笃斯越桔中酿酒酵母菌的筛选、鉴定及特性研究

从口感好、自然发酵的笃斯越桔果汁中分离出140株酵母菌.经过对酵母菌产气、产酒精情况的测定以及发酵酿酒后感官评定,筛选出4株酵母菌,分别编号为C13、C18、D07和D15.对这4株酵母菌进行形态学和生理学特征鉴定以及26SrDNA D1/D2区序列分析,最终鉴定出4株酵母菌为同一种菌,即酵母属(Saccharomyces )中的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).结合商业葡萄酒活性干酵母进行比较分析,选择优良菌株D15作为实验菌株,测定其生物特性,结果表明D15具有较好的发酵特性、耐受特性和快速生长特性.D15在20°Bx、pH 3.5笃斯越桔果汁中24℃发酵9d,残糖量为2.8 g/L,酒精度(V/V)为12.5%,可以作为笃斯越桔酒酿造的优选菌株.     

本土葡萄酒酵母的选育及发酵性能

从天津地区采集的不同葡萄品种及葡萄园土壤中,分离出360株酵母,经过菌落特征、细胞形态、生理生化特性鉴定,确定16株为葡萄酒酿酒酵母菌株,并对其发酵特性进行研究,为进一步选育优良的本土葡萄酿酒酵母提供材料和参考.     

野生嗜杀酿酒酵母的分离筛选

研究从水果中分离酵母菌约70株,经过筛选获得了5株嗜杀酵母,建立了切实有效的嗜杀酵母的筛选技术路线和方法.通过形态学特征观察、糖发酵、嗜杀酵母显微鉴定等实验,鉴定这5株嗜杀酵母均为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).通过发酵实验,筛选到1株适宜啤酒发酵、性能良好的嗜杀酵母菌株.     

梨酒酵母的筛选及鉴定

以梨的果皮和梨园土壤作为分离源进行梨酒酵母的分离、筛选,期望得到发酵性能好的适合于梨酒发酵的菌株。首先对酵母菌富集培养和分离,再通过TTC平板一级筛选,杜氏发酵管二级筛选,三角瓶发酵三级筛选,得到菌株YDJ05。实验结果表明该菌株在梨汁中发酵能力较强,产酒精能力较好,即发酵7d产酒率达到8.8%,且残糖较低,产香较好,可作独立的发酵菌株使用。经过26S rDNA D1/D2区序列分析,鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),命名为Saccharomyces cerevisiae YDJ05。     

昌黎赤霞珠葡萄相关酿酒酵母的分离与筛选

以昌黎地区赤霞珠葡萄为样本,从中分离出5种酵母。通过菌落特征、菌体形态及赖氨酸培养基鉴定,初步确定其中4株为葡萄酒酿酒酵母。通过高浓度酒精(10%~18%)、高浓度SO2(100~400mg/L),高糖浓度(10%~60%)和高温(37、42℃)的耐受性实验,初步筛选出两株可耐受14%浓度酒精、300mg/L SO2、50%的葡萄糖浓度及42℃高温的菌株。与市售的两种酿酒酵母进行葡萄酒发酵实验,将所得酒样进行理化分析及感官品评,结果表明菌株a发酵力强,较市售酵母菌发酵后挥发酸含量低,残还原糖含量为0.40g/L,且葡萄酒感官评价最高。最终选出菌株a为赤霞珠葡萄酿酒酵母最佳菌株。     

自然发酵黑莓果酒中降酸酵母的筛选与鉴定

目的:筛选适合果酒同步发酵降酸的优良酵母,为开发果酒提供酵母菌资源。方法:采用高效液相色谱法测定发酵液主要有机酸的种类和含量,将传统的生理生化鉴定方法与分子生物学方法相结合,对筛选的菌株进行鉴定。结果:从黑莓自然发酵果酒中分离出9株菌,通过对分离菌株发酵液的高效液相色谱检测,得到降苹果酸效果明显的1株酵母菌(FM-sc-08),经菌落特征、细胞形态、生理生化特性和分子鉴定,该菌株被鉴定为酿酒酵母。     

甘肃河西走廊葡萄酒产区高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株筛选

以甘肃河西走廊葡萄酒产区成熟葡萄浆果自然发酵过程中分离得到的115 株酵母菌株为出发菌株,采用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物的平板初筛,摇瓶复筛,对高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株进行WL营养培养基和赖氨酸培养基初步分类以及26S rDNA D1/D2区序列分析。结果表明：6 株酵母β-葡萄糖苷酶活性与商业酵母ICV-D254酶活性相似,酶活力可达（51.40±4.74） mU/mL,其中菌株QLFE、MQFEH-1、MQFSC-3、MQFEH-2和MQFSM-3为酿酒酵母属,菌株QLFE-4为梅奇酵母属,与分子鉴定结果一致。     

