甘薯渣多糖的提取工艺优化、结构鉴定及其功能活性研究

本研究采用超声波辅助热水浸提法提取甘薯渣粗多糖,经单因素实验和响应面优化提取工艺参数,并通过酶法脱蛋白、H2O2法脱色和Superose 1210/300 GL凝胶柱对多糖进行分离纯化,得到甘薯渣多糖.采用紫外光谱法、红外光谱法和高效液相色谱法对甘薯渣多糖进行结构鉴定,在此基础上进一步对甘薯渣多糖进行抗氧化活性测定以及...     

匙羹藤粗多糖的提取及其清除羟自由基活性研究

目的:研究匙羹藤粗多糖的水提法优化工艺和清除羟自由基活性.方法:采用苯酚-硫酸泫测定多糖含量,以多糖得率为考察指标,在单因素试验结果的基础上,进行正交试验设计,考察温度、时间、固液比、提取次数等因素对多糖得率的影响.采用水杨酸法考察匙羹藤粗多糖清除羟自由基活性.结果:影响多糖得率最主要的因素是温度,其次是提取时间.水提法优化工艺条件为温度100℃,时间3h,固液比1∶15,提取次数2次.此条件下多糖得率达2.21%,粗多糖中多糖含量为25.57%.匙羹藤粗多糖具有清除羟自由基能力,并且其清除能力与浓度有明显的量效关系,匙羹藤粗多糖浓度为3.5mg/ml时清除率达50%,浓度为12mg/ml时其清除率高达94.42%.结论:该优化工艺可用于匙羹藤粗多糖的提取,高浓度匙羹藤粗多糖具有较好的抗氧化活性.     

不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化性的影响

目的:研究不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化活性的影响。方法:采用热水提法、酶法和超声波法分别提取米邦塔仙人掌粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖纯度,以抗肝组织自发性脂质过氧化能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子能力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基能力、总还原能力、总抗氧化能力6种方法作为体外抗氧化能力评价指标。结果:酶法提取的粗多糖得率最高,为10.14%;超声波法提取的粗多糖纯度最高,为47.62%;酶法和超声波法提取的粗多糖各项体外抗氧化指标的活性均高于热水提法。结论:米邦塔仙人掌粗多糖的体外抗氧化活性强弱与粗多糖的提取方法有关,酶法和超声波法提取的粗多糖具有较好的抗氧化活性。     

超高压提取铁皮石斛多糖工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化超高压提取铁皮石斛多糖工艺条件,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法:以铁皮石斛干粉为原料,优化超高压技术提取铁皮石斛多糖工艺条件,分析传统热水浸提法、超高压法两种提取方法下的铁皮石斛多糖的相对分子量与单糖组成,并比较其体外抗氧化活性。结果:超高压提取铁皮石斛多糖的最佳工艺条件为超高压压力200 MPa,料液比1:25 (g/mL),保压时间5 min,此时铁皮石斛多糖得率为33.3%,比传统热水浸提法提高了128%,且超高压法提取的多糖蛋白含量和相对分子量下降,甘露糖含量提高,对DPPH自由基的清除能力提高。结论:超高压提取的铁皮石斛多糖得率高,体外抗氧化活性较好。     

不同提取方法对南瓜多糖提取率及抗氧化活性的影响

采用热水浸提法、微波法、超声波法和复合酶法分别提取南瓜多糖,并对不同方法所得南瓜多糖的提取率和抗氧化能力进行了比较。结果表明:在4种提取方法中,复合酶法提取南瓜多糖的提取率最高;以多糖的还原力为判断指标,4种提取方法所得南瓜粗多糖均具有较好的体外抗氧化活性,且抗氧化活性大小依次为复合酶法>微波法>热水浸提法>超声波法。     

木耳多糖提取工艺优化及其体外抗氧化活性研究

目的建立可靠的黑木耳多糖高温蒸汽浸提工艺,并测定粗多糖的抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,通过响应面法优化高温蒸汽浸提黑木耳多糖料液比、浸提温度与浸提时间。此外,利用超氧自由基(O-2·)清除实验、ABTS+·自由基清除实验,DPPH·自由基清除实验与总还原力实验检测粗多糖抗氧化活性。结果高温蒸汽浸提木耳多糖的最佳条件为:料液比1:50(g/m L),提取温度120℃,提取时间85 min。此条件下多糖得率为48.38%±1.64%。此外,木耳多糖对O-2·、ABTS+·及DPPH·的IC50分别为0.65,0.78,1.47 mg/ml,且对铁离子有良好还原力。结论高温浸提法能快速高效提取粗黑木耳多糖,其具有良好的天然抗氧化活性。     

