扳倒井酒用微生物的分离鉴定及功能性、抗逆性研究

利用梯度稀释法和划线纯化法,对扳倒井大曲、酒醅及窖泥中的微生物进行分离纯化,共得到112株菌种,包括61株细菌、32株霉菌和19株酵母菌。经过形态特征观察和分子生物学鉴定后,对其进行冻干管制作,并保藏至扳倒井微生物菌种资源库。分别对112株菌种的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活力进行测定,筛选出高酶活菌株;同时对112株菌种进行耐高温和耐酸性能筛选,筛选出具有抗逆性能的菌株。     

泡菜中益生性乳酸菌的筛选和鉴定

以筛选具益生特性的泡菜发酵剂为目的,从15个泡菜样品中通过比较溶钙圈的大小分离出59株产酸能力较强的菌株。通过测定发酵液的酸度以及耐酸性和耐胆汁盐试验,再从中筛选出2株产酸能力和在胃肠道生存能力都强的菌株A18和B17。经形态特征及16S rDNA序列分析,确定A18和B17均属于植物乳杆菌。     

宜春明月山富硒土壤中耐硒酵母菌株的筛选与鉴定

从宜春明月山毛竹林采集的富硒土壤中,筛选出耐硒酵母菌株并进行鉴定。采用PDA培养基、营养琼脂培养基、马丁氏培养基筛选出耐亚硒酸钠浓度较高的酵母菌株,根据菌株形态学特征和26S rDNA基因序列分析,对其进行分类鉴定。从土壤中分离得到7株耐硒菌株,其中2株具有典型酵母菌特征的菌株,经鉴定结果表明:菌株A₁为Saitozymapodzolica,菌株P为Cyberlindnerasaturnus。得到2株耐硒酵母菌株,丰富了耐硒酵母资源。     

天祝放牧牦牛生活环境土壤中一株产凝乳酶细菌的分离与鉴定

筛选高产凝乳酶细菌,并对其进行鉴定和产凝乳酶活力测定。利用酪蛋白培养基从天祝放牧牦牛生活环境土壤中筛选高产凝乳酶细菌,利用形态观察、生理生化检测、16S rDNA 序列分析对其进行鉴定,并采用Arima法和福林法分别测定凝乳酶活力和蛋白水解活力。获得18 株产凝乳酶细菌,其中菌株D3.11 产凝乳酶活力相对最高,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),其在麸皮培养基中发酵72 h 产凝乳酶活力高达89.56 SU/ml,蛋白水解力为21.27U/ml。菌株D3.11 是一株高产凝乳酶细菌,可作为候选菌株进行进一步研究。     

泡菜中植物乳杆菌的筛选及益生活性研究

从民间自制泡菜中筛选乳酸菌。根据菌落形态,革兰氏染色和溶钙透明圈,分离得到17株乳酸菌菌株,用16S r DNA测序鉴定分离菌株,并测试了其耐酸和耐胆盐能力。结果表明,筛选菌株中WHLP-01、WHLP-02、WHLP-03和WHPE-02四株菌株可以在p H=2.0的环境下生存2 h;WHLP-01与WHLP-02两株菌株可以在0.3%胆盐浓度下存活;其中菌株WHLP-01属植物乳杆菌,其对常见的8株致病菌均有明显的抑制效果和降胆固醇能力,可以作为微生态制剂的候选菌株深入研究。     

内蒙古肉制品中葡萄球菌的筛选及生产性能的研究

通过对内蒙古天然风干肉及肉肠中葡萄球菌的筛选,得到105株球菌。对菌株进行降解蛋白质和脂肪试验,筛选出2株具有降解蛋白质,17株降解脂肪的菌株。将19株菌进行耐6.5%Na Cl、10%Na Cl、耐Na NO2、葡萄糖产气、产H2S、硝酸盐还原、产生物胺等试验,结果表明19株菌中H2O2酶试验均为阳性,5株菌硝酸盐还原酶试验阳性,6株菌分解赖氨酸、5株菌分解酪氨酸产胺试验阳性,4株菌产H2S试验阴性。经以上筛选,得到12株菌性能良好菌株。通过生化鉴定,其中5株菌为木糖葡萄球菌,适合用作肉品发酵剂。     

自然发酵腐乳中芽孢杆菌的分离与鉴定

从自然发酵腐乳中筛选芽孢杆菌并研究其作用。根据菌株产蛋白酶能力大小,对自然发酵腐乳中细菌进行分离纯化获得四株芽孢杆菌,经纯化培养后观察其个体形态和菌落形态,利用Biolog微生物自动鉴定系统和16S r DNA序列分析对其精确鉴定。结果显示四株菌株分别为:一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis B),两株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus B),一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens B)。     

传统固态发酵酿醋产酸菌株的分离筛选及初步鉴定

从保宁醋发酵醋酷中分离筛选出四株产酸菌株,并对其进行产酸性能及耐酒精度研究,实验结果表明:最高耐酒精度达到9%,产酸量高达33.8 g/L,通过对菌株形态观察及生理生化鉴定,初步确定该菌株为恶臭醋酸杆茼属菌种.     

