英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

姜黄素超分子包合物改善乙醇诱导LO2肝细胞DNA损伤的作用机制

该文主要考察了姜黄素超分子包合物(curcumin/β-cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)保护乙醇诱导LO2肝细胞损伤的分子机制.采用流式细胞仪检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞损伤后细胞周期分布的影响;Western blot检测CUR/CDP预处理对乙...     

基于PC12细胞的西维因神经损伤作用机理研究

本文以PC12细胞为神经细胞模型,研究了西维因对神经细胞的损伤作用机理。当PC12细胞暴露于0.00μg/m L~200.00μg/m L不同浓度的西维因溶液时,表现出了一系列显著变化。随着西维因溶液浓度的增大,细胞的存活率从(100.00±0.46)%下降到了(27.86±1.69)%;细胞内乳酸脱氢酶(LDH)漏出率增多;丙二醛(MDA)含量从19.27±0.96 nmol/mg prot逐渐增加到112.39±1.59nmol/mg prot;超氧化物歧化酶(SOD)活力从4.08±0.87 U/mg prot增强到17.77±0.43 U/mg prot,同时其抑制率也从(19.00±1.66)%增加到了(73.00±1.71)%;同时谷胱甘肽(GSH)含量从96.15±6.10μmol/g prot逐渐减少到22.91±3.98μmol/g prot;细胞相对荧光强度(RFI)从37.38±11.48先增强到45.56±11.96,后因细胞严重损伤又减弱到17.11±1.50。细胞液内乙酰胆碱(ACh)含量也逐渐增加。同时,利用激光共聚焦扫描显微镜观察到了线粒体膜电位的显著下降。西维因对PC12细胞表现出很强的神经毒性。     

软枣猕猴桃原花青素对H2O2诱导细胞损伤的预保护作用

研究软枣猕猴桃中原花青素类化合物对过氧化氢损伤人永生化表皮细胞(Ha Cat)的保护作用。以浏阳市大围山软枣猕猴桃为试材,以体外培养的Ha Cat细胞为实验对象。试验分为3组,分别为对照组、过氧化氢损伤组、处理组(软枣猕猴桃原花青素5～1000μg/mL预处理),以细胞内细胞存活率(凋亡率)、SOD(超氧化物歧化酶)、GSH-PX(谷胱甘肽过氧化物酶)、ROS(活性氧簇)、Nrf2基因及其蛋白表达水平为综合评价指标,评价其抗氧化性强弱。实验结果表明:当加入原花青素类化合物对细胞进行预保护后,5～500μg/L浓度的原花青素对损伤细胞的存活率为77%左右,较模型组提高了2.88倍。处理组细胞内SOD(10.46 U/mg prot)、GSH-PX水平(33.83 U/mg prot)较模型组升高了108.28%、137.48%,且存在明显差异(p0.05);而ROS水平显著下降,与模型组(96.21)相比细胞内平均荧光强度下降了48.60%。此时Nrf2基因及其蛋白表达量分别为1.40、35.11较模型组分别提高了63.93%、80.70%。这说明软枣猕猴桃中原花青素类化合物对H_2O_2造成Ha Cat细胞的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天然有效抗氧化剂产品应用于市场中。     

长茎葡萄蕨藻水提物体外抗氧化活性和对人肝细胞L02氧化损伤的保护作用

该文研究了长茎葡萄蕨藻水提物（CLE）体外抗氧化作用,并考察其减轻H2O2诱导的人肝细胞L02氧化损伤的能力。测其成分与含量,通过超氧阴离子和羟自由基来评价CLE的体外抗氧化能力;采用H2O2诱导建立L02细胞氧化损伤模型,以CLE进行干预,CCK8法检测细胞存活率,试剂盒检测胞外乳酸脱氢酶（LDH）、谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）活力以及胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量,荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）的变化。CLE中总多糖、总三萜、总多酚和总黄酮含量分别为205.01、28.32、27.02和15.72 mg/g,CLE对超氧阴离子和羟自由基均具有较好的清除作用,其半抑制率浓度（IC50）分别为0.94 mg/mL和2.20 mg/mL。与模型组相比,CLE（22.5 μg/mL和45.0 μg/mL）干预提高了L02细胞的存活率,并降低了细胞上清中LDH、AST和ALT活力以及细胞内ROS水平和MDA含量,提高了GSH含量;其中当添加45.0 μg/mL的CLE后,细胞存活率显著提高了20.09%,ROS和MDA含量分别降低至模型组的63.23%和63.20%,GSH含量提高了164.02%。由结果可知,CLE具有较强的体外抗氧化活性,可改善L02细胞氧化损伤,发挥细胞保护作用。     

