菜籽蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究

[目的]建立适用于莱籽蛋白质组研究的双向电泳技术.[方法]以湘油17号为材料,对双向电泳技术中的样品制备方法、凝胶浓度、上样量等条件进行了优化.[结果]使用TCA-丙酮法提取莱籽总蛋白最佳,所获蛋白在2-DE图谱上获得的点数最多.当采用pH3～10IPG胶条和12%的凝胶、上样量为250μg时,可得到背景清晰、重复性好、蛋白点分辨率较高的双向电泳图谱.[结论]为开展油菜种子蛋白质组学研究奠定了基础.     

分子蒸馏精制乙二醇葡萄糖苷

采用分子蒸馏法精制乙二醇葡萄糖苷,高效液相测定其组成,并用色差计测定糖苷的颜色.通过控制适宜的蒸馏温度和压力等条件,得到较为满意的蒸馏效果.当进料速率60～80mL/h,刮膜器转速100-110r/min,预热温度80%,较优化的工艺条件为:蒸馏温度70℃,压力200Pa和蒸馏温度90℃,压力500Pa,此时,乙二醇葡萄糖苷的含量分别为85.92%和85.26%.分子蒸馏和减压蒸馏的糖苷颜色相差很大.     

米根霉F1-ATPase活性降低突变株的筛选研究

本实验采用同步辐射软X射线Nk诱变米根霉,获得一株新霉素抗性突变株NA-2,该菌株F1-ATPase活性降低86.82%,胞内ATP含量下降18.99%,最终菌体浓度为出发菌株的79.22%,发酵周期缩短了12h,葡萄糖平均消耗速度和L-乳酸生产强度分别高出25.17%和32.57%,平均葡萄糖消耗比速(qs)、L-乳酸生成比速(qp)和细胞比生长速率(μ)分别提高86.42%、128.13%和60.0%,但胞内能荷变化不明显。进一步研究发现,突变株糖酵解途径中关键酶磷酸果糖激酶(PEK)、丙酮酸激酶(PK)和磷酸甘油醛激酶(GAPDH)的活性较原始菌株提高了58.34%、23.53%和11.29%,乙醇脱氢酶(ADH)活性降低了32.11%,乳酸脱氢酶(LDH)活性提高了42.27%。结果表明,降低米根霉F1-ATPase活性有效地提高了糖酵解关键酶活性而加速葡萄糖代谢,提高了L-乳酸生产强度。     

绿豆β-葡萄糖苷酶的分离纯化与性质研究

本文采用硫酸铵分级沉淀、超滤、DEAE-52离子交换、Sephadex G-100凝胶层析纯化的方法,对绿豆β-葡萄糖苷酶进行了分离纯化,并对纯化酶的部分特性进行了研究。研究结果表明,绿豆中含有两种β-葡萄糖苷酶同功酶,两种同功酶分别被纯化了3.02倍和7．24倍,收率分别为46．75％和91.14％：同功酶的分子量分别为92．4kDa和140．0kDa,其中一种为双亚基蛋白酶：该同功酶的最适反应温度分别为50℃和20℃;最适反应pH值分别为6．0和5．0;两同功酶对对硝基苯-β-D-葡萄糖苷有相似的亲和力。     

葡萄糖和木糖共发酵生产L-乳酸的培养基和培养条件响应面优化

为提高米根霉利用葡萄糖、木糖共发酵产L-乳酸的产量,在单因素试验基础上,采用响应面法进行培养基和培养条件优化的试验方案设计。利用Design Expert软件对其结果进行二次回归分析,获得的最佳产酸条件为：葡萄糖100g/L、木糖50g/L、 (NH4)2SO4 3.0g/L、KH2PO4 0.3g/L、摇床转速180r/min、温度32℃、接种量12%、装液量50mL。该条件下摇瓶发酵72h,L-乳酸产量为119.216g/L,转化率为79.48%。     

