超声波辅助酶法水解鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

采用超声波辅助木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白。研究超声波功率和作用时间对酶解反应的影响,应用正交设计优化酶解工艺条件。结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶用量4 g/L、温度55℃、pH 5.5,在超声波功率为500 W、作用20 min后,继续酶解5 h。在此条件下,鱼鳞胶原蛋白的水解度为25.6%。与常规酶解方法比较,常规酶解8 h水解度为16.6%。说明超声波对木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白有促进作用。     

酶法水解真鲷鱼皮和鱼鳞制取胶原蛋白肽

以真鲷鱼鱼皮、鱼鳞为材料,研究了酶法制取胶原蛋白肽工艺。以水解度为指标,研究蛋白酶种类、酶解条件对水解度的影响,并采用正交试验对鱼皮、鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化。结果表明,采用胰蛋白酶水解鱼皮,在加酶量950 U/g,pH 7.0,温度55℃,料液比1︰8,酶解反应6 h的优化条件下,胶原蛋白时水解度最高,达到29.73%;高压液相色谱(HPLC)分析表明,水解液中甘氨酸含量最高,不含色氨酸,符合胶原蛋白氨基酸特征。     

淡水鱼鳞水解胶原蛋白的酶法制备

对几种常见淡水鱼鳞的基本成分和氨基酸组成进行测定,研究酶解鱼鳞制备水解胶原蛋白的工艺,并采取正交试验时水解条件进行优化.结果表明:淡水鱼鳞主要由蛋白质和灰分组成,粗蛋白含量高达55%以上;氨基酸组成显示淡水鱼鳞羟脯氨酸含量丰富,是制备水解胶原蛋白的良好原料.正交实验结果表明:55℃、E/S为3%、酶解2 h、底物浓度100 g/L时水解效果最好,此时,水解产物分子量较小,且分布集中.     

热力法和酶解法提取鱼鳞胶原蛋白的工艺及性质研究

以草鱼鱼鳞为原料,采用热力法和酶解法提取鱼鳞中的胶原蛋白,用正交实验优化提取工艺,分析所得胶原蛋白的性质。酶解法提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的最佳工艺条件为:每克蛋白中加入7500U的Alcalase碱性蛋白酶,鱼鳞∶水=1∶20(w/v),60℃水解4h,胶原蛋白的水解度为6.43%。热力法提取的最佳工艺条件为,鱼鳞∶水=1∶20(w/v),121℃提取15min,提取率为45.47%。酶解法提取的胶原蛋白的黏度、吸水性和起泡性大于热力法提取的,但保水性、乳化能力和乳化稳定性及泡沫稳定性小于热力法提取的。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的制备及分析

草鱼鱼鳞为淡水产品副产物。我们用木瓜蛋白酶水解草鱼鱼鳞并优化酶解条件,运用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳和凝胶渗透色谱确定所得胶原蛋白肽的分子量,并分析了其中的氨基酸组成。结果表明,最佳酶解条件为:酶解温度60℃、酶添加量8%(质量分数)、酶解时间2 h、pH 5.0、料液比1∶30(g/mL)。所得的胶原蛋白肽分子量小于500 u,其中主要含有甘氨酸、丙氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和天冬氨酸。     

复合酶法制备高纯度鱼基质胶原蛋白肽

利用废弃的青鱼鱼鳞制备胶原蛋白肽,不仅能够减少环境污染,还可以明显提高鱼类加工废弃物的综合利用,提高经济效益。采用青鱼鱼鳞为原料,通过测定胶原蛋白溶出率及脱钙率,优化温水清洗及盐酸脱钙的预处理条件;测定酶解液水解度及低聚肽占成品百分含量,确定并优化复合酶水解的条件,得到所需的肽。最佳工艺条件:(1)采用料液比为1∶15的50℃温水水洗2 h,可得表面无杂质、胶原蛋白溶出率仅为2.2%的鱼鳞;(2)在0.4 mol/L盐酸与料液比为1∶10条件脱钙30 min,脱钙率达94%,而其工艺过程中的胶原蛋白溶出率仅有0.15%;(3)采用2 000 U/g的木瓜+菠萝+碱性蛋白酶(1∶1∶2),50℃自然p H下酶解5 h,获得水解度47%的胶原蛋白低聚肽,其分子质量主要分布在180~1 000 u和1 000~2 000 u两段,含量分别为73.3%和16.6%。成品胶原蛋白低聚肽颜色为白色泛微黄,具有很好的溶解性。     

