骨素及骨素酶解液中蛋白质及肽的电泳分离

为了分离纯化骨素及其酶解产物中的蛋白质及肽,并比较骨素蛋白与骨蛋白和肌肉蛋白的差异,本文以骨蛋白和肌肉蛋白为参照,采用十二烷基磺酸钠凝胶电泳法(SDS-PAGE)对骨素蛋白及其酶解产物中的肽进行分离。利用不同浓度的分离胶(5%、7.5%、10%、15%)对骨素蛋白、骨蛋白和肌肉蛋白样品进行分离,结果发现,各种浓度的分离胶均可以分离骨蛋白和肌肉蛋白,但是不能分离骨素蛋白。对骨素蛋白酶解液采用N-三(羟甲基)甲基甘氨酸凝胶电泳法分离,能有效分离骨素酶解液中的肽。对SDS-PAGE电泳分离时骨蛋白的迁移比和分离胶的相关性分析发现,骨蛋白的迁移比与分离胶浓度间呈指数相关,且具有极显著的相关性(R2≥0.996,p0.01)。利用该相关性并结合蛋白质的分子量与迁移比的相关性方程,可以通过蛋白质的分子量选择合理的分离胶浓度,或者通过迁移比预测蛋白质的分子量。     

乳清蛋白肽对去卵巢大鼠骨生物力学的影响

目的:利用6月龄SD去卵巢大鼠研究乳清蛋白肽(Whey protein peptide,WPP)对骨密度和骨强度的影响。方法:将40只患有骨质疏松症的SD大鼠,随机分为去卵巢对照组OVX-C和WPP低、中、高剂量组(WPP-L、WPP-M、WPP-H,分别为1%、5%、10%)各10只。10周后处死,取大鼠双侧股骨测干重、长度、骨密度和骨强度等指标。结果:低、中、高剂量乳清蛋白肽干预组大鼠体重较对照极显著增高;高剂量组大鼠股骨骨密度及矿物质含量较对照显著增加;乳清蛋白肽干预组大鼠股骨干重、长度大于对照组,但差异不显著;乳清蛋白肽干预组大鼠股骨结构力学指标和材料力学指标较对照组显著增加。结论:用乳清蛋白肽长期喂养大鼠,能明显增加其骨密度、骨矿物质含量和骨骼的承载能力,提高骨骼抵抗骨折的能力。     

磷酸化南极磷虾肽调控Wnt/β-连接蛋白通路改善大鼠骨质疏松症

目的:研究磷酸化南极磷虾肽(PP-AK P)对双侧去卵巢骨质疏松症模型大鼠的改善作用及其机制。方法:采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松症大鼠模型,将SD大鼠随机分为5组:假手术组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、阳性对照组【阿伦磷酸钠1 mg/(kg·d)】和磷酸化南极磷虾肽低、高剂量组【400,800 mg/(kg·d)】,灌胃12周后,分别检测血清骨代谢相关指标、骨密度及骨组织形态学;测定Wnt/β-连接蛋白信号通路关键基因m RNA和蛋白的表达。结果:磷酸化南极磷虾肽能显著下调去卵巢骨质疏松症大鼠血清中骨源性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OCN)和骨形态发生蛋白(BMP-2)的分泌(P0.01),降低血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和I型胶原羧基端交联肽(CTX-I)水平(P0.01),降低去卵巢大鼠骨代谢的高转换率;显著提高模型大鼠股骨骨密度(P0.01),并能显著增加骨小梁厚度和面积,降低骨小梁间距,改善骨组织微观结构;q RT-PCR检测结果表明,磷酸化南极磷虾肽能显著降低LRP-5b、β-连接蛋白、RUNX2、OSX m RNA的表达水平;免疫印迹检测结果表明,磷酸化南极磷虾肽能显著降低LRP-5b、β-连接蛋白总蛋白、β-连接蛋白核蛋白及RUNX2蛋白的表达。结论:南极磷虾肽能显著改善双侧去卵巢大鼠骨质疏松症,其作用机制与下调Wnt/β-连接蛋白通路,降低骨质疏松症大鼠高骨转换速率有关。     