降胆固醇双歧杆菌BZ11的筛选及其耐受性评价

采用平板涂布法从贵州特色香猪粪便中筛选具有降胆固醇能力及耐酸、耐胆盐和耐氧性能的双歧杆菌（Bifidobacterium）。从香猪粪便中共筛选出19株具有双歧杆菌形态特征的菌株。采用邻苯二甲醛法测定其降胆固醇率,得到7株降胆固醇能力较高菌株,其中菌株BZ11降胆固醇率最高可达（38.52±0.60）%,并对酸、胆盐和氧具有较高的耐受性。经菌落形态特征、生理生化试验及16S rRNA序列分析,菌株BZ11被鉴定为动物双歧杆菌乳亚种（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）。     

产细菌素乳酸菌的筛选及相关基因分析

以Escherichia coli为指示菌,采用双层平板法从7株乳酸菌中筛选出一株高产细菌素的优良菌株KLDS 4.0325;通过菌体形态观察及16S r RNA序列分析鉴定菌株KLDS 4.0325为乳酸乳球菌,通过分析该菌株全基因组序列,预测其细菌素合成基因簇有AOI_1和AOI_2,并分别做了简要介绍,在细菌素数据库中比对,均属于二类细菌素中的Lactococcin_B_(LCN-B)型细菌素;最后通过向指示菌菌液中添加无细胞发酵上清液进一步证明了该菌株所产细菌素对指示菌的作用方式是杀菌。     

扬州酱菜中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选、鉴定及性能研究

以扬州地区传统酱菜为研究对象,采用离子色谱（IC）法从32株乳酸菌中筛选降解亚硝酸盐能力较强的乳酸菌菌株,采用形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析对其进行鉴定,并对其生长性能进行测定。结果表明,从扬州地区传统酱菜中筛选出一株降解亚硝酸盐能力较强的乳酸菌菌株,编号为DGJ-17,其亚硝酸盐降解率为91.7%;菌株DGJ-17被鉴定为乳酸肠球菌（Enterococcus lactis）;菌株DGJ-17的最适生长温度为30 ℃,培养12 h后进入对数生长期,30 h后细胞生物量趋于稳定。     

甘蔗醋高产菌株的筛选及鉴定

为了获得适宜甘蔗醋酿造的高产菌株,以自然发酵的甘蔗渣为筛选材料进行筛选。通过对筛选样品进行富集培养和平板分离,获得116株菌株,再采用产醋酸发酵、耐酒精性发酵以及传代稳定性发酵等方法进一步筛选,采用高效液相色谱检测法分析发酵液的乙酸含量,最后获得1株具有产酸高、耐酒精性强、遗传稳定的菌株C22。菌株C22在12%(v/v)的酒精度下仍能够表现出较强的发酵作用,在起始酒精度为6%(v/v)和12%(v/v)的培养基中,菌株C22的醋酸产量分别为41.8g/L和62.2g/L。经过形态特征、生理生化特征以及16S rDNA等方面的分析,鉴定菌株C22为巴氏醋酸杆菌。     

玉米青贮中乳酸菌的分离鉴定及特性研究

为了筛选性状优良的乳酸菌菌株,通过细菌形态学、生理生化特征鉴定和16s r RNA序列分析,从天然发酵玉米饲料中分离纯化出17株菌株,8株植物乳杆菌(3,5,6,8,11,13,15和16),3株玉米乳杆菌(1,4和10),3株乳酸片球菌(7,14和17),1株香肠乳杆菌(2),1株干酪乳杆菌(9),1株副干酪乳杆菌(12)。通过测定产酸速率和生长曲线筛选出3,5,6,8,9,11,15和16为产酸较快、生长迅速的优良乳酸菌菌株。     

冬果梨果酒酵母的筛选及鉴定

以冬果梨作为富集培养基,对野生酵母菌株进行收集、分离,得到980株;采用TTC平板法、耐乙醇性能测定以及产乙醇性能测定共三级筛选,最终筛得一株可耐受18%vol乙醇、乙醇产量达7.79%vol、发酵过程中糖利用率92.75%的菌株L-0301。通过对筛选所得菌株L-0301的形态特征观察、26S rDNA D1/D2区序列分析方法对菌株进行分类鉴定,结果显示,菌株L-0301为酵母亚科酵母属酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）。     

耐胃液乳酸菌的筛选、鉴定与驯化

利用本实验室分离保存的乳酸菌菌种17株,经过耐胃液实验筛选,得到耐胃液能力较强、生长良好的乳酸菌菌株5株,选取4株菌株利用API乳酸菌生化系统和16S rDNA分析鉴定,并进行耐胃液驯化选育.结果表明,鉴定的4株乳酸菌中2株(编号:BR1-2和R8)为副千酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),1株(编号:BR3-2)为屎肠球菌(Enterococcus faecium),1株(编号:BR2-2)为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici);驯化后各菌株耐胃液能力均有不同程度的提高,其中BR1-2经人工胃液处理存活率提高52.2%;其他三株菌株的存活率也均提高20%以上.     

