富硒碎米荠不同提取物抗氧化性能研究

为进一步开发利用恩施堇叶碎米荠,通过比较测定3种碎米荠提取物:碎米荠碱提物(CE)、碎米荠富硒蛋白(SPR)和碎米荠富硒多肽(SPI)对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(OH·)、2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(ABTS+·)和超氧阴离子自由基(O_2~-·)的清除能力,考察3种富硒碎米荠提取物的体外抗氧化性能,并与富硒酵母(SY)、无机硒(IS)和非富硒多肽与无机硒混合物(SPIS)进行比较。结果表明:SPI清除4种自由基能力最强,其对DPPH·、OH·、ABTS~+·和O_2~-·的清除率分别为87.5%,50.3%,99.7%,45.7%,IS清除4种自由基能力最弱,均不超过14%。通过比较SPR、SPI、CE、SY、IS和SPIS对4种自由基的清除率及半抑制浓度(IC_(50)),发现有机硒清除自由基的能力强于无机硒。     

富硒茶叶中硒的赋存形态研究

利用氢化物—原子荧光光度法分析硒在富硒茶叶中的主要赋存形态及分布规律。结果表明,富硒茶叶中的总硒含量为533.5μg/kg,硒主要以对人体有益的有机结合态形式存在,其含量占总硒的比例为83.66%,而有机硒中最主要的赋存形态为蛋白硒,占有机硒含量的76.35%,茶叶中的硒还有少部分与核酸和多糖结合。     

富硒双歧杆菌中硒的赋存形态及分布

研究富硒动物双歧杆菌01中硒的赋存形态和分布。对动物双歧杆菌01进行富硒培养,然后从富硒菌体中分离核酸、多糖和蛋白质,并应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离富硒菌体中的硒蛋白组分,采用氢化物原子吸收(HG-AAS)法测定硒含量。结果表明,动物双歧杆菌01能够吸收16.7%-39.6%的无机硒并将其大部分转化为有机硒;蛋白硒是富硒动物双歧杆菌01中硒的主要赋存形态,有机硒在蛋白质、多糖和核酸中的分布依次为:蛋白硒>多糖硒>核酸硒;在蛋白硒中,硒主要分布在分子量不超过20ku的蛋白或肽链中。     

堇叶碎米荠低聚肽制备工艺优化及结构特征、氧化活性研究

目的：制备堇叶碎米荠低聚肽，并拓展其应用范围。方法：以堇叶碎米荠为原料，使用碱性蛋白酶酶解，采用超滤膜进行分离浓缩，冷冻干燥后获取堇叶碎米荠低聚肽粉末，并对该低聚肽的结构和抗氧化活性进行分析。结果：堇叶碎米荠蛋白水解的最佳工艺条件为酶解温度50 ℃、酶解pH 10、加酶量4%、底物质量分数2%，此条件下水解度为17.9%；堇叶碎米荠低聚肽的蛋白质和多肽含量分别为49.01%和42.87%；该低聚肽在200~220 nm有较强的吸收带，具有酰胺键的特征吸收峰，二级结构以β-转角为主，相对分子质量＜1 000的约占90%；当堇叶碎米荠低聚肽质量浓度为20 mg/mL时，其羟自由基、ABTS自由基、DPPH自由基清除率分别为84.54%，98.22%，60.33%。结论：试验优化的堇叶碎米荠低聚肽制备工艺合理可行，堇叶碎米荠低聚肽具有抗氧化活性。     

梭子蟹中硒形态分析及其分布研究

为研究梭子蟹中硒的赋存形态,并进一步探究梭子蟹硒蛋白组分中硒含量的分布,以梭子蟹为研究对象,采用透析法提取有机硒、连续提取法提取不同种类蛋白质、热水浸提法提取多糖、原子荧光光谱法测定原料和各组分中的含硒量。结果表明:梭子蟹中64.5%的硒是以有机硒形态存在,并主要与蛋白结合(蛋白硒占总硒的48.8%);碱溶性蛋白和水溶性蛋白是梭子蟹结合硒的主要蛋白,总结合硒量占蛋白硒含量的77.9%,按照结合硒量的多少,硒在蛋白中的分布依次是:碱溶性蛋白水溶性蛋白盐溶性蛋白醇溶性蛋白;也有部分硒和多糖结合,占总硒含量的3.59%。     

富硒花生中硒的主要赋存形态及其抗氧化性

通过超声、离心、透析的方法将富硒花生中的有机硒和无机硒分离开,有机态硒以蛋白质和多糖为主要分离对象,采用火焰原子吸收光谱法对硒水平进行测定。结果表明:富硒花生中硒含量为0.165 3μg/g,蛋白提取率为23.39%,多糖提取率为11.32%,硒蛋白是硒的主要赋存形态,其结合的硒量达到富硒花生有机硒总量的73.39%,总硒量的59.89%。抗氧化性分析结果表明,粗多糖相对于纯化多糖和蛋白提取物,具有更长的诱导时间、更高的DPPH自由基清除能力和更高的还原力。     

