模型反应中不同酚酸物质抑制PhIP形成效果分析

2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑[4,5-b]吡啶（2-amino-1-methyl-6-phenyl-imidazole[4,5-b]pyridine,PhIP）是食品加工和烹饪中含量较高且有致癌风险的杂环胺类化合物。该文在以苯丙氨酸和肌酐为前体物质的模型体系中,考察阿魏酸、咖啡酸、对香豆酸3种单体酚酸以及混合酚酸对PhIP形成的抑制效果,并进一步探讨酚酸类物质在模型体系中对PhIP形成的抑制效果是否存在相互协同作用。结果表明,在单体酚酸模型中,当酚酸浓度为10-10mg/mL或10-9mg/mL时,从整体效果比较3种单体酚酸对PhIP形成的抑制效果,由强到弱分别为咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸,而当酚酸浓度为10-8mg/mL时,阿魏酸对PhIP形成的抑制效果强于对香豆酸;在混合酚酸模型中,阿魏酸+对香豆酸的组合对PhIP形成抑制效果最强,抑制率为56.37% ,咖啡酸+对香豆酸的组合对PhIP形成抑制效果最弱,抑制率为13.33% 。推测其反应机理可能是酚酸类物质与前体物质发生反应生成新的化合物,消耗掉前体物质的量,从而抑制模型体系中PhIP的形成。     

不同种类啤酒的酚酸含量和抗氧化特性

本文研究了不同品种啤酒的总多酚含量、游离和总酚酸含量及抗氧化能力。啤酒中酚酸含量最多的是阿魏酸,其次为芥子酸、香草酸、咖啡酸、对香豆酸、4-羟基苯乙酸;阿魏酸、咖啡酸、紫丁香酸、芥子酸和香豆酸主要以结合形式存在,对香豆酸和4-羟基苯乙酸以游离和结合形式存在。在不同类型啤酒中总多酚和酚酸的存在方式不同,用FRAP法评价不同啤酒的抗氧化能力也有显著差异。严格说来,FRAP值与多酚和酚酸含量有一定的相关性。本文也研究了用FAPR法评价单体酚酸的抗氧化能力。     

桑葚、甘蔗糖蜜多酚的成分鉴定及其复配物的抗氧化活性

为探索酚类提取物及其复配物的协同增效作用,以桑葚和甘蔗糖蜜多酚作为研究对象,分别测定其总酚、黄酮含量及酚类组成,基于单一提取物的总酚含量按一定配比制得复配物,评价抗氧化活性。结果表明,桑葚游离多酚（MFP）占桑葚总酚含量的90.3%,为677.62 mg没食子酸当量（Gallic Acid Equivalent,GAE）/100 g,黄酮含量为736.65 mg芦丁当量（Rutinum Equivalent,RE）/100 g,共检测出原儿茶酸、3,4-二羟基苯丙酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和芦丁8种多酚物质,其中矢车菊素3-O-葡萄糖苷含量占92.6%。甘蔗糖蜜多酚（SMP）总酚含量为339.69 mg GAE/100 g,总黄酮含量为314.61 mg RE/100 g,主要单体包括没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、芦丁和表儿茶素9种多酚物质。在0~10 mg/mL的浓度范围内SMP、MFP及其复配物具有良好的抗氧化活性且呈现量效关系。同时,两种复配物的抗氧化活性优于SMP和MFP,其中中效原理计算复配物DPPH自由基清除能力的0.25 IC50、0.5 IC50、0.75 IC50、1 IC50、1.25 IC50、1.5 IC50的联合作用指数CI分别为0.73、0.85、0.94、0.91、0.89和0.90,均小于1,表明桑葚和甘蔗糖蜜多酚复配物具有协同抗氧化作用。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定红美人中8种酚酸化合物

