稻米中镉快速检测金标试纸条的研制

制备一种用于快速检测稻米中重金属镉的金标试纸条。将完全抗原Cd-iEDTA-BSA作为T线,羊抗鼠二抗作为C线,包被于硝酸纤维素膜上,纳米金颗粒标记的7E8G9单克隆抗体包被于金标垫上,组装成金标试纸条。试纸条的灵敏度为0.2μg/mL、重复性良好、与Hg~(2+)有较强交叉,最高共存浓度不得高于1.0μg/mL;与Zn~(2+)有一定交叉,最高共存浓度不得高于10μg/mL;与Cu~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Al~(3+)、Pb~(2+)几乎无交叉:贮存期约为1年。试纸条检测稻米中镉与GFAAS结果一致。成功制备了金标试纸条,并应用于快速检测稻米中重金属镉。     

还原糖快速检测试纸的研制

基于3,5-二硝基水杨酸（3,5-dinitrosalicylic acid,DNS）比色法原理,利用了氧化钙和待测液反应形成的碱性环境及放出的热量,能够促使还原糖与DNS试剂发生显色反应的方法制备了还原糖快速检测试纸。实验对试纸的制备条件及测定范围进行研究,并制备了标准比色卡。实验结果表明,最佳基纸为快速定性滤纸,显色剂质量浓度为6.0?g/L,干燥温度为50?℃。该试纸检测时间仅需5?min,检测范围为0.01～3.00?mol/L,具有操作简单、耗时短、显色迅速、携带方便等优点,适用于食品、发酵、医药等行业中对还原糖的快速半定量检测。     

催化流动注射光度法检测制革废水中的亚硝酸盐

研究了催化流动注射光度法检测制革废水中的亚硝酸盐的新方法。考察了检测波长、反应圈长度、进样体积、流速、显色试剂对实验的影响并确定了最佳实验条件:检测波长为610 nm,反应圈长度为5 m,进样体积为450μL,样品和推动液流速为0.40 mL/min,显色液流速为0.27 mL/min,显色液中孔雀石绿浓度为3.0×10-5mol/L。在优化的流动注射条件下,系统的线性范围为2.0～160.0μg/L,连续16次平行检测的相对标准偏差(RSD)为0.79%,检测限为0.3μg/L。该方法可用于皮革废水中痕量亚硝酸盐的检测,加标回收率为97.6～103.4%。     

组胺检测试纸的研制

利用比色法的原理制备了组胺检测试纸,对显色体系进行了筛选,对试纸制备的条件进行了研究,并制备了标准比色卡,通过与国标法进行比较对试纸进行了评价。实验结果表明:最佳的显色体系为对氨基苯磺酸钠和亚硝酸钠溶液,两者的最佳浓度分别为40g/L和400g/L,两者的最佳体积比为10:0.3,最佳试纸纸材为超厚滤纸,最佳浸泡时间为20min,最佳干燥条件为60℃在干燥箱中干燥,试纸的检出限为4μg/mL,试纸检测结果与国标法检测结果相吻合,数据的重现性较好。     

肉眼读取-荧光微球竞争免疫层析法半定量快速检测保健食品中的西布曲明

建立一种新型的西布曲明半定量检测方法。通过在检测试纸条上设置4?条包被有抗原的检测线,和被测抗原反应后的剩余标记抗体与包被抗原的反应浓度可梯度降低,实现在单一试纸条构建多级灵敏度的免疫反应,从而建立基于波长470?nm手电筒作为激发光源、肉眼读取结果的西布曲明荧光微球竞争免疫层析半定量检测方法。对吐温-20表面活性剂含量、标记抗体量、包被抗原质量浓度、硝酸纤维膜类型和层析反应时间等参数进行优化,通过试纸条上显色条带的数量对西布曲明进行半定量。结果显示,在优化的实验条件下,该检测方法检出限为0.05?μg/mL,检测范围为0～9.00?μg/mL。该方法无需使用专门的检测仪器,可在15?min内完成检测,其结果与液相色谱-串联质谱法检测结果一致。该方法操作简便、灵敏度高、结果可靠,可用于保健食品中西布曲明非法添加物的定性和半定量筛查分析。     

