鸡肉蛋白酶解条件及产物降解规律

采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白,通过单因素实验和正交实验确定水解鸡肉蛋白的最适条件,并在此水解条件下酶解24 h,研究水解过程中酶解液中游离氨基酸含量和肽分子质量分布的变化规律。结果表明,最佳的酶解条件为:温度45℃,pH6.5,酶用量6.0%,固液比1∶2,水解时间6 h;酶解产物中游离氨基酸种类齐全且含量较高,水解过程中,游离氨基酸总量变化呈增长的趋势,16 h后变化不大;酶解液的肽分子质量都集中在3 000Da以下,酶解过程中大分子质量肽不断减少,小分子质量肽不断增加;酶解24 h后,分子质量小于1 000 Da的小分子肽和氨基酸含量可达97.19%。     

微波水解-液相色谱串联质谱法测定16种氨基酸的含量

目的建立微波水解-液相色谱串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS)测定保健食品中16种氨基酸的含量。方法取适量样品,加入6 mol/L盐酸溶液15 m L,加入适量苯酚,于150℃微波消解4 h,冷却稀释至80℃减压干燥1 h。样品经0.1%甲酸溶解后经Agilent-C_(18)柱分离,以乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,以串联质谱的多反应监测模式进行检测,外标法定量。结果方法的线性范围0.01~0.05 nmol/μL;平均回收率为95.6%~100.7%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于3.0%。结论该方法分析速度快、灵敏度高、准确和重复性好,与现有技术对比,该方法通过微波技术辅助水解,缩短了样品的前处理时间,可适用于保健食品中16种氨基酸的快速检测。     

响应曲面法优化海胆氨基酸提取条件

【目的】优化提取三亚海胆中氨基酸工艺实验条件。【方法】研究利用酸水解法处理海胆样品,超声波辅助水解,单因素变量法考察单变量因素,响应面实验优化水解条件,启用高相液相色谱仪测其氨基酸含量。【结果】海胆氨基酸水解的最佳条件是:水解时间为22h,水解温度为105℃,盐酸用量10mL,超声波水解时间为30min;18种被测氨基酸线性关系良好,相关系数R~2均在0.9998以上,氨基酸总含量为310.98mg/g。【结论】该方法是一项新的实验尝试,实验结果令人满意。     

灵芝蛋白酶解产物分析及其抗氧化活性的研究

采用商品蛋白酶Alcalase和Protamex对灵芝蛋白进行水解,并对灵芝蛋白水解前后抗氧化活性的变化进行了比较。结果表明:灵芝蛋白经过蛋白酶Alcalase和Protamex水解10 h后,氨基酸态氮含量从酶解前的0.15 mg/mL分别增长到0.61 mg/mL和0.54 mg/mL;Protamex酶解得到的游离氨基酸Lys、Val、Leu、Thr、Phe、Ala、Arg、Ile、Cys、His和Try含量较高,Alcalase酶解得到的游离氨基酸Ala、Val、Glu、Leu、Arg、Try和Thr含量较高;灵芝蛋白经过蛋白酶Alcalase和Protamex水解后,清除羟自由基的能力显著增强,水解前.OH自由基清除率为28.70%,水解后分别为39.10%和33.30%;还原力亦显著增强,水解前OD700值为0.21,水解后分别为0.35和0.34。     

响应曲面法优化琼胶水解条件

采用酸水解法对琼胶进行降解并结合苯酚- 硫酸法测定琼胶低聚糖的含量。在单因素试验的基础上,利用响应曲面法优化水解工艺,建立盐酸浓度(X1)、水解时间(X2 ) 和固液比(X3 ) 与水解率( Y ) 之间的数学模型：Y =81.5933＋0.7175X1＋1.8938X2＋2.7313X3－3.1567X12－3.3042X22－3.3092X32－0.6625X1X2＋0.0475X1X3－0.8000X2X3,确定琼胶水解的最佳工艺条件,即盐酸浓度0.105mol/L、水解时间96min、固液比4.5:100(g/mL),在此最佳工艺条件下进行水解,琼胶水解率为81.43%。     

