基于UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨质谱的黄花菜中化学成分快速鉴定及裂解途径分析

采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱(UHPLC-LTQ-Orbitrap)高分辨质谱法分析黄花菜中的化学成分。在负离子模式下,采用Hypersil Gold AQ RP-C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL/min;用LTQ-Orbitrap高分辨质谱解析多级质谱数据,并对成分进行定性分析。根据液相保留时间、紫外吸收、精确分子质量数据、多级质谱碎片离子和相关文献报道,从黄花菜中共鉴定出27个组分。其中,酚酸类化合物12个,黄酮醇类15个及其它类1个。本方法可高效、快速、灵敏、全面地分析黄花菜的化学成分,可实现酚酸及黄酮类不同化合物的鉴别,为探讨黄花菜的药效物质基础和类似化合物的结构鉴定提供理论依据。     

新疆野生樱桃李(Prunus cerasifera)叶黄酮类成分研究

此项目研究了新疆野生樱桃李叶乙酸乙酯活性部位中的黄酮类化学成分。采用甲醇浸泡提取野生樱桃李叶,依次采用环己烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取其醇提物。乙酸乙酯活性部分采用MCI (Middle Chromatogram Isolated Gel)大孔树脂柱粗分离,后续进一步采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱,ODS (Octadecyl silane)反向硅胶柱和制备HPLC等色谱技术对其进行分离纯化,并根据化合物理化性质和核磁共振波谱(NMR)数据并与相关参考文献比对鉴定化合物结构。从野生樱桃李叶中共分离并鉴定11个黄酮类化合物,分别为:槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1),槲皮素-3-O-β-D-木糖苷(2),槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(3),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(4),山柰酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(5),山柰酚-3-O-β-D-木糖苷(6),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(7),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(8),反式-二氢山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(9),顺式-二氢山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(10),顺式-二氢山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(11)。所有黄酮类成分均为首次从新疆野生樱桃李叶中分离鉴定,槲皮素和山柰酚糖苷是其主要的黄酮类成分。     

超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱法检测2种金花茶叶化学成分

目的 采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱法（ultra performance liquid chromatography-quadrupole-orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap HRMS）建立防城金花茶和越南金花茶叶主要化学成分的分析与鉴定方法。方法 样品采用ACQUITY UPLC? HSS T3色谱柱分离,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,流速0.300 mL/min,柱温35℃,梯度洗脱,在正负离子模式下采集数据,根据高分辨质谱提供的精确相对分子质量和碎片离子信息,结合ChemSpider、mzVault、mzCloud质谱数据库和相关文献报道对金花茶叶的化学成分进行分析。结果 从金花茶叶中共确认180个化学成分,包含了28个黄酮类化合物,9个苯丙素类化合物,12个萜类化合物,3个生物碱类化合物和128个其他类成分。结论 应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱法结合数据库可实现对金花茶主要化学成分的分析鉴定,可为进一步研究金花茶的全面质量控制提供了科学依据。     

筒鞘蛇菰化学成分研究

目的研究筒鞘蛇菰Balanophora involucrata Hook.f.的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、核磁共振波谱(NMR)和电子轰击质谱(EI-MS)等对该植物石油醚和乙酸乙酯提取部位的化学成分进行分离鉴定。结果共分离鉴定了11个单体化合物,分别为乙酸羽扇豆醇(Ⅰ)、硬脂酸(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、没食子酸(Ⅴ)、短叶苏木酚酸乙酯(Ⅵ)、圣草酚(Ⅶ)、三叶苷(Ⅷ)、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡糖苷(Ⅸ)、3',4'-二羟基黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅹ)、3-羟基根皮苷(Ⅺ)。结论化合物Ⅴ为首次从该植物中发现,化合物Ⅱ、Ⅵ、Ⅸ、Ⅹ为首次从该属植物中分离得到。     

HPLC-DAD-Q-TOF-MS在线筛选鉴定牛蒡中的抗氧化成分

建立高效液相色谱-飞行时间质谱联用在线筛选并鉴定牛蒡提取物中抗氧化活性成分的方法。样品经在线色谱柱分离后进行分流,一路与稳定的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼-甲醇溶液混合,实现在线筛选自由基清除剂;另一路进入二极管阵列检测器-串联三重四极杆飞行时间质谱,用于化合物的快速鉴别。负离子模式下,通过高分辨率质谱获得的相对分子质量结合化合物的紫外吸收特征,参考相关文献和部分对照品验证,从牛蒡乙酸乙酯相中筛选并鉴定出咖啡酸及衍生物19 种。本方法可实现快速定向筛选和鉴定食品及中药等复杂体系中的抗氧化活性成分。     

