硒化低聚氨基多糖对免疫抑制小鼠免疫器官及肠紧密连接蛋白表达的影响

本实验旨在研究硒化低聚氨基多糖（low-molecular-mass seleno-aminopolysaccharide,LSA）对免疫抑制小鼠组织形态、回肠闭合小环蛋白-1（zonula occludens-1,ZO-1）及闭锁蛋白（Occludin）表达的影响。通过腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制模型,测定脏器指数,采用苏木精-伊红染色观察脾脏与空肠组织病理形态,利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析ZO-1、Occludin mRNA的表达水平。结果表明：LSA处理显著缓解了环磷酰胺对小鼠免疫器官的抑制作用（P＜0.05）;与环磷酰胺模型组比较,0.6、0.9 mg/（kg mb·d） LSA组小鼠脾脏结构较清晰,红髓和白髓界限较明显,白髓面积增大,空肠绒毛形态与环磷酰胺模型组相比较为整齐;0.6 mg/（kg mb·d）LSA组的ZO-1、Occludin mRNA表达量显著升高（P＜0.05）。综上,LSA具有一定的免疫调节功能及肠道保护作用。     

裸燕麦球蛋白源多肽对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响

研究裸燕麦球蛋白源多肽（peptide from naked oat globulin,PNOG）对D-半乳糖（D-galactose,D-gal）致衰老小鼠抗氧化能力的影响。采取连续6 周颈背部皮下注射D-gal 120 mg/（kg mb·d）建立小鼠亚急性衰老模型。将60 只小鼠随机分为正常对照组,衰老模型组,PNOG低、中、高剂量治疗组（200、600、1 000 mg/（kg mb·d））以及VC阳性对照组（100 mg/（kg mb·d））,皮下注射同时灌胃给药,每天1 次,连续6 周。6 周后测定小鼠体质量增量、肝及脑的脏器指数;血清中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及过氧化氢酶（catalase,CAT）活力;肝、脑组织中GSH-Px、单胺氧化酶-B（monoamine oxidase B,MAO-B）活力及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果表明：与正常对照组相比,衰老模型组小鼠体质量增加缓慢,脏器指数降低;血清中SOD、GSH-Px及CAT活力均显著降低（P＜0.05）;肝、脑组织中GSH-Px活力显著降低（P＜0.05）,MAO-B活性及MDA含量极显著升高（P＜0.01）。灌胃中、高剂量PNOG后,可使衰老小鼠体质量显著提高,脏器指数增大;与衰老模型组相比,可显著提高血清中SOD、GSH-Px及CAT活力及肝、脑组织中GSH-Px活力,极显著降低MAO-B活力以及MDA含量（P＜0.01）。表明PNOG能有效清除机体内产生的过量自由基,显著提高D-gal致衰老小鼠的抗氧化能力,具有量效关系。     

根皮素对2型糖尿病肾病小鼠的肾保护作用及机制

为探究根皮素对2型糖尿病肾病小鼠肾损伤的分子保护作用及潜在机制,将小鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性药物组（二甲双胍500 mg/kg）、根皮素低、中、高剂量组（100、200、400 mg/kg·d）。造模成功后,各组小鼠灌胃给予相应药物,12周后,观察肾脏肥大指数、肾脏病理形态学变化,测定血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）和尿β2-微球蛋白（β2-MG）、血清白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)等指标,并检测肾组织丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白表达。结果显示：与模型组比较,根皮素中、高剂量组小鼠肾脏肥大指数极显著减小（P<0.01）;HE染色和Masson染色见肾小球体积明显减小、系膜增生明显减少,肾小球和肾间质纤维化明显减轻;血BUN、Scr、IL-1β、IL-18和肾组织MDA含量、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、胶原蛋白Ι（CollagenΙ）、NLRP3、IL-1β和Gasde...     