响应面法优化山豆根多糖提取工艺及其分级醇沉组分的抗氧化活性

为研究山豆根多糖的提取工艺及其抗氧化性,采用热水浸提法提取山豆根粗多糖(SGP),研究提取温度、提取时间、液料比对多糖得率的影响,在单因素实验基础上采用响应面法对山豆根粗多糖的提取工艺进行条件优化。将提取得到的粗多糖分级醇沉,并分别采用清除DPPH、ABTS+自由基及还原能力的方法对各醇沉组分多糖的抗氧化活性进行评估。结果表明,山豆根粗多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度83℃,提取时间133 min,液料比30:1 mL/g。在此工艺条件下,山豆根粗多糖得率为3.98%。粗多糖经分级醇沉共获得SGP50、SGP70、SGP80和SGP90 4个组分,且SGP90表现出最强的抗氧化能力,尤其是在清除DPPH自由基方面,显著高于其它组分(P<0.05)。     

草珊瑚水溶性粗多糖提取及抗氧化性能研究

研究了草珊瑚水溶性粗多糖的提取工艺及抗氧化性能。采用单因素试验和L9(34)正交试验设计,考察了提取温度、时间、料液比、提取次数等因素对提取率的影响,并采用水杨酸法考察草珊瑚粗多糖抗氧化性能。结果表明,温度是影响粗多糖提取的重要因素。优化工艺条件为:提取温度95℃、提取时间4h、料液比1:20、提取三次。抗氧化实验表明草珊瑚粗多糖有较好的抗氧化活性。     

辣木叶多糖的提取及抗氧化活性研究

为提取辣木叶多糖并研究其体外抗氧化活性,利用水提醇沉法获得辣木叶粗多糖,以单因素提取试验为基础,采用正交试验对辣木叶多糖的分离提取工艺进行优化,并探讨6个产地辣木叶粗多糖体外抗氧化活性。研究表明,辣木叶粗多糖的最佳提取工艺:液料比20∶1(mL/g),提取温度为70℃,提取时间为1.5 h,在此工艺条件下多糖的得率为11.48%。6个产地辣木叶粗多糖以普洱市辣木叶多糖的体外抗氧化活性最佳。     

总评归一值法优选山豆根茎多糖的微波预处理-超声波提取工艺及生物活性研究

目的:研究山豆根茎多糖的微波预处理-超声波提取工艺及其生物活性。方法:以多糖得率和多糖纯度的总评归一值为评价指标,采用正交设计优选山豆根茎多糖的微波预处理-超声波提取工艺,并对其稳定性、抗氧化活性和清除亚硝酸盐活性三种生物活性进行研究。结果:最佳提取工艺条件为:解析剂比1∶5(g/m L),微波时间30 s,料液比1∶25(g/m L),超声功率140 W,提取时间20 min,该工艺条件下,多糖得率为3.27%,多糖纯度为29.49%,提取效果优于热水浸提法和超声波提取法。多糖稳定性研究表明粗多糖在温度40~70℃、Ca~(2+)或柠檬酸中较稳定,但在温度高于70℃、H_2O_2、Na_2SO_3、VC、Na~+、Al~(3+)、Cu~(2+)或Fe~(3+)的条件下稳定性较差。体外抗氧化活性研究表明粗多糖具有一定的抗氧化活性,当浓度为1.96 mg/m L时,微波预处理-超声波提取法粗多糖对·OH和O-2·的清除率分别可达78.14%和71.16%;亚硝酸盐清除研究表明粗多糖具有良好的清除亚硝酸盐活性,当添加量为20 m L(或19.60 mg)时,清除率可达82.94%,清除效果与0.32 mg VC相当;相同浓度下,微波预处理-超声波提取法所提取的粗多糖对O-2·和亚硝酸盐的清除活性与超声提取法相当,且对·OH的清除活性优于超声提取法。结论:山豆根茎中富含多糖类物质,具有良好的抗氧化活性和清除亚硝酸盐活性,粗多糖稳定性较差,建议低温避光保存。     

