脱脂油菜饼粕中蛋白质的分步酶水解研究——(Ⅱ)蛋白酶的筛选

本文对不同蛋白酶对脱脂油菜饼粕中蛋白质的水解作用及水解产物的风味作了初步研究.结果表明:在6种蛋白酶中,Alcalase的氮收率最高,其次是HAP碱性蛋白酶、1398中性蛋白酶、Flavourzvme,537酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶的较低;Flavourzyme的水解产物的水解度最高,而HAP碱性蛋白酶和1398中性蛋白酶水解产物的水解度较低.HAP碱性蛋白酶、Alcalase、1398中性蛋白酶的水解产物有较强的苦味,木瓜蛋白酶和537酸性蛋白酶水解产物口感平淡,Flaavourzyme水解产物无苦味.     

制备抗氧化棉籽肽用蛋白酶的筛选

本实验研究了由Alcalase碱性蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、无锡2709碱性蛋白酶、无锡精制中性蛋白酶等蛋白酶水解棉籽蛋白的水解度及水解液抗氧化活性的大小。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解能力最大,水解液清除自由基的能力也最大,实际生产中为了去除多肽的苦味物质,应先用Alcalase碱性蛋白酶水解,再用Flavourzyme风味酶作用。     

复合酶法水解鱿鱼蛋白及水解产物的研究

采用复合酶(Alcalase碱性内切蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶)水解鱿鱼蛋白,并对水解产物进行了研究.利用正交试验设计,对Alcalase的水解条件进行了优化;考察了防腐剂、Flavourzyme对水解度的影响;利用Sephadex G-75凝胶过滤层析,测定了水解产物的相对分子质量,并分析了氨基酸组成.结果表明,Nisin对水解度没有不利影响,Flavourzyme能有效提高鱿鱼蛋白的水解度,在优化的水解条件下,鱿鱼蛋白水解度达20.11%,水解产物的平均分子量为1180 u,约由9.2个氨基酸残基组成.水解产物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的38.4%,天冬氨酸和谷氨酸等鲜味氨基酸占氨基酸总量的26.3%.     

Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

双酶水解淡水鱼下脚料粉的研究

用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解淡水鱼下脚料粉,最佳酶解条件为:底物浓度为10.1%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.1%、水解温度57℃,起始pH值6.0,酶水解时间6.5 h,此条件下水解度为22.3%。     

鲢鱼蛋白水解物的双酶法制备工艺优化

利用双酶法(Alcalase碱性蛋白酶与Flavourzyme复合风味蛋白酶)制备鲢鱼蛋白水解物,应用响应面分析法对酶水解工艺优化,最佳酶解条件为底物浓度为料水比1∶2,Alcalase碱性蛋白酶用量为0.4%,Flavourzyme复合风味蛋白酶用量为0.8%,水解温度60℃,水解pH值6.5,水解时间4h,此条件下水解度为65.2%。     

酶法制备龙头鱼水解蛋白的研究

采用先添加碱性内切蛋白酶(Alcalase),再添加风味蛋白酶(Flavourzyme)及活性炭脱苦的方法,研究制备龙头鱼水解蛋白的工艺条件.以提高水解蛋白得率.利用正交试验设计.对蛋白酶的水解条件及活性发脱苦务件进行优化;利用Sephadex G-75凝胶过滤层析,测定水解产物的平均分子质量;利用氨基酸自动分析仪测定水解产物的氨基酸组成.结果表明,在优化的水解条件下.龙头鱼蛋白的水解度达17.68%;在活性炭的作用下,龙头鱼蛋白水解产物可基本脱除苦味;水解产物的平均分子质量为1 430Da,由13个氨基酸残基组成;水解产物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的34.9%,谷氨酸等呈味氨基酸含量占游离氨基酸总量的27.6%.     

