乌鸡血酶解工艺条件的研究

以新鲜乌鸡血为主要原料,研究了乌鸡血的酶解工艺条件,结果表明对乌鸡血进行间歇式超声破碎处理,其效果比机械破碎效果更好;通过比较AS1.398中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶对乌鸡血酶解作用能力大小,选取AS1.398中性蛋白酶作为酶解用酶;同时在单因素和正交实验基础上,确定了AS1.398中性蛋白酶的酶解最佳工艺条件为:酶解液初始pH7.5,酶加量为8000U/g,酶解温度为45℃,底物浓度为8％,酶解时间6h.此条件下的水解度达到22.22％,血红素含量为0.62mg/mL.     

猪骨蛋白生物活性肽酶法制备工艺的研究

为充分挖掘骨蛋白资源及开发具有保健功能的高附加值骨蛋白深加工产品,本实验以猪骨为原料,以猪骨蛋白质为研究对象,确定了蒸煮猪骨提取骨蛋白的最佳条件为:温度121℃,压力0.1MPa,时间4h;骨蛋白酶解预处理的最佳条件为:温度121℃,压力0.1MPa,时间30min。在此基础上本实验采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及AS1.398中性蛋白酶3种食品级内切蛋白酶对猪骨蛋白进行酶解,以水解度为评价指标,筛选出木瓜蛋白酶为最佳水解用酶,其水解产物具有较高的生物活性肽含量,并通过单因素实验得出其最佳水解条件为:时间5h,底物浓度9%,pH7.0,加酶量8000U/g,温度55℃。     

核桃蛋白最佳酶解条件研究

以水解度为指标,研究五种蛋白酶对核桃蛋白水解作用;结果表明,AS.1398中性蛋白酶为水解核桃蛋白最佳酶,最佳酶解条件为:底物浓度2.5%,E/S为7%,温度40℃,pH7.5,酶解3h;在该实验条件下,AS.1398中性蛋白酶酶解核桃蛋白水解度可达45.37%,水解液仅微苦。     

大豆粕蛋白酶酶解条件和产物分析研究

以水解度为衡量指标,通过正交试验设计,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和As1.398蛋白酶酶解大豆粕的最佳水解条件进行了筛选.试验结果表明:木瓜蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度60℃、时间5 h、酶浓度5%.胰蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%;As1.398蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH6.5、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%.对酶解产物进行超滤和SDS-PAGE电泳分析表明,因酶解条件不同,大豆粕酶解产物中蛋白质和肽的组成及其数量也不同;酶的种类不同,大豆粕酶解产物组成也不同;大豆粕水解度越高,其酶解产物中小分子肽数量越多.     

酶法水解棉籽蛋白的研究

采用pH-stat法测定水解度,探讨了两种蛋白酶分步水解棉籽蛋白的反应条件和影响因素。实验结果表明,先使用碱性蛋白酶Alcalase,在酶加量为750 U/g、水解温度60℃、底物浓度5%、pH为8的条件下水解300 min;灭酶后再加入中性蛋白酶AS1.398,在酶加量8 000 U/g、水解温度60℃、pH为7的条件下再水解100 min;两种酶的最终水解度达到20.08%。     

罗非鱼下脚料酶解工艺的响应面法优化

采用AS．1398中性蛋白酶对罗非鱼下脚料进行水解，利用响应曲面分析法对酶解工艺条件进行优化，最终确定AS.1398中性蛋白酶水解罗非鱼下脚料的最佳条件为：酶浓度=0．56％，温度=53℃，pH=7．1，水解时间t=4h，液固比为3：1，此时水解度为36.2％。     

酶解牛乳酪蛋白制备ACE抑制肽的研究

目的利用酶技术制备酪蛋白源ACE抑制肽.方法以ACE抑制活性为指标,筛选最佳用酶,优化酶解反应条件,并研究酶解过程中水解度和游离氨基酸含量的变化.结果通过对5种蛋白酶的筛选,最终确定AS1.398中性蛋白酶为水解用酶,制备酪蛋白源ACE抑制肽,其最佳反应条件为pH 7、温度45℃、底物质量分数7.5%、酶用量([E]/[S])5%,水解6 h.在酶解过程中,随着时间的延长,水解度略有增加,而游离氨基酸含量大幅度增加.酪蛋白ACE抑制肽的半抑制浓度(IC50值)为0.68mg/mL.结论牛乳酪蛋白用蛋白酶水解可制备高活性的ACE抑制肽,是获得ACE抑制肽的良好来源.     