贵州烤烟糖苷类化学成分抗氧化活性及分离鉴定

为深入研究烟草糖苷类化学成分及其抗氧化活性,以贵州烤烟为材料,首先用有机溶剂甲醇回流提取和大孔树脂吸附法获得糖苷类化学成分粗提物,对糖苷粗提物不同溶剂萃取物的清除DPPH自由基活性进行研究,再应用反相色谱、凝胶色谱、半制备液相色谱及薄层层析等技术,对清除自由基活性最好的组分进行进一步分离纯化。结果表明,糖苷粗提物不同溶剂萃取物均表现一定的清除DPPH自由基活性,其中乙酸乙酯部分活性最好。从乙酸乙酯部分分离获得了多个糖苷类单体,并利用核磁共振仪对其中4个单体结构进行了鉴定,分别为7,8-二氢-3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物1),3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物2),异嗪皮啶6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物3),东莨菪苷(化合物4)。     

植物乳杆菌对淫羊藿黄酮苷类成分的转化作用

以淫羊藿为研究对象,植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）为发酵菌株,考察淫羊藿发酵过程中1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和羟基自由基清除能力和多酚、黄酮、多糖含量的变化,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）法分析了淫羊藿灭菌前后及发酵过程中主要活性成分的变化。淫羊藿经植物乳杆菌发酵后,DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、总黄酮、多酚、多糖含量均有了显著提高,当发酵时间为37 h时,分别为29.59%、46.33%、11.90 mg/L、1.51 mg/L、0.18 g/L;UPLC-Q-TOF-MS共鉴定出57种活性化学成分,其中黄酮类51种,酚酸类4种、其他类2种;经植物乳杆菌发酵后,淫羊藿中黄酮苷元、单糖苷和酚酸类成分总体上相对含量升高,黄酮多级糖苷和二级糖苷的相对含量降低。     

气相色谱- 质谱法分离鉴别溪黄草叶中的弱极性有机组分

利用气相色谱- 质谱法分析石油醚相及乙酸乙酯相中弱极性有机组分是否含有与抗氧化性有关的化合物。通过制备溪黄草叶60% 乙醇提取物,并采用溶剂分离法,从溪黄草叶提取物中分出4 个组分：石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相。气相色谱- 质谱法共鉴定出15 种成分,其中大多数为高级脂肪酸,尤其以棕榈酸、亚麻酸甲酯含量最为丰富。虽从溪黄草叶石油醚相中鉴定出2,2'- 亚甲基双-(4- 甲基-6- 叔丁基苯酚)(工业强抗氧化剂),但其含量很低。     

基于UPLC-Q-Orbitrap-HRMS分析油茶果不同部位化学成分

基于超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap-HRMS)技术，对“黔玉1号”油茶果不同部位化学成分进行分析鉴定，以促进油茶资源的开发和利用。采用70%乙醇对样品进行超声提取，通过UPLC-Q-Orbitrap-HRMS结合Compound Discoverer 3.0软件对一级质谱碎片进行分析，利用中药成分高分辨质谱数据库(OTCML)和文献对二级质谱碎片进行鉴定。采用聚类分析和主成分分析比较进行不同部位化学成分差异。共鉴定出51种化合物，包括黄酮类26种，萜类6种，有机酸类7种，苯丙素类3种，木脂素类2种、氨基酸4种、核苷1种、脂肪酸1种、其他类1种。通过主成分分析及聚类分析发现4个部位化学成分具有明显差异，筛选出了19种差异成分，主要为黄酮类化合物。外果皮中含有大量黄酮类化合物，根皮素是主要差异成分；萜类和苯丙素类化合物主要分布在内种皮中，原花青素B₁和雷公藤内酯甲是主要差异成分；果壳和种仁含有氨基酸、木脂素类等成分，柠檬酸和山茶苷B是主要差异成分。     

基于谱效关系的α-糖苷酶抑制剂筛选方法研究

采用以生物活性色谱为基础的谱效筛选模式,以减肥茶为研究对象,首先确认了该减肥茶对α-糖苷酶有较强的抑制活性;进一步建立了α-糖苷酶抑制剂筛选模型,并与液相色谱串联质谱相结合,对减肥茶进行谱效关系分析,从中筛选到7个对α-糖苷酶有较强的抑制活性的化合物,通过质谱进行结构鉴定。这7个化合物分别为儿茶素、儿茶素没食子酸脂、芦丁、2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、槲皮素、荷叶碱和大黄素;最后对这7个化合物进行活性验证。建立的基于谱效关系分析对α-糖苷酶抑制剂的筛选和鉴定的方法简单、快速、准确率高。可用于对天然产物等复杂体系中活性物质的快速筛选和鉴定。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析黄刺玫果的化学成分

