高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量

建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C_(18)柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10%~105.21%,RSD为1.36%~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。     

柱前衍生RP-HPLC法测定仙鹤草中氨基酸含量

采用柱前衍生RP-HPLC法对仙鹤草中游离及水解氨基酸进行测定。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(体积分数)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(体积分数)的乙腈-CH3COONa溶液(p H=6.5);检测波长为254 nm。21种氨基酸在0.001 9μmol/m L~2.700μmol/m L内呈良好的线性关系(R20.999 0)。21种游离氨基酸平均回收率在95.84%~111.34%之间,RSD在1.23%~2.54%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在90.79%~111.23%之间,RSD在1.29%~2.21%之间(n=6)。柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合仙鹤草中氨基酸含量测定。     

桑椹酒中氨基酸含量分析

建立采用氨基酸分析仪测定桑葚酒中18种氨基酸含量的分析方法。样品经氮吹去除乙醇处理后,采用酸/碱水解将其中的蛋白质和肽类化合物转化成游离氨基酸,采用氨基酸分析仪测定其含量。18种氨基酸在2.5～250.0 μmol/L的浓度范围内,峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数R为0.998 8～0.999 9,检出限均＜0.50 mg/L,各化合物的加标回收率为72.8%～104.0%,重复性试验结果相对标准偏差（RSD）均＜5.0%。该方法可靠、准确、重现性好,为桑椹酒的营养价值评价提供参考资料。     

新疆特有干果中氨基酸含量的测定及分析

利用L-8900氨基酸分析仪,测定新疆8种特色干果——开心果、巴旦木、杏干、红枣、山核桃、沙漠果、夏威夷果和枸杞中17种氨基酸的含量,分析比较了8种干果中人体必需氨基酸、药用氨基酸、增香剂型氨基酸的含量,其中巴旦木中氨基酸含量最高,为188.66 mg/kg,杏干中氨基酸含量最低,为30.98 mg/kg。17种氨基酸的线性范围为1.0~100.0μmol/L,线性回归系数均在0.999以上,方法检出限在0.05~10.0μg·m L-1之间,加标回收率为78.6%~101.6%。     

高效液相色谱法测定米渣复合氨基酸营养液中氨基酸含量

应用邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生、离子交换高效液相色谱法同时测定20种氨基酸,氨基酸浓度在50~180μmol/L(色氨酸浓度为61.5~221.4μmol/L)时,其峰面积和氨基酸浓度的线性相关系数均大于0.96,20种氨基酸的加标回收率在95.7%~104.2%。用此法对米渣经多菌种发酵后制成的复合氨基酸营养液中游离氨基酸含量进行检测,取得了满意的结果。     

超高效合相色谱法测定火龙果果酒中游离氨基酸的含量

建立超高效合相色谱测定食品中游离氨基酸的方法。选取Acquity UPC2Torus Diol(3.0 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,流动相由A(超临界二氧化碳)和B(V(甲醇)∶V(乙腈)=1∶1)组成,2.5 mmol/L乙酸铵作为改性剂,流速2.0 m L/min,紫外检测器波长280 nm,补偿范围330~430 nm,背压1 800 psi。结果表明,该方法具有良好的线性(R2=0.999 0~0.999 8),分离度高于1.22,检出限和定量限范围分别为23~57 ng/L和70~178ng/L,线性范围为20~400μg/m L,加标回收率在85.6%~101.2%之间。该方法被成功用于火龙果酒样品中游离氨基酸含量的测定,也为分析其他食品基质中游离氨基酸分布情况提供了新的方法。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

液相色谱-串联质谱法测定烟用香精香料中的氨基酸

建立了测定烟用香精香料中18种氨基酸的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法。以L-正缬氨酸(Nva)为内标,样品经10%甲醇-水溶液(盐酸浓度为0.1 mol/L)萃取、0.22μm水相滤膜过滤后直接进行LC-MS/MS分析。结果表明:18种氨基酸在0.1~10μmol/L范围内,线性相关系数均≥0.9990,3个加标水平的回收率在85.4%~110.0%之间,相对标准偏差(RSD)为1.3%~4.9%。方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.00005~0.1和0.0002~0.3μmol/L。该方法准确、灵敏,适合用于烟用香精香料样品中氨基酸的测定。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生RP-HPLC法同时测定莲雾中15种游离氨基酸的含量

