抗变链球菌鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的制备及活性检测

以远缘链球菌(S.sorbrinus 6715血清型g)免疫产卵母鸡,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定鸡卵黄中免疫球蛋白(Immunoglobulin of Yolk,IgY)的活性,研究鸡免疫应答并制备出高免抗-S.sorbrinus IgY.结果显示以109 cfu/只剂量免疫的母鸡,第一次免疫后的第七天卵黄中出现特异性IgY,加强免设后抗体效价上升更快,经ELISA法检测,卵黄中的抗体效价到1384.而冷冻干燥后的IgY,其效价要超过12000.     

鸡卵黄免疫球蛋白的研究进展

人们早已认识到人和哺乳动物母体可将其抗体通过胎盘屏障传给胎儿,从而使子代获得对疾病一定程度的免疫力。尔后发现,母鸡也可将其产生的抗体通过产卵的方式垂直传给子代而储存于卵黄中,从而使子鸡获得一定的免疫力;而且,鸡卵黄中抗体的含量要比母鸡血清中的高。此后,对于鸡卵黄免疫球蛋白的研究不断得到发展。本文就国内外有关鸡卵黄免疫球蛋白的研究从下面几个方面作一综述。     

鸡卵黄免疫球蛋白作为食品添加剂和抗体食品的应用

鸡卵黄免疫球蛋白IgY(Egg Yolk Immunoglobulin)是一种与哺乳动物IgG结构类似,具有较强免疫特性的功能蛋白.口服IgY可使机体获得被动免疫,抑制有害细菌或病毒对人体的侵害,增强机体的免疫力,因此IgY可作为食品添加剂或直接以具有免疫特性的卵黄制成抗体食品,达到防治疾病,保护健康的目的.     

抗大肠杆菌O157:H7的卵黄特异性IgY的研究

以大肠杆菌O157:H7为抗原免疫产蛋母鸡,从鸡卵黄中提取免疫球蛋白,建立抗大肠杆菌O157:H7的特异性IgY的效价检测方法,并研究母鸡的免疫应答性,以及抗体的提取方法和体外抑菌效果.研究结果表明,初次免疫后第6d,在卵黄中可以检测到抗大肠杆菌O157:H7 IgY,效价为1:7200;经加强免疫后效价迅速上升,至第44d达到最高效价1:230400;免疫后360 d,效价仍维持在1:7200.用水稀释法、硫酸铵分级盐析和Sephadex G-25凝胶过滤以提取IgY,提纯后IgY的效价是之前的4倍.SDS-PAGE鉴定抗体的纯度,电泳图谱中出现抗体的轻链和重链两条带.体外抑菌实验表明,IgY能抑制大肠杆菌O157:H7的生长.     

抗痢疾志贺氏菌的特异性IgY的研究

以痢疾志贺氏菌为抗原免疫产蛋母鸡,从鸡卵黄中提取免疫球蛋白,建立抗痢疾志贺氏菌的特异性IgY的效价检测方法,并研究母鸡的免疫应答性以及抗体的提取方法和体外抑菌效果。研究结果表明:用108cfu/mL和109cfu/mL剂量的抗原分别免疫的鸡的卵黄中,于初次免疫后的第12天出现抗痢疾志贺氏菌IgY,两组效价均为1∶3600。经加强免疫后效价迅速上升,至第48天低剂量免疫组达到最高效价1∶28800;第60天高剂量免疫组达到最高效价1∶57600。低剂量免疫组的效价维持了210d,高剂量免疫组的效价在免疫后360d时仍维持在1∶7200水平。用水稀释法、硫酸铵溶液分级盐析、SephadexG-25凝胶过滤以提取IgY,提纯后IgY的效价翻倍。SDS-PAGE鉴定抗体的纯度,电泳图谱中出现抗体的轻链和重链两条带。体外抑菌实验表明,IgY能抑制痢疾志贺氏菌的生长。     

杭变链球菌鸡卵黄免疫球蛋白（lgY）的制备及活性检测

以远缘链球菌（S.sorbrinus 6715血清型g)免疫产卵母鸡，应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定鸡卵黄中免疫球蛋白（Immunoglobulin of Yolk,lgY)的活性，研究鸡免疫应答并制备出高免抗－S.sorbrinus lgY。结果显示出10^9cfu/只剂量免疫的母鸡，第一次免疫后的第七天卵黄中出现特异性lgY，加强免设后抗体效价上升更快，经ELISA法检测，卵黄中的抗体效价到1：384。而冷冻干燥后的lgY，其效价要超过1：2000。     