酸水解麦麸蛋白质及氨基酸分析

探讨小麦麸蛋白的酸水解工艺。研究了盐酸浓度、料液质量体积比、水解时间对小麦麸蛋白水解度的影响,并对麦麸蛋白水解液的氨基酸组成进行了分析。在100℃,盐酸浓度4mol/L,料液质量体积比1∶6,水解时间18h的条件下麦麸蛋白的水解度为59.22%。氨基酸分析结果表明,呈甜味和鲜味的氨基酸总和达到53.77%。通过酸水解麦麸蛋白,可获得呈鲜味和甜味氨基酸含量较高的蛋白水解液,为麦麸蛋白水解液的生产提供理论参数。     

正交试验设计优化海胆氨基酸提取条件

优化提取三亚海胆中氨基酸工艺试验条件。研究利用酸水解法处理海胆样品,超声波辅助水解,单因素变量法考察单因素变量,正交试验优化水解条件,启用高相液相色谱仪测其氨基酸含量。结果表明,海胆氨基酸水解的最佳条件是:水解时间22 h、水解温度105℃、盐酸用量10 m L、超声波水解时间30 min;18种被测氨基酸线性关系良好,相关系数R2均在0.999 8以上,仪器检出限在0.000 015 96~0.002 131 07μg/L之间,各氨基酸的RSD在0.15%~1.57%之间,试验样品A(低含量0.1 mg/m L标准液)的氨基酸的回收率在97.9%~103.3%之间,RSD小于1.05%;样品B(高含量1.0 mg/m L标准液)的氨基酸的回收率在99.7%~100.4%之间,RSD小于0.09%,氨基酸总含量为310.98 mg/g。该方法是一项新的试验尝试,试验结果令人满意。     

正交试验设计优化丝绸水解条件

为了正确测定丝绸蛋白质的氨基酸含量,采用正交试验设计法对水解条件进行了优化.通过邻苯二甲醛(OPA)与芴甲氧羰碳氯(FMOC-Cl)在线自动柱前衍生的高效液相色谱法,对丝绸蛋白水解液中的氨基酸含量进行检测分析,从而评判各水解条件下丝绸蛋白水解液中氨基酸的含量变化.通过综合优化分析,得到最适合丝绸的水解条件为4 mol/L盐酸水解液,105℃恒温水解15h.通过对比标准水解条件下与优化后的水解条件下的氨基酸分析结果,除组氨酸、异亮氨酸两种含量较低的氨基酸外,其他氨基酸含量明显高于标准酸条件水解后的氨基酸含量,增幅在5.88％ ～73.13％,总氨基酸含量增加13.68％,能更准确地反应丝绸的氨基酸含量组成.     

酶电极法测定海藻糖含量

对酶电极法测定海藻糖含量进行了研究,实验中首先探索了硫酸和盐酸水解海藻糖的条件.结果表明:海藻糖水解的最佳条件是5%的盐酸在100℃下水解5h或10%的硫酸在100%下水解5h.水解后用酶电极法测定葡萄糖含量,并与硫酸-苯酚法比较,酶电极法测定海藻糖含量基本上消除了杂质的干扰,重现性及精密性较高,是一种理想的测定方法.     

啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖的水解条件的优化

对啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖(用碱-酶法从啤酒废酵母中提取)的水解条件进行了优化.研究表明影响β-(1,3)-D-葡聚糖水解条件的因素顺序依次为:预水解硫酸浓度>水解温度>水解硫酸浓度>水解时间;水解参数为:预水解硫酸浓度12mol/L、水解硫酸浓度2mol/L、水解温度100℃、水解时间24h.此条件下用苯酚-硫酸法测得的β-(1,3)-D-葡聚糖含量为83.1%.     

