高效毛细管电泳检测植物蛋白食品中的特征蛋白质

植物蛋白广泛应用于食品加工中,相关食品标准迫切需要建立蛋白质定性、定量的检测方法保证食品质量和安全。采用高效毛细管电泳法,对4 种样品中的蛋白质进行检测,并利用指纹图谱软件对样品中所含蛋白种类进行比对,找出同类样品中共有特征峰,以及对不同植物蛋白互相掺假谱图进行比对,通过特征峰及保留时间对掺假物质进行鉴别,为植物蛋白掺假鉴别实验提供科学依据。     

葡萄酒中有机酸和甘油掺伪鉴别检测方法的研究

分析葡萄酒中的有机酸、甘油含量,建立葡萄酒中添加的外源性有机酸和甘油含量的掺伪鉴别检测方法。按照国家标准规定的液相色谱法测定葡萄酒中的有机酸和甘油含量,确定有机酸的特征峰,确定有机酸总量的最低限值,确定甘油含量的最高限值,对有机酸和甘油含量的相关性进行分析;结果显示,未掺假葡萄酒中甘油含量在4.0~13.0 g/L之间,含量超过15.0 g/L,可认为葡萄酒中人为添加了外源性甘油。未掺假干白葡萄酒中有机酸总含量在5.0~7.5 g/L之间,未掺假干红葡萄酒中有机酸总含量在5.5~10.0 g/L之间,而掺假的干白、干红葡萄酒中有机酸总量均低于5.0 g/L;未掺假的干白葡萄酒中有13个特征峰,未掺假的干红葡萄酒中有14个特征峰。结果表明,葡萄酒中有机酸总量低,但是甘油含量过高,可鉴别该款葡萄酒为劣质葡萄酒,有造假的嫌疑;如果缺少有机酸特征峰,则鉴别该葡萄酒为掺假葡萄酒。     

基于稳定氢氧同位素技术的花生油掺假检测技术研究

建立了高温裂解/元素分析-稳定同位素比值质谱联用技术（TC/EA-IRMS）测定油脂稳定氢氧同位素比值（δ2H和δ18O）的方法,并根据氢氧同位素特征开展花生油掺假检测技术研究。对28个花生样品、5个大豆样品和6个油菜籽样品榨油后测定δ2H值和δ18O值,结果发现三种油的δ2H值分布范围分别为-231.50‰~-213.69‰、-183.11‰~-169.53‰和-192.17‰~-175.82‰;δ18O值分布范围为14.06‰~16.77‰、19.77‰~20.98‰和24.31‰~27.45‰;其中花生油的δ2H值与大豆油和菜籽油存在显著性差异（p＜0.01）,模拟实验表明根据氢氧同位素特征可检测花生油中掺入大豆油或菜籽油。通过对氢氧同位素比值的二维分布对比,可以更为全面的评价和鉴别花生油的掺杂掺假情况,为花生油的掺假鉴别提供了研究基础和技术支持。     

凝胶色谱分离-柱后染色法快速鉴别橙汁掺假

采用凝胶色谱(GFC)分离柱后复合考马斯亮蓝染色法,研究了不同地区橙汁中的可溶性蛋白质,建立了橙汁蛋白质按分子量分布的特征指纹图谱。结果表明:橙汁中可溶性蛋白质的凝胶过滤色谱指纹图谱具有4个主要特征峰,分子质量位于7.5×104Da及0.5×104~1.0×104Da。其他果汁及勾兑假果汁的蛋白质图谱不同于纯正橙汁的特征峰图谱,可用于橙汁掺假快速鉴别。该方法干扰少,检测快速,可用于浓缩还原橙汁掺假鉴别。     

扫描电镜和稳定碳同位素比质谱法鉴别马铃薯淀粉中的掺假玉米淀粉

为有效辨别食用淀粉掺假,运用扫描电镜和稳定碳同位素比质谱技术对马铃薯淀粉中掺假玉米淀粉行为进行定性和半定量鉴别。根据马铃薯淀粉与玉米淀粉在颗粒超微形貌上的明显差别,运用扫描电镜清晰辨别出马铃薯淀粉中掺假的玉米淀粉颗粒。当玉米淀粉的掺假量大于10% 时,根据二者在稳定碳同位素比上的自然显著差异,稳定碳同位素比法不仅能够定性鉴别马铃薯淀粉中的玉米淀粉掺假行为,而且依照给出的公式可以估算出掺假玉米淀粉的含量。本法可作为国内淀粉市场上产品质量监督的检测方法。     

砷含量测定在蜂蜜掺假鉴别中的应用

目的建立一种通过检测蜂蜜中砷的含量来鉴别大米糖浆掺假的方法。方法检测并比较大量不同来源的大米糖浆和纯正蜂蜜中砷的含量,同时优化了蜂蜜中砷的检测方法,样品以硝酸-微波消解,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定,内标法定量。结果在0~5.0μg/L范围内线性良好,定量限为10μg/kg,10、15和30μg/kg的添加水平的回收率均在83.7%~109.6%之间,相对标准偏差小于5.9%,并确定了蜂蜜中大米糖浆的阳性判定限,砷含量在15μg/kg以上的蜂蜜为大米糖浆掺假蜂蜜。结论该方法前处理简单,结果准确度和精密度高,纯蜂蜜和大米糖浆的中砷的含量差别明显,可用于蜂蜜中大米糖浆的掺假鉴别。     

一种适用于乳制品基因组DNA快速提取方法的研究

目的对比NaOH裂解法、PBS裂解法以及直接煮沸法3种方法提取乳制品中核酸的提取效果,优化提取条件,确定一种更适用于现场检测、简便快速的的乳制品DNA快速提取技术。方法以牛奶、水牛奶、牦牛奶、羊奶、骆驼奶、以及驴奶6种常见的乳制品为材料,分别用NaOH裂解法、PBS裂解法以及直接煮沸法3种提取方法提取乳制品中的DNA,并根据裂解液用量和裂解时间进行优化,通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析,检测DNA提取的质量和灵敏度。结果 NaOH裂解法能够提取所有物种的乳制品DNA,而且可以在最佳裂解条件下提取模拟掺假混合乳的DNA进行检测,发现其检测限能达到1%的牛奶含量。结论该方法取样量小,成本低,在15 min内即可完成快速提取,为实验室乳制品DNA定性或定量鉴别,以及乳制品的现场掺假鉴别提供了一种快速灵敏低成本的样品前处理技术。     

基于脂肪酸特征指标的鳕鱼肝油掺假鉴定

通过分析鳕鱼肝油中各脂肪酸的相对含量及特征指标变化规律,建立鳕鱼肝油掺假鱼油的鉴定方法。鳕鱼肝油中所含脂肪酸经柱前衍生转化为甲酯后进行气相色谱测定,采用面积归一化法计算各脂肪酸相对总脂肪酸的相对含量。根据多样本脂肪酸相对含量分析结果,找出能有效识别掺假的特征性指标二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）/二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）值和鲸蜡烯酸相对含量,并确定其限度范围,DHA/EPA值为1.40～1.68,鲸蜡烯酸相对含量为7.0%～9.4%。当鳕鱼肝油样品中测得的DHA/EPA值和（或）鲸蜡烯酸相对含量超过此限度时,可初步判定该样品掺假鱼油。为进一步有效识别掺假水平,本研究探索建立一种以DHA/EPA值和鲸蜡烯酸相对含量为坐标的掺假模型,并绘制不同掺假水平的识别分析图,46 批样品经鉴定,有2 批样品疑似掺假25%的鱼油。该鉴定方法准确可靠、直观简便,可用于鳕鱼肝油中掺假鱼油的快速鉴定。     

响应面法优化巴旦木总黄酮提取工艺研究

在单因素试验的基础上,利用响应面法对巴旦木总黄酮提取工艺进行优化。巴旦木总黄酮最佳提取工艺条件为:提取时间为60 min,料液比1∶21(g/m L),乙醇体积分数73%。理论预测值为4.093 mg/g,实际测量值为4.090 mg/g。实际优化的工艺条件与理论预测拟合程度高。     

牛、羊乳粉的DSC热学性质比较及掺假分析

为明确羊乳粉、牛乳粉的热学特征,采用差示扫描量热法（differential scanning calorimetry,DSC）对真空冷冻干燥制备的全脂羊、牛乳粉样品以及高比例掺假（75%、50%、25%）和低比例掺假（10%、5%、3%、1%）牛乳粉的混合羊乳粉样品进行热力学分析。结果表明,全脂羊乳粉和全脂牛乳粉在DSC热学指标上存在差异,全脂牛乳粉相比全脂羊乳粉缺失一个脂肪特征熔融吸热峰b,蛋白质熔融吸热峰c峰值温度和热焓值较低,而乳糖熔化分解峰e热焓值较高。对于掺入不同比例牛乳粉的羊乳粉,通过检测是否存在吸热峰b及其热焓值,可判断样品掺假牛乳粉比例是否在25%以下及判断掺入牛乳粉的量;在不同比例掺假样品中检测乳糖熔化分解峰e的焓值可判断羊乳粉掺入牛乳粉的掺假量。因此,DSC技术可以实现对羊乳粉、牛乳粉热学性质的分析和评价,也可作为乳制品行业质量保证和真实性鉴别的潜在分析工具。     

Detection and quantification of adulteration of durum wheat flour by flour from common wheat using reverse phase HPLC

When common wheat (Triticum aestivum L) gliadins were separated by RP-HPLC, a major doublet peak eluted at 47.20 and 47.94 min. This peak was consistently found to be absent in Durum wheat (Triticum durum Desf) gliadins separated under identical conditions. In Durum wheat gliadins a characteristic small peak eluted at 48.30 min followed at 50.47, 510.37, 52.80 min by larger peaks. The peak area ratio of the peaks eluting at 50.47 and 51.37 min was found to be 2.18 (±0.14). This ratio was found to decrease proportionally on contamination of Durum wheat flour with flour from some common wheat varieties. This ratio alone was not enough to detect and quantify adulteration by all varieties of common wheat. An alternative method was found whereby the peak emerging between 47 and 49 min in the Durum wheat gliadin elution profile was expressed as a ratio of the total protein applied. This ratio was shown to increase when Durum wheat flour was adulterated with flour from common wheat thus enabling quantitative estimation of the level of adulteration. A third method of detecting adulteration of Durum wheat flour is also proposed in which the peak emerging between 47 and 49 min is collected and the protein separated by PAGE. The presence of more than one band of γ/β-gliadins is indicative of adulteration.     

核桃饼粕蛋白肽枸杞杏仁复合饮品的研制

以多肽得率为考察指标,研究核桃饼粕蛋白质的适宜酶解工艺。结果表明,中性蛋白酶在60 ℃,加酶量21 000 U/g,固液比1∶30(g∶mL),pH 9条件下水解核桃饼粕40 min,多肽得率达79%。以感官评分为评价指标,采用混料设计,优化得到核桃蛋白肽枸杞杏仁复合饮品的调配工艺为多肽原液37.48%,复配枸杞汁22.52%,杏仁乳30%,含量为50%的蔗糖10%,用正交试验优化得到核桃蛋白肽枸杞杏仁复合饮品的稳定剂配方为羧甲基纤维素（CMC）0.10%、海藻酸钠0.10%和黄原胶0.10%,按此条件,可用核桃榨油后的核桃饼粕制备获得美味可口、营养丰富和稳定性好的核桃蛋白肽枸杞杏仁复合饮品。     

杏仁蛋白的两级泡沫分离工艺优化

为了研究泡沫分离法提取杏仁蛋白的最佳工艺,在进料pH、进料浓度、鼓泡气速和鼓泡时间对杏仁蛋白分离效果影响的基础上,利用田口实验设计法建立了杏仁蛋白的两级泡沫分离工艺。结果表明,泡沫分离最佳工艺条件为:pH4.0、进料浓度6 g/L、气速400 mL/min,鼓泡时间10 min。在该工艺条件下,一级泡沫分离所得杏仁蛋白的质量分数为75.23%,蛋白回收率为79.48%;二级泡沫分离所得杏仁蛋白的质量分数为84.71%,蛋白回收率为71.19%。实验结果表明,两级泡沫分离法可以作为分离杏仁蛋白的一种新方法。     

我国植物蛋白饮料掺假检测技术研究现状

蛋白饮料掺假现象是影响植物蛋白饮料行业健康快速发展的制约因素之一。本文综述了植物蛋白饮料掺假的主要检测技术,包括光谱技术、聚合酶链式反应技术、质谱技术等,从快速性、经济性、准确性和可靠性比较了这些检测技术的优缺点,以期为植物蛋白饮料掺假鉴别提供参考和依据。     

苦杏仁对肉鸡生长性能和肉品质及肝脏抗氧化能力的影响

通过在肉鸡饲料中添加不同剂量的苦杏仁粉,评价其对肉鸡生长性能、肉品质及肝脏抗氧化能力的影响,探究苦杏仁在畜禽生产中应用及最适添加量,为饲料中抗营养因子的开发利用提供试验依据。试验将100只1日龄AA肉鸡,随机分为4组,每组25只;对照组(C组)饲喂基础全价饲料,低剂量组(L组)饲喂含4.5 g/kg苦杏仁粉的基础全价饲料,中剂量组(M组)饲喂含9 g/kg苦杏仁粉的基础全价饲料,高剂量组(H组)饲喂含17 g/kg苦杏仁粉的基础全价饲料,试验周期为45 d。结果表明,与C组相比,H组肉鸡的终末体重和平均日增重极显著降低(P<0.01),料重比极显著升高(P<0.01),而L组、M组肉鸡的末体重和平均日增重及料重比无显著差异(P>0.05);肌肉放置24 h和48 h后,H组肌肉肉色显著降低(P<0.05),肌肉剪切力极显著增加(P<0.01);L组胸肌粗蛋白质含量显著升高(P<0.05),M组、L组差异不显著(P>0.05)。饲料中添加不同剂量的苦杏仁粉均增强肉鸡肝脏中SOD、CAT和GSH-PX的活性(P<0.05)。试验说明,饲料中添加的低剂量(4.5 g/kg)和中剂量(9 g/kg)苦杏仁粉均可改善肉鸡肉品质和增强肝脏抗氧化性能,其中以添加9 g/kg苦杏仁的效果最佳。而添加高剂量(17 g/kg)的苦杏仁粉虽能增强肉鸡肝脏的抗氧化能力,但会导致肉鸡的生长性能和肉品质降低。     

水产品中溶藻弧菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱快速鉴定方法建立

目的建立水产品中溶藻弧菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的快速鉴定方法。方法以溶藻弧菌标准菌株(CICC 10889)为研究对象,采集不同样品处理方法 (直接涂抹法和甲酸提取法)、激光强度和菌株传代次数的MALDI-TOF MS图谱并加以分析比较,探讨上述因素对方法准确性的影响。将溶藻弧菌标准菌株(CICC 10889)的MALDI-TOF MS图谱主产物(MSP)添加到数据库中,使用36株分离菌株及8株与溶藻弧菌近缘的弧菌标准菌株验证数据库的补充对鉴定结果可信度的影响。结果甲酸提取法处理所得图谱特征峰多、基线平滑、信噪比高,图谱质量优于直接涂抹法;激光强度对MALDI-TOF MS图谱有影响,过高或过低均会导致图谱质量的下降;标准菌株补充数据库后可提高鉴定可信度,分离株的鉴定分值均达到2.300以上;传代次数对鉴定结果没有影响。结论 MALDI-TOF MS方法可将溶藻弧菌准确鉴定到种水平。该方法准确、可靠,可用于溶藻弧菌的快速鉴定。     

基于近红外光谱对婴幼儿配方奶粉中非法添加物的快速鉴别方法

利用近红外光谱技术结合Adulterant Screen算法建立婴幼儿配方奶粉中非法添加物快速鉴别方法。采集婴幼儿配方奶粉样品及非法添加物近红外光谱,建立婴幼儿配方奶粉分类模型及掺假物模型,运用Adulterant Screen算法进行计算分析,建立了婴幼儿配方奶粉中非法添加物的快速鉴别方法。方法对单组份掺杂婴幼儿配方奶粉的识别最低检出浓度为:三聚氰胺0.04%、环丙氨嗪0.05%,尿素、双缩脲及硫脲0.1%,双氰胺0.2%。对于二组分和三组分掺假奶粉在两倍到十倍检出限浓度的准确识别率分别达到了83.3%和50%,对无掺假样品的识别率100%,同时,该鉴别模型可以通过一个模型即可实现快速鉴别多个非法添加物。本研究建立的模型能为婴幼儿配方奶粉提供了一种操作简单、快速、可靠、样品无损的掺假鉴别方法,能有效的运用于掺假鉴别的日常检测工作,为婴幼儿配方奶粉的检测和监管提供强有力的技术支持。     

小麦醇溶蛋白和谷蛋白亚基的高效毛细管电泳分离研究

初步探讨了小麦醇溶蛋白和低分子量谷蛋白亚基（ＬＭＷ－ＧＳ）高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）分离的分辨芳及其重复性。结果显示：利用碱性硼酸钠缓冲液系统及一个改进的毛细管冲洗程序分离麦醇溶蛋白，可获得较高的分辨度和重要性。通常在３０ｍｉｎ内一个品种较易分离出４０个左右醇溶蛋白组分，而且重复分离之间峰迁移时间和峰高的平均相对标准偏差（ＲＳＤ）可分别保持在０．２％和４％左右。利用ｐＨ２．５酸性磷酸缓冲液（含２０     

微波辅助提取巴旦木蛋白工艺优化及其功能性质研究

本文采用微波辅助碱溶酸沉法提取巴旦木中的蛋白质,在单因素实验基础上,采用L₁₆（45）正交试验设计,研究微波预处理功率、微波预处理时间、提取液pH、提取温度和料液比对巴旦木蛋白提取率的影响。结果表明,微波辅助提取巴旦木蛋白的最佳工艺条件为:微波功率400 W、微波时间180 s、提取液pH 9.5、提取温度50 ℃和料液比1:25 g/mL,在此条件下测出的巴旦木蛋白提取率达到46.69%。相较于未经微波辅助提取的巴旦木蛋白,微波处理后蛋白的溶解性、持水性、持油性、乳化性和起泡性分别提升了15.35%、26.07%、26.22%、30.61%和20.53%,而乳化稳定性和泡沫稳定性分别降低了1.05%和13.29%,研究表明,微波处理有助于提高巴旦木蛋白的提取率并改善功能性质。