采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定莲雾果实中15种游离氨基酸含量的方法。采用Atlantis T3柱为固定相,以0.1 mol/L乙酸钠缓冲液(pH6.5,含0.5%三乙胺)和乙腈-水(4:1)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温35 ℃,紫外检测器波长254 nm。各氨基酸组分在2.0~500 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.99,检出限为0.08~0.35 mg/L,定量限为0.35~1.25 mg/L,加标回收率为85.61%~106.68%,相对标准偏差RSD均小于5%。该方法使得15种氨基酸很好的分离,且准确度和精密度好,灵敏度和回收率高,适用于莲雾果实游离氨基酸含量的分析。     

全自动氨基酸分析仪法测定不同年份黄酒中游离氨基酸的含量

目的建立采用全自动氨基酸分析仪测定黄酒中游离氨基酸的含量的方法,并测定不同年份的黄酒中游离氨基酸含量。方法黄酒经氮气吹干复溶后,过膜,使用全自动氨基酸分析仪进行测定。结果方法检出限达到0.01 mg/100 m L,回收率达到90.1%~101.2%,均符合检测要求。测定结果显示,黄酒中含有脯氨酸、亮氨酸等多种氨基酸,具有较高的营养价值,且不同酒龄的黄酒中氨基酸的总含量不同,各氨基酸含量随年份的不同也会发生变化。结论该方法前处理简单、快速,测定结果准确、可靠,能够满足黄酒中氨基酸的日常检测工作,适用于大量样品的定性定量分析。     

青蛤与文蛤的营养成分分析与评价

对海州湾冬季养殖池塘中成体青蛤与文蛤营养成分进行测定,结果表明：青蛤和文蛤这两种海洋埋栖蛤类的贝肉水分含量(77.23、76.39g/100g mf)、总糖含量(4.45、4.14g/100g mf)均较为接近,而灰分、粗脂肪以及粗蛋白含量均有显著差异(P ＜ 0.05)。文蛤粗蛋白含量高达15.54g/100g mf,而青蛤为11.55g/100g mf;青蛤的灰分及粗脂肪含量分别高达4.91g/100g mf 和1.86g/100g mf,显著高于文蛤含量(2.86g/100g mf 和1.07g/100g mf)。在Cd、Cr、Cu、Ni、Pb 和Zn 这6 种重金属中Zn 含量最高,青蛤的含量仅12.77μg/g,文蛤则高达252.59μg/g,除Pb 在青蛤略超标外,其余均未超标。这两种贝肉均含有18 种编码氨基酸,其中含有人体所需的全部10 种必需氨基酸。青蛤与文蛤的第一限制氨基酸均为缬氨酸,氨基酸评分分别为50.8 和53.0,第二限制氨基酸均为苯丙氨酸+ 酪氨酸,氨基酸评分分别为55.0 和53.5。谷氨酸的含量最高,在青蛤和文蛤中分别高达116.5mg/g 和111.5mg/g,这远高于其他17 种氨基酸。呈味氨基酸在总氨基酸中所占的比例均高达42% 以上,适宜作为食用或开发呈味物质;青蛤与文蛤的必需氨基酸指数IEAA 相近,分别为50.0 和50.3。必需氨基酸占总氨酸的比例则十分接近,均在45% 左右,远高于WHO/FAO 推荐的模式35.38%,这说明青蛤和文蛤是比较理想的蛋白源。     

上海市售贝类产品中麻痹性贝类毒素污染状况调查及其评价

目的 调查上海市售贝类产品中麻痹性贝类毒素污染状况。方法 2010年8月~2011年7月间, 在上海水产品批发市场进行5种贝类样品采集, 每月抽取样品24份, 全年共288份。采用生物法(SC/T 3023-2004)对其进行了麻痹性贝类毒素的检测, 其中虾夷扇贝的肠腺和肌肉(扇贝柱)进行分开测定。结果 缢蛏、菲律宾蛤仔、牡蛎、文蛤、虾夷扇贝肠腺和肌肉中麻痹性贝类毒素的含量范围分别为ND~121.5 MU/100 g、ND~113.4 MU/100 g、ND~177.7 MU/100 g、ND~124.6 MU/100 g、261.7~3363.5 MU/100 g和ND。全年麻痹性贝类毒素的平均含量分别在98.5±10.5 MU/100 g、78.6±9.3 MU/100 g、50.4±10.1 MU/100 g、40.6±14.8 MU/100 g、1242.2±974.3 MU/100 g和0。按照目前我国贝类产品主要出口国家和国际组织对麻痹性贝类毒素的限量要求进行评价, 仅仅是虾夷扇贝肠腺中麻痹性贝类毒素超标, 超标率为98%, 因此在食用扇贝时应去除其肠腺; 而其余贝类产品中麻痹性贝类毒素均在限量规定范围内。结论 上海市售贝类产品对食用的安全性不产生负面影响。     

