超声波辅助复合酶法制备藏系绵羊胎盘肽的工艺优化

为实现羊胎盘深度开发利用,以肽得率和水解度为指标,筛选确定多种蛋白酶复合水解的最佳组合方案,并利用响应面法优化超声波辅助复合酶法水解制备羊胎盘肽的预处理参数。结果表明,响应面法优化后的超声预处理参数为超声时间18 min、温度28℃和功率420 W,超声波预处理后羊胎盘经木瓜蛋白酶和风味酶联合同步复合酶解制备羊胎盘肽的肽得率为39.89%,水解度为21.78%;该最优条件下平均肽链长度为4.59,分子量约500~600。结论:超声波辅助复合酶法制备藏系绵羊胎盘肽的工艺可行且有效。     

超声波辅助酶解鲶鱼肉制备抗氧化肽及其活性评定

采用超声波辅助酶解鲶鱼肉制备抗氧化肽,以得率和抗氧化性为评价指标,研究超声时间、超声功率、超声温度、固液比、酶解时间等因素的影响,并通过响应面法优化工艺参数。结果表明:超声处理的水解度和得率大于水浴处理的水解度和得率,超声辅助酶解的最优条件为超声时间42min、超声温度40℃、超声功率320W、酶解时间3.3h,此条件下肽的得率为1.13%。超声辅助酶解法制备的多肽具有较强的抗脂质过氧化能力和清除DPPH自由基能力,其IC50值分别为0.55mg/m L和0.69mg/m L。     

超声波辅助酶解黑豆蛋白工艺优化

利用不同蛋白酶酶解黑豆蛋白,根据水解度选择最佳用酶为碱性蛋白酶,采用超声波辅助酶法提取黑豆肽;分析超声波处理时间、功率、加酶量、pH、酶解时间及底物浓度对水解度及二苯代苦味酰基自由基( DPPH·)清除能力影响.在单因素实验基础上,依据响应面分析确定最优提取工艺条件为:超声功率1029.27 W、酶解pH 8.64、底...     

酶解制备羊胎盘抗氧化肽工艺条件的优化

对羊胎盘下脚料为原料制备羊胎盘抗氧化肽的工艺进行了研究。以DPPH自由基清除率和水解度为考察指标,分别采用4种蛋白酶酶解制备羊胎盘抗氧化多肽,结果表明木瓜蛋白酶酶解产物的自由基清除率最高且水解度适中,因此木瓜蛋白酶被确定为水解酶。通过单因素试验与二次响应面回归分析对酶解工艺参数进行了优化。最佳酶解条件为:底物质量浓度33 mg/m L、pH 6.4、酶解温度55℃、加酶量4 900 U/g、酶解时间120 min,此时羊胎盘蛋白水解度为7.92%,10 mg/m L酶解产物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基与羟基自由基的清除率分别可达92.15%、93.45%与46.88%,显示出较好的抗氧化活性。     

采用不同蛋白酶制备羊胎盘抗氧化肽的研究

选取羊胎盘为实验材料,以水解度、多肽含量和DPPH自由基清除率为考察指标,采用生物酶法对羊胎盘酶解制备抗氧化肽进行了研究。采用8种蛋白酶,在最优的酶解条件下对羊胎盘进行酶解制备抗氧化活性肽。结果表明,风味蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶酶解产物对DPPH清除的IC50分别为0.6420、0.7120和0.6781mg/m L。说明该三种酶对羊胎盘酶解制备抗氧化肽的效果比较好。     

羊血浆蛋白抗氧化肽酶法制备与工艺优化

以羊血浆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶7种蛋白酶进行酶解,以酶解物的总抗氧化能力和水解度为评价指标,确定最佳的蛋白酶;采用单因素试验方法和正交试验方法对温度、pH和酶解时间等因素进行优化;采用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分析羊血浆蛋白抗氧化肽分子量分布。结果表明,碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白过程中,其酶解物的总抗氧化能力均显著高于其他6种蛋白酶,水解度仅次于风味蛋白酶,显著高于其他5种蛋白酶(p0.05);影响碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白获得抗氧化肽的因素主次顺序为温度酶解时间pH;结论:碱性蛋白酶是制备羊血浆蛋白抗氧化肽的最佳蛋白酶,碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白获得羊血浆蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解6 h,温度55℃,pH11,且其组成复杂,由多种小分子肽组成。     