桑叶生物碱对氧化应激小鼠糖脂代谢异常及肝损伤的改善作用

目的：探究桑叶生物碱对氧化应激所致小鼠糖脂代谢异常及肝损伤是否具有改善作用,旨在为桑叶生物碱的深入利用提供理论依据。方法：采用连续20 d腹腔注射1 000 mg/kg mb D-半乳糖建立小鼠氧化损伤模型,分别对造模成功的小鼠灌胃低（50 mg/ kg mb）、中（100 mg/kg mb）、高（200 mg/kg mb）剂量的桑叶生物碱及抗氧化剂还原型谷胱甘肽（glutathione（GSH）,200 mg/kg mb）,于灌胃第0、4、8、12周末取样,测定各组小鼠空腹血糖、血脂浓度及肝损伤指标的变化。结果：在本实验周期及剂量范围内,与模型组相比,阳性药物组和桑叶生物碱中、高剂量组小鼠的空腹血糖浓度、血浆总胆固醇浓度、甘油三酯浓度,肝损伤指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力均显著下降（P＜0.05）;同时,桑叶生物碱高剂量组与阳性药物组接近,均恢复到正常水平,表明桑叶生物碱对小鼠糖脂代谢异常及肝损伤的改善作用呈现较明显的剂量依赖效应,但无明显时间依赖效应。肝脏组织切片观察结果也显示阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组小鼠的肝脏病变程度明显减轻。结论：桑叶生物碱可以改善氧化应激所致小鼠的糖脂代谢异常和肝损伤,其机制可能与抑制氧化应激的发生发展有关。     

鞣花酸对马兜铃酸I诱导小鼠急性肾损伤的保护作用

目的：研究鞣花酸（ellagic acid,EA）对马兜铃酸I（aristolochic acids I,AAI）诱导的急性肾损伤的保护作用。方法：40?只昆明小鼠（雌雄各半）随机分为健康组、模型组（10?mg/kg?mb?AAI）、EA低剂量组（10?mg/kg mb?AAI＋10?mg/kg?mb?EA）和EA高剂量组（10?mg/kg?mb?AAI＋30?mg/kg?mb?EA）,EA不同剂量组小鼠每天灌胃不同剂量的EA,从第7天开始,腹腔注射AAI建立急性肾损伤模型,然后灌胃给予不同剂量的EA,12?d后处死小鼠;检测肾脏指数、尿蛋白、尿素氮和肌酐水平等肾功能指标;苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）和Masson染色检测肾脏组织病理学变化;检测肾脏内氧化应激指标（包括还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平）,检测小鼠体内炎症因子水平;通过免疫印迹和定量聚合酶链式反应检测肾脏中核因子（nuclear factor,NF）-κB和NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3,NLRP3）通路相关因子的表达。结果：与模型组相比,EA能显著改善肾损伤模型小鼠的各项肾功能指标以及肾脏组织病理学变化,恢复肾组织中氧化应激指标到接近正常水平;此外,与模型组相比,在EA的作用下小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素（interleukin,IL）-1β水平下降,肾脏中TNF-α和IL-1β编码基因的转录水平亦有明显下降;进一步研究发现,与模型组相比,EA能显著下调小鼠肾脏内NF-κB抑制蛋白（inhibitor of NF-κB,IκB）α和NF-κB p65蛋白的磷酸化水平（P＜0.05,P＜0.01）,抑制NLRP3炎性小体各组分（包括NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein,ASC）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-1和IL-1β的转录和翻译。结论：EA对AAI诱导的小鼠急性肾损伤具有保护作用,其机制可能与通过干预NF-κB/NLRP3通路阻断AAI所致的肾脏内炎症反应紧密相关。     

花椒精油对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠糖代谢的影响

目的：研究花椒精油对1型糖尿病机体糖代谢的影响及可能机制。方法：将50 只健康雄性昆明小鼠（KM小鼠）分为空白对照,糖尿病模型组,花椒精油高（15 mg/（kg mb·d））、中（9 mg/（kg mb·d））、低（3 mg/（kg mb·d））剂量组,每组10 只。采用链脲佐菌素诱导建立1型糖尿病模型。空白组和糖尿病模型组灌胃等剂量的大豆油,给药28 d后,检测血清胰岛素、糖化血清蛋白（glycosylated serum protein,GSP）及糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin,GHb）、肌糖原和肝糖原水平;应用实时荧光定量聚合酶链式反应测定肝脏磷酸肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B,PKB）、葡萄糖转运子2（glucose transporter 2,GLUT2）和骨骼肌葡萄糖转运子4（glucose transporter 4,GLUT4）mRNA相对表达量;Western blot检测肝脏PI3K（p110）、PKB和p-PKB（Ser473）的蛋白表达量。实验期间每周测定其空腹血糖浓度及体质量,给药28 d后进行葡萄糖耐量测定。结果：与模型组相比,花椒精油剂量组的摄食量、饮水量、空腹血糖浓度、GHb质量浓度、GSP质量浓度最高分别下降38.91%、35.93%、28.60%、30.76%、37.29%,胰岛素、肝糖原与肌糖原水平最高分别提高22.56%、23.61%、149.75%;PI3K、PKB、GLUT2、GLUT4 mRNA相对表达量最高分别上调87.5%、53.4%、77.05%、133.3%;花椒精油高、中、低剂量组PI3K（p110）蛋白表达量分别上调了3.20、2.51 倍和1.67 倍,p-PKB（Ser473）蛋白表达量分别上调了7.64、6.12 倍和2.73 倍。结论：花椒精油对1型糖尿病小鼠具有降糖效果,其可能机制是激活PI3K/PKB途径,使GLUT2/4移位,促进细胞对葡萄糖的吸收和利用。     

