植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆对免疫抑制小鼠肠道黏膜免疫的影响

目的：探讨植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆对免疫抑制小鼠肠道黏膜免疫的影响。方法：利用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,将小鼠随机分为5 组,即正常对照组、模型组、胡萝卜原浆组、发酵胡萝卜浆组、灭活发酵胡萝卜浆组。小鼠以灌胃的方式给予胡萝卜原浆、发酵胡萝卜浆和灭活发酵胡萝卜浆后,分别测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数,酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）方法测定小肠组织白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-10和分泌型免疫球蛋白A（secretory immunglobulin A,sIgA）含量,小肠组织病理学观察及直接免疫荧光检测IgA分泌B细胞数。结果：实验组与模型组相比,植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆能显著提高小鼠胸腺和脾脏指数,增加IgA分泌B细胞数量,提高细胞因子IL-2和sIgA的水平,改善肠道形态结构,但TNF-α和IL-10含量没有显著增加。结论：植物乳杆菌NCU116发酵胡萝卜浆能有效拮抗环磷酰胺对小鼠免疫功能的抑制作用和肠道结构损伤作用,提高免疫抑制小鼠的免疫功能和改善肠道形态结构。     

大粒车前子多糖对脂多糖刺激RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

采用脂多糖构建RAW264.7巨噬细胞炎症模型,研究大粒车前子多糖的抗炎作用。培养巨噬细胞RAW264.7,利用脂多糖构建细胞炎症模型,中性红吞噬实验检测细胞吞噬活性;酶联免疫吸附法检测车前子精制多糖（Plantago asiatica L. crude polysaccharide,PLCP）处理前后细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosisfactor-α,TNF-α）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）和IL-6的分泌量,Griess反应测定RAW264.7细胞释放NO水平。结果表明,PLCP可显著抑制RAW264.7炎症细胞的吞噬活性,降低炎症细胞因子TNF-α、IL-10和IL-6的分泌量及NO的释放量。     

黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫相关因子的影响

研究黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫因子的影响。选择健康昆明小鼠,适应性喂养4 d后,分成5 组：空白组、环磷酰胺（cyclophosphamide,CY）模型组、CY＋黄酒多糖（低、中、高剂量）组,每组10 只。黄酒多糖按高、中、低3 个剂量（50、100、200 mg/（kg·d）,均以体质量计）给小鼠灌胃,1 次/d,连续给药14 d,空白组和CY模型组给予生理盐水。第19天除空白组,其余4 组腹腔注射环磷酰胺,连续4 d。处死小鼠,眼眶取血,测定血清中白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosisfactor-α,TNF-α）、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）、补体（C3、C4）水平。结果表明,与CY组相比,黄酒多糖能提高IL-6、IFN-γ、TNF-α、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）和补体（C3、C4）水平,并且随着低中高剂量效果依次增加。由此说明,黄酒多糖能提高免疫缺陷小鼠的免疫功能。     

白术多糖对树突状细胞表型及功能成熟的影响

目的：研究白术多糖对人外周血来源的树突状细胞（dendritic cells,DC）表型和功能的影响。方法：应用流式细胞术检测DC表面标志分子HLA-DR、CD86、CD83和CD80的表达及吞噬FITC-dextran的情况,酶联免疫吸附实验检测DC分泌白细胞介素-12（interleukin-12,IL-12）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）情况,Western blotting检测DC表面Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）。结果：白术多糖能够促进TLR4的表达,促进DC表面分子HLA-DR、CD86、CD83和CD80的表达,并且呈剂量依赖性,同时还使DC吞噬能力下降;白术多糖能够促进DC分泌IL-12和TNF-α。此外,TLR4抗体可以减少IL-12和TNF-α的产生。结论：白术多糖可以促进人外周血来源的DC表型及功能的成熟。     