直接进样火焰原子吸收光谱法测定白酒中的钙

建立采用标准曲线法进行定量,火焰原子吸收光谱法(flame atomic absorption spectrophotometry,FAAS)直接进样测定白酒中钙的方法。探讨反应体系、释放剂浓度、乙炔流量以及燃烧器高度对吸光度的影响,比较两种定量方式对测定结果的影响。结果表明,利用体积分数50%乙醇溶液作为标准酒样可以有效地消除因匹配而产生的误差,因此,实验选择标准曲线法作为定量方式。在最佳的实验条件下,钙的线性范围为0.2～8μg/mL,检出限为0.17μg/mL,白酒中钙的质量浓度为9.73μg/mL,精密度为2.04%,加标平均回收率为101.5%,RSD为2.7 3%。该方法直接、快速、准确、稳定,具有较高的实用价值。     

T-2毒素快速定量检测试纸条的研究

为研制一种快速定量检测玉米中T-2毒素含量的胶体金试纸条,对T-2毒素单克隆抗体进行标记并对胶体金试纸条性能进行研究。用胶体金标记T-2毒素单克隆抗体,通过测定加入不同量碳酸钾后吸光度值的变化,确定标记的最佳pH值,通过与抗原进行正交试验确定最佳组合条件,应用胶体金定量读数仪通过检测线和对照线的对比,检测试纸条的性能。结果表明,单克隆抗体标记的最佳pH值为8.5,最佳标记浓度为20μg/mL,抗原的包被浓度为0.5mg/mL,羊抗鼠IgG的包被浓度为1.0mg/mL,试纸条检测T-2毒素标准品的检测限为5μg/kg。T-2毒素胶体金快速定量检测试纸条检测方法可得出具体数据,与常见真菌毒素无交叉反应,回收率在77%~117.6%之间,批内和批间重复性检测变异系数小于10%,玉米中T-2毒素的检测结果与高效液相法检测结果一致。T-2毒素胶体金快速定量检测试纸条可用于玉米中T-2毒素含量的快速定量检测。     

微波程序消解-共振光散射法测定生姜中的痕量镉

为建立一种快速测定食品中重金属痕量镉的新方法,以生姜为样品,碱性介质中,Cd2+与溴化钾、邻菲罗啉反应生成多元配合物,利用共振光散射技术测定镉。结果表明:镉的最大共振散射光峰位于623.4nm,镉的质量浓度在0~0.15μg/mL范围内与体系相对共振散射光强度有良好的线性关系,相关系数r为0.9984,检出限为0.012μg/mL;样品测定的RSD3.2%(n=5),回收率为93.2%~101.2%。该方法快速、简便、灵敏度高,为生姜中痕量镉的测定提供了参考。     

一种食品中亚硝酸盐含量快速测定方法的研究

为了寻找一种食品中亚硝酸盐含量的快速测定方法,利用亚硝酸盐和盐酸间苯二胺发生重氮化偶联反应的原理,以定性中速滤纸为原料,通过在不同质量浓度的偶联试剂中浸泡,采用不同的试纸干燥法,最终确定了试纸显色的最佳条件为：定性中速滤纸在30.0 g/L盐酸间苯二胺中浸泡20 min,经40 ℃真空干燥后,低温避光条件下密封保存。此法可快速对食品中的亚硝酸盐进行检测,同时检出限较低,实验所用试剂易得、操作简单,所用试纸携带方便,成本低廉,具有较高的应用价值和广阔的市场开发前景。     

邻苯二甲酸二甲酯免疫层析快速检测试纸的研制

邻苯二甲酸酯类塑化剂是一类具有生殖毒性的环境激素类物质,通过违规添加或迁移而造成食品污染问题颇为严峻,开发适合现场的塑化剂快速监测方法非常重要。本研究以邻苯二甲酸二甲酯(DMP)为对象,建立了DMP的胶体金标记免疫层析检测试纸方法。采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备了胶体金,将其标记DMP多克隆抗体,制备了金标抗体;采用棋盘法和单因素试验确定最佳包被浓度和二抗浓度分别为3000μg/mL和1600μg/mL,抗体浓度为稀释1.4倍,基于此建立了DMP免疫层析快速检测方法,其检测限为0.4μg/mL,5 min内肉眼可观察到检测结果,与其它结构功能类似物无明显交叉反应,特异性良好,白酒样品添加检测结果与GC-MS法相符。本法快速简单,稳定可靠,适用于实际样品中DMP的现场快速检测。     