白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠的免疫调节作用

目的:研究白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的免疫调节作用。方法:经超声波辅助热水浸提及Sevage法去蛋白得到白玉菇精多糖(RPHM)。将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、RPHM低剂量组(30 mg/kg bw/d)、RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、RPHM高剂量组(120 mg/kg bw/d),每天同时间段进行灌胃,灌胃15 d,建立环磷酰胺(CPA)免疫抑制型小鼠模型。取小鼠脾脏、胸腺,测定其体重、脏器指数;血清细胞因子、单核-巨噬细胞吞噬能力;外周白细胞、红细胞和血小板计数并观察脾脏、胸腺的形态学。结果:与模型组相比,RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、高剂量组(120 mg/kg bw/d)可明显提升免疫抑制型小鼠的毛色、活动情况、身体状况、食欲、体重、脾脏指数和胸腺指数、单核-巨噬细胞吞噬功能、骨髓造血功能等指标;也可在一定程度上提高免疫抑制型小鼠IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α的水平,并改善IL-6的分泌异常情况;还可明显改善免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的病变,改善结构完整度。结论:RPHM对免疫抑制型小鼠的脾脏和胸腺有明显的免疫调节作用。     

氟苯尼考在鸡蛋和蛋鸡组织中的残留规律及预测模型建立

氟苯尼考是一种被广泛应用于动物养殖过程中的抗生素药物，可能残留于畜产品中，被人类长期食用会对机体造成耐药性、免疫抑制等不良影响。本实验旨在探讨蛋鸡摄入不同剂量氟苯尼考后，鸡蛋及各组织中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的清除规律，建立残留预测数学模型。本实验选取处于产蛋高峰期的罗曼粉壳蛋鸡250 只（350 日龄、体质量（1.97±0.07）kg），随机分为5 组，每组50 只，分别给予氟苯尼考0（对照）、30、60、120、240 mg/（kg mb·d），连续给药5 d。采用液相色谱-串联质谱法测定不同休药时间点蛋黄、蛋清、卵黄、肌肉、肝脏中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的残留含量。结果表明：休药1～3 d时，240 mg/（kg mb·d）剂量组蛋鸡产蛋率与其他处理组相比显著降低（P＜0.05），休药4 d后恢复至对照组水平；氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺在产蛋鸡组织中残留含量分布：蛋黄＞卵黄＞蛋清＞肝脏＞肌肉；不同组织残留氟苯尼考及氟苯尼消除所需休药时间：肝脏＜肌肉＜蛋清＜蛋黄＜卵黄；氟苯尼考给药剂量和休药时间对残留含量影响高度显著（P＜0.001），且给药剂量与休药时间互作效应高度显著（P＜0.001）。休药时间、给药剂量和残留含量之间呈现二元二次回归关系（P＜0.001）。为达到《中国兽药典（2015年版）》所规定的氟苯尼考给药剂量范围（40～60 mg/（kg mb·d）），肌肉等组织需休药1 d、蛋清蛋黄需休药13 d、卵黄需休药21 d。     