广西海鸭蛋中氨基酸的含量及组成分析

目的 研究广西区内海鸭蛋氨基酸含量及其组成分析广西海鸭蛋的品质。方法 采用盐酸水解法处理18组海鸭蛋样品,通过日立氨基酸自动分析仪测定16种氨基酸总含量,分析海鸭蛋各氨基酸的含量及其组成。结果 18份海鸭蛋样品中氨基酸的测定结果表明,广西海鸭蛋中氨基酸总量在11.99 g/100 g~13.79 g/100 g范围,各氨基酸占氨基酸总量的比值相近,其中谷氨酸的含量最高, 约占氨基酸总量的13%, 组氨酸含量最低,约占氨基酸总量的2%,其他氨基酸的含量均在3%~9%的范围内。结论 广西海鸭蛋氨基酸总含量有差异,但氨基酸组成较稳定,各氨基酸占氨基酸总量的比值相近,谷氨酸的含量最高,组氨酸含量最低。人体必需氨基酸占氨基酸总量的百分比（E/T）为47.25%,人体必需氨基酸含量与9种非必须氨基酸含量的比值（E/N ）为0.89,符合1973年FAO/WHO提出的理想模式,说明海鸭蛋中氨基酸都属于优质蛋白质,具有很好的营养价值。     

Sequential hydrolysis of swine carcass samples and determination of amino acid concentrations using pre‐column derivatization with phenyl isothiocyanate

Comparing amino acid (AA) retention levels in pig carcass to true ileal digestible AA intake provides an estimate of the marginal efficiency of AA utilization. Accurate analysis of AA levels in the carcass samples is critical. However, the standard 24 h of hydrolysis does not always provide maximum AA values. A study was carried out to investigate the effect of hydrolysis time on AA measurements in pig carcass. Correction factors to standardize AA levels to 24 h of hydrolysis were also determined. Ground carcass samples were hydrolysed with 6 mol litre⁻¹ hydrochloric acid (HCl) in a 110 °C oven for nine different time periods. Pre‐column derivatization with phenyl isothiocyanate (PITC) was used to determine AA concentrations in all of the samples. Hydrolysis time significantly affected (P < 0.001) AA levels. The highest levels (P > 0.05) of valine, isoleucine, serine, glycine, threonine, alanine, arginine, proline, histidine and phenylalanine were not observed with 24 h hydrolysis. Therefore, correction factors and sequential hydrolysis curves are important for these amino acids. In conclusion, the effect of hydrolysis time should be considered in amino acids analysis. © 2000 Society of Chemical Industry     

四川白鹅氨基酸组成分析及营养评价

采用盐酸水解消化法结合全自动氨基酸分析仪对不同年龄、部位和性别的四川白鹅肌肉氨基酸进行测定。结果显示:所有样品中均检出17种氨基酸,其中谷氨酸含量最高,天冬氨酸和亮氨酸其次;比较年龄、性别和部位3个因素,年龄是影响四川白鹅氨基酸含量的主要因素;各种类型的氨基酸含量基本在180日龄～2年时达到最大值,其中必需氨基酸含量高于FAO/WHO的推荐值,但低于全鸡蛋模式;必需氨基酸/非必需氨基酸和必需氨基酸/氨基酸总量比值均高于WHO/FAO的推荐值,属于优质蛋白质;氨基酸评分、化学评分和必需氨基酸指数在150日龄之后达到最高值,其中第一限制性氨基酸均为缬氨酸,第二限制性氨基酸均为苯丙氨酸+酪氨酸。说明四川白鹅具有较高的营养价值及风味,特别是180日龄之后。     