骨胶原蛋白的酶解工艺条件

采用胰蛋白酶酶解骨胶原蛋白制备胶原多肽,通过单因素和响应面试验,以水解度为指标,确定胰蛋白酶酶解胶原蛋白的最佳工艺条件。结果表明：最优工艺条件为pH6.91、反应温度60℃、酶添加量200mg/g 胶原蛋白、底物水平0.1/61.5(g/mL)、水解时间为4h;此条件下的胶原蛋白水解度达到29.36%。酶解后胶原蛋白的溶解性及乳化性均显著提高。     

仿刺参精酶解工艺条件优化及体外抗氧化

本研究以仿刺参精(Apostichopus japonicus spermary,ASJS)为材料,以水解度为指标优化了酶解工艺条件,并考察了酶解产物的体外抗氧化效果。实验选用木瓜蛋白酶(PAP)、复合蛋白酶(PRO)和风味蛋白酶(FLA)作为实验用酶,以双缩脲法结合三氯乙酸法测定水解度,通过单因素与正交实验,优化了单酶酶解工艺条件,并与双酶及三酶复配水解进行了比较实验,最后对不同的水解产物进行了体外抗氧化活性测定。结果表明:单酶最佳酶解工艺条件为PAP:酶添加量3.0%、温度70℃及反应时间4 h;PRO:酶添加量3.0%、温度45℃及反应时间4 h;FLA为:酶添加量2.0%、温度45℃及反应时间4 h。在最佳酶解工艺条件下PAP水解度为32.14%,PRO为31.09%,FLA为11.89%。双酶及三酶的复配水解工艺检测到的水解度均低于单PAP及单PRO。不同水解产物清除羟自由基和超氧阴离子自由基能力结果为,在样品浓度为5 mg/m L和10 mg/m L时,ASJS的PAP酶解产物好于PRO、FLA、双酶、三酶复配,同时也好于仿刺参卵及体壁PAP酶解产物。综上可知,ASJS的PAP水解产物显示出较好的体外抗氧化活性,可以进一步开发利用。     

鱼鳞胶原多肽的制备研究

利用单因素实验优化热水法提取鱼鳞胶原蛋白工艺,使用正交实验优化胶原多肽酶解工艺。最佳提取工艺为:温度70℃,时间6h,料液比1∶20,胶原蛋白的得率为32.55%;酶解最佳工艺为:pH9.5,温度55℃,时间2.0h,酶量0.3%,最大水解度达23.17%;用氨基酸自动分析仪和凝胶渗透色谱法测定胶原多肽氨基酸分布情况和分子质量,结果表明:氨基酸组成符合胶原蛋白特征,胶原多肽分子质量大部分在1000u以内。     

酶法制取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽的工艺

利用酶工程技术,以罗非鱼鱼鳞为研究对象,研究开发罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽制品。以蛋白酶种类、底物浓度、酶解时间、加酶量、温度、pH为实验因素,以胶原蛋白的提取率、平均分子量等为指标,确定酶解最佳条件为:在pH6,温度50℃,底物浓度150 g/L,加酶量1%MG+1%HHM的条件下,水解12 h,可得胶原提取率为55%,平均分子量为920 u左右。     

双缩脲法测定罗非鱼源胶原蛋白肽含量的改良及应用评价

为探究罗非鱼源胶原蛋白肽含量的快速测定方法,以罗非鱼皮胶原蛋白肽为对照品,改良双缩脲比色法测定肽含量的操作方法,考察显色络合物最大吸收波长、线性拟合度高的肽和三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）用量范围、pH值;在优化条件下对标准曲线进行重复性、精密度评价以及加样回收率实验;研究本方法对不同分子质量罗非鱼皮及鱼鳞胶原蛋白肽体系检测的适用性。结果显示,当胶原蛋白肽（标称分子质量3 kDa）质量浓度在0.3～1.5 mg/mL范围内,使用13% TCA溶液,调整体系pH 12.5,在波长545 nm处检测,吸光度与肽质量浓度线性拟合好（R2=0.999）,标准曲线方程为y=0.144 9x＋0.001 5;重复性和精密度实验得到相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为1.86%和1.84%,加样回收率分别为113.9%、109.7%,RSD分别为1.39%、1.00%;线性范围宽、重复性好、准确度高。将本法应用于不同种类罗非鱼肽产品体系的检测,加样回收率相差不大,偏差均较小,说明本法简便、快捷,适用于罗非鱼源肽含量的检测。     

芽菜腌制过程中理化指标的动态研究

以芽菜为原料,分别采用盐酸萘乙二胺法、直接滴定法、甲醛滴定法、酸碱中和法对芽菜的亚硝酸盐、还原糖、氨基氮、总酸等理化指标进行测定.结果表明,芽菜中亚硝酸盐含量远远低于国家标准规定的酱腌菜亚硝酸盐小于20.00mg/kg的标准,还原糖、氨基氮、总酸也呈良好的变化规律,并符合中华人民共和国供销合作行业标准.     