豆酱自然发酵过程中蛋白质和氨基酸的变化规律

为研究豆酱在自然发酵过程中蛋白质、氨基酸组成及含量的变化规律,以按照东北豆酱传统方法制作的自然发酵豆酱为研究对象,在检测蛋白质含量、氨基氮含量、氨基酸含量、非蛋白氮含量和水解指数等指标变化的基础上,对豆酱的氨基酸评分(amino acid score,AAS)、化学评分(chemical score,CS)、必需氨基酸指数(essential amino acid index,EAAI)进行分析。结果表明,豆酱蛋白质含量、非蛋白氮含量、蛋白水解指数先上升后下降;氨基氮含量则先不断增加后减少至稳定。自然发酵豆酱中共含有17种氨基酸,但不同发酵时期豆酱中氨基酸含量差异较大,成品豆酱中氨基酸总量维持在41.00 mg/g左右,明显高于生豆粉(11.42 mg/g)和熟豆粉(11.06 mg/g)中氨基酸总量。不同发酵时期豆酱中必需氨基酸与非必需氨基酸的比值在0.48~0.77之间,提示豆酱中的蛋白质为优质蛋白。分析不同发酵时期豆酱的AAS、CS和EAAI可知,发酵20 d时EAAI最高达29.41,发酵50~75 d豆酱的EAAI保持在16.16~17.40之间。通过比较4种呈味氨基酸的含量可知,甜味氨基酸苦味氨基酸鲜味氨基酸无味氨基酸。     

不同果桑品种成熟桑椹的游离氨基酸主成分分析和综合评价

为研究不同果桑品种成熟桑椹之间游离氨基酸综合质量的差异,利用氨基酸全自动分析仪测定10 种成熟桑椹的游离氨基酸种类及含量,并采用主成分分析法对10 种桑椹的游离氨基酸成分进行分析及综合评价。结果表明,10 种成熟桑椹中均含有17 种氨基酸,总氨基酸含量最高的是台湾一号,含量为270.073 mg/100 g;含量最低的是射阳3号,含量为38.718 mg/100 g。通过主成分分析法得出,第1、2、3主成分的贡献率分别为50.845%、27.912%、10.078%,这3 个主成分的累积贡献率达到88.835%,可代表桑椹中游离氨基酸的主要趋势,综合评价得分顺序由高到低分别为台湾一号、镇椹一号、大十、丰果桑、选100号、选20号、育721、中椹1号、镇9106、射阳3号。     

响应面试验优化超声法提取橄榄果实游离氨基酸工艺

为获得橄榄果实游离氨基酸的最佳提取工艺,以橄榄果实为实验材料,通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面试验优化超声法提取橄榄果实游离氨基酸的最佳工艺。结果表明:各因素对游离氨基酸提取量的影响力由高到低为料液比提取次数超声时间超声功率乙醇体积分数超声温度;响应面法得出的最佳提取工艺为超声时间20 min、料液比1∶41(g/m L)、提取次数3、超声温度50℃、超声功率270 W、乙醇体积分数60%,游离氨基酸的提取量实际值为79.88 mg/g,与预测值相对误差为2.62%,表明此优化工艺具有实际应用价值。     

广西北部湾3 种贝类中主要呈味物质的测定及呈味作用评价

测定广西北部湾牡蛎(Crassostrea rivularis)、文蛤(Meretrix meretrix)和波纹巴非蛤(Paphia undulata) 3种贝类中的呈味核苷酸(AMP、GMP、IMP)、糖原等非挥发性呈味物质的含量,并采用味道强度值和等价鲜味值(或味精当量)评价这些非挥发性呈味物质的呈味作用鲜味强度。结果表明：牡蛎、文蛤和波纹巴非蛤的味精当量分别为3.2、1.9、2.7g MSG/100g,对应的味精当量的味道强度值分别是106.7、63.3、90,均远大于1,是其呈强烈鲜味的主要原因。     