菊苣多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:研究菊苣多糖（chicory polysaccharide,CP）对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:ICR小鼠随机分为空白组、模型组、药物组（脾氨肽）、CP低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组用环磷酰胺造成免疫抑制小鼠模型。分别测定各组小鼠体质量、免疫器官指数、外周血白细胞和红细胞数量、迟发型超敏反应致小鼠足趾肿胀度、腹腔巨噬细胞吞噬能力、血清血溶素水平及血清中白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的活性水平。结果:与模型组相比,CP高剂量组能显著提高免疫抑制小鼠的净体质量增率、免疫器官指数、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、白细胞和红细胞数量以及降低足趾肿胀度（P<0.05）。同时,CP高剂量组还能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力、血清溶血素含量,调节免疫抑制小鼠的免疫细胞因子。结论:CP对免疫抑制小鼠具有增强免疫活性的作用。     

植物乳杆菌Sc52联合牛蒡低聚果糖对2型糖尿病模型小鼠的治疗作用

目的：研究植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）Sc52和牛蒡低聚果糖（burdock fructooligosaccharide,BFO）联合使用对2型糖尿病小鼠的治疗作用。方法：高脂饲料结合链脲佐菌素（streptozocin,STZ）建立2型糖尿病小鼠模型,分成6 组,各组连续4 周接受不同处理,实验结束后测定小鼠空腹血糖含量、血糖曲线下面积,血清中脂质、胰岛素和炎症因子水平等相关生化指标;分析小鼠粪便中短链脂肪酸含量及主要菌群数量。结果：Sc52＋BFO组合能够抑制小鼠血清中总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、内毒素（endotoxin,ET）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosisfactor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）水平的升高,明显提升血清中高密度脂蛋白胆固醇（highdensity lipoprotein cholesterol,HDL-C）、胰岛素（insulin,INS）水平;Sc52＋BFO组合还能提高小鼠肠道中乙酸、丙酸、丁酸含量,降低乳酸含量;促进小鼠肠道中乳杆菌、双歧杆菌的生长,抑制肠球菌、肠杆菌、产气荚膜梭菌等有害微生物的生长,且Sc52＋BFO组合治疗糖尿病的效果优于单独使用BFO和Sc52。结论：植物乳杆菌Sc52和BFO联合使用能够调节小鼠肠道菌群平衡、降低血糖血脂含量、抑制炎症因子表达,提高2型糖尿病小鼠胰岛素水平。     

乳杆菌Lb.casei.Zhang对小鼠血清中细胞因子水平的影响

目的:观察及评价乳杆菌Lb.caseiZhang对小鼠血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α水平的影响。方法:应用分离自酸马奶,并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的L.caseiZhang,制备成热致死菌体和活菌制剂各分成高、中、低三个剂量组灌服小鼠至15d,采用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α的含量。结果:活菌制剂高、中剂量组小鼠血清中IFN-γ、IL-12含量明显高于对照组(p<0.05),IL-1α、TNF-α含量明显低于对照组(p<0.01);灭活菌制剂对细胞因子的影响与对照相比无显著差异。结论:Lb.caseiZhang活菌制剂的免疫调节作用优于热致死菌体制剂。活菌制剂对小鼠的细胞免疫功能产生了多方面的、有利于机体免疫功能状态的调节作用。     

体外评估乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响

该研究以商业菌株鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）LGG为阳性对照菌,体外评估实验室保藏的5株乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7细胞活性、吞噬活性及免疫活性分子NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-10（IL-10）分泌水平的影响,以期从中筛选出具良好免疫调节作用的菌株。结果表明,鼠李糖乳杆菌260具有更优的免疫调节作用,在特定乳杆菌活菌浓度时,能显著提高巨噬细胞RAW264.7的细胞活性、吞噬活性及NO、TNF-α和IL-10的分泌水平（P＜0.05）。最高细胞增殖率为196.62%;最低乳酸脱氢酶（LDH）释放量为554.36 U/100 mL;最高吞噬活性为136.86%;最高NO分泌量为5.70 μmol/L;最高IL-10分泌量为15.56 pg/mL,最高TNF-α分泌量为50.98 pg/mL。     