榛仁五肽对HUVEC细胞氧化应激损伤的保护作用

本文以长白山榛仁五肽Ala-Trp-Asp-Pro-Glu(AWDPE)为研究对象,利用体外化学和细胞实验,研究AWDPE抗氧化活性及对HUVEC细胞氧化应激损伤的保护作用。结果显示:AWDPE浓度为1 mg/mL时对DPPH和ABTS自由基清除率分别达到63.38±2.44%和69.38±1.96%;实验范围内,不同浓度AWDPE对HUVEC细胞无生长抑制作用,亦无生长促进作用;与血管紧张素Ⅱ氧化损伤组相比,AWDPE保护组细胞活力高于AngⅡ损伤组1.51倍(p0.01);100μg/mL AWDPE保护组细胞内,LDH释放率为27.14±1.16%,为AngⅡ损伤组0.62倍(p0.01);500μg/mL AWDPE保护组细胞内,MDA含量为3.47±0.28 nmol/mg,为AngⅡ损伤组0.73倍;100μg/mL AWDPE保护组细胞内,CAT含量为2.34±0.11 U/mg,为AngⅡ损伤组1.39倍(p0.05);500μg/mL AWDPE保护组细胞内,T-SOD含量为23.55±1.26 U/mg,为AngⅡ损伤组2.48倍(p0.01);500μg/mL AWDPE保护组细胞内,GSH-PX含量为33.9±2.75 nmol/L,为AngⅡ损伤组1.91倍(p0.01)。上述实验证明AWDPE五肽对HUVECs细胞氧化应激损伤具有显著的保护作用。     

雪菊乙醇提取物对丙烯酰胺所致肝损伤的保护作用

该研究探讨雪菊乙醇提取物对ACR所致人肝癌HepG2细胞损伤及小鼠肝损伤的保护作用。以细胞存活率评价雪菊乙醇提取物对HepG2细胞损伤的保护作用,以小鼠体重变化、肝功能和肝脏病理切片结果评价雪菊乙醇提取物对小鼠肝损伤的保护作用,并测定氧化指标探讨保护作用机制。结果显示,雪菊乙醇提取物（2.00 mg/mL）预孵育可使ACR致毒的HepG2细胞存活率增加12.81%,细胞内活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）分别降低了57.67%、4.68 nmol/mg,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性分别提高了4.68、10.48、13.81 U/mg。雪菊乙醇提取物低（0.25 g/kg）、中（0.5 g/kg）、高剂量（1.0 g/kg）组小鼠体重增长率是ACR组的2.2~2.5倍。高剂量组小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）分别降低了27.76、46.79 U/L,MDA降低了1.86 nmol/mg,SOD、GSH-Px分别提高了56.73、330.44 U/mg;肝组织HE染色结果显示,雪菊乙醇提取物可改善肝小叶结构和肝细胞形态,减轻小鼠肝组织损伤。综上所述,雪菊乙醇提取物能够阻止ACR对HepG2细胞和小鼠肝组织的损伤,其作用机制与抗氧化能力有关。     