双酶水解虾粉的研究

为了提高虾加工下脚料的利用价值,用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解虾粉,分析了水解温度、水解时间、起始pH值、酶用量（E/S）和底物浓度等对水解度的影响,确定的最佳酶解条件为：底物浓度为9.0%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度为55℃、起始pH值为6.5和酶水解时间为8h,水解度为22.1%。     

高谷氨酰胺低聚小麦肽制备用酶的筛选

本文研究了胰酶(Pancreatin)、碱性蛋白酶(Alcalase)、中性蛋白酶(Neutrase)、胃蛋白酶(Pepsin)、酸性蛋白酶(Acidic protease)、复合蛋白酶(Protamex)和风味蛋白酶(Flavourzyme)等8种蛋白酶对小麦蛋白的水解作用。以获得高谷氨酰胺低聚小麦肽为目标,通过分析水解过程中谷氨酰胺肽释放规律变化,筛选出Alcalase和Protamex为最佳水解酶。与其余蛋白酶制剂相比,Alcalase和Protamex可实现对小麦蛋白的有效降解、并最大限度减少蛋白酶对酰胺基团的破坏作用,产物有效谷氨酰胺含量可达20%以上,其中分子量低于3000 Da的水解产物高达95%,尤其是Alcalase酶解产物中分子量小于1000 Da的水解产物含量达到75%。与以往研究相比,本试验以分子量分布替代DH作为蛋白酶筛选的重要依据,从而更加准确反映蛋白酶解特性和难易程度,避免了游离氨基酸的干扰。     

牡蛎肉双酶复合水解工艺

以牡蛎为原料,利用多种蛋白酶对牡蛎蛋白质进行水解,挑选中性蛋白酶1398和Flavourzyme蛋白酶进行复合酶解,得出酶解的最佳工艺参数为:时间16h,中性蛋白酶1398与Flavourzyme作用的时间比为16∶15,中性蛋白酶1398酶与底物比为300U/g,Flavourzyme酶与底物比为1200U/g.水解后,氨基态氮质量分数为0.469%,总氮回收率为91%.     

两种酶水解鲢鱼蛋白产物功能性质研究

采用Alcalase 2.4L和Flavourzyme 500L蛋白酶对鲢鱼肉进行水解,研究了水解产物的水解度与体系的pH值对其功能性质的影响。水解产物的溶解度在pH4时最低,碱性时具有较高的溶解度;浊度随pH值变化趋势与溶解度相反,浊度越大,溶解度越小。随水解度的增加,水解产物的乳化活性指数、乳化稳定性、起泡性和泡沫稳定性减小(p<0.05);在水解度相同情况下,水解产物的功能性质取决于所用酶的种类。结果表明,鲢鱼肉蛋白水解产物的功能性质受其水解度和所用酶种类的影响。     

酶法生产大豆蛋白ACE抑制肽的研究

研究了Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protames复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果和ACE(血管紧张素转化酶)的抑制活性。水解能力用pH-start法检测,水解度大小依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶;ACE抑制活性用高效液相法检测,ACE抑制率强弱依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶。综合考虑,选定Alcalase碱性蛋白酶为生产大豆ACE抑制肽的最适酶,并对其酶解条件进行了优化,确定生产大豆ACE抑制肽的最佳条件为:温度60℃、pH8.0、[S]=4%、[E]/[S]=4%,这时的水解度为14.4%。     

内切酶与端肽酶协同水解大豆蛋白的研究

大豆蛋白酶解常常会产生苦味,端肽酶可有效水解苦味肽,但它们对于完整的蛋白大分子几乎没有作用,因此必须与内切酶联合使用或在其后使用。研究了内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)与端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)协同水解大豆蛋白制备寡肽的可行性,结果表明:采用端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶与内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶协同作用水解大豆蛋白,不但水解液的苦味值显著下降,而且大豆蛋白降解率和水解液水解度显著提高。     