建立超高效液相色谱－串联质谱（ultra performance liquid chromatograph tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）同时测定红美人中没食子酸、原尔茶酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸8种酚酸化合物的方法,分析各酚酸在红美人中的组成和含量。选用2 mol/L氢氧化钠水解提取样品中游离型酚酸、游离酯型酚酸和结合酯型酚酸,提取液经固相萃取小柱净化后,采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱、乙腈/0.01%甲酸水流动相梯度分离,UPLC-MS/MS多反应监测模式进行测定,外标法定量。结果显示：8种酚酸在5 μg/L～5 000 μg/L浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 1）,检出限为 0.05 μg/L～0.73 μg/L,定量限为 0.17 μg/L～2.44 μg/L,回收率为 85.7%～103.9%,重复性为0.92%～5.28%。6个产地红美人中8种酚酸均有检出,总酚酸含量在68.82 μg/g～98.96 μg/g之间,其中阿魏酸含量最高,在 38.02 μg/g～53.79 μg/g之间,绿原酸含量次之,在 15.84 μg/g～25.90 μg/g 之间;各产地红美人中的酚酸组成比例基本稳定,其中阿魏酸占比均在51.10%～57.51%,绿原酸占比均在22.29%～27.86%。     

大麦乳酸菌发酵液粉中多酚的提取及其抗氧化性研究

通过单因素和正交实验优化大麦乳酸菌发酵液粉(barley lactobacillus fermented solution,BLFS)中多酚的提取工艺条件,高效液相色谱分析鉴定多酚成分,并对其抗氧化活性进行测定。结果表明:在60%的乙醇浓度,1∶50 g/m L的料液比,60℃提取60 min的最优条件下,BLFS多酚的提取率为(18.09±0.25)mg/g;HPLC分析结果显示,经乳酸菌发酵后大麦多酚中没食子酸、香豆酸、阿魏酸和芦丁的含量显著增加(p0.05),香草酸和对香豆酸的含量显著减少(p0.05),BLFS多酚的主要成分为芦丁35.08μg/g,香草酸21.28μg/g,阿魏酸19.38μg/g,香豆酸11.36μg/g,没食子酸6.80μg/g,原儿茶酸2.99μg/g,对香豆酸0.83μg/g。BLFS多酚提取物和大麦多酚提取物清除羟自由基、1,1-二苯基-2-苦基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和还原能力的半数有效质量浓度(EC50)分别为0.66和0.87、0.88和0.96、0.76和0.89 mg/m L,具有良好的体外抗氧化活性。BLFS多酚提取物的抗氧化活性均高于大麦多酚提取物,说明经乳酸菌发酵后大麦的抗氧化活性增加。     

大麦发芽过程中不同存在形式的酚类物质及其抗氧化活性变化

以甘啤4号为原料,研究发芽过程中4类多酚物质提取物的含量及其抗氧化活性的变化,采用的评价指标为DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性和铁还原力,同时利用HPLC法依次检测4类粗多酚中9种单体酚酸的含量及其变化。试验结果表明:发芽显著影响大麦粗多酚、单体酚酸的种类和含量及其抗氧化活性。游离粗多酚在原麦和萌发过程中始终占总粗多酚含量的最大比例,并且其综合抗氧化活力也显著高于其它3类粗多酚提取物。4类粗多酚提取物和各单体酚酸的总含量及抗氧活性总是原麦高于各萌发时期,在浸泡阶段统一显著下降,萌发后期又有显著升高。相关性分析表明,4类粗多酚的铁还原能力、清除DPPH和ABTS自由基的能力均与其含量密切相关,与粗多酚显著相关的单体酚酸,同样显著影响着其抗氧化活性。阿魏酸、儿茶素、对香豆酸是主要的活性酚酸。     

褐藻多酚对晚期糖基化终产物的抑制作用研究

目的研究褐藻多酚对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)生成的抑制作用及其机制。方法建立牛血清蛋白与葡萄糖体外模拟体系及食品热加工鱼肉肠模型,以不同浓度褐藻多酚为抑制剂,研究其对AGEs生成的抑制作用;通过分析模拟体系中赖氨酸和葡萄糖含量、蛋白质巯基水平及葡萄糖与牛血清蛋白的交联作用,阐明褐藻多酚对AGEs生成抑制作用机制。结果褐藻多酚对荧光性AGEs具有显著的抑制作用,100μg/g褐藻多酚反应36 h,对模拟体系AGEs生成抑制率达30.33%,50μg/mL褐藻多酚对鱼肉肠AGEs生成抑制率达41.91%。褐藻多酚处理后,模拟体系中赖氨酸和葡萄糖含量、蛋白质巯基水平显著高于对照组(P<0.05),而葡萄糖与牛血清蛋白交联条带量显著低于对照组(P<0.05)。结论褐藻多酚可能通过与赖氨酸残基反应、保护蛋白质巯基或抑制葡萄糖与牛血清蛋白交联作用等抑制AGEs生成。     