不同蛋白酶对无糖豆奶粉溶解性的影响

通过在无糖豆奶粉生产过程中添加合适的蛋白酶，采用不同加酶量来控制水解度，研究了Neutrase中性蛋白酶、AS1.398中性蛋白酶和Alcalase碱性蛋白酶对无糖豆奶粉溶解性的影响。结果表明，Neutrase中性蛋白酶在实验添加量范围内，对提高无糖豆奶粉溶解性较AS1.398中性蛋白酶和Alcalase碱性蛋白酶显著；当Neutrase中性蛋白酶加酶量([E]／[S])为0.40％时，豆奶粉蛋白质溶解度指数(PSI)和固形物溶解度指数(DSI)较好，此时豆奶粉中蛋白质的水解度(DH)为4.44％。     

响应面法优化腊肉酶解工艺条件

为探究腊肉最佳酶解工艺,为其进一步深加工奠定理论基础。以川味腊肉为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶及动物蛋白酶对其进行酶解,以水解度(Degree of hydrolysis,DH)为测定指标,确定中性蛋白酶与风味酶的复配酶为最佳用酶;选取中性蛋白酶与风味酶的配比、料液比、加酶量、时间、p H及温度进行单因素实验,再在此基础上,以水解度为响应值,采用响应面法优化工艺条件,确定最佳酶解条件为中性蛋白酶与风味酶配比为1∶2、自然p H(5.9~6.0),加酶量0.35%、料液比1∶2(g/m L)、酶解温度47℃,酶解时间5 h。在此条件下,水解度实测值为8.77%,理论值为8.84%,实测值与理论值相差较小。     

花生蛋白酶水解产物抗氧化活性研究

利用蛋白酶水解花生蛋白并对水解产物的抗氧化活性进行研究.采用中性蛋白酶AS1.398和低温高碱性蛋白酶水解花生蛋白,AS1.398的水解条件为:温度55℃,pH6.5,底物浓度5.0%,酶用量1.0%,水解时间6 h;碱性蛋白酶的水解条件为:温度40℃,pH7.5,底物浓度5.0%,酶用量2.0%,水解时间6 h.在此条件下进行水解、灭酶、离心除去不溶性的成分,水解产物冷冻干燥.酶水解产物的抗氧化活性用油脂的过氧化值进行评价.产物添加到猪油中,65℃恒温保存30 d,每隔一定时间取样测定其过氧化值.Rancimat也用于评价花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性,添加不同的酶水解产物后测定样品的氧化诱导期,用诱导期作为花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性的评价指标.研究结果表明,花生蛋白酶水解产物具有一定的抗氧化性能.     

酶解大豆分离蛋白乳化特性的研究

利用枯草芽孢杆菌AS1．398中性蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解，并利用浊度法测定了不同水解度、不同pH条件下酶解大豆分离蛋白的乳化特性，结果表明：AS1．398蛋白酶对大豆分离蛋白的最大水解度为36％，水解度为9％时乳化活性最大，水解度为3％是乳化稳定性最好。同一水解度时，pH越高，蛋白质的乳化特性越好。水解度为3％、9％、15％的大豆分离蛋白在pH等于或高于5．0时的乳化活性明显地高于原蛋白质，且水解度为3％时乳化稳定性也明显地高于原蛋白质。     

