桑叶生物碱对肝纤维化小鼠的改善作用及机制

目的：观察桑叶生物碱对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）/Smads信号通路及基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）mRNA表达的调节作用，探讨桑叶生物碱改善小鼠肝纤维化的作用机制。方法：采用腹腔注射体积分数10% CCl4 橄榄油溶液（5 mL/kg mb）联合高脂饮食诱导小鼠肝纤维化模型。造模8 周后，正常对照组和模型组给予蒸馏水，低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/kg mb剂量的桑叶生物碱，阳性药物组给予100 mg/kg mb水飞蓟宾，持续45 d。采用酶联免疫试剂盒测定各组小鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、I型胶原蛋白（collagen I，Col I）及III型胶原蛋白（collagen III，Col III）含量；采用实时定量聚合酶链式反应测定肝组织TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、MMP-13、TIMP-1 mRNA表达水平。结果：与模型组比，灌胃高剂量桑叶生物碱（200 mg/kg mb）的小鼠肝组织中α-SMA、Col I、Col III含量分别降低19.55%、19.93%、13.84%（P＜0.05）；TGF-β1、Smad3、Smad4、TIMP-1 mRNA表达水平分别下降59.04%、56.73%、50.70%、49.09%（P＜0.05），Smad7、MMP-13 mRNA表达水平分别上升48.29%、25.72%（P＜0.05）。结论：桑叶生物碱能改善小鼠肝纤维化，其机制可能是对TGF-β1/Smads信号通路相关因子和TIMP-1、MMP-13的基因表达具有调控作用。     

桑叶生物碱对氧化应激小鼠糖脂代谢异常及肝损伤的改善作用

目的：探究桑叶生物碱对氧化应激所致小鼠糖脂代谢异常及肝损伤是否具有改善作用,旨在为桑叶生物碱的深入利用提供理论依据。方法：采用连续20 d腹腔注射1 000 mg/kg mb D-半乳糖建立小鼠氧化损伤模型,分别对造模成功的小鼠灌胃低（50 mg/ kg mb）、中（100 mg/kg mb）、高（200 mg/kg mb）剂量的桑叶生物碱及抗氧化剂还原型谷胱甘肽（glutathione（GSH）,200 mg/kg mb）,于灌胃第0、4、8、12周末取样,测定各组小鼠空腹血糖、血脂浓度及肝损伤指标的变化。结果：在本实验周期及剂量范围内,与模型组相比,阳性药物组和桑叶生物碱中、高剂量组小鼠的空腹血糖浓度、血浆总胆固醇浓度、甘油三酯浓度,肝损伤指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力均显著下降（P＜0.05）;同时,桑叶生物碱高剂量组与阳性药物组接近,均恢复到正常水平,表明桑叶生物碱对小鼠糖脂代谢异常及肝损伤的改善作用呈现较明显的剂量依赖效应,但无明显时间依赖效应。肝脏组织切片观察结果也显示阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组小鼠的肝脏病变程度明显减轻。结论：桑叶生物碱可以改善氧化应激所致小鼠的糖脂代谢异常和肝损伤,其机制可能与抑制氧化应激的发生发展有关。     

桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道菌群紊乱的调节作用

目的：探究桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道菌群失衡的改善作用,为桑叶生物碱的开发利用提供依据。方法：采用D-半乳糖诱导建立小鼠氧化损伤模型,然后灌胃低（50?mg/kg?mb）、中（100?mg/kg?mb）、高（200?mg/kg?mb）剂量的桑叶生物碱,45?d后测定小肠组织中活性氧（reactive oxygen species,ROS）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）及硫氧还蛋白-1（thioredoxin-1,Trx-1）的水平,高通量测序分析盲肠内容物中菌群的α多样性、β多样性及菌群的结构变化。结果：与模型组相比,桑叶生物碱高剂量组中ROS水平降低了30.34%（P＜0.05）,SOD活力及Trx-1含量分别升高了63.59%、123.75%（P＜0.05）。同时,桑叶生物碱能显著改善肠道菌群的α、β多样性,调节厚壁菌门/拟杆菌门的比例,减少潜在有害菌Lachnospiraceae_NK4A136_group、螺杆菌属、Mucispirillum的相对丰度,增加潜在有益菌乳杆菌属、双歧杆菌属的相对丰度,其中高剂量桑叶生物碱的作用效果最佳。结论：桑叶生物碱可以有效改善氧化应激导致的肠道菌群的多样性下降及结构紊乱,该调节作用可能与桑叶生物碱的抗氧化活性有关。     