裙带菜孢子叶仿生酶解工艺优化及酶解肽的抗氧化活性分析

以裙带菜孢子叶为原料,采用仿生酶解工艺制备生物活性肽。以多肽得率和水解度为主要指标,在单因素实验基础上采用响应面分析法优化酶解工艺条件,并评价了酶解肽对三种自由基（DPPH、ABTS、OH）的清除能力。结果表明:裙带菜仿生酶解工艺的最优条件为超声功率720 W、超声破壁时间40 min、料液比1:104 g/mL、胃蛋白酶加酶量为6.1%、酶解时间2.5 h、胰蛋白酶加酶量为5%、酶解时间3 h。在此条件下进行酶解,多肽得率为21.17%,水解度为43.07%。酶解肽对DPPH、ABTS、OH自由基具有较好的清除效果,其IC₅₀值分别为5.71、0.82、1.35 mg/mL。优化的裙带菜孢子叶仿生酶解工艺合理可行,酶解肽具有较好的自由基清除能力,说明其具有良好的抗氧化活性,可作为功能性食品开发的配料。     

超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽工艺研究

采用超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽,超声辅助酶解最佳工艺为复合酶添加量3%,酶解温度50℃,酶解p H 7.5,酶解时间70 min,超声功率150 W。利用混料设计对复合酶配比进行优化,确定复合酶质量比为1.42∶1∶2.66。在最优工艺条件下制备的核桃多肽DPPH自由基清除率为84.94%,其抗氧化能力低于维生素C,与维生素E接近。     

超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽工艺优化

为进一步提高辣木籽蛋白资源的开发利用,采用盐提法提取辣木籽蛋白,再采用超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,通过单因素实验探究超声波功率、超声酶解时间、超声酶解温度及料液比对制备ACE抑制肽的影响,采用响应面法对制备工艺条件进行优化。结果表明：超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽的最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶添加量5.5 mg/mL、pH 9、超声波功率500 W、超声酶解时间1.7 h、超声酶解温度55℃、料液比1∶45,在此条件下制备的酶解物ACE抑制率达到78.32%,水解度为7.78%。以辣木籽为原料制备ACE抑制肽作为功能性蛋白肽产品,可有效提高辣木籽蛋白资源的开发利用。     

超声辅助复合酶法提取莓茶多糖的工艺优化

目的：提高莓茶多糖的提取效率。方法：采用超声辅助复合酶法优化莓茶多糖的提取工艺,通过单因素试验考察超声波温度、超声波提取时间、酶解pH、超声波功率和复合酶添加量对莓茶多糖提取得率的影响,再利用Plackett-Burman试验筛选得到酶解pH、超声波功率和复合酶添加量对多糖提取率影响显著。并经过最陡爬坡试验和响应面（Box-Behnken）试验得到最佳工艺。结果：在酶解pH 4.30,超声波功率104 W,复合酶添加量1.20%,超声波时间40 min,超声波温度50 ℃的条件下,莓茶多糖得率为（7.22±0.06）%,与热水提取、超声波提取、复合酶提取相比,其得率分别提高了106.83%,86.35%,54.46%。结论：超声辅助复合酶提取莓茶多糖工艺可以显著提高莓茶多糖得率。     

酶法及美拉德反应改进鸡肉蛋白功能性质的研究

利用不同单酶酶解鸡胸肉,制得的酶解液和木糖进行美拉德反应,考察不同酶解方式制得的底物对美拉德反应产物的各检测指标(肽、氨基酸、糖等反应底物含量和美拉德产物含量及其抗氧化性能力)影响,并分析各检测指标间的相关性。实验表明:酶解程度对美拉德反应产物特性有显着性影响,酶解作用所得的肽具有更强的美拉德反应活性,酶解程度越大的酶解液,消耗糖量越多,生成的MRPs越多,其MRPs抗氧化活性越强,同一反应起始浓度,8 h与2 h酶解液的MRPs抗氧化能力相比,FRAP还原能力与DPPH·清除能力增强倍数高达2倍和7倍;美拉德反应能明显改善了酶解液的性质,可溶解性肽的含量最高增加了2倍,可溶性氨基酸最高增加了1倍,抗氧化能力最高增强了40倍;从检测指标的相关性可知,糖的消耗量变化一定程度上能反应美拉德反应的程度,美拉德反应能促进肽的分解生成氨基酸。     