湖南石门县地方品种鸡肉氨基酸组成分析及蛋白质营养价值评价

目的 探究湖南省石门当地7个品种鸡肉中的基本营养成分及氨基酸组成差异,并对其进行蛋白质营养价值评价。方法 采用相关国家标准测定7个品种鸡肉中水分、粗灰分、粗脂肪、粗蛋白含量,并利用高效液相色谱仪对鸡肉氨基酸含量进行测定,基于联合国粮食及农业组织和世界卫生组织(Foodand Agriculture Organization/World Health Organization, FAO/WHO)标准模式谱对不同品种鸡胸肉和腿肉蛋白质分别进行营养学评价。结果 7个品种鸡胸肉、腿肉中水分含量分别为71.20～74.97 g/100 g、72.65～76.22 g/100 g,粗灰分含量分别为0.90～1.38 g/100 g、0.91～1.28 g/100 g,粗脂肪含量分别为0.15～0.64 g/100 g、2.30～7.74 g/100 g,粗蛋白质含量分别为22.29～24.61 g/100 g、19.00～21.80 g/100 g,不同品种、部位间存在差异。7个品种鸡肉均检测出17种氨基酸,均以谷氨酸含量为最高;胸肉氨基酸含量高于腿肉(除壶瓶山鸡),其中青脚鸡胸肉和壶瓶山鸡腿肉的...     

盐鸡卤汁酶解工艺优化及氨基酸组成分析

为解决盐焗鸡多次卤制后卤汁的回收利用问题,采用动物复合蛋白酶对卤制7次后的盐焗鸡卤汁进行酶解。考察了酶用量、酶解温度、酶解时间和pH等因素对盐焗鸡卤汁酶解效果的影响,通过响应面法对酶解工艺进行优化,并分析了水解后卤汁中的氨基酸组成。结果表明:酶法水解盐焗鸡卤汁最优工艺条件为酶用量12000 U,酶解温度48 ℃,酶解时间6 h,pH7.6,此条件下卤汁水解度为14.73%。酶解后卤汁中游离氨基酸种类达到30种,主要包含有8种人体必需氨基酸、鲜味氨基酸和药效氨基酸。与酶解前相比,新增氨基酸5种,氨基酸总量增加了3.67倍,必需氨基酸含量增加了9.56倍。丰富了卤汁水解液的氨基酸组成,为其回收利用提供了基础。     

广西水牛奶和荷斯坦牛奶中蛋白质和氨基酸的含量及组成分析

目的研究广西区内生水牛奶和荷斯坦生牛奶中蛋白质、氨基酸含量及其组成特性,分析水牛奶和荷斯坦牛奶的差异。方法采用盐酸水解法处理牛奶样品,通过氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量,分析水牛奶和荷斯坦牛奶氨基酸的含量和组成;通过凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质含量。结果 18份牛奶样品中蛋白质、氨基酸的测定结果表明,生水牛奶的蛋白质和氨基酸含量均高于荷斯坦生牛奶,而水牛奶和荷斯坦牛奶中各氨基酸含量占氨基酸总量的比值相近。结论该方法为广西生水牛奶和荷斯坦生牛奶的鉴别提供参考。     

组合酶对复合骨素酶解液呈味物质的影响

为探究组合酶对牛骨素和鸡骨素的复合骨素酶解液呈味物质的影响,选取四种组合酶(木瓜蛋白酶+风味蛋白酶、菠萝蛋白酶+风味蛋白酶、碱性蛋白酶+风味蛋白酶、复合蛋白酶+风味蛋白酶)制备复合骨素酶解液,测定四种复合骨素酶解液的水解度、游离氨基酸、呈味核苷酸、味精当量(Equivalent umami concentration,EUC)、肽分子量分布等呈味物质指标,并进行对比分析。结果表明:碱性蛋白酶+风味蛋白酶(Alkaline proteinase+Flavourzyme,A+F)和复合蛋白酶+风味蛋白酶(Protamex+Flavourzyme,P+F)酶解液的水解度最大,分别为10.67%和11.27%;对呈味游离氨基酸组成分析发现,A+F酶解液鲜味氨基酸、苦味氨基酸、无味氨基酸含量最高,A+F和P+F酶解液总游离氨基酸含量最高;四种酶解液中肌苷酸较另两种核苷酸含量高,A+F酶解液总核苷酸含量最高;比较四种酶解液味精当量,A+F酶解液EUC值最大;A+F和P+F酶解液中分子量<1000 Da肽段含量最高,制备复合骨素酶解液的呈味效果更好;主成分分析表明A+F组合酶综合得分最高,A+F组合酶为美拉德反应提供丰富反应底物。     