黑木耳多糖AAP-10对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

通过热水浸提、分级醇沉的方法,从产自浙江龙泉地区的黑木耳中提取分离得到一种多糖（命名为AAP-10）;采用一系列理化分析手段对多糖进行了初步表征;采用环磷酰胺（cyclophosphamide,CPA）免疫抑制小鼠动物模型,研究AAP-10对小鼠免疫功能的调节作用。结果表明：AAP-10为一种纯度较高、分子质量较均一的多糖;1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱法测得AAP-10主要由葡萄糖、甘露糖组成（物质的量比为6∶1）;高压凝胶色谱法测得AAP-10的重均分子质量为6.56×105 Da。动物实验结果表明：一定剂量的AAP-10给药能帮助小鼠较快克服CPA注射对其体质量及脾脏造成的负面影响,提高CPA免疫抑制小鼠的脾淋巴细胞转化增殖能力,增强CPA免疫抑制小鼠单核-巨噬细胞的吞噬能力和自然杀伤细胞活性;其中低剂量（2.5 mg/（kg·d））及中剂量（5.0 mg/（kg·d））AAP-10给药效果最佳,说明黑木耳多糖AAP-10具有一定的免疫调节作用。     

酪蛋白糖基化对其胰蛋白酶消化物在免疫低下模型小鼠中免疫活性的影响

本研究揭示酪蛋白美拉德糖基化反应对其胰蛋白酶消化物在免疫低下小鼠中免疫活性的影响。通过酪蛋白与乳糖发生美拉德糖基化反应得到糖基化酪蛋白,利用胰蛋白酶消化分别制备酪蛋白消化物和糖基化酪蛋白消化物,并用80 mg/kg mb的环磷酰胺处理小鼠3 d以诱导其出现免疫低下;低(100 mg/kg mb)、中(200 mg/kg mb)和高(400 mg/kg mb)剂量的酪蛋白消化物灌胃小鼠25 d后,测定小鼠免疫器官指数(脾脏指数和胸腺指数)、血清生化指标、血清免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)质量浓度、脾淋巴细胞增殖指数和自然杀伤(natural killer,NK)细胞活力。结果表明,与生理盐水处理的正常组小鼠相比,模型组小鼠的免疫状况低下,其免疫器官指数、血清生化指标、血清中Ig质量浓度、脾淋巴细胞增殖指数和NK细胞活力等指标显著降低(P0.05)。与模型组小鼠相比,中、高剂量酪蛋白消化物灌胃小鼠脾脏指数和胸腺指数分别增加35.9%～66.4%和50.5%～62.9%,血清IgM、IgA和IgG质量浓度分别增加21.6%～30.4%、27.1%～41.8%和37.2%～45.1%,脾淋巴细胞增殖指数及NK细胞活力分别增加34.2%～51.1%和32.1%～90.7%;中、高剂量糖基化酪蛋白消化物灌胃小鼠后脾脏指数和胸腺指数分别增加27.7%～51.9%和39.2%～52.6%,血清IgM、IgA和IgG质量浓度分别增加19.1%～29.0%、21.8%～35.3%和30.1%～41.6%,脾淋巴细胞增殖指数及NK细胞活力分别增加32.9%～41.6%和27.3%～81.1%。酪蛋白消化物和糖基化酪蛋白消化物均可明显减轻由环磷酰胺引起的上述免疫指标水平下降,且酪蛋白消化物比糖基化酪蛋白消化物具有更好的免疫指标水平提升作用。酪蛋白的美拉德糖基化反应会降低酪蛋白消化物对小鼠免疫状况的提升作用。     

植物乳杆菌P9对小鼠功能性便秘的作用及机制

目的：研究植物乳杆菌P9对小鼠功能性便秘的润肠通便作用及其对肠道菌群的影响。方法：将100只BALB/c雄性小鼠随机分成空白组、模型组、植物乳杆菌P9低剂量组(给予0.42 mg/(kg m_b·d)菌粉(活菌数2.0×1011 CFU/g,下同))、中剂量组(给予0.84 mg/(kg m_b·d)菌粉)、高剂量组(给予2.5 mg/(kg m_b·d)菌粉),每组20只小鼠。将相应剂量的菌粉用无菌去离子水配制成菌悬液,按照10 mL/(kg m_b·d)剂量灌胃15 d,空白组、模型组灌胃等量无菌去离子水。实验第16天,模型组、植物乳杆菌P9干预组以洛哌丁胺4 mg/(kg m_b·d)灌胃诱导小鼠功能性便秘,随机选取10只进行排便实验,检测小鼠首次排黑便时间、6 h排黑便量;剩余10只进行小肠运动实验,测定墨汁推进率,并采用16S rRNA高通量测序技术测定小鼠盲肠内容物菌群组成。排便实验结束后模型组、植物乳杆菌P9干预组剩余小鼠持续灌胃洛哌丁胺4 mg/(kg m_b     