响应面法优化酶法制备猪血红蛋白抗氧化肽

以猪血红蛋白为原料,研究蛋白酶水解制备抗氧化肽的工艺.通过研究酶解时间、酶与底物比、酶种类对制备的抗氧化肽还原力和水解度影响,筛选出最佳蛋白酶及制备抗氧化肽的最佳工艺条件.结果表明:7种酶中,胃蛋白酶的水解度和还原力最佳.胰蛋白酶和胃蛋白酶复合水解比单酶水解的水解度提高了11.83％,还原力没有显著性差异.在此基础上设计单酶响应面,得到最佳还原力酶解条件为:酶解温度37.31℃、pH1.95、酶与底物比3526.74U/g.脱色条件为活性炭用量3％、pH4.0、温度70℃、脱色时间1h,粉末状活性炭的脱色率达到85.69％,蛋白质损失率20.32％.     

2种蛋白酶酶解曲拉干酪素条件优化及抗氧化性比较

以曲拉干酪素为原料、水解度为指标,在酶解时间、酶解温度、pH值、曲拉干酪素质量浓度、酶添加量单因素试验基础上,采用响应面试验对碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解工艺条件进行优化,并对2 种酶解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除率,Fe2＋、Cu2＋螯合能力和还原力等抗氧化性指标进行比较。结果表明,碱性蛋白酶和胰蛋白酶分别在酶解时间3.8、2.5 h,酶解温度49.8、47.8 ℃,曲拉干酪素质量浓度60、35 g/L,pH 8.5、7.5,酶添加量140、2 900 U/g时水解度最大,为24.25%和13.57%。碱性蛋白酶解液超氧阴离子自由基清除率、Fe2＋螯合能力显著低于胰蛋白酶解液（P＜0.01）;羟自由基清除能力高于胰蛋白酶解液（P＞0.05）;2 种蛋白酶酶解液在酶解液质量浓度1～5 mg/mL时,Cu2＋螯合能力、DPPH自由基清除率和还原力随质量浓度均呈上升趋势,Cu2＋螯合能力低于Fe2＋螯合能力（P＞0.05）,DPPH自由基清除率和还原力二者差异显著（P＜0.01）。2 种蛋白酶对酶解物抗氧化性指标影响不同,碱性蛋白酶酶解物抗氧化性相对较优。     

响应面法优化大黄花鱼肉蛋白水解工艺及多肽抗氧化性研究

以大黄花鱼为实验材料,利用酶法水解大黄花鱼肉蛋白制备抗氧化肽。以还原力为响应值,通过单因素结合响应面法对中性蛋白酶酶解大黄花鱼肉蛋白的酶用量、酶解温度、底物浓度以及酶解时间进行了优化,结果表明:四种酶中,中性蛋白酶酶解的酶解液水解度(DH)和还原能力最高。最优酶解工艺条件为酶用量为0.4%、酶解温度45 ℃、底物浓度25.0%、酶解时间7 h、体系pH7.0时,还原力为0.951。酶解液DH为37.51%,超氧阴离子自由基清除力(O₂-·)为82.42%。SDS-PAGE(聚丙烯酰氨凝胶电泳)结果显示,酶解7 h大黄花鱼肉蛋白肌动蛋白完全消失,水解形成肌球蛋白轻链分子量为27、15和6 kDa。     

Production and characterisation of duck albumen hydrolysate using enzymatic process

Influences of different ultrasound treatments combined with heat pretreatment on enzymatic hydrolysis, emulsifying properties and antioxidant activities of hydrolysates from duck egg albumen were studied. Heat pretreatment at 95 °C for 30 min inhibited both serine and cysteine protease inhibitors effectively. Ultrasonication of heated duck albumen at 60% amplitude for 10 min yielded the highest surface hydrophobicity. Coincidentally, aforementioned pretreatment rendered the hydrolysate with highest degree of hydrolysis (DH) than other pretreatments when Alcalase was used. The resulting hydrolysate showed the highest antioxidant activities including DPPH radical and ABTS radical cation scavenging activities and ferric reducing antioxidant power as well as emulsifying properties when hydrolysis time of 90 min was used. The hydrolysate possessed the peptides with molecular weight of 219–255 Da with the highest ABTS radical scavenging activity. Thus, heat pretreatment, followed by ultrasonication of duck albumen under appropriate condition could increase DH, antioxidant activities and emulsifying properties of duck albumen hydrolysate.     