石榴籽油总多酚含量测定方法的优化

对石榴籽油总多酚含量测定方法进行优化。考察提取溶剂、溶剂浓度和提取次数对石榴籽油总多酚提取效率的影响,同时以石榴籽中所含的3种多酚及油多酚提取液为研究对象,对测定方法的检测波长、Folin-Ciocalteu试剂用量、碳酸钠溶液用量、试剂加入的间隔时间和反应时间进行了优化。结果显示:石榴籽油经80%乙醇提取3次后多酚可提取完全,优于常用的甲醇提取或经正己烷脱脂处理后的甲醇提取法。以没食子酸为对照,优化后的显色条件为:检测波长765 nm,Folin试剂3.5 mL,7.5%的碳酸钠溶液2.5 mL,试剂加入间隔时间5 min,显色反应30 min。此条件下没食子酸的高、中、低浓度平均回收率为(100.69±0.34)%;没食子酸浓度在10μg/mL~60μg/mL范围内,吸光度与浓度线性关系良好(r=0.999 1);同一样品重复测定6次的RSD为0.67%。     

豆浆中脲酶活性快速检测试纸研究

目的制备一种对豆浆中脲酶活性进行快速定性检测的试纸。方法利用生豆浆中的脲酶能够对尿素专一性催化分解引起体系酸碱度的变化这一原理制备试纸,能够便捷、高效、准确地对豆浆的生熟度进行判定,从而筛查出脲酶活性为阳性的豆浆。结果确定最优的试剂配比为10 mL 0.4g/L苯酚红试剂和0.005g尿素,选择最佳的显色时间为20min之内,制备出的快检试纸浸入到豆浆样品后可以直接读取实验结果,对脲酶活性进行快速判定。结论该试纸制备方法简单,易于操作,检测重现性较好,方法毒性更小,而且在常温下能够长期储存,可为实施豆浆的现场监督和快速检测提供有效的技术支撑。     

DNS法测定D-氨基葡萄糖含量方法的研究

建立了DNS法测定调味品中色素D-氨基葡萄糖含量的方法。研究了反应的测定波长、DNS试剂用量、反应时间、反应温度、反应液体积以及反应产物在5h内的显色稳定性对测定结果的影响。结果表明:DNS法测定D-氨基葡萄糖含量的最适波长为520nm,D-氨基葡萄糖浓度在100~300μg/mL时,DNS试剂用量为1.0mL,沸水浴反应8min,反应液体积4mL,反应产物在5h内显色性质稳定,该方法精密度良好,RSD为0.08%,回收率为98.86%。     

伏马菌素B_1胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制

目的:为制备一种快速检测玉米中伏马菌素B_1(FB_1)胶体金免疫层析试纸条。方法:采用碳化二亚胺法合成检测抗原FB_1-BSA,柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,辛酸-饱和硫酸铵法对抗FB_1单克隆抗体腹水进行纯化,将金标抗体喷于金标垫,检测抗原FB_1-BSA(T线)和羊抗鼠二抗(C线)喷涂于硝酸纤维素膜(NC膜)。结果:得到的单克隆抗体效价为1.28×105。该试纸条的NC膜喷涂的检测抗原浓度为200μg/m L,羊抗鼠二抗浓度为1.0 mg/mL,喷涂量分别为0.74μL/cm,试纸条灵敏度为20 ng/mL,检测时间只需5 min,试纸条于4℃至少可保存12个月。结论:采用制备的试纸条对玉米实际样品进行检测,检测结果与高效液相和酶联免疫吸附法检测结果相一致,说明该试纸条适合现场快速检测伏马菌素B_1。     

高灵敏黄曲霉毒素B1免疫层析定量检测法的建立

以胶体金为标记物,借助于胶体金读取仪,建立了高灵敏的定量检测黄曲霉毒素B_1的胶体金免疫层析方法。试纸条制备时,当标记溶液pH为6.0,检测线全抗原的使用浓度为1.5mg/mL,金标抗体浓度为4μg/mL、用量为1.2μL时,所建立方法的灵敏度为5.7ng/L。通过加速保存试验,结果显示该试纸条的保存期大于1年。该试纸条应用于实际谷物及酱油加标样本检测,证明该方法可满足食品快速检测的需要。     

