固定化纤维素酶提取牡丹叶黄酮的研究

以大孔树脂DM130为载体,考察给酶量、戊二醛浓度、固定化温度、固定化时间4个单因素对固定化纤维素酶提取牡丹叶黄酮的影响,通过正交试验确定固定化纤维素酶提取牡丹叶黄酮的最佳提取工艺。试验结果表明,DM130大孔吸附树脂固定化纤维素酶的最佳工艺参数为:纤维素酶浓度为1.25 m L/g固定化载体、戊二醛浓度为2%、固定化温度为50℃、固定化时间为3 h,牡丹叶黄酮提取率可达1.95%。制备的固定化酶使用4次后牡丹叶黄酮提取率仍达固定化酶第一次提取时的85.13%,说明制备的固定化纤维素酶在牡丹叶黄酮提取中具有良好的效果。     

制备苹果酒酵母固定化载体ACA的研究

以苹果酒酵母固定化载体ACA的机械强度和通透性为指标,通过单因素试验观察了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、壳聚糖浓度、针头型号、固化时间和液化时间对制备固定化载体ACA的影响,并通过正交试验优化了载体ACA的制备工艺。试验结果表明,4个因素中海藻酸钠浓度(A)对载体ACA的机械强度和通透性有极显著影响,氯化钙浓度(B)对载体ACA的机械强度影响显著,壳聚糖浓度(C)对载体ACA的通透性影响显著,而交互作用(A×B)、液化时间(D)对载体ACA的机械强度和通透性影响均不显著。制备苹果酒酵母固定化载体ACA的最佳条件为:2.0%海藻酸钠溶液,2.0%CaCl2溶液,0.2%壳聚糖溶液,液化时间10min。     

壳聚糖微球固定化β-半乳糖苷酶

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂固定化β-半乳糖苷酶,通过单因素和正交实验探讨了固定化载体和固定化条件对酶固定化的影响。结果表明,固定化载体壳聚糖(脱乙酰度90%以上)的最适分子质量和体积分数分别为3×105和2%,制备的壳聚糖载体具有良好的成球性和机械强度。采用交联方式将β-半乳糖苷酶固定在壳聚糖微球上,在单因素试验的基础上,进行正交试验确定固定化条件为:交联剂戊二醛浓度和交联时间分别为10 g/L和1.0 h,酶浓度和固定化时间分别为1.5 mg/m L和12 h,最终制备的固定化酶的活力回收率达到70.5%。同时该固定化酶具有良好的储存稳定性和操作稳定性,具有一定的应用价值。     

窄分子量分布壳聚糖的制备工艺研究

研究了超声波法制备窄分子量分布壳聚糖的制备工艺,在单因素实验的基础上,根据旋转组合设计原理,研究温度、壳聚糖浓度、乙酸浓度三个影响因素对超声波处理后壳聚糖分子量分布指数的影响,并建立了回归数学模型,通过实验结果进行方差分析及对数学模型进行优化得到了窄分子量分布的壳聚糖的制备条件。结果表明,最佳工艺参数为:温度24℃、乙酸浓度0.27mol/L,壳聚糖浓度根据实际需要定为1%,经过超声波处理后壳聚糖分子量分布指数从11.51降到了4.25。     

棉织物的磁性固定化纤维素酶抗起毛起球整理

以磁性壳聚糖微球为载体,与戊二醛进行共价交联反应制备磁性固定化纤维素酶.考察了影响固定化纤维素酶活力的固定化条件,及其稳定性和重复使用性,并应用于全棉针织物抗起毛起球整理.结果表明,在pH值7.0,温度50℃,EDC和戊二醛的质量分数分别为0.25%和2.5%,游离纤维素酶与载体质量比为80 mg/g的条件下,纤维素酶的固定化效果最好,其固载率为91%,酶活回收率达65%.与游离酶相比,固定化纤维素酶的pH值稳定性和储存稳定性均有显著提高,连续使用12次,酶活仍保持在75%.全棉针织物经磁性固定化纤维素酶处理后,其抗起毛起球等级较原织物提高1.5级.     