贵州蓝莓蜜的成分分析及其抗氧化活性

以贵州蓝莓蜜为研究对象,对其理化指标、抗氧化活性、多酚成分进行研究。结果显示,贵州蓝莓蜜酸度值44.69 mmol/kg,总糖含量79.30%,葡萄糖含量(40.88%)高于果糖含量(38.41%);总酚酸和总黄酮含量分别为20.27～24.72 mg GAE/100 g和3.88～6.77mg RE/100 g,DPPH和ABTS自由基半抑制率分别为119.04～136.56 mg/mL和140.56～212.34 mg/mL;蓝莓蜜含15种多酚类物质(原儿茶酸、对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、对香豆酸、芦丁、阿魏酸、杨梅酮、木犀草素、桑色素、槲皮素、芹菜素、山奈酚、异鼠李素、高良姜素),其中,黄酮类物质含量最高为槲皮素,酚酸含量由高到低为:对羟基苯甲酸对香豆酸阿魏酸咖啡酸香草酸原儿茶酸。研究表明,蓝莓蜜酸度偏高、易结晶,结合槲皮素含量高的特点与酚酸含量高低规律,可作为蓝莓蜜鉴定与检测的参考指标。     

小麦麸皮结构层中抗氧化物质的研究

采用酶法与化学法,分别对麦麸的外皮层、中间层及糊粉层进行水解,对提取物中酚酸的种类和含量进行了测定。对比了酶解与碱解所得提取物中总酚的含量和清除自由基的能力。结果表明：碱解处理后,外皮层申阿魏酸脱氢聚体含量最高,达4．34mg／g,而糊粉层中阿魏酸单体的含量最高,达5．90mg/g;酶解后,外皮层、中间层和糊粉层的水解液中阿魏酸脱氢聚体含量分别为碱解释放量的71．0％、52．6％和51．1％,而阿魏酸单体的释放量为碱解释放量的46．9％、51．0％和56．3％。同时,碱解和酶解提取物中的总酚含量和抗氧化能力与酚酸含量直接相关。     

青梅酚类物质在体外模拟消化过程中生物接受率和抗氧化活性的变化

该研究采用UPLC-MS/MS和INFOGEST 2.0体外静态模拟胃肠道消化模型，分析青梅在消化过程中酚类物质释放量和抗氧化活性的变化，以期探究青梅多酚的消化情况。结果表明，在青梅中共鉴定出10种单体物质，包括7种酚酸和3种黄酮。其中，新绿原酸、表儿茶素、异阿魏酸和p-香豆酸是青梅多酚的主要单体物质。青梅多酚含量为(10.72±0.23)mg GAE/g DW,ABTS和DPPH抗氧化值分别为(16.03±1.00)和(14.65±1.40)mg TE/g DW。青梅多酚的生物可接受率为9.33%。其中，对羟基苯甲酸的生物可接受率(63.20%)最高，其次为芦丁(21.93%)和p-香豆酸(8.14%)。青梅总酚含量、单体酚含量和抗氧化值在体外消化过程中均出现显著下降(P<0.05)。此外，ABTS和DPPH抗氧化值与总酚含量存在显著正相关。其中，原花青素B1、p-香豆酸、阿魏酸和芦丁等单体物质可能是青梅抗氧化能力的主要有效物质。     