比较分析测试稻谷中的镉含量

建立微波消解-ICP-MS测定稻谷中镉的方法,利用石墨炉原子吸收分光光度计比对分析。样品加5 mL硝酸、1 mL双氧水经185℃微波消解后,分别用ICP-MS和石墨炉原子吸收分光光度计检测,根据测试结果评价2016年秋季收获期常州稻谷的镉污染情况。结果表明:该方法在0~2.0μg/L质量浓度范围内线性关系良好(r0.999),在0.01μg、0.02μg、0.03μg、0.04μg添加水平时的平均回收率在96.50~102.12%范围内,测定结果的相对标准偏差在0.22%~0.46%(n=4)范围内,检出限为0.002 3μg/L;2016年秋季常州地区稻谷镉含量未见超标。该方法简便、结果稳定可靠,适合于大批量稻谷中镉含量的快速测定。     

Triton x-114无机盐双水相萃取纺织品中的镉

为解决酸性汗液对纺织品中镉检测的干扰,建立以Triton x-114无机盐双水相体系,建立一种环保、高效检测纺织品中镉的前处理方法。通过无机盐分相能力差异,分析Triton x-114与几种常见盐组成双水相体系中,各成分浓度配比、pH值、Triton x-114浓度、双水相萃取温度对镉回收率的影响,筛选4-氨基偶氮苯镉萃取的最佳体系。结果表明:Triton x-114/硫酸铵体系为镉萃取的最佳体系,在酸性汗液40mL、pH值为6、25%(体积分数)Triton x-114溶液1 mL、硫酸铵12g、萃取温度60℃时效果最优,线性方程为:Y=0.0305X+0.034,线性相关系数r=0.9986,线性范围0~1.5μg/mL,检出限为0.018μg/m L,镉的回收率为88.67%~96%,相对标准偏差3.97%。     

改良的Folin-Ciocalteu比色法测定核桃外果皮中总多酚含量

目的:建立核桃外果皮中总多酚含量的比色测定方法。方法:以没食子酸为对照品,对测定核桃外果皮中总多酚含量的比色条件,包括检测波长、碳酸钠溶液用量、Folin-Ciocalteu试剂用量、反应温度及时间对吸光值的影响进行了研究。结果:对照品标准曲线在1～7μg/mL范围内为y=0.1031x+0.0793,R2=0.9996,线性关系良好,测定方法为采用核桃外果皮中总多酚提取液1.0mL,Folin-Ciocalteu试剂1.0mL、15%的碳酸钠溶液4.0mL、30℃显色1.5h,平均回收率为100.2%(RSD=0.91%)。此条件下测得核桃外果皮中总多酚含量为3.306mg/g。结论:该方法简便快速、结果准确、重现性和稳定性好,可用于核桃外果皮中总多酚含量的测定。     

高效液相色谱-串联质谱联用测定农产品中双氰胺

建立了高效液相色谱-串联质谱检测农产品中双氰胺残留量的检测方法。以氘代试剂为内标,样品经氨化乙腈萃取后,平行定量浓缩仪浓缩,用正己烷脱脂,采用HPLC-MS/MS选择反应监测(SRM)正离子模式测定。双氰胺的检出限可达10μg/kg,最低定量限可达40μg/kg。在10¹ 000 ng/mL内峰强度与质量浓度的线性关系良好(r>0.999)。方法的平均回收率在94.8%1 000 ng/mL内峰强度与质量浓度的线性关系良好(r>0.999)。方法的平均回收率在94.8%¹03.3%。     

超高效液相色谱测定烟叶中的糖类化合物及在筛选评价中的应用

利用可以快速批量前处理的新型样品萃取瓶作为前处理装置,建立了新鲜烟叶中葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖4种糖类化合物的超高效液相色谱快速检测方法。试验结果表明:(1)新开发的样品前处理装置集提取、过滤和转移为一体,可以大大提高样品前处理效率;(2)利用75%的乙腈(内含0.2%三乙胺)为流动相,以ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为色谱柱,以流速0.2mL/min进行色谱分析。4种糖类物质在5～250μg/mL时具有较好的线性关系,线性相关系数0.999;检出限为1.0～3.2μg/mL;不同添加水平下,平均回收率为91.0%～102.0%,精密度试验RSD5%;(3)对于不同类型的新鲜烟叶进行检测,发现糖类化合物的含量差异明显。该方法前处理简单易操作,重复性较好,可以满足烟草及相关样品检测评价的要求。