6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系,以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8 法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期,并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此,可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活 APC 相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系,以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8 法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期,并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此,可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活 APC 相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导SW480凋亡及对APC基因表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与APC(肿瘤抑制基因)表达的关系,以探讨6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度6-姜烯酚(0、5、10、15和20μM)分别对SW480进行干预诱导24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用Western-blot检测分析APC蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使SW480细胞增殖周期阻断在G2/M期,并呈浓度依赖性地促进SW480凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了APC表达(p0.05)。因此,可以得出6-姜烯酚可诱导SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活APC相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系，以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h，再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化，CCK8 法测定细胞抑制率，Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期，最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示，与对照组相比，6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期，并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡，进而抑制细胞增殖，而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此，可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖，并且可能与激活 APC 相关，随着这一研究的不断深入，6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物，其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导人结肠癌细胞HT29凋亡及与VEGFR2表达变化的关系

本文通过研究不同浓度6-姜烯酚诱导结肠癌细胞HT 29凋亡及与VEGFR2(血管内皮细胞受体2)不同表达之间的关系,以探讨其可能的抑制结直肠肿瘤相关机制。通过应用不同浓度6-姜烯酚(0、10、20和40μM)分别对体外细胞实验培养的HT29细胞株进行诱导处理24 h,相差倒置荧光显微镜观察细胞形态变化,CCK8(Cell Counting Kit-8)法测定药物诱导后细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同浓度药物干预后细胞凋亡率及凋亡周期变化,最后用Western-blot检测分析VEGFR2蛋白不同表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可呈浓度依赖性地诱导HT29凋亡,并使细胞周期G0/G1期细胞数由49.48%下降到24.39%和17.18%,而G2/M期细胞数由3.44%增加到34.78%和49.54%,进而将细胞周期阻滞在G2/M期,抑制细胞增殖,而且还不同程度地抑制了VEGFR2表达(p0.05)。结果表明,6-姜烯酚主要是通过诱导HT29凋亡进而起到抑制肿瘤细胞增殖的作用,这可能与不同程度抑制VEGFR2有关。     

6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460和HCT116氧化损伤的作用研究

建立结直肠癌细胞氧化损伤模型,加入H_2O_2刺激,通过体外细胞实验研究6-姜烯酚对H_2O_2诱导人正常肠上皮细胞(NCM460)和原位结肠癌细胞(HCT116)氧化损伤的不同作用及可能的分子机制。利用倒置显微镜观察不同浓度6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460和HCT116后细胞形态的改变。CCK8法筛选6-姜烯酚的浓度区间,并测定细胞存活率。Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同分组细胞凋亡。Western-blot检测分析相关凋亡蛋白(Caspase3、PARP1、MCC1、A2F、BCL2)的表达。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可降低H_2O_2诱导的NCM460中Caspase3、PARP1、MCC1、A2F表达,促进BCL2的表达(p0.05),具有抗氧化作用,并促进H_2O_2诱导的NCM460增殖(p0.05),但是在HCT116中。6-姜烯酚却促进Caspase3、PARP1、MCC1、A2F表达,抑制BCL2表达(p0.05),不同程度加强H_2O_2对HCT116的氧化损伤,抑制细胞增殖(p0.05)。因此可以得出6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460及HCT116具有明显不同的相反作用,这一发现可为进一步研究6-姜烯酚抗结直肠肿瘤具体相关机制或通路提供指导意义。     

6-姜烯酚诱导人结直肠癌细胞凋亡及与Bax、BCL2、Caspase3和PARP1基因表达的影响

本文通过体外细胞实验应用6-姜烯酚对HCT116和HT29进行干预,以探讨6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与相关凋亡蛋白(Bax、BCL2、Caspase3和PARP1)表达之间的关系。利用倒置荧光显微镜观察不同浓度的6-姜烯酚干预HCT116及HT29后细胞形态的变化,CCK8法测定不同分组HCT116及HT29抑制率,并绘制细胞增殖曲线,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同分组HCT116及HT29凋亡,Western-blot检测分析凋亡相关蛋白表达情况(Bax、BCL2、Caspase3和PARP1)。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可不同程度地诱导HCT116及HT29凋亡,促进Bax、Caspase3和PARP1蛋白水平表达(p0.05),抑制BCL2蛋白水平表达(p0.05),并增加Bax/BCL2比值比例(p0.05)。因此,6-姜烯酚诱导HCT116、HT29发生凋亡可能是与激活Bax、Caspase3和PARP1的表达以及增加Bax/BCL2比值比例相关,这一发现可为结直肠癌的临床治疗与预防提供有效参考依据。     