The preparation of protein hydrolysate from defatted coconut and soybean meals

This study was conducted to determine the effects of temperature, time and concentration of acids on the hydrolysis of coconut and soybean meals. Using 6∼ hydrochloric acid (HCl), the complete hydrolysis of soybean meal was reached after 36 hr at 95°C, while it took only 24 hr to complete the process when 18 N sulphuric acid (H₂SO₂) was used at the same temperature. Coconut protein exhibited some degree of resistance to hydrolysis. Using 10 N HC1 and 18 N H₂SO₂ in two separate tests, it took 48 hr to complete hydrolysis at 95°C. Sulphuric acid caused a considerably greater decomposition of amino acids than HCl during longer periods of reaction with high acid concentration and temperature. Flavour development is a function of the free amino acids released which in turn is a function of acid concentration, reaction time and temperature.     

Whey fermentation by thermophilic lactic acid bacteria: evolution of carbohydrates and protein content

Whey, a by-product of the cheese industry usually disposed as waste, is a source of biological and functional valuable proteins. The aim of this work was to evaluate the potentiality of three lactic acid bacteria strains to design a starter culture for developing functional whey-based drinks. Fermentations were performed at 37 and 42 degrees C for 24h in reconstituted whey powder (RW). Carbohydrates, organic acids and amino acids concentrations during fermentation were evaluated by RP-HPLC. Proteolytic activity was measured by the o-phthaldialdehyde test and hydrolysis of whey proteins was analyzed by Tricine SDS-PAGE. The studied strains grew well (2-3log cfu/ml) independently of the temperature used. Streptococcus thermophilus CRL 804 consumed 12% of the initial lactose concentration and produced the highest amount of lactic acid (45 mmol/l) at 24h. Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CRL 454 was the most proteolytic (91 microg Leu/ml) strain and released the branched chain amino acids Leu and Val. In contrast, Lactobacillus acidophilus CRL 636 and S. thermophilus CRL 804 consumed most of the amino acids present in whey. The studied strains were able to degrade the major whey proteins, alpha-lactalbumin being degraded in a greater extent (2.2-3.4-fold) than beta-lactoglobulin. Two starter cultures were evaluated for their metabolic and proteolytic activities in RW. Both cultures acidified and reduced the lactose content in whey in a greater extent than the strains alone. The amino acid release was higher (86 microg/ml) for the starter SLb (strains CRL 804+CRL 454) than for SLa (strains CRL 804+CRL 636, 37 microg/ml). Regarding alpha-lactalbumin and beta-lactoglobulin degradation, no differences were observed as compared to the values obtained with the single cultures. The starter culture SLb showed high potential to be used for developing fermented whey-based beverages.     

肉杂鸡鸡骨架酶解工艺优化及其分析评价

以肉杂鸡鸡骨架为原料,测定其基本成分和氨基酸组成,对蛋白质进行营养评价,发现鸡骨架是进行酶解的良好原料。从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胰酶和复合蛋白酶中筛选出鸡骨架酶解的最佳用酶,利用单因素实验和响应面法优化了鸡骨架酶解的工艺条件。结果表明:在温度50 ℃、pH7.0、酶添加量7000 U/g的条件下酶解4 h,酶解效率最高,水解度和氮回收率分别为（33.54%±0.02%）和（96.20%±0.03%）,与响应面优化试验回归模型的预测值基本一致。在此基础上制备鸡骨架酶解液,对酶解液氨基酸含量和肽的分子量分布进行检测,发现分子量<1000 Da的肽段占比最高,达到83.25%;必需氨基酸含量高,占氨基酸总量的54.27%,营养价值高,且含有丰富的鲜味氨基酸。由氨基酸滋味活性值（Taste activity value, TAV）可知酶解前的样品味感以甜味、鲜味为主,酶解后以苦味、鲜味为主。该研究可为鸡骨架的高值化利用提供理论依据和数据支持。