鳕鱼骨胶原肽的制备及其对成骨样MG-63细胞作用机制的研究

以水产加工下脚料鳕鱼骨为原料,对其进行基本组成分析与组织结构观察。从鳕鱼骨中提取胶原蛋白并酶解制得不同分子量段的胶原肽。探讨不同分子量胶原肽组分对MG-63细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及相关因子骨形态发生蛋白(BMP-2)、骨保护素(OPG)与核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)m RNA表达水平的影响。结果表明:鳕鱼骨中蛋白质含量较高(14.5%),Van Gieson染色发现鳕鱼骨中含有大量的胶原蛋白纤维。鳕鱼骨胶原肽能够提高细胞ALP活性,同时显著上调细胞BMP-2 m RNA的表达水平;鳕鱼骨胶原肽可有效提高细胞OPG/RANKL m RNA的相对表达量,以间接对破骨细胞的成熟及活化进行调控。鳕鱼骨可作为一种优良的天然蛋白源,鳕鱼骨胶原肽能够作为一种有效的抗骨质疏松营养强化剂加以开发。     

自组装双亲短肽氨基酸组成及连接肽对其融合酶表达量的影响

自组装双亲短肽(self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布,具有自聚合效应的氨基酸短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。以自组装双亲短肽S1(AEAEAKAKAEAEAKAK)为出发序列,与来源于Bacillus sp.WSHB04-02的碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)组成的融合酶为模式蛋白,考察SAPs的氨基酸组成及SAPs融合蛋白内部连接肽(linker peptide)对PGL-SAP融合酶的表达量的影响。结果显示,含有较弱疏水性的甘氨酸和丙氨酸残基的PGL-S1突变体可使融合酶正常表达,其中,含有组氨酸的PGL-S1v1具有相对最高的胞外酶活,较野生型提高了9倍,较PGL-S1提高了1.5倍。连接肽方面,与刚性连接肽相比,含有柔性连接肽的融合酶具有更高的胞外酶活,含有(GGGGS)3的PGL-F-S1融合酶胞外酶活是野生型的14倍。上述结果表明,SAPs的氨基酸组成及融合蛋白之间的连接肽对PGL融合酶的表达具有重要影响。     

骨蛋白水解的研究现状与发展前景

我国畜禽骨骼资源丰富,其营养物质含量丰富,尤其是蛋白和钙含量较高,但我国对畜禽骨的深加工利用率不足1%。针对国内外的骨骼开发利用状况进行阐述,对几种主要骨制品(骨蛋白和骨多肽)的特点,用途,加工工艺及研究现状做了较详尽的阐述。并预测了我国骨食品的开发前景。     

畜禽类骨胶原蛋白及其肽的研究进展

胶原蛋白与氨基酸和蛋白质相比,胶原蛋白及其肽具有独特的优越性。当今畜禽类产品特别是肉制品的需求巨大,副产物骨头的产量亦随之大量增加。畜禽类骨头中提取的胶原蛋白及其肽作为许多食品中营养成分和功能物质,有着极高的利用价值。对畜禽类骨胶原蛋白及其肽的提取工艺、功能性、结构和应用等方面的研究进展进行综述,为畜禽类骨胶原蛋白及其肽的进一步开发和应用提供参考。     

虾肽对MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的:从红虾副产物中提取虾肽,研究其促MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化及矿化的活性。方法:用MTT法检测不同浓度虾肽对MC3T3-E1成骨细胞存活率的影响;诱导成骨细胞分化,在3 d和7 d时,测定其碱性磷酸酶(ALP)活性,在7 d和14 d时,测定其细胞骨钙素(OCN)及I型胶原蛋白(COL-I)含量,21 d时茜素红染色测定细胞诱导培养矿化程度;采用qPCR和Western blot方法检测虾肽对OPG/RANKL/RANK信号通路中骨形成关键基因和蛋白OPG、RANKL以及RUNX2表达的影响。结果:虾肽质量浓度为0.02,0.05,0.1 mg/mL时,显著促进MC3T3-E1细胞的增殖;ALP、OCN及COL-I的含量相较于对照组均增加,矿化结节面积显著增大(P < 0.05);此外,虾肽上调了ALP、OCN、COL-I基因的表达,促进OPG和RUNX2基因及蛋白表达的水平,抑制RANKL基因及蛋白表达的水平。结论:虾肽能促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化与矿化,激活OPG/RANKL/RANK信号通路,从而促进成骨细胞的分化及骨形成。     

畜禽骨骼开发利用的研究进展

我国畜禽骨骼资源丰富,其营养物质含量丰富,尤其是蛋白和钙含量较高,但目前对于畜禽骨的开发利用局限性较大.针对国内外的骨骼开发利用状况进行阐述,重点对全骨产品和骨提取物产品进行了简介,全骨产品主要包括:骨泥和骨粉产品;而骨提取物包括畜禽骨蛋白质的开发、骨脂肪的提取,对骨钙的利用,以及对骨中其他成分的利用.     