UPLC-MS/MS同时测定铁皮石斛茎、叶、花中酚类组分的含量

建立超高效液相色谱-串联质谱同时、快速分析18 种酚类物质的方法,测定比较铁皮石斛茎、叶、花部位含量差异。样品用甲醇-水溶液提取,提取液中的目标化合物经Waters T3 C18柱梯度洗脱分离,电喷雾串联三重四极杆质谱仪正、负离子扫描方式多反应监测模式检测。结果表明：以18 种酚类物质标准品作为对照,在铁皮石斛样品中共检出15 种酚类组分,分别为3,5-二羟基苯甲酸、橘皮素、绿原酸、槲皮素、芦丁、对羟基苯甲酸、咖啡酸、丁香酸、香草酸、山柰酚、对香豆酸、芥子酸、阿魏酸、3-羟基肉桂酸、水杨酸。铁皮石斛不同部位多酚组分含量为花＞叶＞茎,相对于其他酚类组分,芦丁在铁皮石斛茎、叶、花中的含量均为最高。铁皮石斛不同部位主要酚类组分表现出一定的差别：铁皮石斛花中主要含有芦丁、咖啡酸、阿魏酸和对羟基苯甲酸,铁皮石斛叶中芦丁和阿魏酸的含量相对较高,而铁皮石斛茎部主要酚类组分则为芦丁、阿魏酸与香草酸。实验结果可为铁皮石斛不同部位酚类组分的利用提供一定的科学依据。     

凤眼果壳多酚的抗氧化和抗人肺癌细胞A549增殖活性

本研究以凤眼果壳为原料,提取凤眼果壳游离态和结合态多酚,通过不同极性有机溶剂萃取游离态多酚获得四相提取物,分别是正己烷相(HF),乙酸乙酯相(EAF),正丁醇相(BF)和水相(Aq F)。测量游离态、结合态和萃取后的四相提取物的总多酚和总黄酮含量,结果表明游离态的多酚和黄酮含量均比结合态高。萃取后的四相提取物中,EAF的多酚和黄酮含量最高。通过DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和还原力对结合态多酚和萃取后的四相提取物的抗氧化活性进行综合评价,EAF具有较好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率的EC50值为2.08 mg/mL,ABTS自由基清除率的EC50值为29.28 mg/mL,在10 mg/mL时,EAF的还原力达到0.81。采用HPLC技术分析,在EAF中鉴定出11种多酚类化合物:分别是表儿茶素、香草酸、异荭草素、阿魏酸、(反)阿魏酸、芦丁、槲皮苷、杨梅素、三叶苷、槲皮素和山奈酚。此外,EAF对人肺癌细胞A549的增殖具有剂量依赖性抑制作用,其抑制A549细胞增殖的EC50值为85.70μg/m L。这项研究获得的结果表明,凤眼果壳多酚提取物具有较好的抗氧化和抗A549细胞增殖活性,有助于凤眼果壳的综合利用和开发新的功能性试剂。     

甘蔗皮花色苷的提取及辅色剂对花色苷的辅色作用研究

采用溶剂提取法提取甘蔗皮中的花色苷,通过单因素实验方法和正交实验方法确定了花色苷的最佳提取工艺条件;选取三种辅色剂(阿魏酸、香草酸和4-香豆酸)与甘蔗皮花色苷进行辅色反应,研究不同温度和p H值条件下辅色剂的辅色效应。结果表明,最佳提取工艺条件为:提取剂组成(V甲醇:V丙酮:V水=2:2:1,p H=1.0),料液比1:10(g/m L),提取时间120 min,提取温度20℃。在此条件下,花色苷总含量为125.01±1.77 mg/100 g DW(甘蔗皮干重)。在模拟酒体系中,辅色剂对甘蔗皮花色苷的辅色效果随辅色剂质量浓度的增加而增强;降低p H可增强辅色效应,当达到最适辅色p H时辅色反应达到平衡;达到最适辅色温度后辅色效应随温度升高而减弱;三种辅色剂的辅色效应从强到弱依次为:4-香豆酸阿魏酸香草酸。     

Antioxidant activity of sugar molasses, including protective effect against DNA oxidative damage

ABSTRACT:  Extracts were obtained from molasses, a byproduct of the sugar industry, via a number of chromatographic steps. Their antioxidant capacity was studied, including the inhibitory effect upon DNA oxidative damage; the phenolic compound profile thereof was ascertained as well. Two extracts exhibited significant antioxidant features, expressed by their capacity to decolorize ABTS radical cation and to scavenge hydroxyl free radicals (via deoxyribose assay). Those 2 extracts also brought about protection against induced DNA oxidative damage (via decreasing DNA scission, as assessed by electrophoresis). The phenolic compounds syringic acid, p -hydroxybenzoic acid, vanillic acid, p -hydroxybenzaldehyde, and ferulic acid were positively identified and quantified.     

