体外酶法水解制备小分子透明质酸

为了制备分子量分布集中的小分子透明质酸,在6 g/L的高分子量透明质酸水溶液中加入一定梯度重组水蛭透明质酸酶,并控制水解时间。结果表明,通过控制加入重组水蛭HAase的量和水解时间,根据水解分子量下降规律,可以制备出分子量分布集中的小分子HA,包括水解终产物透明质酸四糖和六糖。同时,通过高效体积排阻色谱和琼脂糖凝胶电泳,可以证明水解产物的分子量分布集中。     

红葱中小分子化合物对透明质酸酶的分子对接研究

鸢尾科植物红葱是我国西南地区民间药用植物。由于红葱化学成分分离纯化及鉴定方面的原因,妨碍了红葱药理学研究的深入。本文基于文献收集到的已知化学结构的39种红葱化学成分,利用分子模拟对接软件AutoDock 4.2,以分子对接结合自由能为标准,评价红葱化学成分与透明质酸酶（HAase）间的相互作用,从中筛选出HAase抑制剂,同时采用Elson-Morgan改良法测定红葱不同极性提取物对HAase活性的影响。实验中筛选出10个与HAase结合较好的化合物,其中化合物37,33的对接结合能最低,分别为-7.73和-7.72 kcal/mol,提示其可能具有较强的HAase抑制活性。实验结果显示HAase分子中氨基酸残基TYR75、ASN37和GLU131是化合物与酶形成氢键的重要作用位点。酶活性测定实验显示红葱不同极性提取物对HAase有一定的抑制作用。本研究结果为进一步探讨红葱化学成分对HAase活性的影响提供了参考依据。     

透明质酸补糖分批发酵工艺研究

采用马链球菌（Streptococcus equi）在7L自动发酵罐中进行分批补加葡萄糖发酵生产透明质酸（HA）。结果表明：采用葡萄糖初始浓度为35g／L,分批补加葡萄糖,使其浓度控制在20g／L-25g/L,通气量固定1．5L／min,通过调节搅拌转速（170r／min-300r/min）使发酵中后期溶氧控制在10％,可使HA的产量达到5．6g／L,平均分子量达到1．78×10^6u,较分批发酵时HA产量提高90％,分子量提高46％。     

低分子量透明质酸的制备及其抗氧化活性的研究

首先研究了Fe2+-S2O2-8氧化体系硫酸根自由基(SO-4·)对透明质酸(HA)的氧化降解作用,初步确定了SO-4·氧化降解HA制备低分子量透明质酸(LMWHA)的实验条件。接着HA降解产物经过乙醇沉淀以及凝胶柱层析纯化,采用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测得纯化后LMWHA分子量为1.45×105Da。最后采用不同的体外抗氧化实验,并以HA为对照,研究了LMWHA的抗氧化活性,发现SO-4·降解后生成的LMWHA的抗氧化活性高于降解前的。本实验说明用SO-4·降解HA制备具有抗氧化活性LMWHA是可行的,为LMWHA抗氧化药物的开发提供了理论依据。     

透明质酸的生物技术生产及应用

糖胺聚糖（GAGs）是线性多糖,由重复的二糖单位（一个氨基糖和一个糖醛酸残基组成）构成。其中,透明质酸（HA）与其他GAGs不同,组成中无硫酸基。HA具有广泛的科学价值,应用于不同的生物医学领域。HA在生理条件下有多种不同的形式,有酸的形式或盐的形式如透明质酸钠,故将其命名为hyaluronan,本文将其简称为HA。     

透明质酸酶

1透明质酸酶及透明质酸透明质酸酶(hyaluronidase,HAase)是能使透明质酸产生低分子化作用酶的总称。根据全国科学技术名词审定委员会公布的《生物化学名词》将hyaluronic acid译为透明质酸,《药学名词》和药品的国家标准则将其称为玻璃酸,两者为同一种物质,故透明质酸酶亦称为玻璃酸酶。     

高分子量透明质酸生产菌SH0201的诱变选育

以Streptococcus equi SHO为出发菌,通过5-BU、X-射线辐照诱变选育到1株无溶血性和透明质酸裂解酶双缺陷型菌株X103;以NTG为诱变剂对该菌进行化学诱变,选育到遗传稳定性好,无溶血性,产高分子量透明质酸(HA)的突变菌SH0201,其摇瓶发酵生产HA相对分子量达2.06×106Da,较之出发菌,所产HA分子量有大幅度的提高.     

