脱脂油菜饼中蛋白质的分步酶水解研究注—（Ⅱ）蛋白酶的筛选

本文对不同蛋白酶对脱脂油菜饼粕中蛋白质的水解作用及水解产物的风味作了初步研究。结果表明：在6种蛋白酶中,Alcalase的氮收率最高,其次是HAP碱性蛋白酶,1398中性蛋白酶,Flavourzyme,537酸性蛋白酶和木瓜白酶的较低;Flavourzyme的水解产物的水解度最高,而HAP碱性蛋白酶和1398中性蛋白酶水解产物的水解度较低。HAP碱性蛋白酶,Alcalase,1398中性蛋白酶的水解产物有较强的苦味,木瓜蛋白酶和537酸性蛋白酶水解产物口感平淡,Flavourzyme水解产物无苦味。     

制备抗氧化棉籽肽用蛋白酶的筛选

本实验研究了由Alcalase碱性蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、无锡2709碱性蛋白酶、无锡精制中性蛋白酶等蛋白酶水解棉籽蛋白的水解度及水解液抗氧化活性的大小。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解能力最大,水解液清除自由基的能力也最大,实际生产中为了去除多肽的苦味物质,应先用Alcalase碱性蛋白酶水解,再用Flavourzyme风味酶作用。     

苦荞麦蛋白质的酶法水解研究

以苦荞麦蛋白质作为底物,采用碱性蛋白酶(固体)、胰蛋白酶、碱性蛋白酶Alcalase 2.4L、高效水解蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对其进行酶法水解,并对酶解产物的氨基酸组成和相对分子质量进行研究.结果表明,碱性蛋白酶(固体)的酶解程度最高,在酶解2h时DH(水解度)接近20%,其酶解产物的疏水性氨基酸含量较高,大部分肽链的相对分子质量都低于1000Da.     

罗非鱼副产物蛋白水解肽的呈味分析

为了探究罗非鱼副产物蛋白水解物中滋味活性物质的来源,该研究以罗非鱼的鱼皮、鱼头和鱼骨为原料,采用中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分别对三种副产物进行酶解,分析比较水解度、分子量、前体蛋白与滋味活性物质的关系。结果表明：三种罗非鱼副产物经过风味蛋白酶水解酶水解8 h后获得最高水解度,分别为14.29%、23.7%和31.86%。经过木瓜蛋白酶水解的副产物酶解液均呈现出显著苦味或酸味,而鱼头经过碱性蛋白酶酶解得到的水解产物具有鲜味,鱼骨则经过菠萝蛋白酶水解得到鲜味,鱼皮经过中性蛋白酶水解表现出鲜味和酸味,但鱼头却呈现出苦味。通过LC-MS/MS鉴定,胶原蛋白、肌原纤维蛋白以及肌浆蛋白是罗非鱼副产物酶解液滋味活性肽的重要味觉活性前体,这些滋味肽的分子量大部分小于1500 u,肽段中疏水性氨基酸残基对罗非鱼副产物滋味的形成具有重要作用,其中蛋氨酸在酶解液的鲜味的形成中起重要贡献。     

酶法制取罗非鱼动物蛋白水解液的研究

利用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶对罗非鱼肉进行水解制备水解动物 蛋白,以水解度(DH)为指标对水解过程进行分析,选取中性蛋白酶作为适宜的单酶并研究其酶法水解最适宜的工 艺条件。为进一步提高水解度,进行了中性蛋白酶与酸性蛋白酶复合酶解的研究。     

酶解高水解度大豆蛋白肽的研究

通过对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3种酶对大豆分离蛋白水解程度的研究,优化试验方案,探索制备高水解度大豆蛋白水解液的条件组合,并对3种酶进行了比较,以找出适合于大豆蛋白水解的蛋白酶。     

不同蛋白酶对燕麦蛋白水解物乳化性和抗氧化性的影响

研究了碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对燕麦蛋白水解物乳化性质和抗氧化性能的影响.测定了水解物的粒径、电势、表面疏水性、DPPH自由基清除能力以及金属离子螯合能力.结果表明:与中性蛋白酶和风味蛋白酶相比,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解获得的水解产物的粒径和表面疏水性显著降低、电势值(负电荷)显著增多,并且自由基清除能力和金属离子螯合能力显著增加.4种蛋白酶中,碱性蛋白酶对蛋白质具有最强的剪切能力,使碱性蛋白酶水解产物有最高的自由基清除能力和金属离子螯合活性,但表面疏水性有所降低.     