血红蛋白酶法脱色技术研究

为充分改善血红蛋白的感官质量并扩大其应用范围,本实验以猪血为原料,以猪血红蛋白为研究对象,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L,胰蛋白酶,Flavourzyme,AS1398中性蛋白酶,木瓜蛋白酶及胃蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白480min,以产物色泽为评价指标,筛选出木瓜蛋白酶为最佳水解用酶。其酶解液接近无色,透明、清澈,感官质量得到了很大提升。其酶解条件为底物浓度5%,酶与底物比100U/g,温度37℃,pH值6.5。各蛋白酶水解液的色泽由浅至深依次为:木瓜蛋白酶,Flavourzyme,AS1398中性蛋白酶,胰蛋白酶,胃蛋白酶和Alcalase 2.4L。     

Sweet potato protein hydrolysates: antioxidant activity and protective effects on oxidative DNA damage

In this study, sweet potato protein (SPP) hydrolysates were prepared by six enzymes (alcalase, proleather FG‐F, AS1.398, neutrase, papain and pepsin). The antioxidant activities and protective effect against oxidative DNA damage of SPP hydrolysates were investigated. Alcalase hydrolysates exhibited the highest hydroxyl radical‐scavenging activity (IC₅₀ 1.74 mg mL^?1) and Fe²⁺‐chelating ability (IC₅₀ 1.54 mg mL^?1) (P < 0.05). Compared with other five hydrolysates, the hydrolysates obtained by alcalase had the most abundant <3‐kDa fractions. In addition, below 3‐kDa fractions of alcalase hydrolysates showed the highest antioxidant activities and protective effects against DNA damage through both scavenging hydroxyl radicals and chelating Fe²⁺, which was probably because of the increase in several antioxidant amino acids, such as His, Met, Cys, Tyr and Phe, as well as the hydrophobic amino acids. The results suggested that enzymatic hydrolysis could be used as an effective technique to produce high value‐added peptides products from SPP.     

酶水解大豆蛋白物理化学性质的综合表征

大豆分离蛋白分别用AS1.398中性蛋白酶和黑曲霉3.4310酸性蛋白酶在不同条件下水解后,测定其水解度(DH)、三氯乙酸(TCA)溶解度、等电点(IP)溶解度,以及不同分子量区段的相对含量等13个参数.通过主成分分析将这些参数线性组合为4个主成分,但是中性蛋白酶和酸性蛋白酶水解产物参数在主成分中的组合方式不同.以主成分为指标对全体样品进行聚类分析时,两种酶水解产物各自聚为一类;中性蛋白酶和酸性蛋白酶的水解产物单独进行聚类分析则分别得到5个和4个子类,其中包括水解条件差别较大的水解产物,说明水解工艺参数之间存在某种协同或互补效应.     

Production of low antigenic cheese whey protein hydrolysates using mixed proteolytic enzymes

This study examined the effect of different proteolytic enzymes on the production of cheese whey protein (CWP) hydrolysates with low antigenicity. Four enzyme combinations (1:1) trypsin + papain W‐40 (TP), trypsin + neutrase 1.5 (TN), papain W‐40 + protease S (PP) and papain W‐40 + neutrase 1.5 (PN) were added at the rate of 1% of the CWP and it was incubated for 15, 30, 60, 90, 120 and 180 min at 50 °C. CWP hydrolysis and its non‐protein nitrogen concentrations were higher with TP and TN compared with PP and PN at all incubation times. The SDS‐PAGE revealed complete removal of α‐lactalbumin (α‐LA) and β‐lactoglobulin (β‐LG) from hydrolysates produced by trypsin‐containing enzyme mixtures. Reverse‐phase HPLC analysis ascertained the CWP hydrolysis and SDS‐PAGE results. The lowest antigenicity in CWP hydrolysates was observed with the use of trypsin‐containing enzyme mixtures compared with other enzyme combinations. Present results suggested that TP and TN combinations were the most effective for CWP hydrolysis for the removal of β‐LG from CWP. Further research is warranted to identify the peptides in CWP hydrolysates produced with these enzyme combinations that may help enhance the utilisation of whey protein in human food. Copyright © 2007 Society of Chemical Industry     