液相色谱-电喷雾飞行时间质谱法同时测定虫生真菌菌丝中16种游离氨基酸

采用液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(LC-ESI-TOF-MS)法,选择阴离子电离模式,建立了一种同时检测虫生真菌菌丝中16种游离氨基酸的定性定量分析方法。研究结果表明:16种氨基酸的色谱特征和质谱离子特征明显,可用来对氨基酸进行准确定性分析。定量实验结果表明,16种氨基酸的线性范围广准确性高,在氨基酸浓度线性范围4.0～125μmol/L,16种氨基酸的峰面积与浓度相关系数都大于0.998。在氨基酸浓度为50μmol/L时,16种氨基酸的相对标准偏差在0.84%～2.75%之间。用液质联用法对7种虫生真菌菌丝样品中16种游离氨基酸含量的测定结果显示,同一菌株中各种氨基酸的含量相差较大,但所有供菌株中含量最高的均为苯丙氨酸,它在不同供试菌株中的含量范围为0.718～2.173 mg/g,其中中国被毛孢的苯丙氨酸含量最高。供试菌株中含量较高的氨基酸还有脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸和谷氨酸,它们含量大部分都在0.3mg/g以上,较其他氨基酸含量明显较高,这些含量较高的氨基酸可作为判定虫生真菌菌丝中游离氨基酸的特征指标。不同菌株的游离氨基酸总量也存在较大差异,中国被毛孢中游离氨基酸总含量为7.537 mg/g,较蝉棒束孢(3.196 mg/g)的总含量高出1.36倍。     

HPLC法测定茶树花中可溶性糖、儿茶素和游离氨基酸

采用高效液相色谱法测定茶树(Camellia sinensis)花中可溶性糖、儿茶素和游离氨基酸的含量。结果表明：茶树花中含有216.85mg/g可溶性糖,其花冠、雄蕊群和雌蕊群部分(F-1)及花托、萼片和花梗部分(F-2)的含量分别为250.945mg/g和112.65mg/g;茶树花中总儿茶素含量为37.03mg/g,且F-2中的含量(46.90mg/g)高于F-1(30.88mg/g);茶树花中含有包括茶氨酸在内的16种游离氨基酸,含量为10.87mg/g,虽然F-2中游离氨基酸的种类较少,但其含量(16.47mg/g)显著高于F-1(10.59mg/g)。     

柠檬酸提取贝肉中镉及其提取液中氨基酸组成分析

以马氏珠母贝匀浆液为原料,利用柠檬酸络合提取马氏珠母贝匀浆液中的重金属镉,考查柠檬酸溶液浓度、溶液pH、料液比和反应时间对镉提取率的影响,优化镉的提取条件,并分析提取液中氨基酸组成,通过化学评分和必需氨基酸指数对其蛋白质的营养价值进行评价。结果表明,柠檬酸对马氏珠母贝匀浆液中的镉具有很好的提取效果,在最佳提取条件下,即柠檬酸溶液的浓度为0.08mol/L、pH 4.0、料液比1∶10(m∶V)、提取时间4h,柠檬酸对马氏珠母贝匀浆液镉的提取率达到92.2%。马氏珠母贝肉脱镉后所得的柠檬酸提取液中总氨基酸含量为2 940mg/100g,必需氨基酸占总氨基酸的百分含量为51.7%,蛋白质的EAAI为78.06;马氏珠母贝肉总氨基酸含量为13 120.0mg/100g,必需氨基酸占总氨基酸的百分含量为32.4%,蛋白质的EAAI为69.98,表明马氏珠母贝肉以及柠檬酸提取液均富含蛋白质、必需氨基酸,且必需氨基酸组成比较均衡。     

氢化物发生原子荧光法对贝类中无机砷监测及其安全性评价

通过氢化物发生原子荧光法检测浙江省舟山市主要菜场常见的4种贝类中无机砷的含量,并对其安全性进行评价。结果表明：4种贝类中可食部分的无机砷含量分别为花蛤0.138～0.191mg/kg、螠蛏0.112～0.171mg/kg、牡蛎0.067～0.163mg/kg、贻贝0.070～0.168mg/kg,无机砷含量皆符合国家食品卫生标准。食用量低于世界卫生/粮农组织食品添加剂联合专家委员会推荐的129μg的限量。