洋葱汁对结肠癌细胞SW620株增殖和凋亡的影响

目的:初步探讨洋葱汁对结肠癌细胞株SW620增殖的影响及可能的机制。方法:通过MTT法及对比绘制处理组与对照组生长曲线验证不同浓度洋葱汁对肿瘤细胞增殖的影响;对比观察处理前后的细胞形态及荧光定量PCR检测Caspase-3基因检测洋葱汁对SW620细胞凋亡的影响。结果:通过MTT法检结果表明,不同浓度洋葱汁对结肠癌细胞株SW620均有明显的抑制作用,且其抑制作用随着浓度的升高而明显增强;通过绘制对照组和IC50浓度刺激下的SW620细胞的生长曲线,两者对比表明,IC50浓度刺激下的SW620的生长情况明显受到抑制;通过对比处理前后细胞的形态学观察,细胞基因组DNA变化,初步表明,处理组出现了凋亡现象;通过荧光定量PCR法检测对照组及IC50浓度刺激下结肠癌细胞株SW620中凋亡相关的基因——Caspase-3,结果表明,该基因参比未刺激结肠癌细胞株中Caspase-3的表达量增加10倍以上。结论:通过本研究初步说明了不同浓度洋葱汁对结肠癌细胞株SW620的生长有抑制作用,且随浓度的增加抑制能力增强,其抑制机制可能与细胞凋亡有关。     

Bcl-xl和p53基因在条斑紫菜多糖抑制胃癌BGC-823细胞增殖中的作用

目的:探讨Bcl-xl、p53基因在条斑紫菜多糖抑制BGC-823细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法:将不同浓度条斑紫菜多糖作用于BGC-823细胞,利用MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化、流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果:条斑紫菜多糖能抑制BGC-823细胞增殖及诱导细胞凋亡,并上调p53和降低Bcl-xl表达。结论:条斑紫菜多糖抑制人胃癌细胞增殖、促进凋亡,其机制可能与激活p53、抑制Bcl-xl表达有关。     

瘤果黑种草子总黄酮成分对结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及机制

目的探讨瘤果黑种草子总黄酮成分对人结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及可能的作用机制。方法用不同浓度的瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预的结肠癌细胞株SW480,MTT法检测SW480细胞株的增殖能力,倒置显微镜观察对结肠癌细胞株SW480细胞形态的影响,划痕实验检测对细胞的迁移能力的影响,实时荧光定量PCR检测瘤果黑种草子总黄酮成分对细胞中BECN1、MAPILC3B基因表达的影响。结果瘤果黑种草子总黄酮对人结肠癌细胞株SW480体外增殖的抑制作用明显,并呈浓度依赖性抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,在25μg/mL时达到最大的抑制率,抑制率为81.28%。倒置显微镜观察,用瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预后,人结肠癌细胞株SW480形态学发生明显变化,瘤果黑种草子总黄酮成分可抑制人结肠癌细胞株SW480迁移能力,同时,可上调自噬相关基因BECN1、MAPILC3B的表达量。结论瘤果黑种草子总黄酮成分可抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖、迁移能力,机制可能与能影响细胞中BECN1、MAPILC3B基因表达量有关。     

地皮菜中一种新型水应激蛋白基因的克隆表达及其抗人结肠癌细胞SW480的作用

利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增出地皮菜（Nostoc commune Vauch.）一种新型水应激蛋白（water stress protein,WSP）的基因（GenBank 序列号：KF003026）,连接到原核表达载体pET28a上,测序鉴定后转化入大肠杆菌BL21,获得一种新型水应激蛋白表达工程菌;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达及镍离子亲和层析柱（Ni-NTA）纯化后,得到了带6×His标签、分子质量大小为40 kD的可溶性目的蛋白,称其为重组水应激蛋白1（recombinant water stress protein 1,Re-WSP1）。细胞增殖抑制实验结果表明,Re-WSP1蛋白可以抑制结肠癌细胞SW480的增殖,而对正常结肠上皮FHC细胞无明显作用;DAPI细胞核染色结果表明,该蛋白能够诱导SW480细胞凋亡小体的形成;Western blotting结果显示,Re-WSP1蛋白能够促进Procaspase-3和Procaspase-8的活化剪切。以上结果表明：Re-WSP1蛋白能够明显的抑制结肠癌SW480细胞的增殖,并可能通过Caspase依赖途径诱导SW480细胞凋亡。     