花生蛋白水解产物ACE抑制活性的研究

采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶水解花生蛋白,研究了水解过程中水解度的变化,并对水解产物的ACE抑制活性进行了探讨。得出三种酶对花生蛋白的水解作用:碱性蛋白酶>胰蛋白酶>中性蛋白酶。碱性蛋白酶水解产物ACE抑制活性明显高于胰蛋白酶和中性蛋白酶,水解产物的ACE抑制活性高达89.73%,中性蛋白酶水解产物ACE抑制率仅为27.24%。     

高底物浓度玉米蛋白的双酶复合水解效果研究

利用碱性蛋白酶(Alcalase)、风味蛋白酶(Flavourzyme)和复合蛋白酶(Protamex)对高底物浓度(135g/L)玉米蛋白进行双酶复合水解,研究复合水解对水解物的水解度、可溶性蛋白质含量和抗氧化活性的影响,并对双酶酶解效果较好的酶解液进行了分子量分布测定。结果表明,Flavourzyme和Alcalase、Flavourzyme和Protamex、Protamex和Alcalase顺次水解玉米黄粉,总水解度分别为27.11%、26.95%和19.76%,可溶性蛋白质含量分别为50.33、40.32、48.85mg/ml,抗氧化活性分别为634.35、576.79和593.21 U/ml。多肽分子量主要分布在5 801.170～238.962u,与单酶水解相比均有显著提高。     

蟹肉双酶复合水解工艺的研究

以蟹肉为原料,利用多种蛋白酶对蟹肉中的蛋白质进行水解,挑选中性蛋白酶1398以及Flavourzyme两种蛋白酶进行复合酶解,得出酶解的最佳工艺参数为中性蛋白酶1398的酶底比为300U/g、Flavourzyme的酶底比为1200U/g、Flavourzyme的作用时间为14.5h、总时间为16h、底物浓度为2%。水解后,总氮回收率达到81.82%。     

蟹肉双酶复合水解工艺的研究

以蟹肉为原料,利用多种蛋白酶对蟹肉中的蛋白质进行水解,挑选中性蛋白酶1398以及Flavourzyme两种蛋白酶进行复合酶解,得出酶解的最佳工艺参数为:中性蛋白酶1398的酶底比为300U/g、Flavourzyme的酶底比为1200U/g、Flavourzyme的作用时间为14.5h、总时间为16h、底物浓度为2%。水解后,总氮回收率达到81.82%。     

罗非鱼下脚料水解工艺的研究

以罗非鱼下脚料为原料,利用多种蛋白酶对罗非鱼下脚料中的蛋白质进行水解,挑选中性蛋白酶1398以及Flavourzyme两种蛋白酶进行复合酶解,得出酶解的最佳工艺参数为:中性蛋白酶1398的酶底比为300U/g、Flavourzyme的酶底比为1200 U/g、Flavourzyme的作用时间为15h、总时间为16h、底物浓度为2%.水解后,总氮回收率达到84.24%.     

酶法水解生产大豆多肽研究

本文研究了Alcalase酶对大豆蛋白的有限水解作用 ,分析了酶加量、pH值、温度、底物浓度、反应时间等因素对大豆蛋白酶水解的影响 ,确定了Alcalase蛋白酶水解大豆蛋白的较佳条件范围 ;同时研究了Flavourzyme酶对大豆多肽的水解作用 ,及对大豆多肽风味的影响 ,提出了采用Alcalase酶和Flavourzyme酶双酶法分步酶解工艺来生产低苦味大豆多肽的方法     

酶法制备HAP的研究

采用酶法水解鸡骨泥制备水解动物蛋白(HAP),比较了Flavourzyme、Protamex、Alcalase、胰蛋白酶等酶的水解效果.结果表明,用Flavourzyme在pH7.0、温度50℃时的水解效果最好.通过对水解度的控制,可以使HAP液中含有较多的风味前体,为通过美拉德反应制备鸡肉味香料奠定基础.