蒎烷基噻唑腙类衍生物的合成及其抗肿瘤活性

以诺蒎酮为原料,经过加成、缩合、环化等反应,合成出蒎烷基噻唑腙衍生物4a～4n,采用FTIR、1HNMR、13CNMR和HRMS对化合物的结构进行了表征。考察了化合物4a～4n对人肝癌细胞(HepG2)、人多发性骨髓瘤细胞(RPMI-8226)、人肺癌细胞(A549)和乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的抗肿瘤活性。实验结果表明,化合物4a的抗肿瘤活性最强,其对Hep G2、8226、A549和231细胞的IC50分别低至5.8、8.8、7.1和10.6μmol/L;化合物4c的抗肿瘤活性也较强,其IC50分别为8.9、8.7、7.3和9.7μmol/L。细胞凋亡和周期实验数据显示,当化合物4a浓度从0增加到40μmol/L时,A549细胞的总凋亡率从6.55%增加到47.20%,G2/M期的细胞数量从13.50%上升至51.72%。以上结果表明,化合物4a能够诱导A549细胞凋亡,并将细胞有丝分裂周期阻滞在G2/M期。     

多头绒泡菌细胞核肌动蛋白相对含量的动态变化

将自然同步化的多头绒泡菌生质团中的S期、G2早期、G2中期和G2晚期细胞核提取出来,经SDS－PAGE发现一条分子量为43KD的多肽,经Westen blot证明为肌动蛋白,凝胶染色后,发现细胞周期不同期相的肌动蛋白带着深浅不同。G2早期染色最深,G2晚期染色最浅,电泳凝胶扫描表明肌动蛋白相对含量依细胞周期相不同而具有动态变化;G2早期相对含量最高,达6．9％;G2晚期相对含量最低。为2．3％。     

亚硒酸钠与白藜芦醇联合应用对肺癌细胞的协同效应分析

目的:观察亚硒酸钠与白藜芦醇单独及联合应用对肺癌细胞的影响,并通过细胞周期探讨其作用机理。方法:用四甲基偶氮唑盐法检测亚硒酸钠和白藜芦醇单独及联合应用对细胞增殖和存活的影响;用流式细胞术测定细胞的凋亡率及细胞周期。结果:亚硒酸钠和白藜芦醇对肺癌细胞A549均有拮抗作用,且随浓度的增加,拮抗效果越显著,当亚硒酸钠浓度大于等于5μmol/L时,拮抗效果极显著(P0.01);当白藜芦醇浓度大于等于65μmol/L时,拮抗效果极显著(P0.01)。亚硒酸钠对A549细胞的半致死率(lethal dose of 50%,LD_(50))为4.759μmol/L,白藜芦醇对A549细胞的LD_(50)为45.24μmol/L。然而亚硒酸钠和白藜芦醇联合用药作用于A549细胞的拮抗效果优于单独用药,且低剂量的亚硒酸钠和白藜芦醇联合就能发挥出高剂量亚硒酸钠对A549细胞的拮抗作用效果,有效地降低了亚硒酸钠对细胞的毒副作用。另外,亚硒酸钠联合白藜芦醇作用可以阻滞A549细胞G0/G1期,最终导致细胞凋亡。     

罗非鱼头长链碱的分离纯化及抗肿瘤活性

目的：探讨罗非鱼头长链碱（tilapia head long chain bases,TH-LCB）的提取纯化方法及其体外抗肿瘤 活性。方法：以罗非鱼头为原料,采用有机溶剂提取法,提取纯化得到TH-LCB;采用四甲基偶氮唑盐法、细胞 凋亡率和细胞周期的测定和蛋白免疫印迹等方法,探讨了TH-LCB对人白血病K562细胞的增殖抑制作用和凋亡诱 导作用。结果：TH-LCB可显著抑制人K562细胞的增殖,TH-LCB作用24、48 h后的半数抑制浓度分别为42.207、 39.494 μg/mL;随着TH-LCB质量浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加,sub-G0/G1峰（凋亡峰）也随之升高,表明 TH-LCB通过诱导细胞凋亡来抑制K562细胞增殖;Western blot结果表明,TH-LCB可提高细胞内Caspase-3的蛋白 表达量,呈剂量依赖效应。结论：TH-LCB可通过诱导K562细胞凋亡抑制其增殖,这一过程可能与Caspase-3的 激活有关。     

培养液匀浆人参发根抗氧化、抗黑色素瘤作用

以培养液匀浆人参发根为实验材料,选用Cu2＋螯合能力、多酚氧化酶活力、总抗氧化能力3 种方法对其 抗氧化能力进行测定;采用流式细胞术对黑色素瘤细胞A375凋亡、细胞周期进行测定。结果表明：随着质量浓 度的增大,培养液匀浆人参发根的Cu2＋螯合率逐渐提高,在100 mg/mL时与VC差异不显著（P＞0.05）;40、 60、80、100 mg/mL时培养液匀浆人参发根与VC的多酚氧化酶活力差异不显著（P＞0.05）;培养液匀浆人参 发根的总抗氧化能力具有质量浓度依赖性,在100 mg/mL时达到0.877 4 mmol FeSO4/g。与对照组相比培养液匀 浆人参发根组细胞凋亡显著（P＜0.05）;S、G2/M期比例升高,G0/G1期比例下降。结论：人参发根具有抗氧 化、抗黑色素瘤作用。     