The determination of protein content of milk, cheese, and meat with the use of the biuret reaction]

A review is given of the different composition of biuret test solutions and experiments with the estimation of protein content of milk, cheese and meat by means of the biuret method are reported. The pure protein and the casein content of skimmed milk and the protein content of whole milk could be determined with biuret test solutions containing potassium hydroxide and a detergent. The use of the biuret method is advantageous in the case of cheese and meat, which are dissolved in potash lye or alkaline detergent solutions. Disturbances of the biuret method caused by lactose, fat or turbidity were eliminated after addition of hydrogen peroxide, by means of extraction or of additional measurements with a copper-free, zinc-containing biuret reagent. Deviations of the color intensity of biuret complexes were compensated by inclusion of standards in the measurement series.     

稻米蛋白质测定方法的比较与分析

分别利用凯氏定氮法和双缩脲法对10个稻米样品的蛋白质含量进行测定。比较发现,两种方法的测定结果并不相同,并表现出双缩脲法的测定结果较凯氏定氮法小约10%～20%的规律。提出利用已标定蛋白质含量的稻米为标样,基于双缩脲反应原理,进行蛋白质测定的分析方法,结果表明,该法可获得较高的检测精度。     

几种测定油料饼粕粗蛋白含量方法的探讨

采用国家标准规定的凯氏定氮法、改进后的凯氏定氮法以及双缩脲法同时测定油料饼粕中粗蛋白含量，并对三种方法进行比较。结果表明：改进后的凯氏定氮法同国际法相比结果偏高，更皎皎于饼粕中实际粗蛋白含量；采用双缩脲法有测定结果相对平均偏差较大，但操作简便，效率高，更适合于生产厂家进行快速测定大量样品时使用。     

SIZE EXCLUSION HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMOTOGRAPHY OF WATER-EXTRACTABLE PROTEINS FROM HOT-PROCESSED, ELECTRICALLY STIMULATED PORK CARCASSES

The effects of electrical stimulation (ES) on both hot-processed, brine-chilled (BC) and conventionally processed (CON) pork loins were evaluated. Protein solubility changes from water extracts of treated pork longissimus were monitored by size exclusion high-performance liquid chromatography (SEC/HPLC) and the biuret protein reaction. Molecular weight profiles (SEC/HPLC) of water extracts from treated longissimus showed four major peaks that represent proteins with molecular weights greater than 10,000 daltons which were affected by ES. Electrical stimulation led to a decrease in the amount of proteins observed in these four peaks when the conventional method of chilling was employed. At the same time, an increase in smaller molecular weight compounds were observed (compounds < 10,000 daltons). Extractable biuret positive compounds showed no significant changes due to ES or method of chilling.     

Applicability of protein estimation methods for assaying glycomacropeptide

Glycomacropeptide (GMP) is a nutraceutical additive, which is released during cheese preparation. In this study, the protein content in a laboratory GMP preparation and two commercial GMP samples, which was estimated by the Bradford, biuret, Lowry and bicinchoninic acid (BCA) assays, were compared using the Kjeldahl method. There were apparent differences in the values of estimated proteins using the different methods. An absence of dose response in the Bradford method and a low dose response using the Lowry method indicated the unsuitability of both these methods. Absorbance in the biuret and BCA methods linearly increased with increasing GMP content. The BCA method was the most sensitive of these methods.     

Estimation of protein in yeast

A method is described for the quantitative determination of the protein content in dried yeasts. A special pretreatment to break the yeast cell wall is used followed by a biuret determination.     

一种可用于皮革分析的蛋白质快速检测方法

本文针对常规蛋白质检测法分析速度慢、难以实现在线自动检测的缺陷，建立起了一种新颖、简便、快速的分析方法，实现了Lowry试剂－Folin试剂体系、双通道流路的蛋白质快速流动注射分光光度分析法。本文进行了方法精密度、线性回归、检测限等可行性参数的测定和干扰试验，并将该方法应用于皮革分析上。本方法测得的蛋白质含量与双缩脲法分析的结果较为一致。试验结果表明，本方法的线性好、分析速度快、精密度高、检测限低、节省人力物力，可应用于皮革分析检验，为皮革工业的科研和生产提供可靠的依据。     

Effect of reducing sugar (glucose) on the biuret colorimetric reaction

A highly significant interaction between concentration of free reducing sugar (glucose) and total time of the biuret reaction has been found by following absorbence changes. However, concentrations of up to 12.5 mg glucose/25 ml biuret reagent subjected to a reaction period of 1 1/2 hours caused no interference in absorbence value. Conditions for the specific application of the biuret colorimetric reaction for the determination of wheat flour proteins in the presence of free reducing sugars have been defined.