鼠李糖乳杆菌R9639对小鼠肠道菌群及抗氧化能力的影响

为探究鼠李糖乳杆菌R9639对小鼠肠道菌群及抗氧化能力的影响。将44只BALB/c小鼠随机分为对照组、低、中和高剂量组,分别灌胃等剂量生理盐水和不同剂量的鼠李糖乳杆菌R9639制剂,连续灌胃30 d。给药的第0、30天,采集小鼠粪便样品进行活菌计数,第30天采集小鼠粪便进行短链脂肪酸的测定,并测定小鼠小肠和肝脏组织中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）的水平,测定血清中白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factorα,TNF-α）的含量。与对照组相比,灌胃鼠李糖乳杆菌R9639制剂对小鼠的体重和摄食、脏器系数、小肠的质量和长度均无明显影响;炎症因子IL-2、IL-6、IL-1β和TNF-α的水平均有所降低;小肠组织高剂量组T-SOD、GSH、GSH-Px水平均极显著升高（p＜0.01）,中、高剂量组MDA水平极显著降低（p＜0.01）,肝脏组织中、高剂量组T-SOD、GSH、GSHPx水平极显著升高（p＜0.01）,高剂量组MDA水平显著降低（p＜0.05）。灌胃前后,与对照组和自身相比,乳杆菌和双歧杆菌含量在中、高剂量组均有极显著差异（p＜0.01）。中、高剂量组的乙酸、丙酸、丁酸含量与对照组相比均有极显著差异（p＜0.01）。鼠李糖乳杆菌R9639制剂对调节小鼠肠道菌群及提高抗氧化能力具有一定的作用。     

乳酸对主要发炎和抗炎细胞因子的影响

目的:通过不同给药途径观察及评价了乳酸对小鼠血清中IL-6、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-4水平的影响,进而研究了乳酸对免疫系统的调节作用。方法:通过灌胃、腹腔注射、尾静脉注射三种途径给小鼠乳酸,分别在给药4、3、3h后取血分离血清,采用ELISA法检测血清中IL-6、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-4的含量。结果:实验组三种给药途径对小鼠血清中IL-6、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-10、IL-4与对照组相比都有显著性变化,给药组小鼠血清中IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-4含量明显高于相应的对照组,IL-1β含量显著低于对照组。结论:三种给药途径中腹腔注射的效果最为明显,静脉注射及灌胃组次之。乳酸菌发酵产物的免疫调节作用可能是通过其代谢产物--乳酸发挥作用,乳酸通过对肠粘膜系统细胞细胞因子网络和信号传递系统的调节发挥免疫调节和生理功能。     

药桑多糖对四氯化碳所致大鼠肝损伤的保护作用

目的：研究药桑多糖对四氯化碳（CCl4）所致大鼠肝损伤的保护作用。方法：取健康Sprague-Dawley（SD）大鼠40 只,根据体质量随机分为5 组：对照组、CCl4损伤组、药桑多糖低（50 mg/（kg•d））、中（100 mg/（kg•d））、高（200 mg/（kg•d））剂量组,每组8 只,连续灌胃7 d后,除对照组外,其余各组大鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液制造肝损伤模型。24 h后,取血清测定谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）活力以及胆红素含量,取各器官计算脏器指数并测定肝脏超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathionperoxidase,GSH-Px）活力,以及丙二醛（malondialdehyde,MDA）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）含量,并对肝脏进行组织切片观察。结果：100、200 mg/（kg•d）剂量的药桑多糖能显著增加大鼠体质量（P＜0.05）,降低肝脏指数（P＜0.05）、肾脏指数（P＜0.05）和脾脏指数（P＜0.01）,能显著抑制CCl4所致肝损伤大鼠血清ALT、AST活力和胆红素含量的升高（P＜0.05）;肝脏MDA、IFN-γ、TNF-α含量显著降低（P＜0.05）,SOD、CAT、GSH-Px活力以及IL-10含量显著升高（P＜0.05）。50 mg/（kg•d）剂量的药桑多糖能显著降低肝损伤大鼠的肝脏指数、肾脏指数和脾脏指数（P＜0.05）,显著增加肝脏GSH-Px活力和IL-10含量（P＜0.05）,降低肝脏TNF-α含量（P＜0.05）。结论：药桑多糖对CCl4诱导的大鼠肝损伤具有明显的保护作用,其肝脏保护作用与提高肝脏抗氧化能力及抑制肝脏炎症有关。     