不同中和剂对米根霉发酵产L- 乳酸的影响

在米根霉发酵产L- 乳酸过程中,采用CaCO3 作为中和剂会造成下游分离过程中膜堵塞和环保压力,因此以NH3·H2O 和NaOH 替代CaCO3 作中和剂,对米根霉发酵产L- 乳酸的工艺条件和发酵动力学进行研究。结果表明：添加CaCO3 后L- 乳酸产量平均提高7.3 倍;NaOH、NH3·H2O 作为中和剂的最佳浓度及质量分数分别为10mol/L、25%,以该条件进行发酵72h 得菌丝体小球直径分别为0.2～1.2mm 和1.2～2.2mm,残糖含量分别为2.58g/L 和1.37g/L,L- 乳酸产量分别为74.34g/L 和80.61g/L。     

超细化脱脂米糠面包的研制

将米糠脱脂及超细化处理后制做面包,以面包的硬度和比容为指标,考察脱脂超细化米糠、奶油、酵母、碳酸氢钠的不同添加量与面包品质的关系,并对超细化米糠面包的配方进行优化。结果表明：脱脂处理显著降低米糠脂肪含量,提高米糠稳定性;超细化处理减少了粗纤维含量,提高了VB1 和VB2 的含量;采用单因素试验和正交试验,得出在100g 面粉中添加8% 的超细化脱脂米糠、1.5g 的酵母、0.4g 的碳酸氢钠、6g 的奶油为制做面包的最佳配方。此时面包的硬度为374.9g,比容为3.91mL/g。面包产品质地柔软,带有淡淡的米糠香味,色泽金黄,口感佳。     

豆腐柴果冻的制作工艺优化及其降血糖活性研究

目的研究豆腐柴果冻的最优制作工艺及其降血糖活性。方法以豆腐柴鲜叶超微粉为原料,以热处理的碳酸钙为凝固剂,通过单因素和响应面法优化豆腐柴果冻的制作工艺,并对豆腐柴果冻的感官、质构、营养成分及降血糖活性进行了分析。结果豆腐柴果冻的适宜制作条件为料液比1:17(g:m L),CaCO_3添加量0.06%,水浴温度85℃;每克豆腐柴果冻含有(23.65±1.21)mg黄酮和(155.71±10.86)mg果胶,具有抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的作用。豆腐柴果冻的降血糖活性可能与其还有丰富的黄酮和果胶有关。结论豆腐柴果冻不仅营养丰富,而且具有降血糖效应,可以作为糖尿病患者的辅助休闲食品或代餐食品。     

超声波和糖基化复合改性对小麦面筋蛋白性质和结构的影响

采用超声波处理小麦面筋蛋白并经葡萄糖糖基化改性后,研究其溶解性和乳化性的变化,同时对改性小麦面筋蛋白的结构进行表征。结果表明,适当的超声波处理有利于小麦面筋蛋白的糖基化改性,40 k Hz、300 W超声波处理40 min的小麦面筋蛋白糖基化改性效果最为显著,其在等电点处的溶解性较对照组提高了82.15%,且乳化活性及乳化稳定性最高,分别达到56.82 m~2/g和36.27 min。适当的超声波处理使小麦面筋蛋白表面疏水性提高,而与葡萄糖接枝后,蛋白的表面疏水性降低。傅里叶变换红外光谱表明,小麦面筋蛋白以共价键的结合形式接入了葡萄糖分子,生成了糖蛋白。     

微波预处理对热诱导小麦面筋蛋白凝胶性质和微观结构的影响

研究微波预处理对热诱导小麦面筋蛋白凝胶性质和微观结构的影响。结果表明,当微波条件为700 W功率,处理时间90 s时,热诱导小麦面筋蛋白凝胶强度和持水性达到最大值158.6 g/cm~2和83.13%,比对照组分别提高83.4%和162%,此时凝胶中非冻结水的比例也显著提高。随着微波功率从70 W增加到700W,微波处理时间从10 s增加到90 s,热诱导小麦面筋蛋白凝胶的表面疏水性逐渐降低。微波预处理还显著增大了热诱导小麦面筋蛋白凝胶体系中的疏水相互作用,疏水相互作用的贡献从0.85 g/L增大到1.69 g/L。微波预处理的热诱导小麦面筋蛋白凝胶具有更为致密、均匀的微观三维网络结构。