桑叶生物碱对高脂饮食诱导小鼠肝损伤的改善作用及机理

目的：探讨桑叶生物碱对高脂饮食诱导小鼠肝损伤的改善作用与机理,为桑叶的科学利用提供参考。方法：用高脂饲料喂饲小鼠的同时灌胃不同剂量的桑叶生物碱,于第4、8、12、16周末检测小鼠肝脏系数和血浆谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）活力;取肝组织进行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变;实时定量聚合酶链式反应测定肝组织炎症因子白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和细胞凋亡因子Bax、Bcl-2 mRNA表达水平。结果：与高脂对照组比,随着桑叶生物碱灌胃剂量的增加和时间的延长,小鼠肝脏系数及ALT、AST活力显著下降（P＜0.05）,肝脏中脂质沉积和脂肪变性得到改善,IL-10、Bcl-2 mRNA表达水平显著上升（P＜0.05）,TNF-α、Bax mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）。200 mg/kg mb桑叶生物碱灌胃16 周能使肝损伤小鼠机体各指标恢复到正常水平。结论：桑叶生物碱对高脂饮食导致的肝损伤有良好的改善作用,其机制可能与调节炎症因子（TNF-α、IL-10）和细胞凋亡因子（Bax、Bcl-2）的mRNA表达水平有关。     

硒化低聚氨基多糖对免疫抑制小鼠免疫器官及肠紧密连接蛋白表达的影响

本实验旨在研究硒化低聚氨基多糖（low-molecular-mass seleno-aminopolysaccharide,LSA）对免疫抑制小鼠组织形态、回肠闭合小环蛋白-1（zonula occludens-1,ZO-1）及闭锁蛋白（Occludin）表达的影响。通过腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制模型,测定脏器指数,采用苏木精-伊红染色观察脾脏与空肠组织病理形态,利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析ZO-1、Occludin mRNA的表达水平。结果表明：LSA处理显著缓解了环磷酰胺对小鼠免疫器官的抑制作用（P＜0.05）;与环磷酰胺模型组比较,0.6、0.9 mg/（kg mb·d） LSA组小鼠脾脏结构较清晰,红髓和白髓界限较明显,白髓面积增大,空肠绒毛形态与环磷酰胺模型组相比较为整齐;0.6 mg/（kg mb·d）LSA组的ZO-1、Occludin mRNA表达量显著升高（P＜0.05）。综上,LSA具有一定的免疫调节功能及肠道保护作用。     

干酪乳杆菌对不同剂量丙烯酰胺诱导大鼠肠道损伤的保护效果

目的：研究干酪乳杆菌对不同剂量丙烯酰胺诱导大鼠肠道损伤的保护效果。方法：105 只雄性 Wistar大鼠,随机分为7 组。正常对照组给予生理盐水灌胃;低、中、高剂量丙烯酰胺组分别给予5、15、 30 mg/（kg·d mb）丙烯酰胺灌胃;干酪乳杆菌干预低、中、高剂量丙烯酰胺组给予2.1×109 CFU/（kg·d mb） 干酪乳杆菌饮品灌胃,同时分别给予5、15、30 mg/（kg·d mb）丙烯酰胺灌胃。实验周期为4 周。末次灌胃后 收集各组大鼠粪便,禁食12 h后麻醉,腹主动脉取血,留取小肠组织。透射电子显微镜观察大鼠小肠组织超微 结构的改变;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血浆中D-乳酸（D-lactic acid,D-LA）和二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）的浓度变化;实时荧光定量聚合酶链式反应检测干酪乳杆菌对大鼠肠道菌群的影响。结果：与正 常对照组相比,中、高剂量丙烯酰胺组小肠紧密连接肿胀,微绒毛排列稀疏,微绒毛长度明显缩短（P＜0.05）; 干酪乳杆菌干预后,大鼠小肠微绒毛排列情况均得到不同程度的改善。与正常对照组相比,中、高剂量丙烯酰 胺组大鼠血浆中D-LA和DAO水平明显升高（P＜0.05）;干酪乳杆菌干预后,大鼠血浆中D-LA和DAO水平显著 降低（P＜0.05）。与正常对照组相比,中、高剂量丙烯酰胺组大鼠粪便中大肠杆菌和粪肠球菌的数量明显升高 （P＜0.05）,双歧杆菌和乳杆菌的数量明显降低（P＜0.05）;干酪乳杆菌干预后,大鼠粪便中大肠杆菌和粪肠球 菌的数量均有不同程度的减少,双歧杆菌和乳杆菌的数量均有不同程度的增加。结论：干酪乳杆菌对不同剂量丙烯 酰胺诱导大鼠的肠道损伤具有一定程度的保护效果,其机制可能与改善肠黏膜屏障功能、调节肠道菌群有关。     

