红茶菌发酵液的有机酸组成分析

首先对红茶菌发酵过程中的p H、糖度、总糖、总酸及总酚含量等随发酵时间的变化进行研究,又采用离子排斥液相色谱法对发酵液中的有机酸进行分析。以高交联度磺化苯乙烯-二乙烯基苯共聚物多孔微球作为固定相的Aminex HPX-87H离子色谱柱作为分析柱,利用二极管阵列检测器对8种有机酸(柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、乙酸、丙酸、丁酸、草酸、乳酸)进行了较成功的分离,并应用于红茶菌发酵液的有机酸分析。通过色谱条件优化,选定了55℃为柱温和10 mmol/L的H2SO4作为流动相。利用上述方法进行测定,能够有效地对红茶菌发酵液中的6种有机酸(柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、乙酸、丙酸和丁酸)进行提取、分离和测定,回收率为97.1%~102.9%,RSD为0.1%~6.5%。     

离子排斥色谱法分析米根霉富马酸发酵液中的代谢产物

提出了利用离子排斥色谱法同时分析米根霉富马酸发酵液中主要代谢产物与葡萄糖的方法。在BIO-RAD Aminex HPX-87H色谱柱上,65℃柱温下,以5mmol/L H2SO4溶液作为流动相,流速0.8mL/min,采用示差折光检测器对8种有机酸(草酸、柠檬酸、α-酮戊二酸、L-苹果酸、丁二酸、L-乳酸、富马酸和乙酸)、葡萄糖及乙醇进行了成功的分离,确定了各物质工作曲线的回归方程、线性范围、相关系数和检出限。并应用于米根霉产富马酸发酵液的产品分析,对经预处理后的富马酸发酵液直接进样分离定量,其中的富马酸、-酮戊二酸、葡萄糖、L-乳酸和乙醇完全分离定量,确定了测定发酵液中有机酸、葡萄糖和乙醇的相对标准偏差在0.43%～4.69%,平均回收率在98.41%～104.33%。经多次实验证明,该方法是测定富马酸发酵液中各种主要代谢产物与葡萄糖的准确、有效的定量测定方法。     

梯度洗脱高效液相色谱法快速测定1,3-丙二醇发酵液中有机酸

提出了一种快速分析发酵液中9种有机酸的高效液相色谱方法。该方法利用RSpakKC-811色谱柱(300mm×8mmi.d.),采用超纯水-4mmol/L高氯酸为流动相进行梯度洗脱。流动相流速1.0mL/min,紫外检测波长210nm,柱温60℃时,能够快速、准确地分离测定发酵液中的丙酮酸、柠檬酸、苹果酸、延胡索酸、琥珀酸、乳酸、甲酸、乙酸等8种有机酸,分析时间只需15min。各种有机酸的线性相关系数R2≥0.9992,精密度的相对标准偏差为0.97%-2.72%,样品回收率为96.8%-102.5%,具有较高的精密度和准确度,可以用于1,3-丙二醇发酵液中有机酸的分析。     

大肠杆菌9种有机酸代谢产物的高效液相检测条件优化

以高交联度磺化苯乙烯-二乙烯基苹共聚物多孔微球作为固定相的Aminex HPX-87H离子色谱柱为分析柱,通过优化条件对E.coli MG1655及其突变株厌氧发酵过程中九种有机酸(琥珀酸、甲酸、乙酸、乳酸、草酰乙酸、丙酮酸、富马酸,乙醛酸、柠檬酸)进行了有效的分离,尤其做到了对富马酸与其他有机酸的较好分离,为代谢过程...     