响应面法优化秋刀鱼酶解制备抗氧化活性肽的工艺

采用酶解法从秋刀鱼肌肉中提取抗氧化活性肽,以水解度(DH)、TCA-可溶性肽含量、DPPH自由基清除率、Fe3+还原力、·OH清除率以及O2?·清除率为指标,从六种商业用酶中(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶)筛选出最适蛋白酶.以料液比、酶添加量、酶解时间、温度、pH五个因素进行单因...     

双酶法制备银杏抗氧化肽工艺研究

为获得制备银杏抗氧化肽的最佳工艺,采用2709碱性蛋白酶和胃蛋白酶分步水解银杏种仁蛋白,以总还原能力为指标,考察酶用量、酶解温度、pH值和酶解时间这4个因素对银杏种仁蛋白酶解效果的影响。通过响应面试验得出2709碱性蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为6976U/g、酶解温度为55℃、pH值为8.9、酶解时间为5h,此时银杏种仁蛋白酶解液的总还原能力(A700nm)为1.278;通过正交试验,得到胃蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为9000U/g、pH值为3.0、酶解温度为50℃、酶解时间为2h,此时银杏种仁蛋白酶解液的A700nm为1.636。     

Effect of ultrasonic pretreatment on the antioxidant properties of porcine liver protein hydrolysates

In this study, the effect of ultrasonic pretreatment on the antioxidant activity of porcine liver protein hydrolysates (PLPHs) was investigated. The results showed that the degree of hydrolysis (DH) and peptide contents of the PLPHs increased as the time of ultrasonication increased. The hydrolysate pretreated with ultrasonication for 60 s exhibited the highest DH and peptide contents. The hydrolysate pretreated with ultrasonication for 45 s exhibited the highest ferrous ion chelating ability and reducing power. The hydrolysate pretreated with ultrasonication for 30 s exhibited the highest 2,2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and the higher inhibitory activity in the linoleic acid autoxidation system. The molecular weight of peptides in the hydrolysates was less than 6.2 kDa. The results clearly demonstrated that ultrasonic pretreatment enhances the antioxidant activities of the PLPHs in a short period of time (15–30 s).     

超声预处理对玉米蛋白可酶解性的影响

旨在采用超声预处理改善玉米蛋白的酶解性,研究了超声频率模式(单频、双频、定频和扫频)及频率参数对玉米蛋白酶解水解度及溶解率的影响,采用高效尺寸排阻色谱法对酶解液的分子质量分布进行了表征。研究发现,(68±2)kHz/(28±2)kHz双频扫频为最佳超声频率模式,优化试验获得超声预处理的最佳工作参数为:超声温度30℃、料液比1:20(g/mL)、超声处理时间40 min、扫频周期500 ms、超声功率密度80 W/L、脉冲超声的工作时间10 s和间歇时间3 s。在最佳超声频率模式及工作参数预处理的条件下,水解度和蛋白溶解率分别为23.6%和75.2%,较对照组(未经超声处理)分别提高了39.4%和54.7%,且酶解液具有更窄的分子质量分布范围。这表明超声预处理能促进玉米蛋白向多肽转化,尤其有利于分子质量为200~1 000 u的玉米蛋白肽的形成。     

响应面优化鱿鱼须脱皮液胶原肽酶解工艺及抗氧化活性

目的：研究秘鲁鱿鱼须脱皮液胶原肽酶解工艺及抗氧化活性。方法：以水解度和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,利用单因素试验和响应面法对其酶解工艺进行优化,并采用2,2’-联氮-二（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt,ABTS）自由基与•OH清除率及亚铁还原能力评价其酶解产物抗氧化活性以及通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和凝胶排阻色谱分析其分子质量分布。结果：最适酶解工艺为酶解温度50 ℃、初始pH 7.4、底物蛋白质质量分数3.2%、酶解时间3.7 h、酶添加量3 000 U/g。在此条件下,水解度和酶解产物DPPH自由基清除率分别为（37.23±0.08）%和（43.61±0.09）%,对ABTS＋•和•OH清除率的IC50分别为0.37 mg/mL和0.41 mg/mL,且表现出较强的亚铁还原能力;SDS-PAGE显示最适酶解工艺下,蛋白质基本被水解为小分子多肽;凝胶排阻色谱分析可知,酶解产物分子质量在1～5 kD之间。结论：酶解产物具备较强的抗氧化活性,可作为抗氧化活性物质基料,充分开发利用。