白毛藤多糖对宫颈癌细胞系体外增殖的影响及机制研究

探讨白毛藤多糖对宫颈癌细胞系SiHa细胞体外增殖的影响及机制。将不同浓度白毛藤多糖作用SiHa细胞后,用MTT法检测细胞增殖抑制率,用流式细胞仪分析细胞周期各时相的变化。白毛藤多糖能抑制宫颈癌细胞的体外增殖,其机制可能与细胞周期阻滞有关。     

苦白蹄乙醇提取物体外抗肿瘤活性研究

探讨苦白蹄乙醇提取物在体外的抗肿瘤活性。采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)考察苦白蹄乙醇提取物对人肝癌细胞BEL-7404、人肺腺癌细胞H-1299、人胃腺癌细胞SGC-79013种人恶性肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性。结果显示,苦白蹄乙醇提取物对BEL-7404、SGC-7901两株肿瘤细胞具有比较明显的抑制效果,其半数抑制浓度(IC50)分别为73.5、80μg·mL-1,且抑制率随药物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系,但对H-1299的抑制率相对较低。细胞周期实验显示,BEL-7404细胞在苦白蹄乙醇提取物的作用下,G2/M期的细胞比例呈下降趋势,S期细胞比例增大,细胞周期阻滞于S期。苦白蹄乙醇提取物具有比较明显的体外抗肿瘤活性。     

细胞周期中内质网膜系统的组建

细胞周期与细胞癌变 ,胚胎发育 ,组织再生均有密切关系 ,对细胞周期的研究有助于探讨细胞癌变的机理。内质网膜系统不仅是细胞的其他膜性细胞器来源 ,在蛋白质和脂类合成中也起重要作用。因而观察与分析细胞周期中内质网系统的组建特点 ,对了解正常与癌变细胞的生物学特性均具有重要意义。材料与方法　将 CV- 1细胞 (非洲绿猴肾上皮细胞 )单层培养于培养皿中的盖玻片上。取经上述培养的处于对数生长期的细胞 ,用过量的胸腺嘧啶核苷双阻断法使细胞同步化 ,在不同时间分别收集不同时相的 G1,S,G2 和 M期的细胞。对不同时相的细胞应用流式细…     

芹菜素对甲状腺癌BCPAP细胞生长及细胞周期的影响

研究芹菜素对人乳头状甲状腺癌BCPAP细胞生长的抑制作用及对细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度芹菜素在24h对BCPAP细胞的抑制作用,以及12.5,25.0,50.0μmol/L芹菜素分别在24,48,72h对BCPAP细胞的抑制作用;通过明场细胞形态学照片分析,对比不同浓度芹菜素对BCPAP细胞形态的影响,评价其对细胞生长的抑制作用。利用流式细胞仪检测BCPAP细胞周期和凋亡。结果表明,不同浓度(12.5~100.0μmol/L)芹菜素对BCPAP细胞的毒性有明显剂量和时间依赖性,其24h的IC50值为40.65μmol/L。芹菜素对BCPAP细胞的形态学变化有显著影响,高浓度芹菜素强烈抑制BCPAP细胞数目的增长。芹菜素可使BCPAP细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡。芹菜素对BCPAP细胞有较明显的细胞毒性和生长抑制作用,其抑制机制可能是使BCPAP细胞生长停滞在G2/M期并诱导细胞凋亡,使得细胞生存率下降,从而抑制细胞活性和数目增长。     

基于HPLC-MS脂质组学研究棕榈酸 对人正常肝细胞脂质代谢的影响

对棕榈酸（PA）处理的人源肝细胞中的脂质进行脂质组学分析,探讨PA对肝细胞脂质代谢的影响。采用基于HPLC-MS的脂质组学技术,识别和量化PA处理人正常肝细胞后改变的内源性脂质代谢产物,并利用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果表明,通过脂质组学分析共检测到1 000多种脂质代谢物,又可细分为22种质类别,根据正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）显示有628种脂质代谢物含量存在显著差异。其中PA处理组中溶血磷脂酰胆碱（LPC）、磷脂酰肌醇（PI）、神经酰胺（Cer）、己糖神经酰胺（Hex1Cer）、鞘氨醇（SPH）、甘油二酯（DG）、甘油三酯（TG）、酰基肉碱（AcCa）和N-酰基乙醇胺（AEA）含量显著升高,鞘磷脂（SM）、二己糖神经酰胺（Hex2Cer）和胆固醇酯（ChE）含量显著下降。与对照组相比,PA处理组G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例上升,即细胞周期发生阻滞。综上,PA显著改变了肝细胞的脂质代谢谱,诱导细胞G2/M期阻滞。     