传统酸面团中植物乳杆菌发酵馒头抗氧化特性及挥发性风味物质特征

以普通小麦馒头（记为WS）和植物乳杆菌标准菌株发酵馒头（记为LPS）为对照,通过测定总酚含量和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力,同时采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术,研究传统酸面团中植物乳杆菌植物亚种发酵馒头（记为ZLPS）的抗氧化特性及挥发性风味物质特征。结果表明：乳酸菌发酵,尤其是植物乳杆菌植物亚种的发酵可以明显改善蒸制带来的馒头抗氧化特性降低,与WS相比,ZLPS中总酚含量增加了108.70%,DPPH自由基清除能力为WS的13.65 倍;乳酸菌发酵酸面团使得馒头的挥发性风味物质含量增高,酸面团发酵馒头的挥发性风味物质总含量分别增加了53.11%（LPS）、56.92%（ZLPS）,且ZLPS还产生了一些独特的挥发性风味物质,如乙酸异戊酯、6-甲基-5-庚烯-2-酮、3-辛醇、2-乙基己醇、乙酸-2-苯乙基酯等;ZLPS各项指标评分均较高,更具有获得消费者青睐的潜力。     

植物乳杆菌NDC75017抗氧化活性研究

目的：研究酸奶中所筛选的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）NDC75017在不同体系中的抗氧化作用模式。方法：测定了活细胞、无细胞提取物、胞外分泌物及菌体灭活物质的自由基清除能力、总抗氧化能力（totalantioxidant capacity,T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）活性、还原能力和金属离子螯合能力。结果：株菌能够耐受一定浓度的过氧化氢（H2O2）,无细胞提取物的超氧阴离子自由基（O2－•）和DPPH自由基清除能力最强,胞外分泌物的羟自由基（•OH）清除作用最好。无细胞提取物和胞外分泌物的T-AOC效果最佳,与另外两组差异显著（P＜0.05）。胞外分泌物的GSH-Px和T-SOD酶活性最高,明显比无细胞提取物和菌体灭活组效果好（P＜0.05）。4 组样品都具有还原能力和金属离子螯合能力,但Cu2+螯合能力不如Fe2+螯合能力效果好。结论：菌株具有抗氧化活性,其抗氧化本质可能与其具有金属离子螯合能力、提供电子和清除自由基等作用模式有关。     

牦牛酸乳分离发酵乳杆菌发酵豆浆的胃溃疡预防效果研究

以采自川西青藏高原的自然发酵牦牛酸乳样品中分离纯化得到的1 株发酵乳杆菌（Lactobacillusfermentum Zhao,LFZ）作为研究对象,探索比较其与商业用嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus,ST）发酵豆浆的胃溃疡预防效果。通过利血平诱导胃溃疡小鼠模型,LFZ组小鼠的IL-6、IL-12、TNF-α和IFN-γ细胞因子低于ST组小鼠;血清生长抑素和血管活性肠肽水平高于ST组,胃动素和P物质水平低于ST组,且LFZ组小鼠胃溃疡面积也低于ST组小鼠。由此可知,Lactobacillus fermentum Zhao发酵豆浆的品质优于标准嗜热链球菌发酵豆浆,且其对胃溃疡有很好的预防效果。     

