应用体外全仿生模型初步分析2种富硒产品中硒形态及生物可给性

建立微波消解-高分辨-连续光源石墨炉原子吸收光谱(high resolution-continuum source graphite furnace atomic absorption spectrophotometry,HR-CS GFAAS)法测定富硒蛹虫草和富硒酵母胃、肠全仿生提取液中各形态硒的方法,研究胃、肠消化对富硒产品中硒形态和生物可给性的影响。采用体外全仿生消化技术对富硒蛹虫草和富硒酵母进行预处理,得到胃、肠全仿生提取液;通过0.45μm微孔滤膜实现可溶态和悬浮态的分离;选择D101大孔树脂分离可溶态中有机态和无机态;分别利用丙酮和无水乙醇沉淀可溶态中蛋白和多糖,得到蛋白结合态和多糖结合态;分别以正辛醇和单层脂质体为细胞膜,模拟富硒产品中硒在人体胃、肠中的分配行为。通过单因素试验,确定最佳测定条件:分析谱线为196.026 7 nm,基体改进剂为1 g/L Pd(NO_3)_2和0.5 g/L Mg(NO_3)_2混合溶液,添加体积为5μL,灰化温度为1 100℃,原子化温度为2 200℃。在此条件下,测定富硒蛹虫草和富硒酵母中硒含量分别为2.129μg/g和27.75μg/g,肠全仿生提取液中除悬浮态其他各形态硒的含量都高于胃全仿生提取液,在肠消化过程中产生的正辛醇醇溶态硒和单层脂质体结合态硒的含量都高于各自水溶态硒。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定富硒食品中无机硒和有机硒的含量

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术(HPLC-ICP/MS)测定富硒食品中无机硒和有机硒含量的方法。方法采用纯水提取富硒食品中的无机硒,通过透析作用分离小分子量的硒化合物与样品基体,利用阴离子交换色谱分离,采用Hamilton PRP-X100分析柱和预柱(250 mm×4 mm,10μm),流动相为5 mmol/L柠檬酸铵中加2%甲醇,电感耦合等离子体质谱仪测定样品中无机硒的含量。根据总硒与无机硒的差值计算有机硒含量。结果硒(IV)和硒(VI)检出限分别为6.67和9.95μg/kg,二者回收率分别为70.2%~108.1%和73.2%~116.9%。结论该方法可满足富硒食品中无机硒和有机硒含量的测定。     

富硒大蒜中有机Se的测定

对比DBS 42/002—2014和GB 1903.21—2016这2个标准对富硒大蒜中有机Se测定的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化得到测定Se的最佳条件:以1 g/L Pd(NO_3)_2和0.5 g/L Mg(NO_3)_2混合溶液为基体改进剂、基体改进剂添加体积4μL、灰化温度1 100℃、原子化温度2 200℃。加标回收率为92.4%～98.8%,相对标准偏差≤4.2%。试验结果表明GB 1903.21—2016适合测定富硒大蒜中有机Se,而DBS 42/002—2014不适合。富硒大蒜中总Se含量为7.541μg/g,无机Se含量为1.256μg/g,有机Se含量为6.285μg/g,有机Se含量高达83.34%,这说明富硒大蒜含有丰富的有机Se,是补Se良品。该结果为富硒大蒜中有机Se含量的分析提供基础数据。     

市售富硒食品中硒形态及含量的分析

目的 研究市售富硒食品中硒元素的存在形态及含量情况,通过分析总硒、有机硒和无机硒的含量,评估富硒食品的产品质量及存在的风险。方法 改进测定富硒食品中总硒、无机硒含量的电感耦合等离子体质谱法,利用改进的方法对100批次市售富硒食品进行检测,按照相关标准分析富硒食品的质量水平。结果 优化的方法能够有效提取样品中总硒、无机硒,线性相关系数达0.9999,回收率为86%～116%,精密度为1.7%～8.4%,均能满足检验要求。有30批次富硒食品中总硒不符合GB 28050-2011《食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则》的要求,6批次样品总硒超过GB/T 22499-2008《富硒稻谷》限量值,甚至个别批次大米的总硒超标达2倍多。此外,9批次样品的有机硒达不到DBS 42/ 002-2014《食品安全地方标准 富有机硒食品硒含量要求》的要求。结论 市售富硒食品存在总硒含量不达标、有机硒含量过低等问题,该类产品的质量不稳定,容易造成补硒不足或补硒过量。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒杂粮中的有机硒和无机硒