发酵液中透明质酸的分离纯化

考察分离纯化条件对发酵液中透明质酸(HA)提取率的影响。结果表明,采用乙醇和十六烷基吡啶(CPC)相结合的办法来提取HA,提取率较高;适宜的提取条件为温度30℃p,H为7。提取物和HA标准品有着相同的吸收峰,说明该发酵产物呈极为典型的HA红外吸收谱图,证明该提取物即为透明质酸。     

阴离子交换树脂法纯化透明质酸工艺的研究

以鸡冠中提取的透明质酸(HA)粗提物为原料,通过静态吸附及解析试验确定选用201×7型阴离子交换树脂,通过动态吸附及解析实验,确定透明质酸最佳纯化条件为:HA粗提物与树脂体积比为4∶1;吸附时间为45 min;洗脱剂浓度为0.6 mol/L NaCl溶液;洗脱流速为1.0 m L/min;洗脱剂用量与树脂体积比为4∶1。对纯化后的物质进行紫外光谱检测,结果表明纯化后物质与标准品峰型一致,证明纯化后物质为透明质酸;粗提物的纯化率为26%,纯化物的纯化率为89.43%,显著提高了透明质酸的纯化率。     

透明质酸-明胶复合膜的制备及理化性质研究

为研发保鲜效果良好的生物基可食用膜,采用流延法将不同分子量的透明质酸(Hyaluronic acid,HA)与明胶制成透明质酸-明胶复合膜,测定其厚度、密度、抗拉强度、不透明度、色度、溶解性、水蒸气透过率和水分含量等理化指标,分析HA分子量对复合膜理化性质的影响,并使用红外光谱表征复合膜的结构。结果表明,随着HA分子量的增加,复合膜厚度、水分含量和不透明度呈现先增加后降低,溶解性和水蒸气透过率降低。红外光谱中酰胺A区特征峰向短波迁移,表明HA分子与明胶分子之间存在氢键作用。透明质酸分子量为(80~100)×104 Da时,复合膜的综合性能最佳。HA-明胶复合膜的开发在食品包装和保鲜方面有潜在的应用价值。     

透明质酸与化妆品

透明质酸（HA）具有特殊的保水作用,是目前发现的自然界中保湿性最好的物质,在化妆品领域得到广泛应用。现将HA在化妆品领域的应用做一综述。     

透明质酸与化妆品

透明质酸（HA）具有特殊的保水作用,是目前发现的自然界中保湿性最好的物质,在化妆品领域得到广泛应用。现将HA在化妆品领域的应用做一综述。     

阶段控温提高透明质酸酶在毕赤酵母中的表达

透明质酸酶(Hyalurondiase,HAase)是一种具有医药作用的水解酶,为了提高HAase在重组毕赤酵母中的分泌表达量,对重组毕赤酵母诱导阶段的温度进行了优化。研究发现,降低诱导温度可以提高HAase的产量,其中两阶段控制温度诱导策略效果最为显著。诱导阶段0~60 h温度控制在25℃,60~96 h温度控制在22℃,HAase酶活最高为1.18×106U/m L,是诱导温度为30℃时(4.53×105 U/m L)的2.6倍。此外,采用两阶段控制温度诱导策略有利于细胞活性的提高和AOX1启动子的表达。两阶段控制温度诱导策略还可以应用到其他酵母表型中,为毕赤酵母高效表达外源蛋白质提供一种新思路。     

复合保护剂对透明质酸酶的稳定性研究

以球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)A152发酵生产的透明质酸酶(HAase)的酶活力为衡量指标,通过研究糖类、醇类、生物大分子和金属离子等保护剂对提高透明质酸酶热稳定性的作用,考察添加复合保护剂对透明质酸酶热稳定性和储存稳定性的影响。结果表明,山梨糖醇、蔗糖和可溶性淀粉作为保护剂,可提高HAase酶的热稳定性。通过单因素和正交实验优化后得到了效果最佳的复合保护剂配方,即山梨醇7.5%、蔗糖10%、可溶性淀粉0.2%。优化后添加保护剂的HAase在42℃保温2 h后,其酶活保留率为88.68%,较对照提高了64.18%,在37℃,通过添加复合保护剂,其半衰期提高了48%。在4℃储藏90 d,添加复合保护剂和防腐剂(0.1%的山梨酸钾和0.05%的苯甲酸钠)的HAase酶活保留率高达85.52%。     

