模型(Model, MOD)组小鼠比较,跑台力竭时间、脾脏指数、胸腺指数显著提高(P < 0.05或P < 0.01),血液中NK细胞活性、巨噬细胞活性、CD19+CD3e- B细胞、CD19-CD3e+ T细胞、CD4+CD3e+ Th细胞、CD4+CD3e- NK细胞比例显著上升(P < 0.05或P < 0.01),血清中IL-4、IL-6、IgG的含量显著上升(P < 0.05或P < 0.01)。结论 铁皮石斛激活免疫细胞具有多成分、多靶点、多通路的特点。铁皮石斛花、茎提取物在慢性束缚结合睡眠剥夺模型中都具有提高小鼠免疫功能的作用。     

芜菁中性多糖对A549荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 探究芜菁中性多糖对A549小鼠移植瘤模型肿瘤微环境及凋亡相关蛋白、细胞因子水平的影响。方法 实验采用酶联免疫法、HE染色法、免疫组化法，检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3，caspase-3)、白细胞介素2(interleukin-2，IL-2)、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor，TNF-α)含量及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein，Bax)相对表达水平，计算免疫器官指数、抑瘤率。结果 芜菁中性多糖能使A549荷瘤小鼠肿瘤组织caspase-3蛋白含量显著增加(P<0.01)；使小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α含量升高(P<0.01)；Bcl-2蛋白表达水平降低，Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 芜菁中性多糖对人肺腺癌细胞A549生长具有抑制作用，可提高A549荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数，下调Bcl-2蛋白，上调Bax蛋白的表达，减轻荷瘤小鼠脏器病理损伤。     

嗜酸乳杆菌对β-乳球蛋白过敏诱发Thl/Th2细胞平衡的影响

目的:观察嗜酸乳杆菌对牛乳β-乳球蛋白(BLG)致敏小鼠Th1/Th2细胞平衡及血清抗体水平的影响,以研究其缓解过敏反应的作用。方法:用牛乳BLG和弗氏佐剂的混合液腹腔注射诱发BALB/c小鼠致敏,建立动物过敏模型。将实验动物随机分为空白组、过敏组与不同剂量的嗜酸乳杆菌组。采用ELISA法测定各组小鼠血清总IgE、BLG特异性IgE和总IgG含量。体外分离培养各组小鼠脾淋巴细胞,采用ELISA法检测细胞上清液中Th1型细胞因子(IL-12、IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)的水平。结果:中、高剂量嗜酸乳杆菌组小鼠的IFN-γ/IL-4比值(代表Th1/Th2细胞平衡)显著高于过敏组(P<0.05);而其血清中的总IgE、BLG特异性IgE和总IgG水平显著低于过敏组(P<0.05),与空白组相比无差异性(P>0.05)。结论:嗜酸乳杆菌干预可改善小鼠的BLG过敏症状,其作用可能与促进Th1占优势的Th1/Th2细胞平衡,阻断IgE及IgG分泌相关。     

复合益生菌粉对小鼠免疫机能的影响研究

目的:研究复合益生菌粉在增强免疫力功能方面的作用。方法:采用经口灌胃给予方式,设受试物组3组,分别为低、中、高剂量组,同时设阴性对照组(生理盐水),从小鼠体重指标、细胞免疫、体液免疫、单核—吞噬细胞活性、NK细胞活性等方面综合评价复合益生菌对小鼠体内免疫机能的影响。结果:与空白对照组相比,中、高剂量下的益生菌粉组中的小鼠抗体生成细胞数显著增加(P<0.05);低、中、高剂量益生菌组中的小鼠碳廓清功能显著提高(P<0.05);高剂量组的NK细胞活性比对照组有显著性提高(P<0.01)。不同剂量的益生菌给予期间,均未见益生菌粉对小鼠体重、脾脏/体重比值、胸腺/体重比值、足趾肿胀度、淋巴细胞增殖能力、半数溶血、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力有影响。结论:该复合益生菌粉能够增强体液免疫、单核—吞噬细胞活性和NK细胞的活性,具有一定的免疫增强功能。     

卵白蛋白对变应性鼻炎小鼠模型的影响

目的研究卵白蛋白(ovalbumin, OVA)对变应性鼻炎(过敏性鼻炎)小鼠模型的影响。方法小鼠随机分为7组:对照组、高浓度OVA模型+PBS组、中浓度OVA模型+PBS组、低浓度OVA模型+PBS组、高浓度OVA+阳性药组、中浓度OVA+阳性药组、低浓度OVA+阳性药组。采用OVA全身致敏及局部攻击相结合的方法构建变应性鼻炎小鼠模型,以PBS、丙酸氟替卡松(0.008 mg/kg)滴鼻,观察小鼠鼻部抓挠、喷嚏数症状和脏器指数; ELISA法定量检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量;制备脾细胞悬液对比脾细胞悬液CD4+CD25+T细胞变化。结果建模成功后,高浓度OVA+阳性药组与高浓度OVA模型+PBS组相比,血清IgE、IL-10、IL-4、IFN-γ水平和CD4+CD25+T细胞水平变化不明显,差异无统计学意义(P0.05);中、低浓度OVA+阳性药组与中、低浓度OVA模型+PBS组相比,血清IgE、IL-10和IL-4水平显著降低, CD4+CD25+T细胞水平和IFN-γ水平显著升高, IFN-γ/IL-4比值升高,差异有统计学意义(P0.001或P0.05)。结论卵白蛋白的浓度选择对变应性鼻炎模型影响较大,致敏用卵白蛋白为中浓度时对阳性药的检测效率较高。     

