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通过PCR从克隆载体puC18-3Z/Cry2A*上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A*,经限制性内切酶Nde I和BamH I双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a( ),成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a( )/Cry2A*,并转入人肠杆菌BL21(DE3)中.通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时问为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达.采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目的蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度达到95%. 相似文献
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转基因食品安全性评价研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
自1996年以来,转基因作物的大规模商业化生产为人们带来了巨大的社会经济效益,但是转基因技术存在一定的风险性,因此加强转基因食品的安全性评价和标准化管理显得尤为迫切和重要。本文从营养学、毒理学、过敏性等方面综述了转基因食品的食用安全性评价,并多角度探讨了转基因食品安全性评价的关键问题,包括用不同动物实验评价转基因食品的食用安全性,新型转基因植物的安全性评价,以及转基因食品的食用安全标准化等,以期使读者对转基因食品的食用安全性有更加系统、全面的了解。 相似文献
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转基因产品中bar和pat基因的SYBR Green I-PCR检测方法研究(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
SYBRGreenI是一种在实时定量PCR检测中广泛使用的DNA结合染料。PCR结果可以通过溶解曲线分析来鉴定而不再需要使用传统的琼脂糖凝胶电泳来鉴定,因为PCR特定扩增产物的溶解温度的特异性是类似于琼脂糖凝胶电泳中的扩增条带的特异性。建立了基于扩增产物溶解曲线分析的二重实时定量PCR对转bar和pat基因的作物进行检测的方法。获得了bar和pat基因的特异性扩增产物和他们的特定溶解温度,并且通过几组不同的二重PCR对他们的扩增产物进行了溶解曲线鉴定。还对影响溶解曲线分析的一些因素进行了研究和讨论。结果表明基于扩增产物的溶解温度建立的二重PCR检测方法是可行的,该方法对转bar和pat基因的作物可达到0.9%的检测限。 相似文献
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扁平潜器微速与倒航水动力试验研究 总被引:6,自引:0,他引:6
在长条水池中进行了具有扁平外形潜器的微速与倒航运动的水动力模型空间斜拖试验,测量了具有攻角和漂角同时存在下的空间运动的三个水动力和三个水动力矩。将测量的水动力和力矩整理成空间角度攻角、漂角的变化关系曲线图,初步得到了其变化规律。最后将水动力和力矩回归成攻角和漂角双变量的表达式。 相似文献
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提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道茵群的真实情况.采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内.通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR,变性梯度凝胶电泳(DGGE)对改进方法及两种试剂盒法提取DNA的结果进行比较,评价了所建立的高效提取方法.与试剂盒相比,改进的方法DNA得率较高,简便快速,成本低廉.同时后续的PCR鉴定及DGGE菌群多样性分析显示,改进的方法可以更好地揭示鼠肠道菌群分布和特性. 相似文献
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超高效液相色谱法检测6种人参皂苷含量 总被引:1,自引:0,他引:1
采用超声提取药食同源植物(人参、西洋参、三七)中原人参三醇皂苷(Rg1、Re、Rf)和原人参二醇皂苷(Rb1、Rc、Rd),建立了超高效液相色谱(UPLC)检测方法。以50%甲醇溶液为提取剂,料液比1∶80(g∶m L),超声时间30 min。采用乙腈和0.05%磷酸水为流动相,梯度洗脱,检测波长为203 nm。该方法在质量浓度5~1 000μg/m L范围内线性良好,6种皂苷的最低检出限在22.5~51.0 mg/kg之间,平均回收率98.1%~105.5%。该方法准确、灵敏度高、重现性好、省时快捷,适合日常、大批量样品的检测。用此方法测定市售人参、西洋参及三七样品,结果表明3类样品中原人参二醇类皂苷含量高于三醇类皂苷,三七样品中Rg1的含量比人参和西洋参高,西洋参中Re含量高于人参和三七样品,而Rf仅在人参样品中检测到。 相似文献
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