地参游离酚对CCl4所致肝细胞损伤细胞凋亡、细胞周期及炎症因子的影响

通过体外实验,研究地参游离酚对CCl₄所致肝细胞损伤细胞凋亡、细胞周期及炎症因子的影响。采用流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期的分布,采用试剂盒测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素8（IL-8）的含量和天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）活化程度,同时采用免疫组化检测环氧化酶-2（COX-2）、白介素6（IL-6）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达水平。结果表明,与模型组相比,地参游离酚能显著降低CCl₄引起的细胞凋亡,影响细胞周期的分布,能显著降低炎症因子TNF-α、IL-8的含量并阻滞Caspase-3的活化程度（P<0.05）,并不同程度降低COX-2、IL-6和iNOS蛋白表达水平（P<0.05）。地参游离酚通过抑制细胞凋亡、影响细胞周期分布和抑制炎症反应保护CCl₄所致的肝细胞损伤。     

亚硒酸钠在SGC-7901细胞生长中的抑制作用

目的：研究亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长的影响。方法：应用细胞培养和SRB实验探讨了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长曲线的影响：应用集落形成试验、分裂指数试验研究了亚硒酸钠对SGC-7901细胞集落形成和分裂指数的影响；应用流式细胞仪检测了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长周期的影响；应用电镜、TUNEL染色及流式细胞仪观察了亚硒酸钠诱导SGC-7901细胞凋亡的作用。结果：亚硒酸钠溶液对SGC-7901细胞的生长曲线、集落形成、分裂指数有明显的抑制作用，其抑制作用与其作用浓度和作用时间呈正相关。流式细胞仪检测显示亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24h后，细胞周期发生改变，G1期细胞百分率减少，S期细胞百分率增加，与对照组相比有显著性差异（p〈0．05）：电镜下，细胞核固缩，染色质凝集呈新月形紧贴于核膜周边，核膜扭曲；DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”；TUNEL染色法检测细胞凋亡指数在10．4％～33．4％。结论：亚硒酸钠溶液对SGC-7901细胞的生长具有抑制作用，其抑制作用程度与其作用浓度和时间呈正相关：亚硒酸钠通过阻滞细胞S期抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡可能是其抑制SGC-7901细胞生长的机理之一。     

人类骨桥蛋白(hOPN)在细胞增殖中的功能研究

为了研究人类骨桥蛋白（hOPN)与293细胞增殖。细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系。并对其机制进行探讨。成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系，也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系，hOPN对293细胞具有促增殖效应，hOPN蛋白激活了293细胞细胞周期蛋白A的表达。实验结果表明：hOPN通过一定的信号通路刺激了细胞周期蛋白A的表达。加快了细胞进入通过S期，从而促进了细胞的增殖。     

60Co γ射线诱发的MCF-7细胞周期阻滞

以60Co γ射线照射体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,运用流式细胞术探讨了受照射后细胞周期进程的变化规律.结果表明,MCF-7细胞受5.0Gy γ照射后呈现短暂的S期阻滞(持续约6h),主要为G2期阻滞(持续约63h).S期和G2期阻滞高峰分别出现在照射后9h和18h,阻滞峰值分别达正常值的1.6倍和6.2倍.照射后9h和照射后18h的剂量-效应曲线截然不同.照射后9h S期阻滞和照射后18h G2期阻滞均与照射剂量呈现明显剂量-效应关系.     

富勒烯膦酸衍生物对HeLa细胞生长的影响

研究富勒烯膦酸衍生物2P对人宫颈癌HeLa细胞生长的影响.利用本实验室合成的富勒烯膦酸衍生物2P作用于HeLa细胞,并应用MTT法、流式细胞术、和PI/H033342双染色法等方法检测其效应.结果表明,2P在光照条件下对HeLa细胞生长具有明显的抑制作用,这种作用有剂量依赖性和光照依赖性.经过双染后荧光镜检测和流式检测后发现有高比例的凋亡细胞存在.流式细胞术结果还发现2P对HeLa细胞周期产生明显影响,表现为G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,推测细胞可能被2P阻断在S、G2期.以上结果提示富勒烯膦酸衍生物的细胞毒作用,以及作为抗肿瘤药物的可能.