高活性生淀粉糖化酶菌株F7的鉴定及其酶学性质的研究

对高活性生淀粉糖化酶菌株F7的归属和酶学性质进行了鉴定和探讨,从菌体形态特征和分子生物学特征方面对F7进行了鉴定,从F7的酶活力、酶对生淀粉的吸附力、最佳的作用温度、pH等方面探讨了F7的生淀粉糖化酶性质。结果表明:菌株F7归属藻菌纲(Phycomycetes),毛霉目(Mucorales),毛霉科(Mucoraceae),根霉属(Rhizopus Ehrenberg),米根霉种(Rhizopus oryzae)。其酶不仅对生淀粉吸附力大,消化能力强,而且其兼有的强酸性蛋白酶活力低;该酶作用pH范围是3.3～5.3;作用温度是35～45℃,酶活力稳定,在低温条件下酶液能保存较长时间;该酶对大米生淀粉的吸附率高,糖化能力也强。     

无酵母生淀粉酒精发酵的研究

利用根霉—3(Rhizopus—3)麸曲进行无酵母生淀粉酒精发酵研究。以生玉米淀粉为原料,无酵母酒精发酵醪液酒度8.5％(v/v,20℃),淀粉利用率84.87％。研究了该工艺过程中的一些条件。发现发酵终产物乙醇对生淀粉糖化酶的活性有抑制作用。生淀粉的糖化是该过程的限速步骤。15gRhizopus—3鲜曲的酒化力与10ml酒母相当。发酵时添加一定量的α-淀粉酶、纤维素酶或果胶酶有协同作用,可提高淀粉利用率。同时探讨了无酵母生淀粉酒精发酵的机制,认为选育具有高活性生淀粉糖化酶和酒化酶等复合酶系的菌种是关键问题。     

无蒸煮生淀粉糖化酶霉菌的选育

从23份土样中筛选出105株野生型霉菌，其中有10株具有较高的糖化生淀粉的能力，尤以A－4（Ⅱ）、C和E6 3株菌酶活力最高，分别达112562，825．1和825．1个酶活性单位；对C株菌进行紫外光诱变，从诱变后的菌株中筛选出有较大正向突变的两株菌株C（1）和C（5），与诱变前相比，C（1）菌的生淀粉糖化酶活力提高了27．3％，经生淀粉酒精发酵试验，相同条件下酒精度提高了22．4％；C(5) 的生淀粉糖化酶活力提高了12．1％，酒精度提高了5．97％。     

发夫酵母工业化生产虾青素的培养基研究

为进一步降低培养基成本,促进工业化生产,在前期优化的培养基基础上,本研究尝试直接以价廉易得的玉米粉、玉米淀粉、马铃薯淀粉水解液代替葡萄糖作碳源,进行摇瓶发酵实验和10L罐分批发酵实验,探讨了发夫酵母产虾青素工业化培养基的制备。研究发现玉米淀粉水解液可代替葡萄糖作碳源进行工业化生产,并确定了淀粉双酶水解的最佳工艺条件为淀粉糊浓度为30％、液化酶添加量为25U／g淀粉、糖化酶添加量为200U／g淀粉、糖化时间为4h。这样可大大降低培养基成本。     

甜酒曲根霉的筛选及发酵特性研究

采用马铃薯琼脂固体培养基(PDA)，对贵阳及江西的地方特色甜酒曲中的根霉分离纯化，得到菌株Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）。以优良根霉菌株Q303为对照，探究其发酵性能。结果表明，Q303、Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）的糖化酶活力分别为238.6 mg/h·g、243.3 mg/h·g、195.4 mg/h·g，液化酶活力分别为0.237 g/g·h、0.253 g/g·h、0.178 g/g·h,Rhi-1的糖化力和液化力水平都高于Q303，是一株拥有良好发酵性能的菌株。将Rhi-1、Q303制成纯种根霉曲，接入蒸熟的糯米饭中，定时取样，测定不同阶段酒酿糖化酶活力、液化酶活力、总糖及总酸的变化趋势。通过GC-MS分析根霉的发酵产物发现Rhi-1的发酵产物里富含β-苯乙醇和乙偶姻，以及特征物质异己酸乙酯。     

