不同食用菌多糖复配物对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

目的:探究5种食用菌多糖,包括银耳多糖（Tremella fuciformis polysaccharide）、茯苓多糖（Poriacocos polysaccharide）、香菇多糖（Lentinan）、猴头菇多糖（Hericium edodes polysaccharide）和竹荪多糖（Dictyophora indusiata polysaccharide）任意3种多糖复配得到的多糖复配物的免疫调节活性。方法:以RAW264.7巨噬细胞为研究对象,采用CCK-8试剂盒检测不同浓度的复配物对巨噬细胞增殖的影响,酶联免疫吸附法测定复配物处理后细胞培养液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）水平,以及流式细胞仪分析复配物处理后细胞吞噬能力。结果:与正常对照组相比,除了浓度为320 μg/mL的茯苓多糖、香菇多糖和竹荪多糖的多糖复配物,茯苓多糖、猴头菇多糖和竹荪多糖的多糖复配物以及香菇多糖、猴头菇多糖和竹荪多糖的多糖复配物外,在检测浓度范围内10种多糖复配物可明显促进巨噬细胞的增殖,增强吞噬能力,提高细胞因子TNF-α的分泌量。其中,10 μg/mL的银耳多糖、茯苓多糖和竹荪多糖的复配物促进巨噬细胞增殖的效果最佳,160 μg/mL的银耳多糖、茯苓多糖和香菇多糖的复配物能最好的促进TNF-α的分泌和增强RAW264.7的吞噬能力。结论:不同食用菌多糖的复配物均可调节巨噬细胞RAW264.7的免疫活性。本结果可为开发免疫调节功能的食用菌复配多糖产品提供数据参考。     

锁阳多糖对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用的影响

目的 研究锁阳多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。方法 以巨噬细胞RAW264.7为研究对象, 设置空白对照组、阳性(LPS)对照组、锁阳多糖给药组(25、50、100、200、400 μg/mL), 用CCK-8法测定细胞增殖活性, 中性红法测定其吞噬活性; Griess法测定其对NO分泌量的影响; ELISA法测定其IL-6和TNF-α的释放能力。结果 与空白组比较, 不同浓度(25~400 μg/mL)锁阳多糖均能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖(P<0.05或P<0.01), 干预24 h和48 h的增殖活性明显高于干预6 h和12 h的增殖活性(P<0.05); 锁阳多糖(25~ 400 μg/mL)能显著促进细胞的吞噬活性(P<0.05); 干预48 h后, 锁阳多糖(25~400 μg/mL)的NO分泌量显著高于空白组和LPS组(P<0.05); 与空白组和LPS组相比, 锁阳多糖(25~400 μg/mL)能显著促进细胞IL-6和TNF-α的释放(P<0.01)。结论 锁阳多糖在一定浓度范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。     

硒化低聚氨基多糖对RAW264.7细胞的免疫调节作用

本实验旨在研究硒化低聚氨基多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫功能的影响。用噻唑蓝比色法分别考 察硒化低聚氨基多糖、Na2SeO3对巨噬细胞RAW264.7增殖能力的影响,并观察巨噬细胞形态的变化。通过中性红 法、酶联免疫吸附测定法及实时荧光定量反转录聚合酶链式反应法分别检测巨噬细胞的吞噬能力、肿瘤坏死因子 （tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素（interleukin,IL）-6及IL-10细胞因子的分泌量及其mRNA表达水平。 结果表明：硒质量浓度为100～1 000 μg/L时,硒化低聚氨基多糖对细胞的相对增殖率无显著影响;而Na2SeO3的硒 质量浓度超过200 μg/L即对巨噬细胞RAW264.7产生细胞毒性作用。硒化低聚氨基多糖能增强巨噬细胞吞噬活性, 显著提高RAW264.7细胞TNF-α、IL-6及IL-10分泌量及其mRNA表达水平,且效果比Na2SeO3处理组、低聚氨基多糖 处理组及Na2SeO3＋低聚氨基多糖复合添加组好。实验结果提示硒化低聚氨基多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7具有一 定的免疫调节作用。     