壳聚糖涂覆磁性纳米颗粒对纤维素酶的固定化

设计具有高稳定性、选择性的酶-载体复合物是固定化酶领域的研究重点。本研究以环氧氯丙烷作为表面活性剂,通过沉淀法制备磁性纳米颗粒并涂覆壳聚糖,用以固定化纤维素酶。通过SEM扫描电镜、VSM磁强计、FTIR红外光谱对 Fe₃O₄-壳聚糖磁性纳米颗粒进行表征,并研究其固定化纤维酶的表征及酶学性质。结果表明,制备的磁性纳米颗粒晶形完整,纤维素酶有效固定在Fe₃O₄-壳聚糖载体表面;固定化纤维素酶比游离纤维素酶具有更好的酸碱稳定性和热稳定性。固定化纤维素酶在pH 2~9范围内均有较好的活性,并且置于60和70 ℃条件下4 h后,仍然能保持将近50％的活性,经10次循环利用后,固定化纤维素酶仍然保持在52.6%的活性,说明Fe₃O₄-壳聚糖可作为固定纤维素酶的有效载体,为固定化酶的进一步应用提供了参考。     

聚乙烯醇固定化酵母粗酶发酵玉米秸秆纤维素工艺研究

以聚乙烯醇(PVA)为载体将从热带假丝酵母菌制备的粗酶进行固定化,并通过响应面方法对生物质乙醇的发酵工艺进行了一系列研究.在单因素试验的基础上,确定粗酶量、底物浓度和pH值为影响因子,应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,以乙醇得率为响应值,进行响应面分析.结果表明,PVA法固定化热带假丝酵母粗酶的最佳条件为:粗酶量0.36g,底物浓度8%,pH 4.53:在该条件下进行固定化发酵的乙醇得率为25.84%.     

包埋-交联结合法固定β-呋喃果糖苷酶的研究

分别以海藻酸钠、壳聚糖为载体,采用包埋-交联法固定β-呋喃果糖苷酶。对固定化过程中氯化钙浓度、戊二醛浓度、加酶量、包埋时间、交联时间等因素进行考察;采用正交试验设计对载体制备与酶固定化中的主要条件进行优化。通过对固定化酶活力回收比较,壳聚糖固定化酶活力回收率优于海藻酸钠。     

龙虾头壳制备低聚壳聚糖的研究

以虾仁加工的副产品龙虾头壳为原料,采用酸浸碱煮工艺制备甲壳素,得率为(16.11±0.73)%;浓碱处理脱乙酰基制得壳聚糖,得率为(68.07±1.60)%(相对于甲壳素);选用纤维素酶对壳聚糖进行降解制备低聚壳聚糖。分别研究了加酶量、pH、温度、时间、底物物浓度对壳聚糖降解为低聚壳聚糖的影响。选择0.5%的壳聚糖浓度,通过优化设计试验,确定纤维素酶降解壳聚糖最佳条件为:加酶量8IU/(g底物),pH5.0,温度60℃,时间4h。取最佳工艺条件下降解的低聚壳聚糖,采用乙醇分步沉淀,EP75为(2.36±0.15)%,平均聚合度为9;EP87为(0.85±0.15)%,平均聚合度为7;ES87为(79.84±0.10)%,平均聚合度为5。龙虾头壳制备壳聚糖,纤维素酶降解制成聚合度10以下的低聚壳聚糖,平均得率为8.8%。     

一种复合酶的固定化及应用研究

以壳聚糖为原料制备了壳聚糖微球,并通过扫描电镜对微球的形态和结构进行了表征。以自制的壳聚糖微球为载体固定化复合酶,分别通过单因素试验和正交试验,对影响酶固定化效果的因素及固定化酶的酶学性质进行了考察,并采用HPLC对其应用于催化京尼平苷制备京尼平的效果行了研究。结果表明:壳聚糖微球平均粒径约为2 mm,表面呈多孔结构。酶固定化最优化条件为:吸附时间4 h,交联时间1 h,交联剂质量分数0.2%。固定化酶的最适温度为60℃,游离酶最适温度55℃,且固定化酶温度稳定性比游离酶高;固定化酶与游离态酶的最适pH5.0,且固定化酶pH稳定性比游离酶高;固定化酶在使用8次以后剩余酶活力仍在50%以上;固定化酶湿态储存适合短期内使用和储存,干态储存适合长期储存。采用此固定化方法制得的固定化酶催化京尼平苷水解制备京尼平效果良好。     