桔梗多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节

研究桔梗多糖(PPS80)对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠的免疫调节作用。将60只雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组、桔梗多糖低、中、高剂量治疗组(100,200,400mg/(kg.d))和盐酸左旋咪唑(LMS)阳性组。连续3d腹腔注射环磷酰胺80mg/(kg.d)建立免疫抑制小鼠模型,于给药治疗1周后利用称重法检测胸腺指数和脾脏指数,ELISA法测定血清白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果表明,桔梗多糖能明显增加环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的胸腺指数和脾脏指数,显著提高血清中IL-2和TNF-α的含量并呈剂量依赖性。桔梗多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠具有免疫增强调节作用。     

纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤的改善效果及免疫调节作用

目的：探讨纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤的改善效果及免疫调节作用。方法：雄性Wistar大鼠随机分为5 组,正常对照组（生理盐水灌胃）、酒精模型组（酒精体积分数56%的白酒灌胃：第1周灌胃6 mL/（kg?d mb）,第2周灌胃8 mL/（kg?d mb）,第3周灌胃10 mL/（kg?d mb）,第4～10周灌胃11 mL/（kg?d mb））、纳豆激酶对照组（灌胃530.39 FU/（kg?d mb）纳豆激酶）、纳豆激酶干预组（灌胃530.39 FU/（kg?d mb）纳豆激酶＋酒精）、甘利欣干预组（灌胃200 mg/（kg?d mb）甘利欣＋酒精）;后两组酒精剂量同酒精模型组,实验持续10 周。苏木精-伊红染色观察肝脏组织形态结构,透射电子显微镜观察肝细胞超微结构;测定血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、γ-谷氨酰转肽酶（gamma-glutamyl transpeptidase,GGT）、胆碱酯酶（cholinesterase,CHE）活力;计算脾指数,流式细胞术检测大鼠外周血中CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群和自然杀伤（natural killer,NK）细胞比例。结果：酒精模型组大鼠肝组织形态结构和肝细胞超微结构均出现明显的病变损伤,纳豆激酶和甘利欣干预后得到显著改善。与酒精模型组相比,纳豆激酶干预组和甘利欣干预组大鼠血清ALT、AST、GGT活力显著下降（P＜0.05）,CHE活力有一定上升趋势。与酒精模型组相比,纳豆激酶干预组和甘利欣干预组大鼠脾指数、CD3+CD4+ T淋巴细胞比例、CD3+CD8+ T淋巴细胞比例均显著升高（P＜0.05）,TCRαβ+CD161a+ NK细胞比例有不同程度的上升趋势。结论：纳豆激酶对大鼠酒精性肝损伤有一定改善效果,其机制可能与调节CD4+、CD8+ T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞比例,提高机体免疫调节作用有关。     

兰坪虫草的缓解运动疲劳功能

目的：研究兰坪虫草对小鼠运动的抗疲劳效果。方法：小鼠随机分为5 个实验组,分别为兰坪虫草低剂量组（450 mg/（kg·d））、中剂量组（900 mg/（kg·d））、高剂量组（1 800 mg/（kg·d））以及空白组（蒸馏水）、阳性对照组（西洋参600 mg/（kg·d））,连续灌胃30 d,研究兰坪虫草对小鼠负重游泳时间、血乳酸、血清尿素氮、肝糖原、抗氧化酶、血液相关参数等疲劳指标的影响。结果：各剂量组兰坪虫草均能显著延长小鼠负重游泳时间（P＜0.05）;中、高剂量组可以显著降低小鼠运动后血清尿素氮浓度（P＜0.05）;高剂量组和阳性对照组能显著提高小鼠体内肝糖原的储备量（P＜0.05）;同时,兰坪虫草能提高血液血红蛋白和血糖浓度,明显增加抗氧化酶的活力,降低丙二醛水平。结论：研究证明兰坪虫草具有缓解小鼠运动疲劳的作用。     