紫球藻多糖免疫调节作用初步探究

探究紫球藻多糖对体外免疫细胞免疫功能的影响。用不同浓度的紫球藻多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为阳性对照,格里斯试剂(Griess)法检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量,噻唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法测定紫球藻多糖对RAW264.7细胞活力的影响,中性红法检测细胞的吞噬能力。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌情况。结果表明:不同浓度紫球藻多糖能够促进NO的释放,增强巨噬细胞对中性红的吞噬能力,刺激TNF-α与IL-6的释放。紫球藻多糖浓度在12.5μg/mL～400μg/mL的范围内,对细胞无毒性。试验结果初步证明:紫球藻多糖对巨噬细胞RAW264.7具有免疫调节作用,这将为进一步开发应用紫球藻多糖奠定基础。     

树蝴蝶多糖的免疫调节活性研究

本文采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52纤维素阴离子交换层析法分离纯化得到从树蝴蝶原料中提取的中性多糖LKY-I。以不同浓度的多糖为原料,研究了LKY-I的体外免疫调节活性。结果表明,LKY-I在125~500μg/mL浓度范围内对RAW 264.7细胞无明显毒性。LKY-I可显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,当多糖浓度为500μg/mL时,吸光度值可达到1.39,显著高于阳性对照组LPS。LKY-I可促进巨噬细胞RAW 264.7分泌NO,最大分泌量可达55.42±1.79μM;与正常对照组相比,LKY-I促进巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α细胞因子,分泌量分别增加了102.3%和289.5%。在125~500μg/mL浓度范围内,LKY-I可显著提高i NOS、IL-6及TNF-α基因的表达。LKY-I协同LPS和Con A能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。研究结果表明,LKY-I多糖具有良好的体外免疫调节活性,可以作为一种有益健康的成分应用到食品工业中。     

基于巨噬细胞模型的竹荪多糖的免疫功能

为探索竹荪多糖(DI)对巨噬细胞RAW264.7免疫功能的影响,分别采用四唑氮蓝(MTT)法、中性红法、Griess法、ELISA法,检测DI对巨噬细胞增殖、吞噬活性、一氧化氮(NO)和白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)分泌量的影响;运用反转录PCR(RT-PCR)检测i NOS和IL-1、IL-6、TNF-α的m RNA表达量的变化。结果表明,在25~200μg/m L质量浓度范围内,DI能够明显促进巨噬细胞增殖,增强其吞噬活性。同时,DI能够增强巨噬细胞分泌NO、IL-1、IL-6、TNF-α的能力,且明显提高i NOS、IL-1、IL-6、TNF-αm RNA的表达水平。因此,竹荪多糖对巨噬细胞RAW264.7具有免疫刺激作用。     

阿里红多糖组分对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖(Fomes Officinals polysaccharide,FOPS)及其组分FOPS-a、FOPS-b对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。方法以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象,不同浓度(50~1600μg/m L)FOPS、FOPS-a、FOPS-b干预后,用cck-8试剂盒测定细胞活力,中性红法测定其吞噬活性,NO试剂盒测定NO的含量,ELISA试剂盒测定TNF-α和IL-1β释放能力。结果 FOPS、FOPS-a、FOPS-b在一定的浓度范围内可以提高RAW264.7巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、一氧化氮以及TNF-α、IL-1β的释放量。结论 FOPS、FOPS-a、FOPS-b一定浓度范围内具有良好的增强RAW264.7巨噬细胞免疫功能的作用。     

蛹虫草多糖调节小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫活性的分子机制

多种真菌多糖近年来因其免疫调节活性成为保健食品领域研究的热点。本实验以食药用真菌蛹虫草提取物蛹虫草多糖（Cordyceps militaris polysaccharides,CMP）为研究材料,初步探究CMP对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫活性的调节机制。噻唑蓝实验结果显示CMP无细胞毒性,且100、200 μg/mL CMP可以明显增强RAW264.7细胞活性;中性红法、Griess法和酶联免疫吸附检测结果表明25～200 μg/mL的CMP以剂量依赖方式增强RAW264.7细胞吞噬活性并增加一氧化氮（nitric oxide,NO）和白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）分泌,肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的分泌呈先升高后降低的趋势,在100 μg/mL时达到最高值;抑制剂中和实验结果显示当Toll样受体4（Toll-like receptors 4,TLR4）和甘露糖受体（mannose receptor,MR）受到抑制时,CMP诱导的RAW264.7免疫反应显著降低,这表明TLR4和MR均为CMP激活巨噬细胞的受体;此外,Western blot结果显示丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPK）信号通路也参与CMP诱导的RAW264.7细胞分泌NO、TNF-α和IL-1β。表明TLR4和MR/MAPK信号传导途径在CMP诱导巨噬细胞RAW264.7产生免疫应答时发挥了重要作用。     