红茶菌发酵罗城毛葡萄13种有机酸的同时检测

为解决目前尚无对红茶菌发酵液中多种有机酸同时检测方法的问题,本文利用液相色谱建立红茶菌发酵液13种有机酸的准确定量方法,并对发酵过程中的典型有机酸变化进行跟踪。优化后的色谱条件:Atlanis T3色谱柱,流动相为0.02 mol/L KH₂PO₄(pH=2.6),流速0.4 mL/min,等度洗脱,柱温30 ℃、检测波长210 nm。此色谱条件下,葡萄糖醛酸和草酸完全重合(只能用葡萄糖醛酸标准曲线相对定量),但其它11种有机酸均能有效分离。定量方法线性范围较宽,R2>0.990,定量限0.080~4.789 mg/L,加标回收率92.68%~107.35%,相对标准偏差<5%,葡萄糖酸、乙酸、苹果酸在发酵过程中一直增加,而其它酸类呈先升后降趋势。葡萄糖酸、乙酸是主要的有机酸,在17 d的发酵液中所测有机酸占75.03%和10.46%。本研究建立的有机酸检测方法适合红茶菌发酵样品的检测,为红茶菌发酵毛葡萄生产酸性功能软饮品提供了基础依据。     

HPLC法测定苹果树腐烂病菌发酵液中的有机酸和葡萄糖

建立了一种用高效液相色谱(HPLC)检测苹果树腐烂病菌发酵液中有机酸和葡萄糖的方法。采用Atlantis C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),以5g/L NH4H2PO4(用磷酸调pH=2.5)溶液为流动相,流速为0.6mL/min,柱温30℃,应用紫外检测器检测有机酸,示差检测器来分析葡萄糖。在此色谱条件下,葡萄糖和有机酸能很好地被分离检出,平均回收率为96.2%¹02.2%,精密度RSD(n=5)为0.26%102.2%,精密度RSD(n=5)为0.26%⁰.75%,每一样品的分析时间不超过15 min。该方法能够简便、快速测定苹果树腐烂病菌发酵体系中有机酸及葡萄糖的含量。     

高效液相色谱法测定葡萄酒中的有机酸

本文提出了一种利用高效液相色谱分析葡萄酒的有机酸的一种方法.应用Aminex~H HPX-8TH色谱柱,以0.008N的硫酸作为流动相,将葡萄酒中的草酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸及乳酸一次分离,各种酸的回收率大于90%.本方法采用伯乐-太平洋公司生产的高效色谱仪器和该公司具有分辩率较高的有机酸分离柱,来分析葡萄酒中的有机酸.     

不同碳源对酵母代谢有机酸的影响

对啤酒酵母在以葡萄糖、果糖、麦芽糖作碳源的培养基中的代谢生长状况进行了跟踪检测,应用高效液相色谱检测各发酵液中酒石酸、苹果酸、琥珀酸和柠檬酸的含量变化,得出了碳源对啤酒酵母有机酸代谢的影响:其中酒石酸、苹果酸和柠檬酸含量差别明显,琥珀酸含量差别较小。     

反相高效液相色谱法测定苹果酸发酵液中的有机酸

采用反相高效液相色谱法分析测定苹果酸发酵液中的有机酸,最终确定了适用于发酵液中各种有机酸含量测定的色谱条件,色谱柱:COSMOSIL 5C18-PAQ(4.6 mm I.D.×250 mm);紫外检测波长:210 nm;流动相:1%乙腈-20 mmol/L KH2PO4溶液(pH 2.8);流速:0.5 mL/min;柱温:23℃。结果表明,在该条件下苹果酸发酵液中的7种有机酸都得到了较好分离,方法的回收率为94.2%～102.7%,表明具有较好的准确度和精密度。     

反相高效液相色谱法测定嗜碱微生物发酵液中的有机酸

建立了采用反相高效液相色谱检测嗜碱微生物Lp3-3发酵液中有机酸的方法。采用Sinochrom ODS-BP色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以2.5mmol/L NH4H2PO4(含1%甲醇)溶液(pH2.5)为流动相,流速为0.5mL/min,柱温30℃,紫外检测器检测波长为210nm。在此色谱条件下,7种有机酸得到很好分离,方法重现性好,精密度高,有机酸浓度在1~500μg/mL范围内,线性相关系数均大于0.999,加标回收率为96%~110%,各有机酸检出限≤0.12μg/mL。运用该方法测定嗜碱微生物Lp3-3发酵液中的有机酸,得到发酵液中主成分乳酸及副产物乙酸、丙酮酸在发酵不同时间的变化趋势。     

Production of malic and succinic acids by sugar-tolerant yeast <Emphasis Type="Italic">Zygosaccharomyces rouxii</Emphasis>

Zygosaccharomyces rouxii V19 was grown in YPG medium (yeast extract, 0.5%, peptone, 1.0%, glucose, 10%). Fermented broth was purified through a series of ion-exchange columns and ODS column and the purified sample was TMS-esterified. Malic and succinic acids were identified with GC-MS analysis. The yeast was cultivated under various cultural conditions and quantitative determination of the organic acids was carried out with HPLC on Shodex column. Glucose concentration of 30%, initial pH 5.0, and 25 °C incubation temperature were the optimum conditions. Inclusion of glutamic, malic, and succinic acid precursors in the medium increased the production of malic acid. On the other hand, only addition of malic acid enhanced the production of succinic acid. Maximum amount of malic acid produced was 74.9 g/L (32.8% yield, based on glucose consumption) in the medium with 0.5% glutamic acid supplement, and that of succinic acid was 7.7 g/L (8.1% yield) when 0.3% malic acid was added in the medium.     

Organic acids in orange,grapefruit and cherry juices quantified by high-performance liquid chromatography using neutral resin or propylamine columns

Malic and citric acids were measured in orange and grapefruit juices by h.p.l.c. using a neutral resin column. Low levels of succinic acid (<0.01%) present in some samples required the use of a propylamine column, which was also used for succinic and malic acids in sweet cherry juice. All samples required preliminary separation on ion exchange columns to remove interfering substances. Either refractive index or ultraviolet (206 nm) detectors can be used for analyses after purification.     

利用反相高效液相色谱法测定梨汁中有机酸的种类和含量

研究了利用HPLC法分离测定梨汁中有机酸的条件 ,同时对来源于不同产地和品种梨汁中的有机酸的种类和含量进行了测定 ,并应用SAS统计软件对各有机酸含量之间的相关性进行了分析。结果表明 ,选择 0 0 1mol/LK2 HPO4 磷酸盐缓冲液 (pH 2 5 5 )和体积分数 3 %甲醇做流动相 ,流动相流速为 0 5mL/min ,柱温为 3 0℃ ,紫外检测波长为 2 1 0nm时 ,可以较好地分离和测定果汁中常见的 1 1种有机酸 ,该方法相对标准偏差 0 72 %～ 2 99% ,回收率 91 1 %～ 1 0 6 5 % ,各种酸的线性相关系数r>0 9996,具有较高的准确度和精确度 ;梨汁中的主要有机酸有苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、莽草酸、酒石酸、奎宁酸、乳酸和富马酸 ,其中苹果酸含量最高 (为 1 1 4× 1 0 3～ 3 0 9× 1 0 3mg/L) ;不同品种梨汁中各有机酸含量差别较大 ,其中琥珀酸与乳酸和富马酸 ,莽草酸与柠檬酸和奎宁酸的含量之间表现出极显著相关性。     

离子排斥色谱法测定苹果醋中的有机酸

采用离子排斥色谱法分离测定了苹果醋中有机酸的含量，考察了流动相组成、流速、柱温对分离检测的影响。6种有机酸的检测限在9．17mg／L-78．0mg／L之间，各组分回收率除草酸外均在90％-110％之间。主要存在的有机酸为柠檬酸、DL-苹果酸、琥珀酸和乙酸。     

丙酸发酵过程中四种有机酸快速、简便的分析方法

产酸丙酸杆菌在发酵生产丙酸的同时也会伴随有机杂酸的产生,通过对4种有机酸的监测以期调控发酵条件,从而使丙酸高产。应用HPLC的方法分别研究了在不同流动相种类、pH、洗脱条件、流速、柱温条件下四种有机酸的分离状况,建立了快速、简便测定丙酸、乳酸、乙酸和丁二酸四种有机酸的方法。结果表明,色谱柱条件为COSMOSIL 5C18-PAQ（4.6 mm×250 mm）,检测器为紫外检测器,紫外检测波长为210 nm,流动相为K2HPO4缓冲液（0.02 mol/L）和乙腈（0～1%梯度洗脱）,流速1.0 mL/min,柱温25 ℃,进样量10 μL,采用外标法定量。在该条件下各物质线性回归方程相关系数均＞0.999,加样回收率均在95%～105%,精密度实验结果相对标准偏差均＜5.0%,表明该方法准确度高、精密度好,可为丙酸发酵过程中四种有机酸的监控及发酵调控提供数据参考。     

毛细管硅胶整体柱分离分析食品中有机酸

建立应用毛细管硅胶整体柱采用毛细管电色谱法分离分析食品中有机酸的方法。对影响毛细管电色谱分离效率的条件进行优化,色谱柱为本实验室制作的毛细管硅胶整体C18柱(100μm×40cm)、电压－6kV、进样时间10s、紫外检测波长200nm,流动相为150mmol/L磷酸二氢钠-60mmol/L硼砂缓冲溶液(浓度比为5:2)和0.5mmol/L十六烷基三甲基溴化铵,pH7.5、25℃。结果表明：草酸和富马酸的线性范围为10～1000μg/mL,丁二酸线性范围20～500μg/mL,酒石酸和柠檬酸的线性范围为15～1000μg/mL,线性相关系数r≥0.9986,平均回收率在89.8%～101.1%之间,相对标准偏差≤6.23%(n=5),检出限在3.0～7.5μg/mL之间。毛细管硅胶整体柱具有制作成本低廉,对加热、有机溶剂等稳定和重复使用次数多等优点,应用毛细管硅胶整体柱采用毛细管电色谱法可以方便、快速、高效地分离分析食品中有机酸。     

青梅酱中的有机酸成分分析

分析了青梅酱的可溶性固形物、总酸、还原糖等主要成分,并采用高效液相色谱法对其中的草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸及琥珀酸等7种有机酸进行了测定.有机酸分析采用的色谱柱为Zorbax SB-Aq C18(4.6x250 mm,5μm),流动相为0.01 mol/L KH2 PO4(pH 2.8),流速为1mL/m...     

Determination of ethanol,volatile fatty acids,lactic and succinic acids in fermentation liquids by gas chromatography

A rapid and simple quantitative method was developed to determine, by gas chromatography, the concentrations in fermentation liquids of ethanol, the C₂-C₆ volatile fatty acids, and lactic and succinic acids. Aqueous samples were acidified with 250μlml^?1 metaphosphoric acid (5:1 ratio), centrifuged, and injected directly on to a column containing a porous aromatic polymer (Chromosorb 101) maintained at 200°C in a gas chromatograph fitted with a flame ionisation detector. It was unnecessary to purify samples further before injection, although distillation and ion-exchange methods were examined. Derivatisation of lactic and succinic acids before injection was not necessary, but the lowest level of detection of these two relatively non-volatile acids was about four times greater than that for the volatile fatty acids. The method described was suitable for the analysis of rumen fluid, methane digester fluid, silage extracts and other anaerobic fermentation fluids. The relative retention times are given for 23 organic acids and six other fermentation end-products.     

液相法测定米香型白酒发酵液中18种有机酸

为给白酒厂建立包括挥发性短链脂肪酸在内的有机酸品控手段,进行了18种有机酸液相定量方法的开发。通过流速和梯度优化,实现了各有机酸的有效分离,色谱条件为:Atlanis T3色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流速0.4 mL/min,梯度洗脱,柱温30 ℃,检测波长210 nm,上样量10 μL。该方法线性范围较宽,R2>0.989,定量限0.280~3.138 mg/L,加标回收率93.03%~107.21%,相对标准偏差<3.70%。米香型白酒发酵跟踪数据表明:各有机酸含量在发酵过程呈现不同的变化趋势。与初始发酵醪液相比,除柠檬酸、L-苹果酸和富马酸外,其它有机酸的含量在12 d发酵醪中均增加。L-乳酸、乙酸、异丁酸、异戊酸、琥珀酸是12 d发酵醪的5种主要有机酸,含量占比均大于10%。发酵过程总有机酸一直增加,且不同发酵进程的有机酸差异较大,暗示着改变发酵周期可以调控米香型白酒有机酸的组成。该方法为米香型白酒有机酸的品控提供了有效手段。