Acetylation of loofa (Luffa cylindrica) sponge as immobilization carrier for bioprocesses involving cellulase

The feasibility of using loofa sponge for immobilization of cellulase-producing microorganisms was investigated by acetylating loofa sponge. Acetylation was achieved by autoclaving process of loofa sponge immersed in acetic anhydride at various temperatures for various times. The degree of acetylation, as inferred by the weight percentage gain (WPG), was enhanced by increasing both temperature and the duration of acetylation. The acetylation of a piece of loofa sponge in an autoclave at 120 degrees C for 20 min resulted in a WPG of about 8%, which was sufficient to protect the loofa sponge against cellulose degradation. The acetylated loofa sponge prepared under this condition was not decomposed by commercial cellulase and its structure was maintained for more than 720 h during repeated-batch treatments with commercial cellulase. A flocculating yeast (Saccharomyces cerevisiae IR-2) and a fungus (Trichoderma reesei QM9414) were successfully immobilized in the acetylated loofa sponge. In each case, the percentage of immobilized cells was as high as that obtained using nonacetylated loofa sponge. Acetylation had no adverse effects on cell growth and immobilization of T. reesei QM9414, as well as on cell growth and ethanol production by S. cerevisiae IR-2. T. reesei QM9414 immobilized on an acetylated loofa sponge was successfully used for repeated-batch cellulase production from commercial cellulose powder. Although the acetylated loofa sponge showed a slight weight loss, it was not disintegrated by activated sludge. The results obtained in this study showed that acetylated loofa sponge is suitable as an immobilization carrier for bioprocesses involving cellulase.     

小黄姜腌制过程中硬度变化及其影响因素研究

目的 以贵州小黄姜为原料,通过对小黄姜脆度、多聚半乳糖醛酸酶活性、纤维素酶活性、果胶含量、纤维素含量进行检测,研究其在腌制过程中酶活的变化对产品脆度的影响。方法 采用质构仪检测小黄姜脆度;多聚半乳糖醛酸测定以及纤维素酶的测定采用DNS比色法;果胶含量的测定采用咔唑比色法;纤维素采用称量法。结果 随着腌制时间的延长,多聚半乳糖醛酸酶和纤维素酶活性都逐渐增强,在腌制第14天,两种酶的活性均有显著增强的情况;在腌制过程中,果胶含量逐渐降低,在腌制的第14天,果胶含量下降速度加剧;在腌制过程中,纤维素含量总体是降低的,但在腌制的第7天至21天,纤维素含量出现增高情况,具体原因有待研究;腌制至35天,小黄姜质地变软,脆度劣化严重。结论 相关性分析显示,脆度与果胶含量呈现极显著正相关,脆度与纤维素之间不显著,脆度与多聚半乳糖醛酸酶活以及纤维素酶活性呈现极显著负相关。     

非碳水化合物对木醋杆菌合成细菌纤维素影响规律的初探

该文论述了在静置培养条件下乙醇、醋酸和柠檬酸对木醋杆菌(Acetobcter xylinum)产细菌纤维素的量都有不同程度的增效作用。其中，添加1．5％的乙醇，细菌纤维素产量为2.44g/L；添加0．1％的醋酸，细菌纤维素为2．75g／L；添加0．2％的柠檬酸，细菌纤维素产量为2．15g／L。     