榆黄菇多糖对体外诱导炎症模型细胞因子的分泌及一氧化氮合酶（NOS）的影响

以榆黄菇为原料,采用水提醇沉法提取榆黄菇粗多糖,Sevage法去除蛋白,利用DEAE-Cellulose离子交换和Superdex-75凝胶层析方法纯化获得PSI和PSII两个组分;通过脂多糖（LPS）刺激建立炎症模型;利用MTT法筛选出两个多糖的优势浓度,采用吸光度分析法测定一氧化氮合酶（NOS）的活力、酶联免疫吸附试剂盒测定细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平来评价多糖对RAW264.7细胞的抗炎作用。研究结果显示,LPS浓度为5 μg/mL时,细胞炎症水平达到最高,在模型的基础上筛选出PSI的优势浓度为500 μg/mL、PSII的优势浓度为200 μg/mL;与LPS模型组相比较,PSI对NOS活性、IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平抑制率分别为37.54%、28.84%、28.27%和30.25%,PSII对NOS活性、IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平抑制率分别为51.24%、37.56%、31.35%和32.67%。研究证实,榆黄菇多糖PSI和PSII对LPS诱导RAW264.7炎症细胞具有缓解作用,主要表现在抑制炎症细胞因子的分泌水平、促进细胞增殖、降低巨噬细胞的吞噬能力等方面,而对比PSI来说,PSII对于一氧化氮合酶（NOS）以及细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平的抑制力要更强,具有更好的抗炎效果。     

树蝴蝶多糖的免疫调节活性研究（英文）

本文采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52纤维素阴离子交换层析法分离纯化得到从树蝴蝶原料中提取的中性多糖LKY-I。以不同浓度的多糖为原料,研究了LKY-I的体外免疫调节活性。结果表明,LKY-I在125~500μg/mL浓度范围内对RAW 264.7细胞无明显毒性。LKY-I可显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,当多糖浓度为500μg/mL时,吸光度值可达到1.39,显著高于阳性对照组LPS。LKY-I可促进巨噬细胞RAW 264.7分泌NO,最大分泌量可达55.42±1.79μM;与正常对照组相比,LKY-I促进巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α细胞因子,分泌量分别增加了102.3%和289.5%。在125~500μg/mL浓度范围内,LKY-I可显著提高i NOS、IL-6及TNF-α基因的表达。LKY-I协同LPS和Con A能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。研究结果表明,LKY-I多糖具有良好的体外免疫调节活性,可以作为一种有益健康的成分应用到食品工业中。     

亚麻籽胶中酸性多糖和中性多糖的分离纯化

采用十六烷基三甲基溴化胺 (CTAB)络合法 ,利用离子交换柱层析和凝胶柱层析从亚麻籽胶中分离得到酸性多糖 (AFM -1 )和中性多糖 (NFM -1 )纯品 ,其分子质量分别为 7 62× 1 0 5u和 1 1 9× 1 0 6u ,总糖含量分别为 5 8 92 %和 84 93%,糖醛酸含量分别为 33 5 5 %和 6 5 8%,AFM-1中C、H和N的含量分别为 2 8 0 4%、5 89%和 0 80 %,红外光谱测定表明 ,AFM -1和NFM -1具有多糖的特征吸收 ,并且其糖环均为吡喃环。     