shRNA沉默P115基因对胃癌细胞增殖相关蛋白表达的影响及机制

目的探讨高尔基体囊泡转运蛋白(colgi-vesicular transport protein,P115)基因沉默对胃癌细胞株BGC-823中增殖相关因子细胞周期素D1(cyclinD1)、微小染色体维持缺陷蛋白2(mini chromosome maintenance protein 2,Mcm2)和增殖细胞核抗原(proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达的影响及其可能的机制。方法采用脂质体介导法将重组表达质粒P115-shRNA2(P115-shRNA2组)和阴性对照质粒shNC(阴性对照组)转染至高表达P115的胃癌细胞株BGC-823中,并设未转染组,经G418筛选出稳定转染细胞,实时定量PCR(Real-time PCR)法检测细胞中P115、巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)、cyclinD1、Mcm2和PCNA基因mRNA的转录水平;Western blot法检测细胞中P115、MIF、pERK1/2、cyclinD1、Mcm2和PCNA蛋白表达水平;免疫共沉淀法检测BGC-823细胞中P115与MIF间的相互作用;ELISA法检测细胞上清液中MIF的分泌水平。结果与未转染组和阴性对照组相比,P115-shRNA2组细胞中P115、MIF、cyclinD1、Mcm2和PCNA的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,ERK1/2的磷酸化水平明显下调,BGC-823细胞培养上清中MIF的含量明显降低;P115蛋白可在抗MIF的免疫沉淀物中检出,P115和MIF在BGC-823细胞中存在特异性的相互作用。结论 P115基因沉默下调胃癌细胞中cyclinD1、Mcm2和PCNA的表达,其分子机制可能与P115通过调控MIF的表达和分泌,进而启动下游的ERK1/2信号通路有关。P115可作为研究胃癌细胞增殖分子机制的新靶点。     

当归多糖预防给药对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞黏附分子表达及细胞周期的影响

目的探讨当归多糖(Angelica polysaccharide,APS)预防给药对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclear cells,BMNCs)黏附分子表达及细胞周期的影响。方法将BALB/c小鼠分为4组:正常对照组(不作任何处理)、NS组(经腹腔注射生理盐水)、2mg/kgAPS组(经腹腔注射2mg/kgAPS)和8mg/kgAPS组(经腹腔注射8mg/kgAPS),连续注射7d后,进行照射,并继续给药13d。分别于照射后第7、14天采集各组小鼠外周血,并取骨髓,进行WBC、RBC、PLT及BMNC计数;流式细胞术检测小鼠Sca-1+BMNC表面黏附分子CD44和CD49d的表达及BMNC细胞周期的变化;半定量RT-PCR和Western blot法分别检测小鼠BMNC细胞周期蛋白D(2CyclinD2)mRNA转录水平和蛋白表达水平的变化。结果与正常对照组比较,NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC数量均明显减少,Sca-1+BMNC表面黏附分子CD44和CD49d的表达明显下降(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),CyclinD2 mRNA转录水平和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);2mg/kgAPS组和8mg/kgAPS组能增加外周血各指标及BMNC数量(P<0.05),明显降低第7和14天Sca-1+BMNC表面黏附分子CD44和CD49d的表达水平(P<0.05),降低G0/G1期细胞比例(P<0.05),提高CyclinD2 mRNA的转录水平和蛋白表达水平(P<0.05)。结论 APS预防给药能通过降低放射损伤小鼠Sca-1+BMNC表面黏附分子的表达水平,上调BMNC的CyclinD2 mRNA和蛋白表达来加速BMNCG1期向S期的转换,促进造血恢复。     

藏灵菇嗜热链球菌胞外多糖对人结肠癌细胞的增殖抑制

探讨从藏灵菇中筛选的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)所产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对人结肠癌HCT-8细胞增殖的影响.采用CCK-8法测定EPS对HCT-8细胞生长的抑制率;形态学观察EPS对HCT-8细胞的杀伤作用;流式细胞术检测EPS对HCT-8细胞周期的影响.结果显示:EPS对HCT-8细胞增殖有明显的抑制作用,且呈时间.剂量依赖性;倒置显微镜下观察部分细胞脱壁、核碎裂、固缩,细胞悬浮坏死;细胞周期分析显示G1期细胞百分率增大.说明EPS通过直接杀伤人结肠癌HCT-8细胞,使细胞周期阻滞于G1期而抑制细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用.     

冬虫夏草菌丝体水提液对SP2/0细胞周期的作用

用四唑篮比色法试验,琼脂糖凝胶电泳方法及流式细胞仪研究了冬虫夏草菌丝体水提液对小鼠骨髓瘤细胞生长、凋亡及细胞周期的影响。结果发现浓度为100mg/ml水提液抑制瘤细胞的增殖,抑制率为70%,使细胞周期阻滞,在DNA电泳出现明显凋亡带,这提示水提液对瘤细胞抑制作用可能是由于细胞周期阻滞诱导细胞凋亡的结果。     

大蒜素抗癌作用及其机制研究进展

大蒜素是大蒜中的主要生物活性成分,包含多种烯丙基有机硫化物。近年国内外的流行病学调查和实验研究表明,大蒜素对多种肿瘤均有明显抑制作用。其主要作用机制是通过影响肿瘤细胞调控基因表达、细胞周期及细胞内酶系等途径诱导肿瘤细胞凋亡。同时还与转基因肿瘤疫苗及抗癌药物协同作用,增强抗癌效果。本文就近年来大蒜素抗癌作用的研究进展作一综述。