牛骨源胶原蛋白肽的制备及其生理活性研究进展

牛骨是肉牛产业中的主要副产物。胶原蛋白是牛骨中的主要蛋白,经过酶解、分离纯化等手段可制备具有生理活性的胶原蛋白肽,从而提高牛骨的利用价值。本文围绕牛骨源胶原蛋白酸碱法、酶法、水热抽提和热压浸提的提取工艺,牛骨胶原蛋白肽的酶解、分离纯化制备工艺及其抗高血压、保护骨健康、抗菌、抗氧化和免疫调节等主要生理活性展开综述,为高效利用畜禽骨中的胶原蛋白为原料生产活性多肽提供研究思路。     

Discrimination of edible fungi varieties and evaluation of their umami intensities by using an electronic tongue method

The flavour and taste of edible fungi are highly associated with the presence of several umami substances. In this study, the different edible fungi are discriminated by an electronic tongue method. The response data are analysed by the PCA (principal component analysis), DFA (discriminant factor analysis) and PLS (partial least square) method. The results show that the two data analysis methods (PCA and DFA) could successfully distinguish the variety of edible fungi. Moreover, the umami intensities of the edible fungi solutions are evaluated and compared by an electronic tongue analysis with calibration by the responses of different monosodium glutamate (MSG) concentrations. The signals are also used to build up PLS models to estimate and predict the umami intensities of the edible fungi. The results of this study indicate that the electronic tongue has a great potential in qualitative and quantitative analysis of the sensory quality of edible fungi.     

基于电子舌的鸡肉香精风味改进研究

研究使用食品原料在达到相同风味效果的情况下取代化学的香味物质,运用电子舌采集鸡汤与添加不同物质的鸡肉香精的口感轮廓,得到传感器的响应值,并通过主成分分析(PCA)、统计质量控制分析(SQC)和判别因子分析(DFA)等多元统计方法进行数据分析,建议采用基本配方+小麦蛋白+大蒜粉的配方,建议不添加硫胺素.研究表明电子舌技术可以较好的应用于香精的风味改进.     

基于电子舌技术的卷烟主流烟气味觉识别

为考察电子舌对不同卷烟烟气味觉的识别效果,利用电子舌系统检测了6个烤烟型和3个混合型卷烟样品主流烟气水处理液的味觉特征,并对其传感器响应信号进行了主成分分析( PCA)和判别因子分析( DFA).结果表明:①前2维主成分对卷烟品种的味觉识别贡献率达84.82％;②前2维DFA对卷烟品种的味觉识别贡献率达95.42％.结...     

基于电子鼻和电子舌技术对不同金银花酒的鉴别分析

为鉴别不同生产类型的金银花酒,该研究利用电子鼻和电子舌技术及二者拟合技术结合人工感官评价对金银花酒样品进行检测,对所测数据进行主成分分析（PCA）、判别因子分析（DFA）,分别从气味和滋味两方面进行评价鉴别。不同生产类型金银花酒样品在电子鼻、电子舌和二者拟合结果的主成分分析中第一主成分（PC1）与第二主成分（PC2）的贡献率之和分别达到了90.97%、90.91%、95.00%;电子鼻判别因子分析总贡献率为89.72%,佐证了主成分分析结果;滋味雷达图显示小曲酿造金银花酒在鲜味上的响应度明显高于大曲酿造和大曲配制的金银花酒,这与人工感官评价相一致;以上表明电子鼻、电子舌技术能够准确的鉴别不同生产类型的金银花酒样品,可用于今后对不同金银花酒的比较分析中。     

电子鼻和电子舌在果酒风味分析中的应用

采用电子鼻嗅觉指纹分析系统、电子舌味觉指纹分析系统及人工感官评价对不同品种樱桃酒(中樱狄墨尔干红和干白)和不同品种葡萄酒(张裕干白和长城干红)的香气和口感进行了检测,并采用主成分分析(PCA)和判别因子分析法(DFA)对传感器响应信号进行了分析。经模式识别分析得到:在香气上,樱桃干白与葡萄干白的差异最小,其次是樱桃干红和葡萄干红,干白和干红之间的差异最大;在口感上,樱桃酒(干红和干白)与葡萄酒(干红和干白)的差异较大。电子鼻和电子舌分析结果与人工感官评价结果一致。研究表明,电子鼻和电子舌结合模式识别方法可用于果酒的风味评价。     