特异性抗肠出血性大肠杆菌O157:H7内毒素鸡卵黄抗体的制备

目的:比较研究LPS和O-SP的免疫原性,制备出特异性抗内毒素(LPS)鸡卵黄免疫球蛋白(eggyolkimmunoglobulin,IgY),用于对E.coliO157:H7的免疫预防及检测。方法:分别用灭活E.coliO157:H7菌体、不同浓度内毒素(LPS)及O-特异性多糖链(O-SP)与不完全弗氏佐剂充分乳化后作抗原免疫临产蛋母鸡,以水稀释法从卵黄中提取抗体,阴离子交换色谱法实现对抗体的纯化,间接ELISA及双向免疫扩散检测抗体产生效价与活性。结果与结论:所制内毒素(LPS)和O-SP均有较好的免疫原性,刺激鸡体后可产生高效价抗体,灭活菌体、600μg/mlLPS、1200μg/mlLPS、2000μg/mlLPS、O-SP抗体产生效价最高可分别达1:32000、1:28000、1:32000、1:12000、1:40000。结合离子交换色谱,用0.185mol/L的离子强度可实现一步洗脱纯化抗体,制备出高纯度、高活性、特异性强的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,为大肠杆菌O157:H7的感染防治提供了可靠的保证,在此实验基础之上可进一步探讨应用特异性IgY对大肠杆菌O157:H7的检测。     

鸡卵黄免疫球蛋白的糖基化及其构效关系研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白（egg yolk immunoglobulin,IgY）是鸡卵黄中的一种免疫球蛋白。由于其具有原料易得、制备简单、不与类风湿因子以及哺乳动物的补体发生交叉反应等优点,IgY是一种颇具潜力的抗生素替代品,但由于IgY性质不稳定,易受温度、pH值、酶的影响,从而限制了其实际应用。糖链在维持IgY理化性质、抗原特性等功能中扮演着重要角色。因此,对IgY进行糖基化修饰,从而改善其理化性质和抗原特性,不仅能使鸡蛋资源得到充分利用,也为开发蛋黄保健食品、添加剂以及相应的医药产品提供科学依据。本文归纳几种常见的IgY的糖基化方法,并论述IgY糖基化与其结构、理化性质之间的关系。     

鸡卵黄抗体(IgY)的制备工艺研究

对鸡卵黄抗体(简称IgY)的制备工艺进行研究。通过低温乙醇沉淀、DEAE葡萄糖凝胶A-50离子交换层析、Tris-HCl缓冲液洗脱及Sephadex G200凝胶过滤等逐步纯化免疫球蛋白。研究卵黄稀释倍数、pH值、乙醇添加量以及盐浓度对纯化效果的影响。分离纯化后所得的提取物经检测IgY纯度可达98%。用大肠杆菌(E.coli)对其活性进行测定,效果良好,此方法能很好保持免疫球蛋白的活性。     

单增李斯特菌(Listeria monocytogens)鸡卵黄抗体的制备及其抑菌活性研究

以单增李斯特菌为抗原免疫产蛋母鸡,比较了不同方法对于鸡卵黄中单增李斯特菌抗体(IgY)的分离效果,研究确定了所得IgY的主要理化性质及其对于单增李斯特菌的体外抑菌效果。研究结果表明,采用硫酸铵盐析法可以取得较好的提取纯化效果,提取液中的单增李斯特菌抗体效价可以达到1∶10 000以上,且蛋白组分较为单一。IgY具有较好的理化稳定性,pH3～9范围内均可保持70%以上的免疫活性,经60℃、4 h处理后仍保持约67%的免疫活性。体外抑菌实验显示,液态培养8 h、固态培养24 h后,该抗体能够对于单增李斯特菌的生长产生显著的抑制率效应;这表明其有望作为新型天然抗菌剂用于生物体及动物性食品中单增李斯特菌的预防和控制。     

免疫蛋黄抗体的研究进展

用特殊抗原免疫母鸡,并从免疫蛋中获取特异性抗体(IgY)已受到人们的关注。文章重点介绍了免疫蛋抗体IgY的理化性质和制备方法,并结合食源性疾病诊断与治疗以及我国食品工业发展的趋势,对IgY的应用前景进行了论述。     

水稀释法分离鸡卵黄免疫球蛋白的研究

本研究详细探讨了水稀释法分离鸡卵黄免疫球蛋白（Immunoglobulin of Yolk:IgY）的主要工艺条件，当蛋黄液的稀释倍数为6、pH5.2时，IgY的提取率和纯度分别是6.73mg IgY/ml蛋黄、14.66%。比较了水稀释法和聚乙二醇法分离IgY的效果。结果表明，水稀释法更适合于大规模分离食品级IgY。     

冰乙醇分级离心法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

采用冰乙醇分级离心法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (Immunoglobulin of egg yolk,IgY).通过低温乙醇沉淀、DEAE 葡萄糖凝胶 A-50 离子交换层析、Tris-HCl 缓冲液洗脱及 Sephadex G200 凝胶过滤等逐步纯化免疫球蛋白.研究卵黄稀释倍数、pH 值、乙醇添加量以及盐浓度对纯化效果的影响.分离纯化后所得的提取物经检测 IgY 纯度可达98%,且很好地保持了免疫球蛋白的活性.     