宁夏玉泉营地区酿酒葡萄酵母菌的分离筛选及分子鉴定

为进一步探究宁夏玉泉营地区酿酒葡萄酵母菌的多样性,更好地开发利用本土葡萄酒产区酵母菌资源,从宁夏玉泉营地区的葡萄园土壤、葡萄果实表皮以及葡萄自然发酵过程中进行酵母菌的分离筛选,对得到的22株酵母菌株运用WL营养琼脂培养基进行初步聚类分类,并采用26S rDNA D1/D2区序列分析法进行菌株鉴定。结果表明,供试菌株共鉴定为6种,分别为大隐球酵母（Cryptococcus magnus）、美极梅奇酵母（Metschnikowia pulcherrima）、葡萄酒有孢汉生酵母（Hanseniaspora vineae）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、克鲁维毕赤酵母（Pichia kluyveri）、东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）。     

冬果梨果酒酵母的筛选及鉴定

以冬果梨作为富集培养基,对野生酵母菌株进行收集、分离,得到980株;采用TTC平板法、耐乙醇性能测定以及产乙醇性能测定共三级筛选,最终筛得一株可耐受18%vol乙醇、乙醇产量达7.79%vol、发酵过程中糖利用率92.75%的菌株L-0301。通过对筛选所得菌株L-0301的形态特征观察、26S rDNA D1/D2区序列分析方法对菌株进行分类鉴定,结果显示,菌株L-0301为酵母亚科酵母属酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）。     

猕猴桃果酒专用酵母的筛选与鉴定

旨在筛选酿制猕猴桃果酒专用酵母,为猕猴桃酒在生产过程中品质改善提供专用菌种资源。通过菌落形态和18SrDNA进行测序鉴定菌株,确定从猕猴桃表面筛选出的3株酵母菌的种属关系,并比较分析三者的发酵力、酒精和二氧化硫的耐受情况,采用3株酵母酿制猕猴桃酒,经陈酿后测定酒的理化指标、甲醇含量及挥发性风味物质,筛选最理想的菌株。通过分子生物学鉴定,3株菌株被鉴定为季也蒙毕赤酵母,其中菌株Q3的发酵力最强,能够耐受酒精体积分数为16%,可耐受SO_2的质量浓度为300 mg/kg,酿制的猕猴桃酒酒精度可达11.54%Vol,VC含量390.82 mg/L,残糖5.35g/L,甲醇含量87.7 mg/L,检测出挥发性风味物质25种。菌株Q3在发酵力、酒精和二氧化硫耐受方面都优于菌株Q1、Q2,能满足工业需求,且菌株Q3酿制的猕猴桃酒品质优良,甲醇含量低,在猕猴桃酒工业中具有良好的运用前景。     

5株酵母菌的系统发育树分析以及发酵性能测定

从四川藏区高原威代尔冰葡萄渣泥中分离纯化出5株酵母,用18S rDNAD1/D2 区域序列,通过序列比对及构建系统发育树分析,通过WL培养基的培养观察和普通光学显微镜观察,并且进一步对5种酵母菌的发酵性能进行测定。结果表明：JH、JH1、JH2、JH3和JH4分别鉴定为葡萄汁有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）、美极梅奇酵母（Metschnikowia pulcherrima）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、解脂耶罗维亚酵母（Yarrowia lipolytica）和异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）。该5种酵母菌均有一定的发酵能力,并且发酵液总酚、还原糖、果糖以及总酸含量等均有不同变化。总体来说,JH2的发酵性能最好。     

两株野生沙棘酵母菌株的分子生物学鉴定及其发酵特性

应用26SrDNAD1／D2区域序列测定和系统发育分析,对从野生沙棘果中分离出的两株酵母菌JHZ3、WKZl-2进行了鉴定。结果表明,其分别为葡萄汁有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）和戴尔凯氏有孢圆酵母（Torulaspora delbrueckii）。对这两株茵发酵特性的研究结果表明,JHZ3和WKZl—2在较强酸性条件下发酵能力强。     

Inhibition of malolactic fermentation by Saccharomyces during alcoholic fermentation under low- and high-nitrogen conditions: a study in synthetic media

The ability of different wine yeast ( Saccharomyces cerevisiae ) to inhibit malolactic bacteria ( Oenococcus oeni ) and the influence of nitrogen were studied using a synthetic grape juice. Malolactic fermentation was induced in fermenting synthetic grape juice or synthetic wines inoculated with different commercial strains of S. cerevisiae. O. oeni was generally inhibited in wines that contained higher concentrations of total SO₂ although many yeast strains only inhibited the bacteria during fermentation under high nitrogen conditions. Yeast produced higher amounts of SO₂ during fermentation under high nitrogen conditions suggesting that nitrogen affected the malolactic fermentation by influencing yeast SO₂ production. However, the production of SO₂ by yeast did not always account for the inhibition of O. oeni , suggesting the presence of other inhibitory mechanisms.     