采用氢化物-原子荧光光谱法与无水乙醇提取相结合的方法测定了富硒杂粮中总硒、无机硒和有机硒的含量,并对仪器的试验参数进行优化。结果表明,富硒杂粮样品中硒主要以有机硒的形态存在,占硒总量的63.02%～95.10%,其中黄玉米有机硒含量最高,达到95.10%。该方法检出限为0.01 μg/L,总硒回收率为97.31%～103.53%,无机硒回收率96.10%～105.45%。本方法操作简单、灵敏度高、回收率好,适合富硒杂粮有机硒和无机硒的测定。     

产朊假丝酵母富硒及产谷胱甘肽的培养工艺

为生产高生物活性(高谷胱甘肽、高有机硒含量)的富硒产朊假丝酵母,在100 L发酵罐规模水平研究了菌体培养、无机硒的添加工艺,结果表明指数连续流加是富硒酵母最佳的培养方法,在补料的同时添加125 mg/L的无机硒(Na_2SeO_3)和3 mmol/L的半胱氨酸,菌体浓度、胞内谷胱甘肽浓度及无机硒转化率分别达到72 g/L、1080 mg/L和86%,胞内有机硒含量达到1493 μg/g,研究结果对富硒酵母大规模工业化生产具有一定的实践指导意义。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定食品中有机硒和无机硒

目的:建立食品中有机硒含量和无机硒含量的测定方法。方法:50%盐酸提取食品中无机硒成分,通过硝酸-高氯酸混合酸体系进行消解,测定无机硒含量。有机硒含量通过总硒与无机硒含量差减法获得。结果:硒的检出限是0.0028 mg/kg,线性范围是(0~10)ng/m L。经回收实验与实际样品检测,总硒加标回收率为83.82%~101.46%,相对标准偏差(RSD)为0.75%~3.79%;无机硒加标回收率为97.95%~102.47%,相对标准偏差(RSD)为0.64%~4.10%。结论:该测定方法线性范围广、重复性好、检出限低,适合用于测定食品中有机硒及无机硒含量。     

几种提取溶剂对富硒香菇中有机硒含量测定的影响

目的研究不同提取溶剂对富硒香菇中的有机硒含量测定的影响。方法采用纯水、无水乙醇及盐酸(6 mol/L)3种不同提取溶剂对香菇中无机硒进行提取,通过测定总硒和无机硒,两者差减而得到有机硒含量,探讨不同提取体系对有机硒含量测定的影响。结果用乙醇提取,仅有一半有机硒被提取出,无法准确测定有机硒含量;盐酸(6 mol/L)提取,会导致无机硒测定结果略为偏高且操作较繁琐,不适合香菇中有机硒的测定;直接用水提取,测定结果比较符合香菇中有机硒的含量。直接用水提取方法的测定检出限0.039μg/L,无机硒加标回收率为99.26%~102.72%,精密度测定相对标准偏差小于4.81%。结论水提取测定无机硒,通过总硒相减得到有机硒含量,对于香菇中有机硒含量测定,该法简单、快速,是的一种较为理想的方法。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒发芽糙米中的硒含量

对氢化物发生-原子荧光光谱法(HG-AFS)测定富硒发芽糙米硒含量的方法.研究表明:其检出限为0.2μg/L,相对标准偏差RSD为0.94%,平均回收率为99.74%,精密度高、稳定性好、简便快速,适合于富硒发芽糙米中硒的定量分析.通过测定采用不同浓度亚硒酸钠溶液富硒处理的发芽糙米的总硒、有机硒和无机硒含量,确定选择硒浓度为50 mg/L的溶液富硒处理后的发芽糙米品质较好.     