采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术对黄刺玫果乙醇提取物的化学成分进行定性分析。在负离子模式下扫描,根据色谱峰分子离子峰的精确分子量及元素组成、主要碎片信息、保留时间,并结合刺玫果相关文献和在线数据库检索,从黄刺玫果中共鉴定出53个化合物,包括29个多酚、15个黄酮、2个有机酸和7个脂肪酸化合物。分析结果显示,黄刺玫果乙醇提取物中没食子多酚、鞣花鞣质多酚和黄酮类化合物是其主要的化学成分,且化合物2,3-(s)-六羟基联苯二甲酰基-D-葡萄糖、没食子苷、木鞣质C为首次从黄刺玫果中发现。本分析结果可为黄刺玫果资源在功能性食品开发利用、质量控制及阐明其药效物质基础提供理论参考。     

Phenolic composition,antioxidant and cytoprotective effects of aqueous-methanol extract from Anneslea fragrans leaves as affected by drying methods

The present study is aimed to evaluate the effect of three different drying methods, including shade drying (SD), freeze drying (FD) and hot air dying (HAD), on the chemical components, antioxidant and cytoprotective activities of aqueous-methanol extracts from A. fragrans leaves. The total phenolic and flavonoid content were determined by spectroscopic methods, whereas the chemical profile of different extracts was determined by ultra-high-performance liquid chromatography coupled with a tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS). A total of thirteen compounds were characterised and 9 phenolic compounds have been quantified. Two dihydrochalcone glycosides named confusoside and vacciniifolin were found to be the most abundant phenolic compounds in the SD extract of A. fragrans leaves, which also showed the strongest antioxidant and cytoprotective activities. The results showed that shade drying is an efficient method for preserving the chemical constituents and maintaining the antioxidant and cytoprotective activities of A. fragrans leaves.     

Determination of catechins and flavonol glycosides in Chinese tea varieties

A standardised profiling method based on high performance liquid chromatography combined with ultraviolet (UV) and mass spectrometric detection (MS) was established to analyse the phenolic compounds of selected tea varieties used for manufacturing of green, black and oolong teas. The composition and content of 24 tea constituents were analysed, including catechins, flavonol and flavones glycosides, phenolic acids and purine alkaloids. Each tea variety had a unique chemical profile. The compositions of catechins were lower in the tea varieties for green tea manufacturing, while the content of myricetin glycosides was the lowest in the tea variety for oolong tea manufacturing. The content of individual phenolic compounds in the selected tea varieties is highly variable. However, the content of total catechins is proposed to be helpful to classify tea according to the future application as non fermented green and fermented oolong or black tea.     

超高效液相色谱-质谱联用分析茶叶中酚酸类化合物的组成及分布

采用超高效液相色谱-串联质谱技术建立同时测定茶叶样品中游离型、游离酯型、结合型、可溶性糖苷型及不溶性糖苷型等不同形态酚酸的分析方法。以70%甲醇溶液直接提取样品中的游离型酚酸,该提取液分别以2 mol/L NaOH溶液（含1 g/100 mL抗坏血酸和10 mmol/L乙二胺四乙酸）和1 mol/L HCl溶液水解以释放游离酯型与可溶性糖苷型酚酸;提取后的样品残渣分别以碱水解、酸水解方式释放结合型与不溶性糖苷型酚酸。23 种酚酸类化合物在50～1 000 μg/L范围内呈良好线性关系,相关系数（r）均高于0.996,相对标准偏差小于8.84%;茶叶样品中游离型酚酸的回收率为71.14%～105.43%,游离酯型酚酸和可溶性糖苷型酚酸的回收率分别为82.81%～108.93%、39.09%～102.25%。在茶叶中鉴定出14 种酚酸类化合物,总含量范围为7.84～12.90 mg/g。     

超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法定量分析云南大叶种茶酚类成分

基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用技术,建立和验证一种高灵敏度、高特异性和高通量的靶向定量分析方法,其具有良好的线性、准确性和稳定性。该方法成功应用于4 类云南大叶种茶叶中90 个酚类成分的准确同时定量分析。结果表明,绝大部分酚类成分在未发酵茶（绿茶或普洱生茶）中含量较高,但游离酚酸、黄酮苷元和茶黄素在发酵茶（红茶或普洱熟茶）中的含量更高。偏最小二乘判别分析进一步揭示了不同类型茶叶的酚类成分差异,并筛选到系列化学标志物。     