桑叶浸出液抑制MDA-MB-231细胞增殖和抑制Survivin蛋白表达

为了研究桑叶浸出液对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和对凋亡抑制蛋白Survivin的作用。本实验采用体外培养MDA-MB-231细胞,倒置显微镜观察桑叶浸出液作用后细胞形态变化;CCK-8法检测桑叶浸出液对MDA-MB-231细胞增殖的影响;流式细胞仪分析桑叶浸出液对MDA-MB-231细胞凋亡及周期的影响;Western Blot印迹法检测桑叶浸出液对凋亡抑制蛋白Survivin表达的影响。结果表明桑叶浸出液会引起MDA-MB-231生长形态的变化,抑制细胞增殖,增加细胞凋亡数量,且在桑叶浸出液作用后MDA-MB-231细胞的G0/G1期细胞明显高于正常组(p<0.05),同时桑叶浸出液降低凋亡抑制蛋白Survivin的表达,且表达量随着桑叶浸出液浓度的升高而降低。研究表明,桑叶浸出液能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖,促进细胞凋亡及导致G0/G1期阻滞,同时能够降低凋亡抑制蛋白Survivin的表达。     

松口蘑菌丝体蛋白质诱导细胞凋亡

采用深层发酵技术培养菌丝体并提取分离出的蛋白质,进行体外抗人子宫颈癌HeLa细胞增殖及诱导细胞凋亡机理的研究.试验发现松口蘑菌丝体水提液中活性蛋白质TMP在体外具有抑制肿瘤细胞增殖的作用,扫描电镜观察到TMP处理细胞产生明显的凋亡小体,TMP对细胞周期的影响是通过抑制细胞从S到G2M期的转化来抑制HeLa细胞增殖,诱导细胞发生凋亡的.DNA电泳出现以200bp左右为单位的DNA碎片.结果表明采用液体培养方法生产的松口蘑菌丝体蛋白质,具有显著的抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡作用.     

棒曲霉毒素对人胚肾细胞增殖与诱导其凋亡的研究

本文研究了棒曲霉素抑制人胚肾细胞增殖与诱导其凋亡的作用。不同浓度的棒曲霉素作用于人胚肾细胞293后,采用乳酸脱氢酶释放检测棒曲霉素对细胞增殖的抑制作用。通过扫描电镜和荧光显微镜观察了细胞形态学的变化,Annexin V-EGFP/PI标记检测细胞凋亡率,JC-1线粒体膜电位荧光探针检测了细胞线粒体膜电位的变化。实时荧光定量PCR测定了线粒体相关基因FIS1、ASL、SLC25A6、COX17的表达水平。结果表明,棒曲霉素可显著抑制人胚肾细胞293增殖并诱导凋亡,具有明显的量效关系,2.5、5、7.5、10和15μM棒曲霉素对人胚肾细胞293的抑制率分别为8.1%、18.2%、31.0%、42.2%和63.1%;5μM棒曲霉素处理0、3、10、24 h,细胞的存活率分别为94.2%、78.1%、47.4%。5μM和10μM的棒曲霉素处理8h后,细胞凋亡率分别为16.4%,和20.1%。线粒体膜电位和线粒体相关基因的表达水平的变化表明棒曲霉素可能通过线粒体途径引起人胚肾细胞293凋亡。     

二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用

本研究旨在探讨二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用及其机制。采用MTT法检测不同浓度的二氢杨梅素溶液对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜、Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞术检测不同浓度的二氢杨梅素溶液对骨肉瘤细胞形态、凋亡和周期的影响;并进一步采用Western Blot法分析细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。研究结果表明二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,细胞形态发生了明显变化,呈显著的剂量依赖型,其半数抑制浓度（IC50）值为24.41±1.25 μM。细胞周期实验结果表明,经二氢杨梅素处理后,G0/G1期细胞数百分比从60.20%下降到21.50%,而G2/M细胞数百分比从11.60%增加到45.30%,细胞周期蛋白Cyclin B1表达下降引起细胞周期阻滞;此外,抗凋亡蛋白Bcl-2表达和促凋亡蛋白Bax表达的比例显著下降,从而诱导细胞发生凋亡。结果表明二氢杨梅素具有显著的抗骨肉瘤增殖活性,可开发一种潜在的治疗骨肉瘤的功能食品或药物。     

鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞抑制作用

探究鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞的生长抑制能力,并初步确定影响结直肠癌细胞生长的主要原因。选取3株具有代表性的结直肠癌细胞Caco-2、HCT-116、SW480,采用CCK-8法测定细胞生长曲线、硫酸软骨素对癌细胞增殖的抑制能力;以其中一株结直肠癌细胞HCT-116为模型,用流式细胞仪测定其周期和凋亡情况,用细胞核染色法观察处理前后细胞形态,结合caspase-3凋亡酶活力的测定,考察鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞的促凋亡能力,并初步确定作用途径。研究结果表明,鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞Caco-2、HCT-116、SW480的增殖具有一定抑制作用,最高抑制率分别为70.94%、90.00%和75.00%,明显高于阳性对照处理组;处理后,细胞周期G1/G0期比例升高至88.56%,S期比例降低至4.47%,阻滞细胞G1/G0期;同时,使用鲟鱼硫酸软骨素处理细胞后,细胞形态发生变化,出现细胞核固缩以及细胞破碎等现象,细胞主要的凋亡酶活力显著升高,酶活力可达1 645 IU/μg,使细胞发生凋亡,凋亡率可达63.73%。研究结果证明,鲟鱼硫酸软骨素具有促进结直肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖的能力。     

姜黄素对大肠癌细胞Caspase-3和PARP表达的影响

为了探讨姜黄素对LoVo细胞凋亡与凋亡相关蛋白Caspase-3和多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达的影响,明确其治疗大肠癌的生物学基础。用不同浓度姜黄素处理体外培养的人大肠癌LoVo细胞,采用MTT法检测姜黄素对LoVo细胞的增殖抑制作用,倒置显微镜观察姜黄素对LoVo细胞集落形成的影响;Hoechst33258染色法观察细胞凋亡;采用分光光度法检测Caspase-3酶活性;Western blotting检测姜黄素作用前后Caspase-3和PARP蛋白表达的差异。结果显示姜黄素可抑制人大肠癌LoVo细胞的生长増殖,并能抑制细胞集落的形成,降低细胞增殖生存率,激活Caspase-3的表达,呈量效和时间依赖性,20μmol/L以上浓度姜黄素能显著诱导LoVo细胞凋亡,上调Caspase-3和PARP蛋白表达。这表明姜黄素能显著抑制LoVo细胞的增殖并诱导其发生凋亡,其分子机制与调节Caspase-3和PARP的表达相关。     

鼓槌石斛毛兰素诱导人结肠癌Caco-2细胞凋亡

目的:研究毛兰素对人结肠癌Caco-2细胞增殖的抑制作用及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法:采用SRB法检测毛兰素对Caco-2细胞增殖的抑制作用,用Hoechst33342染色法观察细胞的形态学改变,流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3的表达水平。结果:与对照相比,毛兰素能抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖,且抑制率随着药物浓度与时间增加,呈剂量时间效应,48 h半数抑制浓度IC50为0.845μg/m L;毛兰素能诱导Caco-2细胞凋亡,并诱导细胞周期阻滞于G_2期;Caspase-3活性裂解片段表达增高。结论:毛兰素对肿瘤细胞的增殖具有一定抑制作用且通过线粒体途径诱导Caco-2细胞凋亡。     

6-姜烯酚抗肿瘤机制研究进展

癌症的发病率与死亡率逐年递增,严重威胁人类健康。6-姜烯酚是生姜中一种主要活性成分,因其具有安全、低毒的优势成为国内外学者关注的热点,6-姜烯酚具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用,尤其是其抗肿瘤活性日趋成为研究焦点。本文对6-姜烯酚的抗肿瘤作用机制进行综述,主要包括抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期、抑制细胞的迁移和侵袭、影响肿瘤细胞自噬等,以期为6-姜烯酚抗肿瘤的进一步研究、开发和应用提供思路。     

胭脂萝卜天竺葵素抑制人胃癌细胞迁移与侵袭

主要探讨胭脂萝卜天竺葵素对人胃癌细胞(MKN45)迁移侵袭能力的影响及机制。采用不同浓度的天竺葵素处理MKN45细胞,用MTT法、流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell~(TM)小室实验分别检测细胞增殖、周期、迁移和侵袭能力变化,并用蛋白印迹法检测细胞黏附蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达。结果表明,6μg/m L天竺葵素能显著抑制细胞的增殖,迁移和侵袭,并使细胞阻滞在S期。天竺葵素抑制细胞迁移和侵袭的机制可能是促进E-cadherin蛋白的表达和抑制N-cadherin蛋白的表达。