一株酸性糖化酶的分离纯化及酶学性质研究

从土壤中筛选得到一株产酸性糖化酶的黑曲霉ASP-S21,粗酶液通过（NH4）2s04沉淀、Sepharose HP阴离子交换层析、SephacrylS-200层析柱分离纯化,SDS-PAGE电泳测定其分子量为120kDa。该酶最适作用温度为65℃;酶的最适反应pH值为4．0;在pH2．2-7．6之间,具有较好的酸稳定性;酶的Km值为0．94mg／mL,Vmax=142．43mol（Glu）／min-L。Cu2＋和Co2＋对酶活有较强的促进作用,10mM的Cu2镟酶活力提高到129％,Fe^3＋对酶催化活力抑制作用较强。该酶且具有部分降解生淀粉的能力,在pH4．0,50℃反应1h,生淀粉酶活力为0．39U,RDA值为4．57％。得到的黑曲霉ASP-S21酸性糖化酶,产生的糖化酶活力高、耐酸稳定性好,酶争陛质符合淀粉糖化工业化过程中对酶的要求,具有良好的研究前景。     

米根霉液态发酵产糖化酶工艺条件研究

米根霉具有较强的产淀粉糖化酶能力。本研究通过对米根霉液态发酵工艺条件的研究来提高其产糖化酶能力,为红曲黄酒纯种酿造技术奠定基础。以米根霉为出发菌株,大米液化液作为碳源进行摇瓶发酵,通过正交试验优化液态培养基配方,并通过单因素试验得出米根霉的培养条件。优化的摇瓶发酵最佳培养基为:液化液浓度50%,NH4Cl 5 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4·5H2O 0.3 g/L,FeSO4·7H2O 0.4 g/L,CaCO38 g/L;发酵条件为:初始pH6.0,装液量50 mL,摇床转速150r/min,接种量6%,发酵温度为32℃。该发酵条件下,菌株摇瓶发酵液的糖化酶活力达到196.6 U/mL±8.1 U/mL。     

提高黑曲霉糖化酶活力的研究：II.浓醪发酵技术

以黑曲糖化霉ｓｙ８９－１为出发菌株，采用亚硝基胍（ＮＴＧ）处理，获得适合於浓醪发酵的变异株ｓｙ８９－２，在玉米面，淀粉总浓度为２６％培养基中，５吨罐发酵１４０小时糖化酶活力达到２４０００ｕ／ｍｌ左右。     

甘薯生淀粉糖化酶菌株的分离与诱变育种

以红薯淀粉作唯一碳源的察氏培养基,从腐烂甘薯分离筛选出1株产甘薯生淀粉糖化酶能力较强的黑曲霉菌株,出发菌株发酵液粗酶的生淀粉降解酶活力为55.10 U/mL.通过紫外线诱变,突变株的粗酶活提高36.70%.再经亚硝基胍诱变,生淀粉酶活达116.84 U/mL,进一步提高34.30%.     

生淀粉糖化酶的研究

具有水解生淀粉能力的糖化酶的霉菌包括黑曲霉、泡盛曲霉、根霉、罗尔伏格菌和扣囊拟内孢霉等.分析了各种酶的特性及作用机理.并对应用于工业化糖化发酵的各个影响因素作了阐述.     

白酒发酵高糖化性能霉菌的筛选及鉴定

以不同香型大曲为筛选源分离出霉菌96株,在透明圈法初筛、糖化力测定法复筛的基础上,以清香大曲和糖化酶为对照,模拟白酒酒精发酵过程,将酿酒酵母与霉菌纯种曲混合发酵,以出酒率作为评判指标,从中筛选出1株优质霉菌Rh-07。其纯种曲糖化力、发酵结束后培养基中酒精浓度、出酒率分别为2657.00 U/g、15.40 mL/100 g、42.73%;且以Rh-07纯种曲为糖化剂,其发酵速度基本与对照大曲一致。采用传统微生物学和现代分子生物学的方法对Rh-07进行了鉴定,初步确定为Rhizopus oryzae。同时发现,霉菌糖化酶活力大小与其在酒精发酵中的作用不成严格的正相关关系;在评价霉菌在白酒酒精发酵过程中作用时,不能单纯以糖化酶作为评价指标,应以原料与霉菌作用后的整个物系对酒精发酵作用作为评价指标。     

固态法稻谷小曲酒生产试验总结

采用根霉Q303、YG5-5、AS.3.866各1/3混合AS.2.109酵母配小曲药,固态法生产稻谷小曲酒。培菌出箱后添加糖化酶20u/g原料和TH--AADY0.03g/kg原料,发酵5天,57%（v/v）酒产率46.93%,比未添加糖化酶和TH-AADY的产率提高2.47%。产品符合国家卫生标准和四川省地方标准,风格、质量均好。     

淡雅型基酒开发的试验研究

该文研究了以多粮(即高粱35％，玉米10％，大米25％，小麦15％，糯米15％)为原料，分别以不同的发酵剂代替传统的大曲，酿制一种淡雅型基酒的工艺。试验结果表明，麦粉加干酵母代替大曲作为发酵剂所酿基酒的各项理化指标均高于麦芽代替大曲组，且与对照窖接近，达到预期的效果。     

马铃薯渣生料同步糖化发酵生产乙醇工艺研究

采用生料同步糖化发酵法,将马铃薯提取淀粉后的废渣进行发酵制备乙醇,对各影响因素进行了探讨,获得了最佳发酵工艺条件.结果显示:适宜发酵条件为水料比3.5∶1.0、初始pH4.5、酵母接种量0.4％、发酵温度32℃、糖化酶添加量160U/g,α-淀粉酶添加量10U/g、纤维素酶添加量10U/g、原料粒度0.40mm.     