长寿老人源降胆固醇肠球菌的生化特性研究

目的:以新疆和田维吾尔族长寿老人和一般人肠道中筛选出来的27株菌株为试材,采用耐胆汁盐,耐酸,降胆固醇等实验方法对该菌株进行综合性分析,并对其降胆固醇机理进行初步探讨。方法:采用硫酸铁铵法测定该菌株对培养基中胆固醇的脱除率,同时用吸光度法对候选菌株耐酸,耐胆汁盐以及蛋白酶的耐受性进行检测,筛选综合性能高的菌株。结果:27株实验菌都能从培养基中除去胆固醇,脱除率在22.32%～78.57%之间,平均脱除率50.63%,13株脱除率高于平均值(50.63%)。其中10株菌株脱除率高于52.58%,被选为后续研究的菌株;又通过胆汁盐耐受性,低pH耐受性和蛋白酶耐受性实验,从10株菌中筛选出综合性能比较高的R02-23,R03-13,S04等3株菌。结论:从长寿老人肠道中分离筛选的R02-23,R03-13,S04菌株均具有降胆固醇,耐胆汁盐,耐酸,耐蛋白酶能力。且胆固醇的降解机理研究表明它们都有吸收胆固醇和同化胆固醇的能力,但对病原菌的抑菌作用机理有待进一步研究。     

堆积醅中耐高温细菌的分离与鉴定

从江苏双沟酒业股份有限公司堆积醅中筛选得到7株耐高温细菌。形态特征观察、生理生化特性测定结果结合16S rDNA序列同源性分析以及部分基因特异性序列分析,结果表明,7株菌株中3株为地衣芽孢杆菌,3株为枯草芽孢杆菌,1株解淀粉芽孢杆菌。     

发酵香肠中益生性乳杆菌的分离及筛选

利用PH2.5和1%胆盐的MRS液体培养基,对自然发酵香肠中耐低酸耐胆盐的乳杆菌进行富集,从中分离纯化得到184株乳杆菌。通过一级筛选:24h产酸、耐盐耐硝性、产粘液、产过氧化氢等实验,筛选出20株符合发酵香肠乳酸菌发酵剂基本要求的菌株。通过二级筛选:耐低酸能力、耐胆汁酸盐能力和抑菌能力,最终筛选出了性能优良乳杆菌3株,可作为益生型发酵剂用于发酵香肠生产。文中还对所获得菌株的相关发酵性能进行了测定。     

四个国家雪茄外包皮烟叶表面细菌分离与活性测定

研究不同国家雪茄外包皮烟叶表面细菌差异,并为筛选菌株在雪茄外包皮烟叶发酵中的利用奠定基础。利用常规分离方法对美国、巴西、多米尼加及中国4个国家的7个雪茄外包皮烟样表面细菌进行分离鉴定,并初步测定筛选细菌的功能活性。结果表明,4个不同国家雪茄外包皮烟叶表面共分离获得细菌100株;属水平上不同地区雪茄外包皮烟叶表面细菌多样性及数量存在差异,基本以芽孢杆菌和葡萄球菌为主,尤其芽孢杆菌属为优势菌属;细菌种类多米尼加 > 美国-2=中国-1 > 巴西-1 > 巴西-2 > 中国-2 > 美国-1。活性分析结果显示,具有纤维素酶、果胶酶和蛋白酶分泌功能的菌株分别为24株、20株和22株,耐烟碱菌株46株,有7株芽孢杆菌同时具有上述4种活性。本研究证明国内外不同地区雪茄外包皮烟叶表面细菌种类存在差异,以芽孢杆菌属为优势细菌,其次是葡萄球菌,且芽孢杆菌属酶活更全面,不同菌株间活性差异较大。     

旱生植物内生细菌的分离及耐旱菌株的筛选鉴定

为筛选耐旱内生细菌,并对其进行鉴定,以典型耐旱植物为材料,分离纯化出142株内生细菌。采用液体培养基中添加聚乙二醇6000降低渗透势的方法分析内生细菌的耐旱情况。从中筛选出1株能够耐受质量浓度为60g/100mL聚乙二醇6000的内生细菌PB14。对该菌株进行形态学观察,生理生化和16S rDNA序列鉴定,判定菌株PB14为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。