纤维素酶法提取决明子粗多糖的工艺优化及其抗氧化活性

目的:优化纤维素酶法提取决明子粗多糖的工艺,并研究决明子粗多糖的体外抗氧化活性。方法:在单因素实验的基础上,以酶解时间、酶解温度、酶用量、液料比及酶解pH为自变量,多糖得率为响应值,利用BoxBehnken响应面法进行工艺优化。以对DPPH自由基和羟自由基清除率的大小为指标考察决明子粗多糖的体外抗氧化活性。结果:纤维素酶法提取决明子粗多糖最佳工艺为酶用量1.4%、酶解时间50 min、液料比24:1 mL/g、酶解pH5.4、酶解温度48℃,此条件下决明子多糖得率为11.67%,与回归模型的理论预测值11.91%误差小于5%。决明子粗多糖对DPPH自由基和羟自由基均具有较强的清除作用,半数抑制浓度分别为1.025 mg/mL和0.894 mg/mL。结论:纤维素酶法可显著提高决明子粗多糖得率,工艺简便可行,获得的决明子粗多糖具有体外抗氧化活性。     

马齿苋多糖提取工艺优选及活性初筛

以多糖提取得率为指标,采用正交试验对加酶超声辅助法提取马齿苋多糖的工艺条件进行了优化。方法:以未经酶解和未采用超声处理的传统水提醇沉法得到的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶超声处理对马齿苋多糖结构的影响并对马齿苋多糖的抗氧化活性进行分析。结果表明:在纤维素酶2.5%,超声温度60℃,超声功率70 W,超声时间20 min,多糖提取得率达到18.40%。结论:近红外光谱分析表明,加酶超声对多糖的结构没有显著影响,提高了多糖提取率。体外抗氧化性实验表明,所提取马齿苋多糖具有较强的总抗氧化能力,对.OH和DPPH均有较好的清除能力,活性大小与多糖的浓度呈明显的线性关系。     

厚壳贻贝多糖的提取工艺优化及体外生物活性研究

以抗氧化和抗肿瘤活性为指导优化提取工艺,分别采用热水提取,两步联合酶解法（木瓜蛋白酶和胰蛋白酶）从厚壳贻贝中提取和分离纯化具有生物活性的贻贝多糖,对其进行基本理化性质分析和DEAE-Cellulose 52 柱层析分离纯化并进行体外抗氧化、抗肿瘤生物活性研究。通过对热水提取法,单一酶提法和联合酶提取法得到的贻贝多糖粗品进行理化性质分析和活性筛选,发现联合酶解提取得到的贻贝粗多糖在得率、纯度和生物活性上均优于其他方法提取得到的粗多糖,其提取粗多糖的得率为23.69%。联合酶提粗多糖体外抗氧化研究表明其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和脂质过氧化物清除的半最大效应浓度（concentration for 50% of maximal effect,EC50）分别为3.75、5.01 mg/mL和2.41 mg/mL;对体外前列腺癌DU-145细胞48 h,IC50为2.93 mg/mL。通过分离纯化后对各组分的得率和组成分析表明：联合酶提可提高贻贝多糖类糖胺聚糖（MT3）的含量,并达到13.5%,单糖组成主要为Man、GlcN、GlcUA、Gal和Fuc,分子质量约为18 kD。和其他组分相比,MT3 组分表现出良好的体外抗肿瘤活性,对体外前列腺癌DU-145细胞48 h,IC50 为2.71 mg/mL。通过活性追踪和工艺优化结果表明,热水提取后酶解工艺不仅可以降解蛋白提高多糖的纯度,而且还可以显著提高贻贝多糖中类糖胺聚糖的含量,而贻贝类糖胺聚糖是贻贝多糖的主要活性组分,具有良好的抗肿瘤活性。     

复合酶法超声辅助提取高寒香菊花多糖

通过对复合酶超声辅助提取高寒香菊花多糖的工艺研究,以提取得率和纯度为指标,确定了适宜工艺条件。以未经酶解和未采用超声处理的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶及超声处理对高寒香菊花多糖结构的影响。结果表明:在复合酶2.5%(纤维素酶2.0%,酸性蛋白酶0.5%),酶解温度55℃,pH值4.5的条件下酶解2.0 h,多糖提取得率和纯度分别达到9.83%和28.58%,经聚酰胺柱纯化后纯度为64.57%。近红外光谱分析表明加酶和超声对多糖的结构没有显著影响,但提高了多糖提取得率。     