软枣猕猴桃黄酮对过氧化氢诱导HaCaT细胞损伤的保护作用

研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢（H2O2）损伤人永生化表皮细胞（HaCaT细胞）的保护作用。 以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H2O2 模型组、阳性对照组（VC组）和黄酮处理组（软枣猕猴桃黄酮0.1～1.0 mg/mL预处理）,以细胞内超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase,SOD）活力、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平为综合评价指标,并以VC作 为阳性对照评价其抗氧化活性。实验结果表明：当H2O2浓度为30 μmol/L时,细胞相对存活率为40%左右,较好地 诱导了HaCaT细胞氧化损伤模型。当加入黄酮类化合物对细胞进行预保护后,质量浓度0.3、0.6 mg/mL的黄酮处理 组细胞相对存活率为60%左右,较模型组均提高了20%左右。0.3 mg/mL黄酮处理组细胞内SOD活力（6.33 U/mg） 较模型组升高了约1 倍,且存在明显差异（P＜0.05）;ROS水平显著下降,与模型组（677.80）相比下降了13%左 右。说明软枣猕猴桃中黄酮类化合物对H2O2造成的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天 然抗氧化剂产品投入市场。     

麦麸中阿魏酸糖酯对高糖诱导HepG2细胞氧化应激的影响

研究麦麸中阿魏酸糖酯(FGs)对高糖诱导损伤的Hep G2细胞氧化应激的影响。Hep G2细胞分为正常对照组、高糖诱导损伤组、阿魏酸糖酯低剂量组(0.0565μmol/L)、阿魏酸糖酯中剂量组(0.113μmol/L)和阿魏酸糖酯高剂量组(0.565μmol/L),以荧光探针法检测细胞ROS水平,分光光度法测定细胞总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,用油红O脂类染色法观察细胞脂质沉淀情况。与高糖诱导损伤组相比,FGs高、中、低剂量组细胞的ROS水平显著降低(P0.01),CAT活力显著上升(P0.01),细胞脂质沉淀量明显减少;FGs中、高剂量组细胞的GSH-PX活力显著上升(P0.01);高浓度组的T-SOD活力为(48.05±1.40)U/mg,与高糖诱导损伤组的T-SOD活力相比具有极显著差异(P0.01)。阿魏酸糖酯通过增强细胞抗氧化酶活性,抑制胞内ROS生成,抑制高糖诱导Hep G2细胞的氧化应激。     

姜黄植物饮料对KM小鼠的解酒作用

该研究探讨了姜黄植物饮料（以下简称“姜黄饮”）对KM小鼠的解酒作用及可能的作用机制。构建高浓度酒精致小鼠醉酒模型,通过小鼠防醉试验行为学变化、醉酒小鼠血液乙醇浓度、体内乙醇代谢关键酶的含量或活性及胃肠组织的变化,评价姜黄饮对小鼠的解酒作用。结果显示,姜黄饮高剂量组醉酒潜伏期为235.00 min,与模型组相比显著延长（p<0.05）;醒酒时间为232.00 min,与模型组相比显著缩短（p<0.05）。血液乙醇含量为4.21 mg/mL,与模型组相比极显著降低（p<0.01）;乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶活力分别为3.74 U/mg prot和8.36 U/mg prot,与模型组相比显著提高（p<0.05）;辅酶Ⅰ和还原型辅酶Ⅰ含量分别为0.08 nmol/mg prot和0.39 U/mg prot,NADH/NAD+比值与模型组相比极显著提高（p<0.01）;细胞色素P450、谷胱甘肽过氧化物酶含量分别为78.51 pg/mg和1341.00 pg/mg,与模型组相比极显著提高（p<0.01）。胃部、肠组织观察和病理切片结果显示,姜黄饮低、高剂量组可减轻乙醇对小鼠肠道引起的损伤,减少小鼠肠道出血和水肿。上述结果表明,姜黄饮对醉酒小鼠有明显的解酒作用,其作用机制可能与其增强机体乙醇代谢路径关键酶及抗氧化酶的活性,加快体内乙醇代谢速度,保护肝脏及胃肠道有关。     