氢化物-原子荧光光谱法测定鸡蛋中的硒

建立了测定鸡蛋中总硒和有机硒的方法,蛋清通过三氯乙酸沉淀脱除蛋白,蛋黄通过聚乙二醇脱脂、三氯乙酸沉淀脱除蛋白后,经微波消解后直接测定鸡蛋中总硒和有机硒含量。结果表明,富硒鸡蛋样品中硒主要以有机硒形态存在,通过3%聚乙二醇脱脂, 15%三氯乙酸沉淀蛋白,可实现有机硒与无机硒的有效分离,该方法线性范围在0～20μg/g之间,无机硒检出限为0.002μg/g,方法加样平均回收率为81.6%～86.3%,相对标准偏差(rSD, n=3)为0.64%～2.6%。该方法操作简单、灵敏度高、回收率好,适合富硒鸡蛋总硒和有机硒的测定。     

石墨炉原子吸收法测定富硒酸奶中有机硒

采用超声波破碎,离心、透析的方法将有机硒与无机硒分开,利用微波消解法进行样品消化,减少了消化过程中硒的损失。利用石墨炉球子吸收法对富硒酸奶中有机硒的含量进行测定。用1％Ni（NO3）2作为基体改进剂,灰化温度为900℃,原子化温度为2200℃时,测定甯硒酸奶中有机硒含量,该方法检出限为2．5μg/L,精密度为3．24％～8．27％（RSD）,加标回收率为98．5％～101.3％。该法具有简便、快速、灵敏、稳定、准确等优点,适于富硒酸奶中有机硒的分析测定。     

古尼虫草富硒发酵条件优化

利用液体发酵技术,对古尼虫草进行富硒发酵,开发新的有机硒化物食品添加剂。筛选古尼虫草富硒发酵中最佳硒浓度,得出亚硒酸钠的最佳质量浓度为7μg/m L;利用单因素试验和正交试验对古尼虫草富硒发酵营养条件和培养条件进行优化,得出最优发酵条件为蔗糖6%,蛋白胨0.6%,KH2PO40.3%,Mg SO40.25%,培养基p H 6.0,培养温度25℃,接种量8%。经验证试验得出,古尼虫草生物量为(11.657±0.134)g/L,富硒率为(78.33%±0.67)%,与对照组相比【(11.067±0.224 g/L),(69.30%±0.43)%】分别提高了5.32%和13.03%。本研究为开发新的有机硒化物食品添加剂提供一途径。     

蛹虫草富硒研究

研究了蛹虫草液体发酵富硒过程中最佳的营养条件,确定蛹虫草富硒的最佳培养基配方为：大豆粉30g/L,蔗糖40g/L,KH2PO41.5g/L,硫胺素50μg/L,Na2SeO312 mg/L,pH6.0.     

优化碳源及Na_2SeO_3补料策略强化发酵生产富硒酵母

为提高富硒酵母的生物量及富硒水平,在7 L发酵罐规模研究了碳源和无机硒的不同补料方式对富硒啤酒酵母发酵性能的影响。结果表明,采用碳源指数流加(μset=0.19 h-1)能够获得较高的生物量(32.9 g/L)及生产强度[1.50 g/(L·h)],相对碳源恒速流加发酵分别提高了15.8%和27.1%;在对数期采用两阶段恒速流加无机硒的策略可以实现高生物量和高硒含量的相对统一,发酵22 h后,酵母干重可达31.5 g/L,干酵母硒含量和有机硒转化率分别达到602.3mg/kg和72.0%,相对无机硒恒速流加发酵分别提升了13.2%和8.1%。     

雪莲菌富硒条件优化及体外抗氧化活性分析

利用雪莲菌吸收和转化无机硒为有机硒,旨在通过优化富硒条件制备菌活性和有机硒占比较高的富硒雪莲菌。针对不同优化需求,确定不同优化指标,从而选择最佳的富硒条件。优化后富硒温度为28 ℃、富硒时间为24 h、亚硒酸钠添加时间为雪莲菌接种后3 h;通过摇床培养,进行梯度驯化富硒;以透析后总硒含量占比、生物量、富硒率（selenium enrichment rate,SER）和有机硒占比（organic selenium percentage,OSP）确定梯度富硒底物浓度为3、6、9、12、15 μg/mL。在最优富硒条件下所制备的富硒雪莲菌的总硒含量（total selenium content,TSC）为（2 194.41±58.49）μg/g,有机硒占比为（84.57±1.45）%。通过抗氧化活性测定发现富硒雪莲菌的抗氧化活性极显著高于雪莲菌（P＜0.001）。     