天然酵母菌株在葡萄酒酿造中的应用研究

以河北产赤霞珠葡萄为原料,用本土天然酿酒酵母菌株Y14和商业酵母菌株F15酿造干红葡萄酒,并采用固相微萃取结合气质色谱的方法对葡萄酒中的挥发性香气物质进行检测。结果表明,本土酵母菌株在发酵能力方面与商业酵母无明显差别,但在不同酵母发酵葡萄酒中的香气成分种类和含量方面具有较大差别,本土酵母菌株Y14在香气成分生成能力方面具有优势。因此,此菌株具有生产本地特色葡萄酒的潜质。     

不同株系赤霞珠葡萄表皮酵母菌的多样性研究

通过采用富集分离方法,从3个赤霞珠株系（R5、ISV-FV5和169）的葡萄果实表皮共分离得到酵母菌36株。利用26S rDNA的D1/D2和5.8S-ITS区序列分析并结合形态学特征对这些菌株进行了多样性研究。共鉴定出3个酵母菌属的4个已知种群,分别为Cryptococcus magnus、Cryptococcus uzbekistanensis、Rhodosporidiobolus ruineniae和Hanseniaspora uvarum。Hanseniaspora uvarum为株系R5所特有,Cryptococcus uzbekistanensis和Rhodosporidiobolus ruineniae为株系ISV-FV5所特有,而Cryptococcus magnus同时存在于株系ISV-FV5和169上。结果表明,不同株系的赤霞珠葡萄表皮蕴含着多种类型的酵母菌资源,而且尽管其生长的客观条件是一致的,但因为株系的不同其所含酵母菌种群的组成上也存在明显的差异。     

天然优良葡萄酒酵母发酵特性研究

以实验室保藏的16株葡萄酒酵母为供试菌株,通过模拟酒精发酵初筛获得发酵力强、产酒度高或产香好的酵母5株。以2株商品酵母为对照,采用杜氏管发酵法研究其对NaCl、SO2、酒精、酸碱、温度和高糖的耐受性。结果表明,所有菌株在SO2200～600 mg/L、葡萄糖400～600 g/L浓度范围内都能发酵产气,且在pH1.5～13.0范围内可生长,其中有5株最高耐NaCl为100 g/L以及22%vol的乙醇、2株耐温最高达70℃。葡萄酒酿造结果显示,菌株Y-6发酵酒度高于2个商品酵母,总酸和挥发酸低,且其发酵葡萄酒具有浓郁的果香且香气持久、口感协调,有望应用于特色葡萄酒生产中。     

酒曲中生香酵母的分离及生理生化鉴定

从酒曲中筛选出11株生香酵母,并对其形态及生理生化特性进行研究,确定其种属。筛出菌后进行发酵测发酵液中总酯含量,选出高产优质菌株。在11株产酯酵母中,产酯最高的菌株是X7,其发酵液总酯含量达到1.78 g/L。     

葡萄酒酵母和酵母营养物对蜂蜜酒发酵的影响

实验研究了 3株葡萄酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)D2 4、C19和CHP在蜂蜜酒发酵过程中的特性 ,初步探讨了蜂蜜酒的发酵工艺流程 ,对成品酒进行了理化指标和感官特征的分析 ,确定了酿造蜂蜜酒的优选葡萄酒酵母菌株为C19,并以C19发酵蜂蜜酒作为对照 ,在发酵过程中分别进行添加两种酵母营养物Helper和酵母浸膏的处理 ,观察各处理的发酵过程变化 ,并分析成酒的品质 ,实验结果表明 :以Helper为酵母营养物且添加浓度为 10g/hL时 ,提高了蜂蜜酒的发酵速度 ,使蜂蜜酒获得了最佳的感观品质。     

Differentiation between fermenting and spoilage yeasts in wine by total free fatty acid analysis

Differentiation between fermenting and spoilage yeasts in wine was estimated by cellular fatty acid profiles. Forty-two strains of yeasts representing 17 genera were grown on a defined liquid medium for 48 h at 25°C in a rotary shaker. After saponification of yeast cells, free fatty acid extracts were analysed by gas chromatography. Multivariate analysis was performed by Principal Components Analysis (PCA) to define clusters of fatty acids and yeasts. Strains were characterised especially by long-chain fatty acids, palmitic (C16) to linolenic (C18:3) acid under aerobic culture. Nevertheless, most of Saccharomyces cerevisiae and also Dekkera bruxellensis (former names D intermedia and Brettanomyces lumbicus) synthesized medium-chain fatty acids, octanoic (C8) acid to dodecanoic (C12) acid. With this method it was possible to differentiate fermenting grape yeasts such as S cerevisiae from spoilage yeasts on the basis of the absence of linoleic (C18:2) and linolenic (C18:3) acids. However, the method seemed unreliable for the identification of strains, more particularly those of species of S cerevisiae.