Antioxidant activity of sugarcane molasses against 2,2′-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride-induced peroxyl radicals

Sugarcane molasses is a rich source of antioxidant materials with peroxyl radical scavenging effects. To explore the potent antioxidant activity of sugarcane molasses against 2,2′-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced peroxyl radicals, 7 methanolic fractions of sugarcane molasses (F1–F7) were separated via bioassay-guided fractionation and evaluated by oxygen radical absorbance capacity (ORAC), cellular antioxidant activity (CAA), and oxidative DNA damage protective activity assays. The ORAC values of sugarcane molasses fractions ranged from 4399 to 6266 μmol TE/g, whilst the EC₅₀ values for CAA ranged from 3.7 to 5.9 μg/ml. Moreover, it was found that sugarcane molasses fractions, particularly F6 and F7, could protect against oxidative DNA damage caused by peroxyl radicals at an effective concentration of 100 μg/ml. Ten phenolic constituents were identified in the fractions, including known antioxidative compounds, viz., schaftoside, isoschaftoside, ferulic acid, p-coumaric acid, and p-hydroxybenzaldehyde.     

PhIP化学模型体系中前处理及UPLC-MS检测方法的研究

本文以PhIP化学模型体系为对象,建立了利用冻干浓缩萃取进行样品前处理,用 UPLC-MS进行PhIP含量检测的分析方法。本研究简化了样品前处理步骤,将反应体系冻干浓缩后采用碱性乙酸乙酯体系提取,用超高效液相色谱-三重四级杆串联方式(UPLC-MS)进行PhIP检测,采用Waters BEH phenyl色谱柱,以乙腈和0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱。结果表明,本方法检测PhIP的线性范围为0.5~15 ng/mL,决定性系数为0.999,检出限为0.110 ng/mL,定量限为0.332 ng/mL,在加标水平为10、15、30 ng/mL时的平均收率分别为78.16%、81.22%、82.03%,相对标准偏差(RSD)分别为6.32%、5.40%、4.28%。本方法操作简便、可重复性高,可作为测定化学模型中PhIP的有效方法。     

色米提取物的抗氧化作用与成分分析研究

为探讨色米提取物总酚含量与抗氧化相关性及其抗氧化的物质基础,以4种不同品种的色米为材料,采用Folin-Ciocalteu法测定总酚含量,三氯化铝比色法测定黄酮含量,DPPH·、ABTS~+·清除法和O~(2-)·清除法评价抗氧化活性,高效液相色谱法进行多酚成分分析。结果表明,4个品种的色米总酚含量范围为42~305.2 mg GAE/g,红米具有最高的总酚和黄酮含量以及最好的抗氧化能力,绿米各项指标均最低。提取物成分分析结果显示,4个品种均具有一定含量的没食子酸、儿茶素、香草酸、咖啡酸和阿魏酸。     

Inhibitory effects of guava (Psidium guajava L.) leaf extracts and its active compounds on the glycation process of protein

Hyperglycaemia causes increased protein glycation and the formation of early glycation products and advanced glycation end products (AGEs) which are major factors responsible for the complications of diabetes. This study investigated the ability of guava leaf and compounds to inhibit glycation process in an albumin/glucose model system and compared the potency of these extracts with Polyphenon 60 which is a commercial polyphenol product extracted from green tea and with the standard antiglycation agent, aminoguanidine. The results showed that the inhibitory effects of guava leaf extracts on the formation of α-dicarbonyl compounds were over 95% at 50 μg/ml. Phenolic compounds present, namely gallic acid, catechin and quercetin exhibited over 80% inhibitory effects, but ferulic acid showed no activity. The guava leaf extracts also showed strong inhibitory effects on the production of Amadori products and AGEs from albumin in the presence of glucose. The phenolic compounds also showed strong inhibitory effects on the glycation of albumin, especially quercetin exhibited over 95% inhibitory effects at 100 μg/ml. According to the results obtained, guava leaf extracts are potent antiglycation agents, which can be of great value in the preventive glycation-associated complications in diabetes.