酶解高水解度大豆蛋白肽的研究

通过对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3种酶对大豆分离蛋白水解程度的研究，优化试验方案，探索制备高水解度大豆蛋白水解液的条件组合，并对3种酶进行了比较，以找出适合于大豆蛋白水解的蛋白酶。     

菜籽蛋白酶解预处理条件研究

以脱脂菜籽粕制备的菜籽蛋白为主要原料,水解度为考察指标,探讨了蛋白酶的选择及湿热处理条件对蛋白质水解的影响。结果表明,碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶4种酶在其最适条件下水解菜籽蛋白能力顺序为碱性蛋白酶中性蛋白酶酸性蛋白酶木瓜蛋白酶。选择碱性蛋白酶进行菜籽蛋白水解,通过完全试验得出菜籽蛋白的湿热处理最佳工艺条件为:温度100℃,时间30min,此条件下,水解度可达到18.51%。     

花生蛋白水解产物ACE抑制活性的研究

采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶水解花生蛋白,研究了水解过程中水解度的变化,并对水解产物的ACE抑制活性进行了探讨。得出三种酶对花生蛋白的水解作用:碱性蛋白酶>胰蛋白酶>中性蛋白酶。碱性蛋白酶水解产物ACE抑制活性明显高于胰蛋白酶和中性蛋白酶,水解产物的ACE抑制活性高达89.73%,中性蛋白酶水解产物ACE抑制率仅为27.24%。     

5种蛋白酶对猪皮胶原蛋白水解效果的比较研究

以新鲜猪皮为原料,分别采用中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶5种不同蛋白酶水解胶原蛋白,以水解度(DH)和超氧阴离子自由基(O2-·)清除率为指标,根据单因素和正交试验优化5种蛋白酶水解猪皮胶原蛋白的最适条件;比较分析5种蛋白酶对猪皮胶原蛋白的水解效果。结果表明:5种蛋白酶对猪皮胶原蛋白的水解产物均具有抗氧化性,其水解产物对O2-·清除率依次为:胰蛋白酶水解产物中性蛋白酶水解产物胃蛋白酶水解产物菠萝蛋白酶水解产物木瓜蛋白酶水解产物。     

内切酶与端肽酶协同水解大豆蛋白的研究

大豆蛋白酶解常常会产生苦味,端肽酶可有效水解苦味肽,但它们对于完整的蛋白大分子几乎没有作用,因此必须与内切酶联合使用或在其后使用。研究了内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)与端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)协同水解大豆蛋白制备寡肽的可行性,结果表明:采用端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶与内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶协同作用水解大豆蛋白,不但水解液的苦味值显著下降,而且大豆蛋白降解率和水解液水解度显著提高。     

不同苦荞蛋白酶解产物抗氧化活性研究

以苦荞蛋白作为底物,采用碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃蛋白酶加胰蛋白酶模拟体内蛋白消化,制备苦荞麦蛋白水解物。采用DPPH及ABTS~+·法比较不同的蛋白水解物与水解前苦荞蛋白的体外抗氧化活性。结果表明:不同蛋白酶水解产物水解度由高到低的顺序为:碱性蛋白酶胃蛋白酶~胰蛋白酶胃蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶,其中碱性蛋白酶水解苦荞蛋白水解度达29.95%。苦荞蛋白本身具有一定的抗氧化能力,其中DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别达71.91%及11.25%,但均显著低于阳性对照Vc。随着水解程度的增加,苦荞蛋白水解产物抗氧化能力逐渐增强。其中,以碱性蛋白酶酶解产物抗氧化活性最高,其DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别为91.65%(0.5 mg/mL)及16.67%(1 mg/mL),均显著高于原苦荞蛋白。其中,碱性蛋白酶水解产物的DPPH自由基清除率在高浓度(0.5mg/mL)条件下,与阳性对照Vc持平。同时碱性蛋白酶酶解产物抗氧化性(DPPH清除率及ABTS~+·清除率)显著优于其他蛋白酶解产物。因此,苦荞麦蛋白采用碱性蛋白酶解制备苦荞水解产物可作为天然的抗氧化剂。     

复合酶法水解鱿鱼蛋白及水解产物的研究

采用复合酶(Alcalase碱性内切蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶)水解鱿鱼蛋白,并对水解产物进行了研究.利用正交试验设计,对Alcalase的水解条件进行了优化;考察了防腐剂、Flavourzyme对水解度的影响;利用Sephadex G-75凝胶过滤层析,测定了水解产物的相对分子质量,并分析了氨基酸组成.结果表明,Nisin对水解度没有不利影响,Flavourzyme能有效提高鱿鱼蛋白的水解度,在优化的水解条件下,鱿鱼蛋白水解度达20.11%,水解产物的平均分子量为1180 u,约由9.2个氨基酸残基组成.水解产物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的38.4%,天冬氨酸和谷氨酸等鲜味氨基酸占氨基酸总量的26.3%.     