基于代谢组学研究不同花色种类云南白茶的化学成分差异

以云白毫、白牡丹（包括月光白一级和月光白二级）、云寿为云南白茶的代表性样品,采用基于超高效液相色谱-四极杆轨道阱质谱的代谢组学方法对不同花色种类云南白茶的化学成分差异进行研究。共鉴定出120 个化合物,包括儿茶素类、二聚儿茶素类、氨基酸类、生物碱类、酚酸类、有机酸类、香气糖苷类、N-乙基-2-吡咯烷酮取代的儿茶素类、黄酮糖苷类、脂质类等。偏最小二乘法判别分析和热图分析分别表明不同花色种类云南白茶的化学成分存在较大差异,共得到76 个化合物具有组间显著性差异（P＜0.05）,其中儿茶素类、二聚儿茶素类、生物碱类、酚酸类、茶氨酸等化合物随云南白茶原料嫩度的降低,含量下降;部分氨基酸和杨梅素苷在白牡丹中含量相对较高;芹菜素苷、山柰酚苷、槲皮素苷、脂质类化合物在云寿中含量相对较高。本研究可为云南白茶感官品质和营养价值的研究以及等级判别提供理论依据。     

基于代谢组学的不同年份晒青红茶化学成分分析

为探究红茶在贮藏过程中化学成分的变化规律,以贮藏时间为0、1、3 a和4 a的晒青红茶为代表样品,采用基于超高效液相色谱-四极杆轨道阱质谱的代谢组学方法对其研究。结果表明,在不同年份晒青红茶中共鉴定出82 种化合物,包括儿茶素类6 种、二聚儿茶素类9 种、氨基酸类5 种、生物碱类8 种、酚酸类8 种、有机酸类3 种、香气糖苷类2 种、N-乙基-2-吡咯烷酮取代的儿茶素（N-ethyl-2-pyrrolidinone-substituted flavan-3-ols,EPSF）类6 种、黄酮糖苷类20 种、脂类10 种和其他化合物5 种。偏最小二乘法判别分析和热图分析结果表明,不同年份的晒青红茶化学成分具有较大差异,其中66 种化合物组间差异显著（P＜0.05）,儿茶素类、二聚儿茶素类、氨基酸类和大部分黄酮醇-O-糖苷类化合物均在晒青红茶贮藏后含量降低;咖啡碱、黄酮-C-糖苷类和6 种EPSF类化合物在贮藏后含量升高;其中EPSF类化合物与贮藏时间的Pearson相关系数达0.802～0.986,表明EPSF类化合物在贮藏过程中呈线性增加趋势。本研究可为不同年份晒青红茶化学物质基础的阐明和科学贮藏提供理论依据。     

Occurrence and content of hydroxycinnamic and hydroxybenzoic acid compounds in foods

Phenolic acid compounds seem to be universally distributed in plants. They have been the subject of a great number of chemical, biological, agricultural, and medical studies. Hydroxycinnamic acid compounds occur most frequently as simple esters with hydroxy carboxylic acids or glucose, while the hydroxybenzoic acid compounds are present mainly in the form of glucosides. Furthermore, phenolic acids may occur in food plants as esters or glycosides conjugated with other natural compounds such as flavonoids, alcohols, hydroxyfatty acids, sterols, and glucosides. Also, hydroxycinnamic acid amides appear to be common constituents. The occurrence of the different natural phenolic acid compounds in foods is reviewed, and data of the content in fruit, vegetables, and spices are given. The distribution of the main phenolic acid compounds in food plants as well as their changes during development and maturation of fruits are considered. Furthermore, the hydroxycinnamic acids bound to cell wall polymers, the phenolic acid compounds in coffee, cereals, oil seed, and tree nuts, and the analysis of phenolic acid derivatives are reviewed.     

杜仲雄花化学成分的液相色谱-电喷雾三重四极杆飞行时间质谱分析

采用液相色谱-电喷雾三重四极杆飞行时间质谱法对杜仲雄花中化学成分进行分析。用反相C18色谱柱,以0.1%甲酸溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱;采用电喷雾离子源负离子扫描方式对样品进行分析。根据高分辨质谱提供的准分子离子和碎片离子的精确分子质量信息,结合标准品对照与参考相关文献数据,共鉴定出32?种化学成分,包括2?种木脂素类、9?种环烯醚萜类、8?种苯丙素类、12?种黄酮类和1?种酚苷类成分。上述结果可为探究杜仲雄花的药效物质基础及深度开发利用提供基础资料。