鸡蛋抗体的研究进展及其抗SARS病毒的可行性分析

鸡蛋抗体，即鸡卵黄中的免疫球蛋白，简称IgY。由于其具有不与人类补体结合，不与蛋白A结合以及不与类风湿因子结合等的免疫学特性，目前已被运用于疾病诊断检测和防治中。因此，利用IgY研制“非典”病毒特异性抗体，以用于预防“非典”病毒引起的呼吸道感染和治疗肺部感染及清除肠道中的病毒、防止排泄物引起的二次感染的设想有可能实现。本文就对鸡蛋抗体的研究进展及其抗SARS病毒的可行性作一分析、综述。     

盐析法提取卵黄免疫球蛋白的研究

为了确定盐析法提取特异性卵黄免疫球蛋白的最佳盐浓度，采用SDS—PAGE鉴定IgY的纯度，用RID测定IgY含量，间接ELISA法检测特异性卵黄抗体的活性。结果表明：用饱和度50％的硫酸铵盐析一次，再用140g／L的硫酸钠溶液盐析，可以获得469，6的回收率和77％的纯度。盐析液经超滤膜包超滤后制得的冷冻干燥制品，保持了完整的抗体结构和良好的抗体活性。这一结果为IgY的进一步分离纯化奠定了基础。     

禽蛋黄免疫球蛋白促进人体健康作用的研究进展

卵黄免疫球蛋白(yolk immunoglobulin,IgY)作为禽蛋中重要的免疫活性成分,具有稳定性好、安全性高、廉价、易获得、免疫活性强、不会引发耐药性等优点,在科学研究和生产应用中表现出极强的竞争力.本文综述了IgY作为良好的抗生素替代物在病毒、细菌性疾病防治中的显著优势.另外,IgY通过特异性作用于关键限速酶...     

卯黄抗体冻干粉除菌技术的研究

卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk,IgY)是禽类经过特定抗原刺激产生的特异性免疫球蛋白,在生产过程中不能采用高温灭菌.为获得优质的IgY,利用微生物技术分析IgY冻干粉中的微生物,反复冻融和抗菌肽处理,ELISA技术测定IgY效价,抑菌圈法、试管二倍稀释法和琼脂平板计数法测定抗菌肽对IgY冻干粉残...     

不同鸡蛋中鸡卵黄免疫球蛋白的比较

采用PEG分步沉淀法分别从京红一号鸡蛋、市售鸡蛋、土鸡蛋中制备鸡卵黄免疫球蛋白(IgY).通过SDS-PAGE分析提取物,发现存在2条主要的蛋白带:分别为66.4kDa和29.0kDa,与文献报道的IgY重链(～ 60kDa)和轻链(～ 30kDa)的分子量相符.     

酪蛋白和乳球蛋白的抗体及酶标物制备研究

选用牛乳中的β-酪蛋白(β-CN)和β-乳球蛋白(β-Lg)为抗原对鸡体免疫,从鸡卵黄中用水稀释法及亲和色谱(HiTrapTM IgY Purification HP)纯化特异性鸡卵黄抗体(IgY)。PAGE电泳分析IgY纯度高达90%,ELISA效价为1:4096。用过碘酸钠氧化法进行抗原的过氧化物酶(HRP)标记,HRP与β-CN和β-Lg的分子个数比分别为1:1和1.5:1的标记效果最好,β-CN-HRP和β-Lg-HRP的效价高达1:640,其ELISA工作浓度分别为1:80和1:40。特异性IgY和酶标抗原为特异检测牛乳蛋白的酶联免疫吸附(ELISA)分析提供必要条件。     

低温乙醇除脂法纯化鸡卵黄中免疫球蛋白

采用低温乙醇除脂法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (immunoglobulinyolk,IgY)。通过低温乙醇沉淀、透析和葡聚糖凝胶等不同方法逐步纯化免疫球蛋白。研究了卵黄稀释倍数、乙醇浓度、NaCl浓度以及离心转速对纯化效果的影响。分离纯化后所得的冷冻干燥制品 ,经SDS PAGE和抑菌试验检测可知 :可溶性蛋白质得率为每毫升蛋黄 1 2 6mg ,可溶性蛋白质含量占总蛋白质量的 97% ,且保持了免疫球蛋白的活性