发酵麸皮多糖对大鼠空肠组织抗氧化能力、形态结构和紧密连接蛋白表达的影响

目的：研究发酵麸皮多糖对断奶大鼠空肠组织抗氧化能力、形态结构和紧密连接蛋白表达的影响。方法：将40 只雄性断奶Wistar大鼠随机分为5 组,包括对照组、VC组及发酵麸皮多糖低、中、高剂量组（每天分别灌服生理盐水、100 mg/kg mb VC及20、40、80 mg/kg mb发酵麸皮多糖,灌胃剂量均为0.4 mL）,实验期为21 d。检测大鼠空肠组织中总抗氧化能力（total antioxitant capacity,T-AOC）,过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力以及谷胱甘肽（glutathione,GSH）、8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG）含量;采用苏木素-伊红染色法分析大鼠空肠测定绒毛高度和隐窝深度,计算绒毛高度与隐窝深度的比值;并采用实时荧光定量聚合酶链反应法测定空肠Claudin-1、Occludin和ZO-1 3 种紧密连接蛋白的mRNA表达量。结果：与对照组相比,灌胃40 mg/kg mb发酵麸皮多糖能显著提高断奶大鼠空肠组织中T-AOC、CAT、SOD和GSH-Px活力以及GSH含量（P＜0.05）,显著降低8-OHdG含量（P＜0.05）;提高空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度,降低隐窝深度;提高Claudin-1、Occludin和ZO-1 3 种紧密连接蛋白的mRNA表达量。结论：发酵麸皮多糖可以改善断奶大鼠空肠抗氧化能力和形态结构,提高紧密连接蛋白的表达,起到保护肠道健康的作用。     

鼠尾草酸对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的改善作用

研究了鼠尾草酸（CA）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（UC）的改善作用。小鼠自由饮用含3%DSS的蒸馏水,连续7 d造模。将60只小鼠随机分为5组：空白对照组（CK）、DSS模型组（DSS）、鼠尾草酸低剂量组（CAL）、鼠尾草酸高剂量组（CAH）、美沙拉嗪组（PC）。通过小鼠体质量变化、疾病活动指数（DAI）评分、结肠组织病理学和肠道通透性变化评估CA对UC小鼠的干预作用。通过测定结肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性、超过氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达及肠道菌群组成的变化探讨可能的影响机制。与DSS组相比,CA干预降低了UC小鼠的质量损失和DAI评分、改善了结肠组织病理损伤。同时,CAL和CAH组结肠组织MPO活性显著降低、MDA含量分别降低了13.75%、70.00%(P<0.05),SOD活性分别升高了6.12倍、9.62倍（P<0.05）,肠道通透性显著降低、ZO-1和Occludin蛋白的表达得到恢复。50 mg/kg mb的CA灌胃提高了厚壁菌门和拟杆菌门的丰度比值,恢复了DSS诱导的U...     