牛磺酸对顺铂所致H22荷瘤小鼠免疫器官及淋巴细胞损伤的保护作用

目的：研究牛磺酸对顺铂化疗荷瘤小鼠免疫器官和淋巴细胞损伤的保护作用。方法：H22荷瘤小鼠随机分为5 组：模型对照组、顺铂（1.5 mg/（kg·d））化疗组、顺铂＋高剂量（640 mg/（kg·d））牛磺酸组、顺铂＋中剂量（320 mg/（kg·d））牛磺酸组和顺铂＋低剂量（160 mg/（kg·d））牛磺酸组,末次用药24 h后眼球放血处死小鼠,测定小鼠体质量、瘤质量、脾脏指数、胸腺指数以及血清白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）水平,胸腺依赖性淋巴细胞（thymusdependent lymphocyte,T细胞）、骨髓依赖性淋巴细胞（bone marrow dependent lymphocyte,B细胞）增殖能力的变化情况。结果：顺铂化疗组小鼠体质量和瘤质量均明显低于模型对照组,抑瘤率为36%,顺铂＋中、高剂量牛磺酸组小鼠的体质量显著高于顺铂化疗组,抑瘤率分别达到51%和68%;顺铂化疗组小鼠的脾脏质量和脾脏指数明显低于模型对照组,而顺铂＋各剂量牛磺酸组小鼠的脾脏质量和脾脏指数均高于顺铂化疗组;顺铂化疗组小鼠的胸腺质量和胸腺指数明显低于模型对照组,顺铂＋高剂量牛磺酸组小鼠的胸腺质量和胸腺指数明显高于顺铂化疗组;顺铂化疗组小鼠血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的分泌水平明显低于模型对照组（P＜0.01）;而顺铂＋各剂量牛磺酸组血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平均高于顺铂化疗组;顺铂可明显抑制荷瘤小鼠对丝裂原刺激的T细胞和B细胞的增殖,顺铂＋高剂量牛磺酸组小鼠的T细胞刺激指数明显高于顺铂化疗组（P＜0.05）;而顺铂＋低、中剂量牛磺酸组小鼠的B细胞刺激指数则高于顺铂化疗组。结论：牛磺酸可协同顺铂发挥抑制肿瘤的作用,其机制与保护顺铂导致的动物免疫器官和淋巴细胞功能损伤有关。     

奶粉加工对其食用属性的改变及细胞间无线通讯网络的定量化评价

牛乳酪蛋白经过胃蛋白酶控制酶解制备富含改善睡眠和抗疲劳生物活性肽酶解物作为添加剂,按优化的配方制备成改善睡眠和抗疲劳的奶粉,通过健康志愿者食用该功能性配方奶粉和全脂奶粉（作为对照）,检测服用前、后血清中38 种细胞因子质量浓度的变化。结果表明：全脂奶粉可显著刺激TNF-α的表达水平;而功能性配方奶粉则对TNF-α、VEGF、G-CSF、IL-17、IL-1ra和IFN-γ的表达均有显著下调作用。为了定量化评价这些作用,通过国际上权威数据库检索查询这些具有显著性变化的细胞因子的分泌细胞和靶细胞,构建食用该功能性配方奶粉和全脂奶粉后机体细胞间无线通讯网络的变化网络,该网络属于有向加权网络。通过该网络不仅可以直观比较食用功能性配方奶粉和全脂奶粉前后细胞间的无线通讯变化层次和规律,还可以通过引入节点的出强度（S出）、入强度（S入）和总强度（S总）以及整体网络强度（S网络）进行定量化评价。其中食用全脂奶粉组网络有15 个节点和108 条边,并且S网络=34.2,表明全脂奶粉对机体内细胞间无线通讯网络具有明显的促进作用;而食用功能性配方奶粉组的网络共有23 个节点和304 条边,并S网络=－885.7,表明食用功能性奶粉主要发挥下调细胞通讯网络活性、免疫和生理代谢水平的作用,并且这种抑制作用明显比全脂奶粉的促进作用更强。本研究可为食品的体内功能性评价提供一个新的定量化评价方法。