沧州不同产地小枣中有机硒和无机硒的含量测定及差异分析

目的建立小枣中有机硒和无机硒的测定方法。方法分别利用微波消解和80%乙醇溶液提取枣样,采用氢化物发生原子荧光光谱法(HG-AFS)测定总硒和无机硒的含量,差值即为有机硒。结果硒的线性范围为0~100 ppb,检出限为0.0904 ppb,回收率94%~104%。结论通过测定沧州4个不同产地20份小枣总硒、无机硒及有机硒含量,并采用方差分析,表明4个不同产地的小枣总硒含量、无机硒及有机硒含量差异有统计学意义,其中任丘和黄骅枣中不仅总硒含量高,且有机硒含量比例也最大。     

氢化物原子荧光法分析不同地区刺参总硒和无机硒含量及分布规律

为测定我国黄渤海海域刺参群体硒含量并探索其分布规律,采用氢化物原子荧光光谱法进行含量分析。结果显示,呼吸树为总硒和无机硒含量最高的组织,平均值分别为（14.171±3.412） mg/kg和（6.194±3.829） mg/kg,不同组织内的总硒、无机硒含量变化呈现一致的规律,硒含量由高到低为：呼吸树＞消化道＞肌肉＞内壁＞外壁,同时刺参体壁和肌肉（食用部分）中有机硒比例在75.6%～89.4%之间（除东营地区刺参群体肌肉组织的有机硒比例最低为53.6%）;5 个地区刺参群体同一组织内的总硒及无机硒含量有显著性差异,东营地区呼吸树、消化道和肌肉中无机硒含量较高。     

碎米荠蛋白制备工艺及抗氧化活性

以恩施堇叶碎米荠为原料,研究碎米荠硒蛋白的提取工艺,探讨碎米荠蛋白的抗氧化活性,结果表明:提取温度为50℃,料液质量体积比为1 g:40 mL,先后用去离子水和0.1 mol/L的NaOH溶液分别提取8 h。在此工艺条件下蛋白质得率最高,为75.4%,其中水提蛋白质质量分数为26.5%,硒质量分数为1 748μg/g;碱提蛋白质质量分数为52.3%,硒质量分数为1 513μg/g。碎米荠碱提蛋白经Sephadex G-100凝胶层析柱分离得到两个组分,分别为峰1和峰2,硒质量分数分别为668μg/g和650μg/g,通过研究碎米荠蛋白对羟自由基(·OH)和1-1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)的清除能力,发现碎米荠蛋白均有一定的清除自由基的能力。     

氢化物-原子荧光光谱法测定鸡蛋中的硒

建立了测定鸡蛋中总硒和有机硒的方法,蛋清通过三氯乙酸沉淀脱除蛋白,蛋黄通过聚乙二醇脱脂、三氯乙酸沉淀脱除蛋白后,经微波消解后直接测定鸡蛋中总硒和有机硒含量。结果表明,富硒鸡蛋样品中硒主要以有机硒形态存在,通过3%聚乙二醇脱脂, 15%三氯乙酸沉淀蛋白,可实现有机硒与无机硒的有效分离,该方法线性范围在0～20μg/g之间,无机硒检出限为0.002μg/g,方法加样平均回收率为81.6%～86.3%,相对标准偏差(rSD, n=3)为0.64%～2.6%。该方法操作简单、灵敏度高、回收率好,适合富硒鸡蛋总硒和有机硒的测定。     

几种提取溶剂对富硒香菇中有机硒含量测定的影响

目的研究不同提取溶剂对富硒香菇中的有机硒含量测定的影响。方法采用纯水、无水乙醇及盐酸(6 mol/L)3种不同提取溶剂对香菇中无机硒进行提取,通过测定总硒和无机硒,两者差减而得到有机硒含量,探讨不同提取体系对有机硒含量测定的影响。结果用乙醇提取,仅有一半有机硒被提取出,无法准确测定有机硒含量;盐酸(6 mol/L)提取,会导致无机硒测定结果略为偏高且操作较繁琐,不适合香菇中有机硒的测定;直接用水提取,测定结果比较符合香菇中有机硒的含量。直接用水提取方法的测定检出限0.039μg/L,无机硒加标回收率为99.26%~102.72%,精密度测定相对标准偏差小于4.81%。结论水提取测定无机硒,通过总硒相减得到有机硒含量,对于香菇中有机硒含量测定,该法简单、快速,是的一种较为理想的方法。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒杂粮中的有机硒和无机硒