电子舌对啤酒的区分识别研究

采用电子舌对不同品牌的啤酒及其混合样品进行识别,对所获得的数据进行主成分分析、判别因子分析和偏最小二乘回归分析。结果表明：电子舌能够有效识别不同品牌的啤酒及不同品牌啤酒的混合样品;对不同品牌啤酒的混合样品建立了偏最小二乘回归分析预测模型,电子舌响应信号和啤酒混合比例之间有很好的相关性(相关系数为0.9436),偏最小二乘回归分析模型预测误差在1.43%～3.00%之间。证明电子舌可用于啤酒的识别。     

电子鼻和电子舌技术在五倍子蜂蜜风味识别中的应用

为实现不同产地五倍子蜂蜜的快速识别,采用德国AIRSENSE公司的PEN3型电子鼻系统和日本INSENT公司的味觉分析系统对贵州12个不同地区五倍子蜂蜜进行检测,通过主成分分析（Principal Component Analysis,PCA）、线性判别分析（Linear Discriminant Analysis,LDA）、传感器区分贡献率（Loadings）分析等,从气味和滋味方面对不同产地五倍子蜂蜜进行识别。不同产地的五倍子蜂蜜在电子鼻PCA分析、LDA分析中第一和第二主成分贡献率之和分别为99.90%、87.05%,Loadings分析发现气味差异主要来自于无机硫化物类、氮氧化物类、有机硫化物类、醇醚醛酮类等;在电子舌PCA分析中第一和第二主成分贡献率之和为99.35%,通过雷达图离散程度可知,不同地区五倍子蜂蜜在酸味、甜味、苦味上的差异较大。电子鼻和电子舌技术均能区分不同产地的五倍子蜂蜜,可用于今后蜂蜜的鉴别分析中。     

电子舌在工夫红茶甜纯滋味特征评价中的应用

为了更客观、快速、准确地评价工夫红茶的甜纯滋味特征,首先以专家人工感官审评为依据,根据茶汤滋味特点将工夫红茶分为甜纯、纯正、欠纯3?组。然后采用电子舌分析并结合多元统计分析手段综合评价茶汤滋味,并建立甜纯滋味判别方程。最后,对验证集中的工夫红茶开展电子舌分析进行验证。结果表明：基于电子舌响应的主成分分析、偏最小二乘判别分析揭示电子舌可有效区分滋味甜纯或非甜（纯正、欠纯）工夫红茶,且影响甜纯滋味识别的关键电子舌传感器为SWS甜味传感器（P＜0.001,单因素方差分析）。基于二元逻辑回归构建甜纯滋味判别预测方程,且整体预测准确率达93.8%。此外,验证集茶样的电子舌分析结果进一步证实电子舌用于评判工夫红茶甜纯滋味的有效性。综上,本研究采用电子舌技术实现了对工夫红茶甜纯滋味特征的快速、准确判别评价,为后续茶叶滋味特征成分的研究提供理论依据,亦可为茶汤滋味的客观、智能评价提供依据。     

电子感官在玉兰花茶品质分析中的应用

通过电子鼻和电子舌检测了玉兰花茶及原料绿茶、白兰花酊剂调配玉兰花茶的品质,并采用主成分分析(PCA)、判别因子分析(DFA)和统计质量控制分析法(SQC)进行了数据分析。结果显示,不同茶水比冲泡出来的玉兰花茶和绿茶风味变化较大且差异明显,采用白兰花酊剂开发玉兰花茶与传统工艺加工的玉兰花茶在电子感官数据上差异较大。将电子鼻和电子舌分析结合能够有效进行玉兰花茶品质分析,利用该技术可以改进玉兰花茶加工工艺。     

基于电子舌技术的浓香型白酒基酒年份分类方法

为实现不同年份的浓香型白酒基酒的快速区分和识别,该研究以5个不同年份浓香型白酒基酒为研究对象,利用电子舌对样品进行判别分析,并采用主成分分析（PCA）、线性判别分析（LDA）对白酒的年份进行分类,将得到的模型分别通过簇状独立软模式法（SMICA）、判别因子分析（DFA）对白酒的年份进行识别和验证。研究表明,SMICA分析的结果能够准确的识别导入的样品数据是否是模型以内和模型之外的年份基酒,而DFA分析可以准确的对导入的白酒样品的年份进行识别,确定其白酒样品的年份。综上所述,利用电子舌结合化学计量学,可以快速、准确、稳定的对白酒基酒年份进行分类和识别,可为白酒掺假问题提供理论支撑,并促进白酒产业和白酒分析技术的快速发展。