高静压协同酶法处理对白果蛋白抗原性的影响

本文研究了高静压结合酶解处理对白果蛋白抗原性的影响,分别采用4种蛋白酶水解白果蛋白,水解前分别采用不同压力的高静压对白果蛋白进行预处理,酶解产物水解率和分子量采用OPA法和SDS-PAGE测定,致敏性采用western-blotting和ELISA法测定。结果表明,木瓜蛋白酶,碱性蛋白酶或胃蛋白酶为水解酶时,高静压能显著提高白果蛋白的水解率和降低其致敏性;而中性蛋白酶为水解酶时,白果蛋白的水解和脱敏效果很差,即使高压处理也未见明显提高。木瓜蛋白酶或碱性蛋白酶在处理压力为300 MPa时,而胃蛋白酶在400 MPa时,其水解和脱敏效果最好,在此条件下白果蛋白能被水解为分子量小于15 ku的多肽,95%以上的白果蛋白致敏性能被消除,酶解产物中致敏蛋白条带全部消失。因此,高静压处理能明显提高蛋白酶对白果蛋白的水解效率和脱敏效果,但是取决于选择的蛋白酶种类和处理压力的大小。     

Evaluation of bitterness in enzymatic hydrolysates of soy protein isolate by taste dilution analysis

ABSTRACT:  Although enzymatic hydrolysates of soy protein isolate (SPI) have physiological functionality, partially hydrolyzed SPI exhibits bitter taste depending on proteases and degree of hydrolysis (DH). To determine proteolysis conditions for SPI, it is important to evaluate bitterness during enzymatic hydrolysis. Taste dilution analysis (TDA) has been developed for the screening technique of taste-active compounds in foods. The objectives of the present study were to evaluate bitterness of enzyme-hydrolyzed SPI by TDA and to compare bitterness of SPI hydrolysates with respect to kinds of proteases and DH. SPI was hydrolyzed at 50 °C and pH 6.8 to 7.1 to obtain various DH with commercial proteases (flavourzyme, alcalase, neutrase, protamex, papain, and bromelain) at E/S ratios of 0.5%, 1%, and 2%. The DH of enzymatic hydrolysates was measured by trinitrobenzenesulfonic acid method. The bitterness of enzymatic hydrolysates was evaluated by TDA, which is based on threshold detection in serially diluted samples. Taste dilution (TD) factor was defined as the dilution at which a taste difference between the diluted sample and 2 blanks could be detected. As DH increased, the bitterness increased for all proteases evaluated. Alcalase showed the highest TD factor at the same DH, followed by neutrase. Flavourzyme showed the lowest TD factor at the entire DH ranges. At the DH of 10%, TD factor of hydrolysate by flavourzyme was 0 whereas those by protamex and alcalase were 4 and 16, respectively. These results suggest that TDA could be applied for the alternative of bitterness evaluation to the hedonic scale sensory evaluation.     

不同蛋白酶水解高温花生粕和低温花生粕及其水解产物抗氧化活性的对比研究

由于高温花生粕中的花生蛋白在高温压榨过程中高度变性,因此在食品工业中蛋白利用率较低。本研究通过对比高温花生粕和低温花生粕经过不同商业蛋白酶(Alcalase 2.4 L,Neutrase,Papain,Protamex及Flavorzyme 500 MG)水解后水解产物特性的蛋白回收率、水解度、分子量分布及抗氧化活性,确定高温花生粕是否适合采用生物酶解的方式利用其中的蛋白质并筛选合适的蛋白酶。结果表明,高温花生粕经不同蛋白酶水解后,其蛋白质利用率均在60.61~67.86%,与低温花生粕相当;水解度及分子量分布方面,高温花生粕Flavorzyme水解产物的DH最高,高达44.92%,且含有较多的3 ku小分子肽及游离氨基酸;此外,高温花生粕不同酶水解产物的DPPH自由基清除活性均高于低温花生粕,这可能是由于高温花生粕水解产物中含有较多具有供电子的小分子肽、游离氨基酸以及高温压榨过程中生成的美拉德反应产物。