乳源酪蛋白糖巨肽抗细胞凋亡干预小鼠溃疡性结肠炎效应研究

研究乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜细胞凋亡的影响。利用恶唑酮诱导小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,采用低、中、高剂量的CGMP组(剂量分别为5、50、500mg/(kg·d))和药物柳氮磺胺吡啶(剂量为40mg/(kg·d))连续灌胃4d,正常对照组和模型对照组每天灌胃相应剂量的超纯水;用HE染色和TUNEL法检测小鼠结肠大体形态损伤和病理组织学及其细胞凋亡变化。结果表明：低、中、高剂量CGMP组均可在一定程度上改善恶唑酮诱导的结肠炎中结肠病理损伤和细胞凋亡表现,尤其以中剂量CGMP组的作用较为明显,与药物治疗组相比不存在显著性差异。因而,证实CGMP作为一种生物活性物质可以通过抗结肠组织细胞凋亡具有抑制溃疡性结肠炎的功能。     

蛤蜊肽的制备工艺优化及其增强免疫活性

目的:以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为原料,研究蛋白肽制备工艺及其增强免疫活性。方法:以蛋白水解度为评价指标,筛选最适蛋白酶,采用单因素实验和响应面试验确定最佳酶解条件;氨基酸分析仪分析蛤蜊肽氨基酸组成;通过小鼠器官/体重比值、小鼠脾淋巴细胞转化实验、血清溶血素实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、NK细胞活性实验评价蛤蜊肽的增强免疫活性。结果:菲律宾蛤仔蛋白肽制备的最适蛋白酶为胰蛋白酶,最佳酶解条件为温度48.4℃,pH8.0,加酶量3795 U/g,料液比1:2,水解时间4 h,该工艺下蛋白水解度达到15.33%,蛋白肽重均分子量为418 Da;其氨基酸组成合理,必需氨基酸占比达到41.48%;经口给予小鼠不同剂量的蛤蜊肽30 d,与空白对照组比较,小鼠的脏器比值无显著影响(P>0.05),低剂量(700 mg/(kg·d))与高剂量(2800 mg/(kg·d))下能显著提高血清溶血素水平(P<0.05),低剂量(700 mg/(kg·d))与中剂量(1400 mg/(kg·d))下能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率(P&l...     

蓝靛果花色苷对高脂血症大鼠肝脏LDLR、ABCG1及ABCA1基因表达的影响

目的：研究蓝靛果花色苷对高脂血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor, LDLR）、三磷酸腺苷结合盒转运体G1（ATP-binding cassette transporter G1,ABCG1）及ABCA1基因表达的影响。 方法：选择2 月龄雄性Wistar大鼠60 只,将大鼠随机分为6 组,分别为基础饲料对照组（ND,1.2 g/（kg·d mb） 生理盐水灌胃）、高脂模型对照组（HFD,1.2 g/（kg·d mb）生理盐水灌胃）、阳性对照组（10 mg/（kg·d mb） 辛伐他汀片灌胃）,蓝靛果花色苷低、中、高剂量组（HFD＋L、HFD＋M、HFD＋H,分别给予4.0、40.0、 120.0 mg/（kg·d mb）的花色苷灌胃）,持续28 d。实验结束后,测定血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、 甘油三酯（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密 度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、载脂蛋白A（apolipoprotein A,Apo-A）及载 脂蛋白B（Apo-B）等血脂指标水平。取大鼠肝脏,利用实时荧光定量聚合酶链式反应测定大鼠肝脏组织中 LDLR、ABCG1、ABCA1 mRNA表达量,Western blot检测LDLR蛋白表达水平。结果：蓝靛果花色苷干预后, 与HFD组相比,花色苷均能不同程度地降低高血脂大鼠血清中TC、TG、LDL-C、Apo-B的含量（P＜0.05或 P＜0.01）,显著升高HDL-C及Apo-A的含量（P＜0.05或P＜0.01）。花色苷各剂量组LDLR蛋白和mRNA水平均增 高,与HFD组比较差异有显著性（P＜0.05）,ABCA1 mRNA和ABCG1 mRNA的表达水平也高于HFD组,尤其是花 色苷中、高剂量组差异明显（P＜0.05）。结论：40.0 mg/（kg·d mb）蓝靛果花色苷具有明显的调节血脂作用,其 作用机制可能是通过上调肝脏LDLR和ABC家族基因的表达,进而调节胆固醇逆转运过程。