多糖的应用研究

本文概述了多糖的来源、结构与生物活性及其在医药、食品等领域的广泛应用，以期能为多糖研究开发有所帮助。     

龙眼多糖与燕麦多糖的结构特征及其益生活性比较

目的：比较龙眼多糖和燕麦多糖的益生活性与结构差异,分析其构效关系,为以龙眼和燕麦为原料开发健康食品提供科学依据。方法：以龙眼干、燕麦麦麸为原料,采用热水浸提Sevag脱蛋白方法得到龙眼多糖和燕麦多糖,分别以2种多糖为碳源,加入无碳源的MRS培养基,测定活菌数、pH值变化,比较两者的益生效果;分别测定2种多糖的总糖、糖醛酸、还原糖和蛋白质含量,采用凝胶渗透色谱法测定分子质量,GC/MS面积归一化法测定单糖组成,HPLC-FLD法测定氨基酸组成,扫描电镜观察表观形貌,流变仪测定流变性,解析2种多糖益生活性差异的结构基础。结果：龙眼多糖和燕麦多糖作为唯一碳源,均能促进干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌增殖、植物乳杆菌、粪肠球菌增殖,然而两者的促增殖作用明显不同;龙眼多糖对干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌亚种的促增殖作用显著优于菊粉（P＜0.05）,对植物乳杆菌、粪肠球菌的增殖作用与菊粉相似;燕麦多糖对干酪乳杆菌的增殖作用与菊粉相似,对嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌亚种和粪肠球菌的增殖作用略高于空白组。其理化性质、结构特征测定结果是：龙眼多糖和燕麦多糖的总糖含量分别为61.2%,68.3%,糖醛酸含量分别为10.1%,5.9%,还原糖含量16.0%,5.4%,蛋白质含量2.2%,2.9%。采用凝胶渗透色谱法测定龙眼多糖分子质量（Mw）为6.38×106 u,燕麦多糖分子质量（Mw）分为2部分5.42×103 u和2.45×106 u。龙眼多糖的单糖组成为葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖等,燕麦多糖的单糖组成主要为葡萄糖,2种多糖的水解氨基酸总量和组成差异不大。扫面电镜结果表明：2种多糖均呈无规则片状,龙眼多糖表面光滑排列较紧密,燕麦多糖表面粗糙排列松散。此外,2种多糖溶液的黏度具有质量分数依赖性,黏度均随温度的增加而下降,其中燕麦多糖溶液的黏度对温度变化更为敏感。结论：与燕麦多糖相比,龙眼多糖因单糖组成复杂、黏度低等结构特点,促益生菌增殖的作用更明显。     

奇可力多糖的免疫调节作用

经口给予小鼠不同剂量的奇可力多糖20d后，与对照组相比能显著地提高小鼠抗体生成细胞数（低、中、高剂量组）、小鼠巨噬细胞吞噬指数（中剂量组）和小鼠脾脏、胸腺器官重量（低、中、高剂量组）。检测结果表明，奇可力多糖具有较强的调节小鼠体液免疫功能和一定程度的调节小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。     

猴头多糖的研究进展

猴头多糖是猴头菌中重要的活性成分,日益受到人们的重视。研究表明,猴头多糖具有抗肿瘤、抗衰老、降血脂等多种生理功能。本文介绍了猴头多糖的生物活性、液态发酵工艺的研究进展、猴头多糖的提取纯化,并对其发展前景进行了展望。     

微生物多糖物质的发酵生产

本文对两种微生物多糖——黄原胶和凝胶多糖的进行了介绍。描述了它们的分子结构,并对它们的菌种选育和培养条件进行了综述。     

多糖研究热点

该文概述多糖研究现状,详述多糖生物学及多糖在药物、食品、化妆品等领域应用研究热点,以期为多糖研究开发提供理论依据。     

真菌多糖的研究进展

近年来,真菌多糖的研究已成为糖生物学研究的一个热点。真菌多糖是目前最有开发前途的保健食品和药品新资源之一,其生物活性也是保健食品功能因子的研究热点。本文综述了真菌多糖的化学结构、构效关系、多糖的提纯方法以及药理功能等方面的研究现状。     

活性多糖的研究进展

活性多糖是当今医药和食品工业共同关注的热点 ,是一类重要的保健食品功能因子 ,文章详细介绍了活性多糖的国内外研究概况、分离纯化、保健功能、结构及其分析、构效关系和发展前景