氢化物发生-原子荧光法测定鸭蛋中无机硒和有机硒

建立鸭蛋中有机硒和无机硒的测定方法,采用pH8.6的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液提取,硫酸铵沉淀后获得无机硒溶液,采用原子荧光法测定其中的总硒和无机硒,采用差减法计算有机硒的含量。结果表明,在优化的条件下,方法无机硒检出限0.003mg/kg,线性范围2.0～50μg/L,相对标准偏差3.21%,方法的加标回收率为82.8%～91.0%。该方法简便、灵敏,可为鸭蛋中有机硒和无机硒的测定提供了一种完善检测方法。     

富硒农产品中有机硒的分离与测定

目的建立富硒农产品中总有机硒的分离与测定方法。方法通过粉碎、均质、离心及环已烷萃取将富硒农产品中的有机硒与无机硒分离,分离后的试样经消解、赶酸后在最隹仪器条件下用原子荧光光谱法测定总硒和无机硒,差减法计算出总有机硒的含量。结果均质离心分离后,环已烷对水溶性有机硒的萃取率为96%,测定方法回收率为86.68%～113.48%,检出限为0.02 ng/mL,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为5.14%。结论方法操作简单、无需有机硒标准品、检测周期短、样品普适性强,适用于初级农产品、加工农产品、保健品、发酵产品等4类富硒农产品的中总有机硒的测定。     

浸泡及萌发条件对大豆富硒作用的影响

为开发一种新的富硒食品,本文以亚硒酸钠为硒源,以大豆为富硒载体,通过浸泡和萌发处理,实现大豆对无机硒的吸收和转化,制备富含有机硒的大豆产品.本文研究了浸泡温度、浸泡时间、浸泡液中亚硒酸钠浓度、萌发温度及萌发时间对大豆富硒作用的影响.以单因素实验为基础,然后通过正交实验对大豆富硒的最佳工艺条件进行优化,结果表明,大豆富硒的最佳工艺条件为:浸泡时间8h,浸泡温度30℃,萌发时间36h,萌发温度25℃,亚硒酸钠浓度80μg/mL.在此条件下得到富硒大豆产品总硒含量为27.31 μg/g,其蛋白质中的硒含量可达31.95 μg/g.本研究将为富硒食品研究开发提供基础.     

悬浮进样-氢化物发生原子荧光法用于面粉和富硒盐中微量硒的形态分析

为了探索悬浮进样- 氢化物发生原子荧光法直接测定总Se、无机Se 和Se(Ⅵ)的新方法。样品中的总硒以5mL 浓盐酸提取,用悬浮进样- 氢化物发生原子荧光法加以测定;以环己烷萃取分离无机硒和有机硒,水相中的无机硒在浓盐酸量为20%(V/V)的介质中以悬浮进样- 氢化物发生原子荧光法加以测定,而水相中的Se(Ⅵ)在5g/L 亚硫酸钠溶液中以同样的方法加以测定。利用差减法求得有机硒和Se(Ⅳ)的含量。结果表明,硒的检出限(RSN=3)为0.10μg/L,回收率为90.7%～107%,相对标准偏差(RSD,n=5)为0.7%～1.9%。本方法具有准确、操作简易、快速、灵敏度高等优点,可用于小麦面粉、大米面粉和富硒盐中总硒、无机硒和Se(Ⅵ)的测定。     

亚硒酸钠对蛋白核小球藻生长及生物转化的影响

本文研究了亚硒酸钠对海水培养蛋白核小球藻的生长和有机硒转化能力的影响,以及富硒蛋白核小球藻中的主要硒形态。通过分批等量添加2μg/mL至50μg/mL的亚硒酸钠,确定最佳富硒培养浓度,并采用高效液相色谱法检测藻体中亚硒酸钠、硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸三种主要硒形态的含量。结果表明:亚硒酸钠浓度不宜过高,否则蛋白核小球藻的生长受到抑制。硒浓度为2μg/mL时小球藻的生物量较高,有机硒含量达到301.40μg/g,占总硒含量的83.24%;高效液相色谱分析表明在该培养条件下富硒小球藻中有机硒的主要形态为硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸;在测定的三种主要硒形态中未转化的亚硒酸钠仅占23.02%。上述结果说明在海水培养下,小球藻富硒培养的适宜外加硒浓度为2μg/mL,此条件下长势良好,无机硒得到有效转化,有机硒含量较高,可达到富硒要求。