采用氢化物-原子荧光光谱法与无水乙醇提取相结合的方法测定了富硒杂粮中总硒、无机硒和有机硒的含量,并对仪器的试验参数进行优化。结果表明,富硒杂粮样品中硒主要以有机硒的形态存在,占硒总量的63.02%～95.10%,其中黄玉米有机硒含量最高,达到95.10%。该方法检出限为0.01 μg/L,总硒回收率为97.31%～103.53%,无机硒回收率96.10%～105.45%。本方法操作简单、灵敏度高、回收率好,适合富硒杂粮有机硒和无机硒的测定。     

富硒农产品中硒代氨基酸形态及其在不同蛋白组分中的分布

目的：探究富硒西兰花、富硒大豆、富硒玉米、富硒大麦苗不同溶解性蛋白组分中硒代氨基酸形态及分布情况。方法：利用高效液相色谱—氢化物发生—原子荧光光谱联用技术测定4种富硒禾谷类和十字花科农产品中硒代蛋氨酸(SeMet)、硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代乙硫氨酸(SeEt)含量,并分析各硒代氨基酸在清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白等不同溶解性蛋白组分中的分布特点。结果：4种富硒植物的硒代氨基酸在不同蛋白组分中的含量及分布存在显著差异(P＜0.05)。富硒大豆、富硒玉米、富硒大麦苗的有机硒以SeMet形式存在,在4类蛋白组分中分布较一致且相对含量均高于66%,不存在SeEt;富硒西兰花的有机硒主要以SeCys2和SeMet为主、MeSeCys次之,前二者在清蛋白和谷蛋白组分中的分布较一致且约占有机硒含量的36%,但在球蛋白和醇溶蛋白组分中均以SeMet存在,相对含量最高达60%,其次为SeCys2约占有机硒含量的34%。富硒西兰花中存在极少量的SeEt约占有机硒含量的5%。结论：3种禾谷类农产品(富硒大豆、富硒玉米、富硒大麦苗)的不同溶解性蛋白中均以SeMet为主;而富硒西兰花的不同溶解性蛋白则以SeMet和SeCys2为主,并且其清蛋白和谷蛋白还富含较多的MeSeCys。     

富硒小麦提取物中硒含量及其抗氧化特性

为研究富硒小麦的富硒水平和硒的赋存形态,选用兰州高硒地区生产的富硒小麦为原料,通过超声、离心、透析的方法将富硒小麦中的有机硒和无机硒分离,用火焰原子吸收光谱法测定小麦硒水平。结果表明,富硒小麦硒的主要赋存形态是有机态,占总硒的84.36%。有机态硒主要为硒蛋白（54.46%）,硒多糖次之,少量为硒核酸和其他有机态硒。在蛋白态硒中,清蛋白和谷蛋白硒含量较高,分别占总硒的19.46%和16.83%。抗氧化性分析结果表明,多糖相对于蛋白和核酸提取物,具有更长的诱导时间、更高的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力和Fe3+还原力。皮尔逊相关性分析表明,小麦富硒提取物抗氧化能力与其硒含量之间表现为显著的正相关性。     

食品中硒元素形态分析的研究进展

硒是人体必需的微量元素,具有丰富的化学形态,分为无机硒和有机硒,不同硒形态对人体的生物活性不同。无机硒主要包括硒酸Se(Ⅵ)、亚硒酸Se(Ⅳ),有机硒主要包括硒蛋白、硒核酸和硒多糖等大分子硒,及硒代胱氨酸(selenocystine,SeCys2)、硒代蛋氨酸(selenomethinonine,SeMet)、甲基硒代半胱氨酸(methyl selenocysteine,MeSeCys)、硒代乙硫氨酸(selenoethionine,SeEt)等小分子硒化物。无机硒不易吸收,可能对人体造成危害,有机硒易吸收,适当摄取对人体有多方面益处。准确测定食品中不同硒形态及具体含量,对人体按需摄入硒元素具有重要指导意义。本文总结了近年来食品行业中硒形态检测研究涉及的领域,包括果蔬、水产、药食同源的中药、茶叶、谷物等方面的研究,常用的提取、分离、分析技术,重点介绍了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术和液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱联用技术在不同食品中检测硒形态的应用情况,并展望了未来硒形态分析的前景。     

富硒大米中硒形态分析

采用原子荧光光度法分析了天然富硒大米中硒的主要赋存形态、分布及含量.本实验中,硒的检测线性范围为4 μg/L～20μg/L,相关系数是r=0.999 3,总硒测定的相对标准偏差(RSD)为0.966％(n=6),总硒的加标回收率为103.12％.实验表明富硒大米中的总硒含量为206.708 μg/kg,达到60 μg/kg～300 μg/kg的富硒标准,而硒主要以对人体有益的有机硒形态存在,含量为168.875 μg/kg,占总硒的81.70％,而有机硒中最主要的赋存形态是蛋白硒,含量90.170 μg/kg,占53.40％,其次多糖硒占9.28％,RNA硒占1.86％,其它形态的有机硒占35.46％.     