南极磷虾蛋白水解产物超滤组分的抗氧化活性评价

目的 对南极磷虾(Euphausia superba)蛋白水解产物超滤组分进行系统的抗氧化活性评价。方法 利用胃蛋白酶和胰蛋白酶制备南极磷虾蛋白水解物(antioxidant hydrolysate of Euphausia superba protein, EPAH), 利用超滤技术制备抗氧化组分。以自由基清除实验、脂质过氧化抑制实验、体外DNA氧化损伤保护实验以及氧化损伤张氏肝细胞(Chang liver)模型进行抗氧化组分的活性研究。结果 利用超滤技术将EPAH按照分子量(molecular weight, MW)分为三个肽组分EPAH-I(MW<3.5 KDa)、EPAH-II(3.5 KDa5 KDa)。其中, EPAH-I显示出强的DPPH自由基和羟基自由基清除活性、脂质过氧化抑制作用和质粒DNA的氧化损伤保护作用以及对H2O2氧化损伤的张氏肝细胞显示出较强的保护作用。在5.0 mg/mL浓度下, EPAH-I可将氧化损伤张氏肝细胞(Chang liver)的活力由模型组的(49.51±4.18 )%显著提升至(70.58±4.52)% (P<0.05); 超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力分别提高至(176.34±10.92) U/mg prot和(35.83±2.55) U/mg prot, 活性氧自由基含量降至2.76±0.18%, 膜脂质氧化产物丙二醛的含量降至(5.75±0.16) nmol/mg prot。结论 本实验制备的南极磷虾抗氧化组分(EPAH-I)具有显著的生物活性, 可用于抗氧化相关功能产品的研发。     

咖啡酸对CCl4诱导BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用

采用体外四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl₄）诱导BRL大鼠肝细胞损伤模型,研究咖啡酸（caffeic acid,CA）对CCl₄诱导BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用。实验分为对照组、CCl₄模型组（100 mmol/L CCl₄ 损伤3 h）和CA干预组（含0.2、0.4和0.8 mg/mL CA的DMEM溶液预处理4 h,再行CCl₄暴露3 h）,采用全自动生化分析仪检测天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力,试剂盒测定胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）、细胞质中细胞色素C（cytochrome C,Cyt c）和8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG）水平, qRT-PCR检测核因子E2相关因子2（nuclearfactor erythroid-2-related factor 2,Nrf2）、谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase,GSR）、醌氧化还原酶1(quinine oxidoreductase,NQO1)和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的表达水平。结果显示,CA对CCl₄所致细胞培养液中AST、ALT和LDH活力以及胞内ROS、细胞质中Cyt c 和8-OHdG水平的异常升高均具有显著的抑制作用（P<0.05）;与对照组相比,模型组细胞中Nrf2、GSR、NQO1和SOD基因的mRNA表达水平无显著差异（P>0.05）,而CA干预组中各检测基因的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）,且具有剂量依赖效应。结果表明,CCl₄暴露可使BRL大鼠肝细胞发生氧化应激,而CA可激活Nrf2/ARE信号通路、上调抗氧化基因的mRNA水平,从而有效抑制CCl₄对肝细胞的损伤。     

山西老陈醋对急性醉酒小鼠防醉及护肝作用研究

建立急性醉酒小鼠模型,将40只美国癌症研究所（ICR）小鼠随机分成空白对照组、模型组、低、高剂量醋组,并在灌胃4.0 h后,观察小鼠的的醉酒行为及小鼠肝组织病理学,并分别检测血清中乙醇含量及谷草转氨酶（ALT）、谷丙转氨酶（AST）活性和肝组织生化指标。结果表明,与模型组相比,高剂量醋组可显著延长醉酒时间至（44.00±9.35） min（P＜0.05）、醒酒时间极显著缩短至（121.25±12.71） min（P＜0.01）;血清中乙醇含量及谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性显著降低为（37.01±4.24） mg/100 mL、（12.83± 3.62） U/g、（14.22±1.56） U/g（P＜0.05）;肝组织中乙醇脱氢酶（ADH）活性极显著增加（P＜0.01）、乙醛脱氢酶（ALDH）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性显著增加（P＜0.05）,且丙二醛（MDA）含量显著降低（P＜0.05）。食醋组肝脏病变程度减轻,切片显示空泡面积减少。结果表明山西老陈醋具有预防小鼠醉酒和护肝作用。     