磁性固定化纤维素酶的制备及其磁响应性

本研究以磁性壳聚糖微球为载体,采用吸附法制备磁性固定化纤维素酶。以酶活力为考察指标,研究了不同工艺条件对制备固定化酶的影响,及其在外加磁场下的磁响应性的变化。实验结果表明,制备磁性固定化纤维素酶最适条件为:吸附时间10h,pH5.0,离子浓度0.05mol/L,酶用量为150mg。在外加磁场作用下,比较磁性固定化纤维素酶与游离纤维素酶酶活力的变化发现:当磁场强度<500mT与曝磁时间<60min时,游离纤维素酶的酶活随着磁场强度与曝磁时间的增加而增加,但超出此范围,酶活就明显下降;而当磁场强度<300mT与曝磁时间<60min时,磁性固定化纤维素酶酶活与游离纤维素酶的变化趋势相似。     

大豆β-淀粉酶、产气杆菌异淀粉酶在虾壳几丁质上的固定化及在麦芽糖生产中的应用

本文研究了大豆β—淀粉酶和产气杆菌异淀粉酶在同一载体上的固定化作用。以虾壳几丁质和壳聚糖为载体,证明几丁质更适于固定化异淀粉酶。用5％甲酸和50％乙酸预处理载体可增加固定化异淀粉酶的活性和稳定性,这可能是由于载体中壳聚糖的溶解造成的。经甲酸处理的几丁质先与4～6％pH7～9的戊二醛反应1小时,再同酶液(10mg/ml,pH6)反应2小时,并添加0.2mol/1Ca~#,将有利于固定化作用。用本方法得到的固定化酶具有高度活性和稳定性。固定化异淀粉酶最适pH由6.5变为5.0,而固定化β—淀粉酶最适pH变化不大。固定化酶在60℃稳定,在70℃5分钟失活。固定化酶在水中贮藏稳定,并具有良好的操作稳定性,使其在麦芽糖生产中具有潜在的应用价值。     

胡椒提取物在冷却肉保鲜中的应用

研究胡椒提取物作为复合保鲜剂的成分在延长冷却肉货架期方面的作用。采用常压回流方法获得胡椒提取物,再以胡椒提取物、壳聚糖和乙酸为试材,对冷却肉进行贮藏保鲜,最后采用二次通用旋转组合设计法,对复合保鲜液配方成分的比例进行优选。结果表明：复合保鲜剂能明显地抑制保藏过程中微生物的生长。胡椒提取物质量分数0.95%,壳聚糖质量分数0.99%,乙酸质量分数0.80%的保鲜剂配方较好,保鲜12d后细菌总数(lg(CFU/g))为5.2214。     

Chitosan coating for the protection of amino acids that were entrapped within hydrogenated fat

A novel formulation method was suggested to prepare rumen-protected amino acid by coating chitosan on the particles of hydrogenated fat entrapping amino acid. Chitosan coating that was formed due to the coacervation either by the addition of ethanol or sodium hydroxide to the acetic acid solution of chitosan could increase the retention of amino acid in the fat prills. Both protected methionine and arginine particles showed a sustained release behavior in simulated rumen conditions. In the pH 5.5 buffer, the protected arginine particles coated with chitosan by the coacervation using NaOH could retain about 80% of arginine. When the coacervation with the addition of ethanol was employed, the chitosan-coated particles could retain even 97% of arginine. The chitosan-coated methionine particles prepared by addition of ethanol led to almost the same level (85%) of retention as the commercial product Mepron M85. Both the Higuchi kinetics and the model for the release of agent dissolved in polymer matrix could well describe the control release of protected amino acid.     

壳聚糖纺丝原液性能及其湿法纺丝工艺

壳聚糖由于其优异的生物性能备受人们关注,但目前壳聚糖纤维的强度低,严重制约了其应用的领域。研究了乙酸的体积分数、温度以及壳聚糖的质量分数对壳聚糖纺丝原液稳定性的影响,并进行湿法纺丝工艺制备纯壳聚糖纤维。研究表明:纺丝原液壳聚糖的质量分数为3%～4%,乙酸的体积分数为2%,纺丝温度为30～50℃时,可得到力学性能良好的初生纤维;以5%NaOH加入适量乙醇和Na2SO4作凝固浴较好;适当增大凝固时间,提高卷绕速度,可得到高取向、高强度的壳聚糖初生纤维。