硒化卡拉胶中有机硒比率的测定

硒化卡拉胶是卡拉胶与无机硒通过酸或酶水解催化合成制备的一种有机硒化合物。有机硒比率是硒化卡拉胶的重要质量指标,有机硒含量愈高,无机硒含量愈低,有机硒比率愈高,产品质量就愈好。因为无机硒毒性大,中毒量与需要量之间范围小,使用量需要严格控制,而有机硒化卡拉胶毒副作用远比无机硒低。国内外目前尚无硒化卡拉胶有机硒比率的测定方法,通过截留分子量500D透析法或80%乙醇沉淀法可有效分离有机硒和无机硒,用GB5009.93-2010标准中规定的方法测定总硒、有机硒或无机硒。有机硒÷总硒×100%=有机硒比率,或用差减法,总硒–无机硒=有机硒,计算有机硒比率。该测定方法简便、快速、准确,为硒化卡拉胶产品质量控制提供了有力的保证。     

碎米荠硒肽的制备及其体外抗氧化活性分析

本文以恩施碎米荠为原料,采用酶法制备具有抗氧化活性的碎米荠硒肽。以蛋白提取率为指标,通过单因素实验和正交试验优化了碎米荠蛋白的提取条件;以DPPH?、ABTS+?清除率为考察指标,优化了碎米荠蛋白的酶解参数,利用超滤设备对碎米荠蛋白酶解液进行分级分离,确定了碎米荠硒肽制备的最佳方案;考察了碎米荠硒肽的还原力、Fe2+螯合能力。结果表明,碎米荠蛋白提取的最优条件为:提取溶液0.1 mol/L NaOH、液料比45:1 mL/g、提取温度60 ℃、提取时间3 h、提取2次,此时碎米荠蛋白的提取率为72.91%。碎米荠硒肽制备的最佳条件为:碱性蛋白酶、底物浓度4%、酶底比1.0%、酶解时间1 h,超滤膜截留分子量为1 kDa,所得碎米荠硒肽的含硒量为362.378 mg/kg,其DPPH?、ABTS+?清除率的EC₅₀值分别为0.435和0.399 mg/mL,并表现出良好的还原力和Fe2+螯合能力。     

亚硒酸钠对蛋白核小球藻生长及生物转化的影响

本文研究了亚硒酸钠对海水培养蛋白核小球藻的生长和有机硒转化能力的影响,以及富硒蛋白核小球藻中的主要硒形态。通过分批等量添加2μg/mL至50μg/mL的亚硒酸钠,确定最佳富硒培养浓度,并采用高效液相色谱法检测藻体中亚硒酸钠、硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸三种主要硒形态的含量。结果表明:亚硒酸钠浓度不宜过高,否则蛋白核小球藻的生长受到抑制。硒浓度为2μg/mL时小球藻的生物量较高,有机硒含量达到301.40μg/g,占总硒含量的83.24%;高效液相色谱分析表明在该培养条件下富硒小球藻中有机硒的主要形态为硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸;在测定的三种主要硒形态中未转化的亚硒酸钠仅占23.02%。上述结果说明在海水培养下,小球藻富硒培养的适宜外加硒浓度为2μg/mL,此条件下长势良好,无机硒得到有效转化,有机硒含量较高,可达到富硒要求。     

分次加硒法培养高富硒量螺旋藻及其对藻体光合色素和蛋白质含量影响的研究

在螺旋藻生长的不同阶段分次添加无机硒(Na2SeO3)进行富硒处理。设置11个实验组,分别从第1天至第10天分次加硒,观察不同硒处理组中螺旋藻对无机硒的富集转化及其光合色素、蛋白质的变化情况。结果表明,在螺旋藻生长的第7、8、9三天分次加硒(实验组7),可获得硒产率1743.06μg/L、有机硒比率为86.85%的高富硒量螺旋藻,与对照相比,其硒含量增加150倍,生物量也明显提高(1.34g/L,对照组为1.18g/L);该实验组藻体中的硒主要分布在水溶性蛋白质中,占总硒含量的60.51%,占有机硒含量的69.67%;螺旋藻主要营养物质藻蓝蛋白(PC)、别藻蓝蛋白(APC)、类叶黄素、β-胡萝卜素含量也有不同程度的增加,表明此富硒方法是螺旋藻高值化处理的有效途径。