桑叶生物碱对四氯化碳联合高脂饮食诱导的小鼠肝纤维化的改善作用

目的:探讨桑叶生物碱对四氯化碳(CCl_4)联合高脂饮食诱导的小鼠肝纤维化的改善作用,为桑叶的科学利用提供依据。方法:采用腹腔注射体积分数10%CCl_4橄榄油溶液(5 mL/kg mb)联合高脂饮食,持续8周,建立小鼠肝纤维化模型。造模结束后,小鼠灌胃低(50 mg/kg mb)、中(100 mg/kg mb)、高(200 mg/kg mb)剂量的桑叶生物碱及阳性药物水飞蓟宾(100 mg/kg mb),连续45 d。观察各组小鼠体质量、肝脏指数变化;测定小鼠血脂、血浆肝功能相关指标和肝纤维化标志物含量;苏木精-伊红染色观察小鼠肝组织病理学变化。结果:与模型组比较,阳性药物水飞蓟宾和桑叶生物碱各剂量组小鼠的肝脏指数、血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活力,总胆红素、直接胆红素浓度,血浆胆固醇、甘油三酯含量,肝纤维化标志物透明质酸、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原质量浓度均有所下降;总蛋白、白蛋白质量浓度均显著上升(P0.05);体质量虽有所增加,但与模型组差异不显著(P0.05);此外,桑叶生物碱高剂量组与阳性药物组之间结果差异不显著(P0.05),但均未恢复至正常水平。肝脏病理组织切片图像显示,阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组肝脏病变程度明显减轻。结论:桑叶生物碱对CCl_4联合高脂饮食诱导的小鼠肝纤维化具有改善作用,且与水飞蓟宾的效果相似。     

桑叶生物碱粗提物对D-半乳糖诱导的小鼠蛋白氧化损伤的改善作用

目的:探讨桑叶生物碱改善小鼠蛋白氧化损伤作用效果与机理,旨在为桑叶生物碱的开发利用提供理论依据。方法:采用D-半乳糖(D-galactose,D-Gal)诱导建立小鼠氧化损伤模型,灌胃不同剂量的桑叶生物碱,于第8周末测定小鼠血浆蛋白羰基(protein carbonyl,PCO)、晚期蛋白氧化产物(advanced oxidation protein products,AOPP)、3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、醌氧化还原酶1(NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1)活力,实时荧光定量聚合酶链式反应测定肝脏组织SOD、GSH-Px、NQO1、核因子E2相关因子2(nuclear erythroid related factor 2,Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch like ECH-associated protein-1,Keap1)mRNA表达情况。结果:与模型对照组相比,桑叶生物碱高剂量组(200 mg/kg mb)小鼠血浆中PCO、AOPP、3-NT水平分别降低36.43%、61.81%、58.13%(P0.01);血浆中的SOD、GSH-Px、NQO1活力分别提高48.89%、167.17%、85.12%(P0.01)。同时,桑叶生物碱高剂量组肝脏中SOD1、SOD2、GSH-Px、NQO1、Nrf2 mRNA相对表达量分别增加96.96%、94.26%、116.71%、101.51%、63.01%(P0.01),Keap1 mRNA相对表达量下降33.54%(P0.01)。结论:桑叶生物碱可能通过调控Nrf2/Keap1氧化应激信号通路实现对D-Gal诱导的小鼠蛋白氧化损伤的保护作用。     

壳寡糖对酒精诱导的大鼠肠道损伤的干预作用

目的：研究壳寡糖（chitooligosaccharide,COS）对慢性饮酒诱导的肠道损伤的干预作用。方法：将Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、COS低剂量组、COS中剂量组和COS高剂量组5 组,除空白对照组,其余各组通过连续42 d灌胃4.5 g/kg mb酒精构建肠道损伤模型,COS组酒精灌胃前灌胃COS。结果：与模型组相比,COS可以显著改善大鼠小肠平滑肌伸缩性（P＜0.05）,恢复小肠健康水平,降低血浆中D-乳酸水平、二胺氧化酶活力及白细胞介素（interleukin,IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-6等促炎因子、丙二醛和蛋白质羰基水平（P＜0.05）以及抑制claudin-4蛋白的基因表达（P＜0.05）,高剂量COS可以显著提高紧密连接蛋白Occludin（P＜0.05）和ZO-1（P＜0.05）的基因表达,中、高剂量的COS可以显著降低小肠组织中炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的基因表达量（P＜0.05）。结论：COS通过提高小肠健康水平、提高肠黏膜屏障、降低炎症反应及减缓氧化损伤,缓解慢性酒精导致的大鼠肠道损伤。     

‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠肠道屏障和肠道菌群的影响

为探讨‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠的肥胖调控作用及其与肠道屏障和菌群的关系，将SD雄性大鼠分为正常饮食组、高脂饮食组以及平阳黄汤低、中、高剂量组（75、150、300 mg/kg mb），建立预防肥胖模型。通过分析大鼠体质量变化、摄食量、脂肪指数、血清指标、肝脏指标和肝脏、结肠组织切片评估‘平阳黄汤’对高脂饮食大鼠的肥胖调控作用；通过分析肠道的病理形态、杯状细胞数量和紧密连接蛋白的表达评估肠道屏障作用；通过分析微生物多样性和菌群结构评估对肠道菌群的影响。结果：高剂量‘平阳黄汤’能极显著降低高脂饮食大鼠的体质量增长量、附睾和肾周脂肪质量（P＜0.01），降低血清血脂、脂肪因子和氧化应激水平（P＜0.01），降低肝脏甘油三酯和总胆固醇水平（P＜0.01），有效调节肝脏的脂质堆积和炎症损伤。同时，高剂量平阳黄汤还显著改善了高脂饮食大鼠结肠的形态，减少绒毛脱落和炎症浸润现象，显著恢复肠道杯状细胞数量，提高闭锁小带蛋白和闭锁蛋白的表达（P＜0.01），有效降低了血清中脂多糖、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平（P＜0.01），有效预防代谢性内毒素和全身慢性炎症，提高了大鼠肠道菌群的丰度和多样性，促进了与肥胖发生相关有益菌的增殖，抑制有害菌的生长。结论：‘平阳黄汤’能通过维护肠道屏障和调节肠道菌群紊乱，有效调控高脂饮食引起的肥胖。     

南极磷虾油对硫酸葡聚糖钠盐诱导溃疡性结肠炎小鼠的抗氧化作用机制

目的：探讨南极磷虾油（Antarctic krill oil,AKO）对硫酸葡聚糖钠盐（dextran sulfate sodium,DSS）诱导溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠的抗氧化作用及其机制。方法：BALB/c小鼠随机分成4 组：对照组、DSS组、低剂量AKO组（L-AKO,0.25 g/（kg mb·d））和高剂量AKO组（H-AKO,0.5 g/（kg mb·d））。通过在小鼠饮水中连续一周添加含质量分数3.5%的DSS诱导小鼠以产生UC。处死小鼠后收集其结肠组织,使用苏木精-伊红染色观察组织切片结构变化,并测定结肠组织中的谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活力,以及白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、内毒素（lipopolysaccharides,LPS）、二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）的水平;利用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative polymerase chain reaction,qPCR）、蛋白免疫印迹（Western blot）进一步测定小鼠结肠中核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）/Keap1信号通路相关基因及关键蛋白表达水平。结果：H-AKO处理不仅可以改善DSS干预后造成的结肠组织损伤,还可以显著提高其抗氧化酶基因（GSH-Px、SOD）的表达（P＜0.05）,显著降低炎症因子和肠道通透性指标（IL-6、TNF-α、LPS、DAO）的水平（P＜0.05）。qPCR结果表明相较于DSS模型组,H-AKO干预除了能提高结肠组织中Nrf2基因表达,还能提高GSH-Px、SOD和HO-1基因表达。Western blot结果显示,AKO处理使UC小鼠结肠Nrf2蛋白水平增加,Keap1蛋白水平表达降低,提示Nrf2/Keap1信号通路被激活。结论：AKO对UC小鼠的抗氧化保护作用可能是通过调节Nrf2/Keap1信号通路相关基因和蛋白表达,增强体内抗氧化酶水平的表达,从而实现改善机体氧化应激损伤、炎症反应和恢复肠道屏障结构与功能。