微波酸处理对骨胶原蛋白酶解效果的影响研究

以骨胶原蛋白为原料,采用微波酸处理辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度及抗氧化能力为指标确定最佳水解条件。通过比较实验确定最佳微波酸处理条件为:微波功率510W作用270s;通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶水解结果比较,确定中性蛋白酶水解产物的水解度及ABTS、DPPH自由基清除率最高;通过单因素实验及正交实验优化中性酶最佳酶解条件为:酶与底物比10%,底物浓度4%,反应温度55℃,pH7.0。结果表明,与单独酶解相比,微波酸处理能够使骨胶原蛋白酶解时间缩短1/2,水解度上升3.2%,产物的ABTS、DPPH自由基清除率分别提高8.7%和3.1%。     

制备芝麻抗氧化肽的蛋白酶筛选

研究了菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶2709和Alcalase蛋白酶分别酶解芝麻蛋白制备芝麻抗氧化肽,测定多肽产率、水解度并评价抗氧化活性,以多肽产率和抗氧化活性为参数采用逼近理想解排序法对酶解物进行排序,确定适宜制备芝麻抗氧化肽的蛋白酶。结果表明:蛋白酶品种差异会显著影响芝麻抗氧化肽的制备效果;在加酶量相同时,碱性蛋白酶2709、Alcalase蛋白酶、胰蛋白酶酶解芝麻蛋白能力强,多肽产率高,且抗氧化活性强;根据与最优向量距离总和,用于制备芝麻抗氧化肽蛋白酶的适宜性由高到低依次为碱性蛋白酶2709、Alcalase蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶。     

多酶协同水解核桃蛋白的研究

以核桃蛋白为原料,采用酶法制备核桃多肽,对单一酶解、多酶酶解、加酶顺序进行了研究。试验结果表明:蛋白酶种类对核桃蛋白水解作用影响较大,单酶水解度大小依次为碱性蛋白酶中性蛋白酶酸性蛋白酶菠萝蛋白酶木瓜蛋白酶;分步依次加酶方式优于同时加酶方式;选择碱性、中性、酸性3种蛋白酶对核桃蛋白进行分步依次加酶水解,水解度达到45.58%。     

酶法制取鲮鱼皮胶原蛋白寡肽工艺的研究

本文以水解度为指标,在2709碱性蛋白酶、537酸性蛋白酶、A.S.1.398中性蛋白酶三种蛋白酶中确定2709碱性蛋白酶为最佳水解用酶.在单因素试验的基础上利用通过响应面法优化2709碱性蛋白酶水解鲮鱼皮制取胶原蛋白寡肽的最佳工艺条件为:底物浓度120g/L,pH值10.0,酶与底物比2200U/g,温度50℃,水解时间2h,最大水解度为28.23%.     

油菜蜂花粉蛋白酶解条件的研究

通过单因素试验,以水解度为标准对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的最佳反应条件和对花粉蛋白的酶解能力进行了研究.碱性蛋白酶对于油菜蜂花粉的水解作用最强,依次减弱为中性蛋白酶和木瓜蛋白酶.碱性蛋白酶的最适条件为pH9、50℃下加入3000U/g的酶量水解3h.     

大豆蛋白酶解肽的分子量分布及抑制ACE活性关系研究

研究不同蛋白酶作用的酶解肽表现在血管紧张素转化酶(ACE)活性抑制差异,酶解产物的水解度、分子量分布与ACE抑制率的相互关系。用胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶等五种蛋白酶对大豆分离蛋白酶解,进行了多肽增量、水解度、超滤膜分离及其ACE抑制率对比等实验。结果表明,碱性蛋白酶的多肽增量最大,胃蛋白酶次之,依次为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,胰蛋白酶则出现反常;水解度随着酶解的时间而增加,碱性蛋白酶的最大水解度可达到21%,依次为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,最低为胰蛋白酶仅为9%左右;与此对应的碱性蛋白酶的酶解物的ACE活性抑制率为最高(44.9%),胃蛋白酶次之(43.5%)。分子量范围在1000Da以下组分对ACE的抑制效果最高,碱性蛋白酶作用获得的小分子肽组成为71.25%,胃蛋白酶的为69.35%,但其对应的ACE抑制率却为64.57%和78.49%。中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作用获得的小分子肽的ACE抑制率分别为45.7%、47.3%和29.6%。胃蛋白酶的降压肽制备效果为最好,其次为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶。