枯草芽孢杆菌工程菌株产普鲁兰酶发酵条件的优化

利用基因工程手段获得的产长野芽孢杆菌普鲁兰酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株WB600/pWB-pulB,通过单因素筛选及正交试验进行发酵培养基优化,得到产酶最佳配方为玉米淀粉3.0％,酵母膏20％,CaCl20.03％,Na2HPO41.0％.同时对重组菌株摇瓶条件下液体发酵的主要影响因素初始pH、接种量、装液量、转速、温度等进行探讨,确定了产酶最佳培养条件为,以3％接种量接种于优化后培养基,初始pH7.0,装液量30 mL/250 mL,37℃,200 r/min摇床培养36 h.在此优化条件下,普鲁兰酶活力达到20.16 U/mL,是之前研究结果(10.94 U/mL)的1.84倍.     

海洋纤溶酶高产菌株的选育及产酶条件优化

以海洋枯草芽孢杆菌FA-7为出发菌株,经紫外诱变获得一株遗传稳定性良好的高产纤溶酶菌株Y-22,并对该菌株的发酵培养基和发酵条件进行优化,确定菌株Y-22的最佳产酶条件为可溶性淀粉4％,黄豆粕粉2．5％,CaCl20．025％,MgSO4·7H：00．35％,吐温-80O．15％;接种量4％,装液量50mt：250mL,初始pH值为5．5,发酵温度30℃,180r／min振荡培养96h。在此条件下,菌株Y-22的发酵液粗酶酶活为（910±11．3）1U／mL,是出发菌株的3．05倍。     

假单胞菌B41产果胶酶发酵条件的研究

对假单胞菌B41发酵产果胶酶培养基和发酵培养条件进行了优化。经单因素和正交试验得到最优发酵培养基组成为桔皮粉20．0g／L,蛋白胨10．0g／L,FeSO40．5g／L,初始pH值5．5。最佳发酵条件为装液量50mL,接种量2％,发酵温度30％,发酵时间32h。在此优化条件下,果胶酶活力为739U／mL。     

毕赤酵母产α-葡聚糖酶发酵工艺研究

对毕赤酵母液体发酵产α-葡聚糖酶的主要影响因子进行了研究,考察了影响外源蛋白表达的因素,包括碳氮源、pH、装液量、接种量、温度等,单因素实验结果表明最佳培养及发酵条件为：最佳碳源氮源分别为甘油和YNB,甲醇诱导浓度为1．5％,pH为5．5～6．0,装液量为25mL／250mL,接种量为10％,表面活性剂为0．2％,摇床转速为200r／min。菌株的产酶水平由原来的47．50U／mL提高到73．16U／mL,酶活力提高了约1．5倍。     

响应面法优化产β-内酰胺酶菌Bacillus cereus B03的发酵条件

为快速高效地提高菌株Bacillus cereus B03的产酶能力,采用响应面法对Bacillus cereus B03产β-内酰胺酶的发酵培养基进行优化。首先通过单因素实验研究了不同碳源及浓度、不同氮源及浓度、不同金属离子及浓度、氯化钠、磷酸氢二钾以及温度、pH、接种量、装液量对菌株产酶活力的影响,然后设计Plackett-Burman试验筛选出影响产酶的3个显著性因素:温度、pH、接种量。在此基础上,最后设计Box-Behnken中心组合试验确定最优产酶发酵条件。结果表明,最佳发酵培养基成分为葡萄糖20 g/L、酵母浸粉20 g/L、NaCl 2 g/L、MgSO₄·7H₂O 0.2 g/L,K₂HPO₄·3H₂O 4 g/L,最佳产酶发酵条件为发酵温度37 ℃,pH为7.3,接种量3%,装液量50 mL/250 mL。在此优化条件下,该菌株产β-内酰胺酶的酶活力为113278.7 U/mL,为优化之前酶活(88792.7 U/mL)的1.28倍。本研究为进一步工业化开发利用性状稳定且高产β-内酰胺酶的菌株提供借鉴。     

利用谷氨酸提取液生产细菌纤维素的研究

探讨了利用谷氨酸提取液生产细菌纤维素的方法，研究了接种量、糖化液的添加量、温度、pH值、发酵培养基的厚度、发酵时间等对生产细菌纤维素的影响，确定了谷氨酸提取液生产细菌纤维素的最适工艺条件为：糖化液20％，接种量3％-4％，温度28—32℃，发酵起始pH3．6—3．8，静置发酵时。发酵培养基深度1．2～2．0cm，发酵时间6～7d。     

纳豆激酶液体发酵条件的优化

以纳豆枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtillisnatto ,BSN)为实验菌株 ,对其液体发酵生产进行了研究。实验考察了发酵条件 (温度、接种量、起始pH、装液量 )和培养基成分 (碳源、氮源、金属离子等 )对纳豆激酶产量的影响 ;在优化发酵条件和培养基的基础上 ,进行了 5L发酵罐放大实验 ,产酶量为 2 2 5 0IU/mL。     

响应曲面法优化嗜碱芽孢杆菌产环糊精葡萄糖基转移酶的发酵条件

对一株嗜碱芽孢杆菌产环糊精糖基转移酶的发酵备件进行了研究。利用单因素试验和响应曲面试验获得该菌株产环糊精糖基转移酶的最佳条件为：接种量3％；培养温度30℃；pH10．5；发酵培养基的组成为玉米粉2％，酵母膏1．5％．玉米浆5％；250ml三角瓶装液量为30ml；270rpm振荡培养3d，其发酵液酶活可达5400U／ml左右。10L罐发酵时酶活可达5820U／ml。     

嗜碱芽孢杆菌产环糊精葡萄糖基转移酶发酵条件的优化

对一株嗜碱芽孢杆菌产环糊精糖基转移酶的发酵条件进行了研究。利用单因素试验和正交试验获得该菌株产环糊精糖基转移酶的最佳条件为：接种量3％；培养温度30℃；pH10．5；发酵培养基的组成为玉米粉2％，酵母膏1．5％，玉米浆5％；250ml三角瓶装液量为30ml；270r/min振荡培养3d，其发酵液酶活可达5400U／ml左右。10L罐发酵时酶活可达5820U／ml。     

纳豆菌的分离、鉴定及产蛋白酶液态发酵条件的优化

利用奶粉豆粕培养基,采用稀释平板分离法,以H/C(透明圈直径/菌落直径)为指标,从日本传统食品纳豆中分离出9株蛋白酶产生菌。将这些初筛菌株进行发酵培养,采用Folin-酚法测定酵上清液的蛋白酶活性,选出蛋白酶活性最高的菌株H2,并依据形态特点和主要生理生化特征,鉴定为芽孢杆菌纳豆亚种(Bacillussubtilis sub.Natto)。最后以蛋白酶活性为指标,考察培养基初始pH值、温度、装液量、接种量和种龄等因素对H2菌株液态发酵的影响。结果表明,该菌株液态发酵产蛋白酶的适宜条件是:培养基初始pH值7、培养温度40℃、装液量40 mL/250 mL、接种量3%、种龄25 h。     

棒曲霉GM-69深层发酵生产木聚糖酶的研究

报道了发酵条件对棒曲霉GM-69产木聚糖酶的影响，并用50L发酵罐进行了深层发酵试验。确定产酶摇瓶培养的最佳条件：培养时间为72h，温度为28℃，培养基起始pH为3．8，接种量为5％(V／V)，转速为250r／min，装液量为90mL／500mL三角瓶。其酶活力最高362IU／mL，平均为343IU／mL，比培养条件优化前增加了55．6％。50L发酵罐发酵最佳条件：转速为400r／min，通风量为1：0．6～1，罐压为0．08Mpa，装量为700，发酵周期为72h，温度28℃，培养基起始pH3．8，接种量5％(V/V)，酶活力平均为351IU／mL。     

绿僵菌Ma83固态发酵几丁质酶和部分酶学性质的初步研究

研究了金龟子绿僵菌MetarhiziumanisopliaeMa83菌株产几丁质酶的固态发酵条件和粗酶液的酶学性质。研究结果显示 ,当以麸皮∶蚕蛹粉为 3∶1作为培养基 ,最适氮源为1%NaNO3,起始pH为 6 5 ,发酵温度为 31℃ ,接种量为 2mL液态种子时酶活力最高。此外 ,添加稻壳对Ma83产几丁质酶有促进作用。该菌株在生长 2d时 ,酶活力达 33 9U /g干培养基。酶的最适反应温度为 5 0℃ ,最适反应 pH为 6 0 ;不同温度保温 1h后 ,酶的半失活温度为 42℃。不同 pH值的缓冲溶液中 (2 5℃ )放置 1h后 ,酶在pH 5 0～ 6 0条件下稳定性最高     

大豆异黄酮糖苷水解酶高产菌株的筛选

采用选择平板分离、初筛,摇瓶发酵复筛;从保藏菌种和豆豉分离茵中筛选得到一株能高产大豆异黄酮糖苷酶的菌株——03。该菌在培养基组分为玉米芯3％;豆饼粉0．2％;KH2PO40．4％;CaCl20．04％;MgSO4;7H2O0．04％;自然pH,接种量为10％,培养温度为30℃,培养周期为60hr的培养条件下,其酶活力可达388．572U／ml。     

基因工程菌Pichia Pastoris高密度培养条件的摇瓶研究

对基因工程茵Pichia pastoris高密度培养的培养基进行了研究，选取了价廉易得的培养基，对此培养基各组分进行了优化，并对其它发酵条件进行了优化试验，得到了最优培养基配方及培养条件。结果表明，培养基最佳配方为：葡萄糖为5％，氨水单次补料量为20μL(250mL摇瓶装液量为20mL)，KH2PO4浓度为0．7％，培养基其它组分为：K2HPO40．1％、MgSO4．7H2O0．03％、FeSO4．7H2O0．05％、MnSO4．H2O0．05％。种子液最佳培养时间为40h，接种量为10％，250mL三角瓶装液量为20mL，摇床转速为220r／m，发酵培养基最佳初始pH5．5，发酵温度为30℃，发酵结束时间64h。在此优化的培养基及培养条件下，茵体密度达到最高，OD600达到64．3，细胞干重20．2g／L。     

响应面优化微泡菌ALW1产褐藻胶裂解酶的发酵条件

采用单因素和响应面法对产褐藻胶裂解酶菌种Microbulbifer sp.ALW1发酵产酶的培养条件进行优化.通过单因素实验,得到发酵条件如下:培养基初始pH 7.5,接种量5％,装液量50 mL,温度25℃,最大酶活力达到117.1 U/mL.在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken设计和响应面分析,得到最佳的发酵培养条件:培养基初始pH 8.0,接种量6.5％,装液量50mL,温度23℃,褐藻胶裂解酶活力达到130 U/mL,比基础培养条件下提高16.5％.     

响应面法优化产色氨酸的谷氨酸棒杆菌的发酵条件

以实验室保藏的一株谷氨酸棒杆菌ATCC21851为出发菌株,在液体完全培养基进行活化培养,250mL三角烧瓶进行发酵培养,完成单因素试验,利用单因素试验确定了最佳的培养基pH值、装液量、接种量和培养温度。运用Box-Benhnken的中心组合设计和响应面分析,对该菌株产L-色氨酸的发酵条件组成进行多项式回归模型建立和最优化,在此基础上确定了该产L-色氨酸菌株的最佳培养条件组成:接种量10.11CFU/mL、装液量46.25mL/250mL和培养基pH值6.76。在优化后的培养基和最佳发酵条件下进行发酵培养,测得经过发酵之后L-色氨酸产量达到9.06g/L。     

青霉菌Y3固态发酵产酶条件的研究

筛选了一株高产木聚糖酶及纤维素酶的青霉菌 (Penicilliumemersonii)Y3 菌株 ,研究了其在固体培养基中的发酵条件。该菌株的最佳培养条件为 :起始pH值为 4 .6 ,发酵温度为 2 9℃ ,每 1g固体培养基中接种量为 1ml孢子悬液 (孢子悬液的浓度为 2 .5× 10 7个 (孢子 ) /ml) ,玉米芯与麦麸比为 7∶3,尿素为氮源 ,发酵 3d。木聚糖酶活力可达 4 2 36U/g ,纤维素酶活力可达 1895U/g。粗酶的最适反应温度为 5 0℃ ,pH值为 5 .0 ,热稳定性在 5 0℃以下。     

毕赤酵母工程菌pk53产纤溶酶发酵条件的优化

对1株产纤溶酶毕赤酵母工程菌菌株pk53,利用单因素试验和正交试验确定该菌株的适宜廉价发酵培养基为:麸皮1.5%,豆粕粉2.0%,KH2PO40.5%,MgSO4.7H2O 0.05%;发酵条件为:接种龄14 h,接种量1%,甲醇添加量1.5%,培养基装液量30 mL(250 mL三角瓶),生长pH为5.5,诱导pH为6.0;在此条件下培养,纤溶酶酶活力达429.06 U/mL,是初始发酵条件下酶活力的8.88倍。     

耐高温中性纤维素酶高产菌的筛选及发酵条件研究

从云南大马尖山土壤中筛选到一株热稳定性能好的纤维素酶高产细菌菌株D-9,并对其发酵条件进行研究,该菌株发酵72h在pH6.0、70℃条件下发酵液酶活为24.23IU/mL,酶学特性非常适合于纺织行业.通过分子生物学及其生理生化鉴定,该菌株为类芽孢杆菌(Paenibacillus elgii).此外,分别对该菌发酵培养基的初始pH、碳源、氮源、装液量、接种量及产酶进程进行了分析.     

发光杆菌MBL15产胶原酶发酵条件的研究

通过单因子试验和正交试验确定了发光杆菌MBL15产胶原酶的最适发酵条件为初始pH6．5，接种量6％，250ml三角瓶的装量为10％，发酵温度37℃。优化的发酵培养基成分为：牛肉膏4％、蔗糖2％、酵母粉0．2％、Cac120．04％。