鸡骨草多糖的酶法提取工艺优化及其抗氧化活性

目的:研究纤维素酶提取鸡骨草有效成分多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以鸡骨草多糖得率为响应值,在单因素实验基础上,以液料比、酶解时间、酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件,并采用DPPH·和·OH清除能力体系评价鸡骨草多糖体外抗氧化活性。结果:最佳提取条件为:液料比13:1 mL/g,纤维素酶酶解时间60 min,酶添加量12.8 mg/mL,酶解温度50 ℃,pH5.0,在此条件下鸡骨草多糖得率为8.15%,与理论值8.34%相对误差小于5%。酶添加量对多糖得率影响最大,液料比、酶解时间次之,酶解温度影响最小。鸡骨草多糖对DPPH·和·OH清除的半数抑制浓度IC₅₀分别为1.591、1.926 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:鸡骨草多糖纤维素酶酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

茯苓多糖的酶解工艺及抑菌性研究

采用β-葡聚糖酶酶解茯苓多糖获得水溶性茯苓多糖,优化水溶性茯苓多糖的最佳酶解提取工艺,测定酶解产物抑菌效果。通过苯酚-硫酸法测定其含量,以水溶性茯苓多糖含量为评价指标,采用L9（34）正交试验设计,优化酶解工艺条件为酶解反应温度55 ℃,pH值5.5,时间150 min,酶用量9 000 U。在此条件下获得水溶性多糖含量达到9.20%。牛津杯法测定其抑菌活性,结果表明,酶解产物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌产生较好的抑菌作用,抑菌圈直径分别为14.67 mm、8.89 mm,对枯草芽孢杆菌未见产生明显抑菌圈,为茯苓水溶性多糖深度开发提供前期研究数据。     

不同提取方法对龙眼多糖性质的影响

以龙眼为原料,利用水提法、酶提法、础提法、酸提法、超声法五种方法来提取龙眼多糖,研究不同提取方法下龙眼多糖的提取率、还原力、DPPH．清除率、单糖组成等的区别,比较五种提取工艺的优缺点。实验结果表明,五种提取方法相比较,酶提法得率最高,达到6．78％,碱提法得率最低,为1．84％。酶提法得到的龙眼多糖抗氧化性最好,超声法所得多糖的活性次之,而碱提多糖的抗氧化活性最差。     

沙棘多糖分离纯化及抗氧化活性

分离纯化沙棘多糖（sea buckthorn (Hippophae rhamnoides) polysaccharides,SBP）,并对其单糖组分、结构表征及体外抗氧化活性进行分析。通过水提醇沉、Sevag法除蛋白得到沙棘粗多糖,利用DEAE-52纤维素柱对其进行分离纯化得到中性多糖SBP-I和酸性多糖SBP-II、SBP-III 3 种组分。单糖组分结果表明,SBP-I由物质的量比为1.18∶1∶2.20∶32.17∶1.45的阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖组成;SBP-II由物质的量比为1∶0.28∶1.02∶0.20的木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖组成;SBP-III由物质的量比为1∶2.15∶0.28的木糖、葡萄糖及半乳糖组成;红外光谱测定表明,3 种组分均具有多糖的特征吸收峰;体外抗氧化实验结果表明,粗多糖及3 种纯化多糖组分均具有较好的抗氧化性且随样品质量浓度的增加抗氧化活性也随之升高,抗氧化能力大小顺序为：VC＞SBP-III＞SBP-II＞SBP-I＞粗多糖。     

不同提取方法对松茸多糖理化性质及抗氧化活性的影响

目的研究不同提取方法对松茸多糖(polysaccharide of Tricholoma matsutake,TMP)的理化性质及抗氧化活性的影响,并以提取得率和抗氧化活性为依据,筛选出最优方法。方法采用热水浸提、超声提取、酶提取和微波提取等4种提取方法,获得4种相应的多糖。利用高效阴离子交换色谱和傅里叶红外光谱对4种多糖的化学特性进行了结构表征。结果 4种多糖的提取得率顺序为热水浸提多糖超声提取多糖酶提取多糖微波提取多糖。在4种多糖中,超声辅助多糖含量最高(48.98%),蛋白含量最低(0.2%)。抗氧化试验结果表明,超声辅助多糖的还原力和·OH的清除力均高于其他3种多糖;从清除DPPH活性来看,超声辅助多糖和热水浸提多糖的EC_(50)分别为1.06和0.98 mg/mL,二者活性相当,均远高于其他2种多糖。结论综合考虑提取得率、多糖含量和抗氧化活性,超声提取为最优方法。4种多糖的单糖组分基本相同,但它们的摩尔比有明显不同。