酶法水解荞麦粉提高发酵酒精度工艺的研究

以荞麦粉为原料,分别添加了不同单位的淀粉酶和糖化酶,通过酶解单因素条件试验分析及正交分析,确定了提高利用荞麦中淀粉利用率达到较高发酵酒精度的工艺路线,最佳的工艺水平:7685淀粉酶10U/g荞麦粉,糊化温度85℃,糖化工艺:pH值为5.0,酶解温度为55℃,加酶量180U/g荞麦粉,酶解时间为2.5h,荞麦粉水解液经酵母发酵后酒精度达到8°,发酵时间6d.     

高糖化力米根霉G1培养条件优化

该研究以糖化力和糖化酶酶活为评价指标,通过单因素和正交试验对米根霉（Rhizopus oryzae）G1一级种的培养条件进行优化。结果表明,米根霉一级种的最佳培养条件为在麸皮汁琼脂培养基的基础上添加蛋白胨3 g/L、葡萄糖30 g/L和CaCl2 2.5 g/L,培养温度为30 ℃。经过优化后的米根霉一级种糖化性能得到提升,制成麸曲后糖化力达到33.97 g/100 g,糖化酶酶活为5 536.64 U/g。     

蓝莓酵素发酵工艺优化

以新鲜蓝莓为原料,植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和酵母菌作为发酵菌种,以蛋白酶活力及超氧化物歧化酶（SOD）活力为评价指标,通过单因素试验和正交试验优化最佳发酵工艺条件。结果表明,植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）单独发酵蓝莓酵素时,发酵工艺条件为植物乳杆菌接种量为4%,39 ℃条件下发酵1 d。在此条件下蛋白酶活力及SOD酶活力分别为39.44 U/mL和84.17 U/g。植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和酵母菌复合菌种发酵工艺条件为同时接入4%植物乳杆菌与0.15%的酵母菌,34 ℃条件下培养4 d,蛋白酶活力及SOD酶活力分别达到了55.76 U/mL和81.27 U/g,该方式是最佳的蓝莓酵素制备工艺。     

应用A型发酵剂改善食醋风味提高出醋率

应用万家兴A型发酵剂代替麸曲、大曲和糖化酶、干酵母，与使用大曲相比，醋的风味更好，出醋率提高26．19％，食醋的原料成本降低36．36％，糖化发酵剂的成本降低82．24％；与使用麸曲相比，醋的品质大幅提高，出醋率提高28．36％，醋的成本降低26．32％，糖化发酵剂的成本降低73．52％。     

嗜杀酵母Sa2发酵籼米小曲酒的工艺研究

该文对以籼米为原料,纯种根霉曲作糖化剂,嗜杀酵母(Sa2)曲作发酵剂的小曲酒的生产工艺进行了探讨,并对影响小曲酒的出酒率和品质的因素(糖化温度、糖化时间、纯种根霉曲添加量、嗜杀酵母曲添加量、加水量和发酵时间)作了研究.确定了籼米小曲酒发酵的最佳工艺条件:纯种根霉曲加曲量0.4％,糖化温度30℃,糖化时间1d,加水量120％,发酵时间4d,嗜杀酵母曲种加曲量0.8％.     

黑根霉Q3Y在旱胁迫效应下的菌丝生长特性及糖化产物

选取产糖化酶较强和糖化能力较高的黑根霉（Rhizopus nigricans）Q3Y进行菌丝体的抗旱逆境液态发酵培养,分析了菌株Q3Y菌丝生长状况及菌丝对糯米的利用。结果表明,在土豆汁培养基中添加0.50%的琼脂,使其黏度达到500 mPa·s,黑根霉菌Q3Y在该培养基中菌丝生长状态良好,细胞分散均匀;在料水比为6∶10（g∶mL）,含水量为62.5%糯米培养液中,黑根霉菌株Q3Y菌丝体能得到更好的生长,培养72 h还原糖、可溶性总糖及糖化酶酶活分别达到26 g/100mL、32 g/100mL、23.0 U/mL。