龙须菜酸性多糖对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

本文主要研究龙须菜酸性多糖(GLSPs)对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用。通过流式细胞术检测GLSPs对小鼠体内肿瘤细胞的细胞凋亡和细胞周期的影响;MTT法检测GLSPs对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性的影响;组织病理学方法检测GLSPs对荷瘤小鼠肿瘤和免疫器官(脾脏、胸腺)的影响。结果显示,GLSPs能够促进荷瘤小鼠体内H22肝癌细胞凋亡,显著抑制肿瘤生长。以200 mg/(kg?d)和600 mg/(kg?d)GLSPs灌胃管理荷瘤小鼠28 d,小鼠的平均体积抑瘤率分别为84.65%和94.58%。免疫学试验显示,GLSPs能够明显改善荷瘤小鼠脾脏肿大和胸腺萎缩的组织病变情况,增强荷瘤小鼠免疫器官的免疫功能,同时能够有效调节荷瘤小鼠白细胞和淋巴细胞的激增,显著增强荷瘤小鼠由ConA和LPS诱导的T、B细胞的增殖能力,提高脾NK细胞的杀伤活性,多方面提高荷瘤小鼠机体的免疫水平,提示GLSPs通过免疫调节作用达到体内抗肿瘤效果。     

不同时段嗜酸乳杆菌干预对β-乳球蛋白过敏缓解的作用

目的:分析和比较嗜酸乳杆菌预防和治疗β-乳球蛋白过敏的作用和效果,为抗过敏性能益生菌的使用提供科学依据。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、β-乳球蛋白过敏组、嗜酸乳杆菌预防组和嗜酸乳杆菌治疗组。建模结束后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清中IgE及Thl/Th2型细胞因子(IL-12、IFN-γ、IL-4)的含量;RT-PCR法检测脾脏中T-bet和GATA-3 mRNA的表达量。结果:嗜酸乳杆菌干预可有效缓解β-乳球蛋白过敏,与过敏组小鼠比较,其血清总IgE和特异性IgE水平明显降低(P0.05),IFN-γ、IL-12含量及T-bet mRNA表达量显著增加,IL-4含量及GATA-3 mRNA表达显著降低(P0.05)。特别是嗜酸乳杆菌预防组的抗过敏效果优于治疗组,且预防组调节IFN-γ/IL-4比值(代表Thl/Th2细胞平衡)的能力显著优于治疗组(P0.05)。结论:嗜酸乳杆菌预防β-乳球蛋白过敏的效果优于其治疗效果。     

复合多糖对小鼠细胞免疫功能的影响

目的比较香菇多糖、茯苓多糖、银耳多糖及按一定配比组成的复合多糖对免疫抑制小鼠细胞免疫功能影响。方法采用常规迟发型超敏反应(DTH)动物模型检测T细胞功能,Luminex液相蛋白芯片分析系统检测血清中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)等细胞因子的含量,通过流式细胞技术(FCM)检测T细胞比例及分型,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测T细胞增殖。结果各多糖组小鼠耳肿胀度与模型对照组相比趋于恢复正常,其中香菇多糖组、复合多糖组这一作用更明显,均差异有统计学意义(P0.05);香菇多糖、茯苓多糖和复合多糖具有上调免疫抑制小鼠血清IL-6水平的作用,均差异有统计学意义(P0.05);各多糖均有提高小鼠外周血调节性T细胞(Treg)细胞比例的趋势,其中银耳多糖、复合多糖组与模型对照组比较,均差异有统计学意义(P0.05);各多糖组均有恢复小鼠外周血Th1/Th2(Th1、Th2为2种辅助性T细胞)细胞比例的作用,均差异有统计学意义(P0.05),其中复合多糖组的这一作用最明显;各多糖均有恢复免疫抑制小鼠脾脏T、B淋巴细胞比例的趋势,其中复合多糖的作用较明显;4种多糖均有促进免疫抑制小鼠脾脏T淋巴细胞增殖的趋势,其中香菇多糖、复合多糖组与模型对照组比较,均差异有统计学意义(P0.05)。结论由香菇多糖、茯苓多糖和银耳多糖,以及按一定配比组成的复合多糖对免疫抑制小鼠细胞免疫功能均有一定的恢复作用,但复合多糖较单一多糖的作用更明显,显示出复合多糖组分的协同作用。     

茶树菇凝集素检测醋酸格拉替雷诱导小鼠的CD8~+T淋巴细胞表面糖基化研究

醋酸格拉替雷是治疗多发性硬化症的一线药物,可通过诱导调节性CD8+T细胞发挥免疫调节作用。为研究GA诱导的CD8+T淋巴细胞,我们将茶树菇分离的两种凝集素AAL(Agrocybe aegerita lectin)和AAL2(Agrocybe aegerita lectin 2),通过生物素标记结合流式细胞仪,分别分析GA诱导的免疫耐受小鼠模型中脾脏、腹股沟淋巴结CD8+T淋巴细胞的糖基化水平,及细胞因子的表达。发现脾脏AAL+CD8+,AAL2+CD8+T淋巴细胞的比例(%)分别为8.46±3.1和9.08±2.8,淋巴结AAL+CD8+,AAL2+CD8+T淋巴细胞的比例(%)分别为10.65±4.6和8.25±5.9,且脾脏、淋巴结CD8+T淋巴细胞中AAL+细胞的百分比均显著高于CD8-T淋巴细胞(p0.05)。淋巴结中AAL+CD8+T细胞表达IFN-γ的细胞比例显著高于AAL-CD8+T细胞,AAL2+CD8+T细胞表达IFN-γ和perforin细胞比例均显著高于AAL2-CD8+T细胞。该结果为CD8+T淋巴细胞表面糖基化研究提供了初步数据,并暗示糖基化水平与细胞因子分泌有关。