食品原料透明质酸的国内外管理及应用

透明质酸（HA）作为广泛存在于人体的天然物质,具备多种生理调节作用,常以结构更稳定的钠盐形式存在,即透明质酸钠（SH）。目前HA在国外食品领域已得到了广泛应用,日本、美国、欧盟等多个国家/地区允许在普通食品中添加HA;韩国批准HA添加至健康食品和饮料中。中国于2008年批准HA（SH形式）作为保健食品原料,2020年12月将其使用范围扩大至普通食品。本文对作为食品原料的HA的产品特点、口服功效及其在国内外的管理批准情况、适用范围、功能声称、安全限量及生产工艺进行概述,了解其适用性和潜在市场需求。同时对相关法规管理及批准使用现状进行梳理分析,以期为HA相关食品的研发、监管、消费等提供系统参考,促进食品行业对HA的合理利用和发展。     

pH调控方式和温度对透明质酸发酵过程的影响

本文以一株产透明质酸(hyaluronic acid, HA)的兽疫链球菌为研究对象,在5.00 L发酵罐和250 mL摇瓶中考察了温度和pH对HA发酵过程中菌体生长、HA产量、HA分子量大小以及分布的影响。结果显示,当pH为7.00时适合菌体生长,而在产物合成阶段更高的pH条件8.00下HA比生成速率更高。据此,设计了分段和周期性改变发酵过程pH的调控模式,研究表明:分段pH调控方式与pH为7.00时相比HA浓度没有提高,但是pH在7.00和8.00之间进行的分段调节时分子量提高了10.60%,同时显著降低了多分散系数,另外在pH在7.00和8.00之间进行的分段调节的同时在33℃的培养温度下收获时HA分子量提高了18.70%,而为后续工业化生产分子量更为集中的HA,同时降低不同分子量HA分离成本提供了方向。     

透明质酸在皮肤创伤修复中的应用

透明质酸(HA)吸水性强、生物相容性好,在创伤愈合中具有特殊的生物活性,在创伤治疗领域中应用广泛。本文对HA在创伤敷料、皮肤组织工程等创伤修复领域中的应用进展作一综述。     

透明质酸的制备及其应用的研究进展

透明质酸(hyaluronic acid,HA)作为一种线性黏多糖,其在人体内分布广泛,发挥着重要的生理功能作用,由于其独特的理化性质和生理功能,在保健品、化妆品、医药等方面应用广泛.2021年我国批准HA作为新资源食品原料,了解其制备及分离纯化方法对推动其产业化发展很有必要,本文综述了HA的生理功能、不同来源HA的制...     

甲壳低聚糖功能性质

对５种平均分子量（ＭＷ）分别为１５００，３０００，５０００，８０００，１３０００甲壳低聚糖的水溶性、保湿性、吸湿性以及抑菌作用进行了研究。结果表明：ＭＷ１５００和３０００的甲壳低聚糖具有优良的水溶性，其吸湿性和保湿性强于透明质酸、乳酸钠和甘油，并且也有显著的抑菌作用。甲壳低聚糖的分子量大小和游离氨基的存在是影响其功能性质的关键因素。     

透明质酸的降解方法及工艺条件研究

对物理法、化学法、物理化学法和酶法降解透明质酸(HA)进行了研究,利用HPLC对降解后HA的组分进行了分析。研究结果表明:采用过氧化氢和抗坏血酸降解HA效果好,降解后的HA基本组成单元没有发生明显的变化;过氧化氢和抗坏血酸氧化降解HA的最佳工艺条件为过氧化氢和抗坏血酸的摩尔比为2∶1、pH4.0、温度55℃、时间15min,过氧化氢和抗坏血酸的最佳浓度分别为0.4mmol/gHA和0.2mmol/gHA,HA的分子量可降解为45.7KDa。