西兰花茎叶蛋白酶解条件优化及其降血脂活性

为优化胰蛋白酶水解西兰花茎叶蛋白的酶解条件及研究西兰花茎叶蛋白肽辅助降血脂活性,选取pH、温度、加酶量和底物浓度为自变量,水解度为响应值,利用响应面分析法,确定最佳酶解工艺参数;通过小鼠喂养实验分析西兰花茎叶蛋白肽对小鼠甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量以及动脉硬化指数(AI)的影响。结果表明,西兰花茎叶蛋白胰蛋白酶酶解的最优条件为:pH7.5,温度50℃,加酶量2000 U/g,底物浓度4%,水解度22.37%±0.46%;西兰花茎叶蛋白肽低剂量组(300 mg/kg)小鼠血清TC、ALT含量与模型组相比有极显著差异(P<0.01),TG、LDL-C含量与模型组有显著差异(P<0.05),对AST含量无明显降低作用;中(600 mg/kg)、高(1200 mg/kg)剂量组样品在降低TC、TG、LDL-C、ALT和AST含量上与模型组有极显著差异(P<0.01);高剂量组(1200 mg/kg)对HDL-C含量无明显影响,低(300 mg/kg)、中剂量组(600 mg/kg)能增加HDL-C含量,与模型组间有极显著差异(P<0.01),有利于AI指数的降低。以上结果表明西兰花茎叶蛋白肽具有良好的降血脂活性。     

二氢杨梅素及其酰化衍生物对肝细胞氧化损伤的保护作用

目的：考察二氢杨梅素(DHM)及其衍生物对肝细胞氧化损伤的保护作用。方法：建立L02细胞过氧化氢损伤模型,通过酶法酰化修饰DHM得到不同亲脂性的DHM衍生物,再通过测定活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平、线粒体膜电位和Caspase 3水平评估DHM及其衍生物对肝损伤细胞的保护作用。结果：除3-O-月桂酰化二氢杨梅素外,其余衍生物处理后的肝损伤细胞中活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)的释放和丙二醛(MDA)水平显著降低,抗氧化酶系水平升高,线粒体膜电位升高,Caspase 3水平降低,其中3-O-辛酰化二氢杨梅素的保护效果最好。结论：中等链长二氢杨梅素衍生物有较好的护肝效果。     

刺梨口服液对急性醉酒小鼠的解酒护肝作用

本研究通过动物实验,探讨刺梨口服液对急性醉酒小鼠的解酒护肝作用。解酒作用实验:各试验组灌胃相应受试物30d后建立急性醉酒模型,1 h后取血、肝脏,比较各组小鼠的血液乙醇浓度,并测定肝脏乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)活力;护肝作用实验:各组于建模后12 h取血和肝脏,计算其肝脏指数,并检测小鼠血液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量。结果发现,与模型组相比,刺梨口服液高剂量组小鼠血液中乙醇浓度降低33.54%,肝脏ADH活力由26.92 U/mL上升至41.78 U/mL、ALDH活力从118.12 U/mL升高到146.72 U/mL,血清ALT、AST活力分别降低58.40%、42.69%,肝脏指数下降9.80%,肝脏SOD活力升高72.65%,肝脏GSH含量增加25.34%(p0.05)。表明刺梨口服液具有一定的解酒作用,且对急性醉酒引起的肝损伤有明显的保护效果。     

乙醇降解菌种的筛选及其发酵乳产品解酒功效评价

通过乙醇耐受度、乙醇降解能力测定,从10株发酵性能良好的乳酸菌中筛选出乙醇降解效果好的菌种,并评价此菌种生产的发酵乳产品的体内外解酒功效。结果表明,筛选出1株具有高效乙醇降解能力的嗜酸乳杆菌,用其复配发酵菌种生产的发酵乳产品在模拟胃、肠液消化条件下,乙醇脱氢酶激活率分别为(36.87±1.58)%、(33.64±1.90)%,2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力(以谷胱甘肽当量计)分别为(1293.72±4.12)、(729.98±21.37)μmol/mL,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力(以谷胱甘肽当量计)分别为(16.14±0.12)、(11.26±0.10)μmol/mL;大鼠灌胃不同剂量发酵乳均能降低血液中乙醇质量浓度,高剂量组3 h后降为51.62 mg/100 mL(P<0.001),并能不同程度降低血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性且呈剂量依赖性,对乙醇所致肝损伤有较好的保护作用。研究为后续解酒功能性产品的研发提供科学依据。