酶联免疫吸附法快速检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量

目的采用乳铁蛋白快速检测试剂盒,通过酶联免疫吸附法定量测定婴儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量,并验证该方法的准确性、稳定性和可靠性。方法按照试剂盒操作说明制作标准曲线,选取乳铁蛋白阴性样品进行添加回收实验,验证方法的准确性;选取一个乳铁蛋白阳性样品,重复检测6次,计算结果偏差,验证方法的稳定性;选取12个乳铁蛋白阳性样品,分别采用试剂盒方法和高效液相色谱法进行检测,对比2种方法的检测结果,验证试剂盒方法的可靠性。结果试剂盒检出限为2 mg/100 g;试剂盒检测方法回收率在101.6%~109%;相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为5.34%;试剂盒方法检测结果与标签值的偏差为-6.90%~6.45%,和高效液相色谱法检测结果的偏差为-6.45%~6.9%,说明试剂盒方法具有很好的可靠性。结论乳铁蛋白试剂盒检测方法灵敏度高、操作简单,能快速准确地测定婴儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量。     

婴幼儿配方食品中乳铁蛋白含量测定方法比较研究

探讨不同检测方法对婴幼儿配方食品中乳铁蛋白检测结果的影响以及应用价值。采用乳铁蛋白酶联免疫试剂盒检测法(ELISA法)和高效液相色谱法(HPLC法)分别对婴幼儿配方乳粉和特殊医学用途婴儿配方食品中乳铁蛋白含量进行测定,并对结果做了对比。分析结果表明两种方法的检测结果没有显著性差异,显著性概率P0.05。酶联免疫试剂盒检测法操作简单,分析速度较快,可以同时进行大批量的样品分析,但重复性稍差。高效液相色谱法灵敏度高,结果准确可靠,但样品前处理需经肝素亲和柱净化,价格昂贵、操作复杂,不适合分析大批量的样品。     

新型维生素检测试剂盒测定奶粉中叶酸的含量

考察新型维生素检测试剂盒在奶粉中叶酸含量测定方面的检测效果。按照试剂盒说明书测定奶粉中叶酸的含量,同时与国家标准GB 5413.16-2010和进口某品牌试剂盒对比;并进行回收率、批内和批间差异验证。结果表明:检测4种奶粉样品和1份标准质控样品,3种检测方法样品测定结果CV值小于10%,新型维生素检测试剂盒标准质控样品测定值与参考值的相对误差为4.0%,回收率为90%~110%(RSD10%),批内差异为3.49%~4.86%,批间差异为4.25%~6.56%。新型维生素检测试剂盒具有较好的准确度、精密度和稳定性,相对传统微生物方法操作简单、结果准确、重复性好,适用于奶粉中叶酸含量的检测。     

干湿混合工艺婴幼儿配方奶粉质量分析

研究了干湿混合工艺对婴幼儿配方奶粉营养素的均匀性和加速实验下营养素的衰减情况,并比较了干混前和干混后产品品质的差异。结果表明,样品中维生素D的均匀性极好,铁、叶黄素、核苷酸的均匀性良好。营养素在加速实验6个月条件下衰减率各不相同,其中宏量营养素除脂肪外基本不衰减。大部分维生素和一些可选择性添加的成分会有一定程度的衰减。干湿混合工艺生产的婴幼儿配方奶粉样品在干混前和干混后感官评分没有明显差异。     

两种纯化乳铁蛋白的肝素亲和柱性能对比研究

本实验运用高效液相色谱法对两种商品化肝素亲和柱的柱容量、实际样本纯化效果、重复性及操作便捷性进行了系统性对比,旨在研究两种商品化肝素亲和柱纯化乳及乳制品中乳铁蛋白的性能,同时为相关用户提供选择商品化肝素亲和柱的建议。研究结果显示,两种肝素亲和柱对1mg乳铁蛋白标准品的回收率为90.8%~95.6%,柱容量均能满足常见乳及乳制品中乳铁蛋白的检测需求;对牛乳及乳粉样本中乳铁蛋白的加标回收率为81%~95%,且重复使用3次仍能保持对牛乳及乳粉样本80%以上的加标回收率,即两种肝素亲和柱对乳及乳制品中乳铁蛋白均有良好的纯化效果且3次内可重复使用。在操作便捷性方面,两种肝素亲和柱在保证检测结果准确性的前提下,A柱操作简便、前处理时间短且可同时使用多个A柱检测多个样品,B柱则需要手动加压或使用蠕动泵进行操作,前处理时间较长且无法低成本地同时处理多个样本。综上所述,两种商品化的肝素亲和柱均可满足常见乳及乳制品中乳铁蛋白的纯化需求,在操作便捷性方面A柱优于B柱,相关用户可综合市场、价格等因素选择合适的产品。     

市售进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白含量的检测

目的 根据国家进口婴幼儿配方奶粉全项目检测的需求,采用酶联免疫方法对市售的多个品牌的进口婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量进行了定量测试,为相关乳品企业、检测部门和消费者提供有益参考.方法 采用实验室建立的酶联免疫方法,方法操作方便、灵敏度高、可同时定性定量检测多个样品.结果 对市售16种进口婴幼儿配方奶粉中乳铁蛋白的含量进行检测,检测出乳铁蛋白的含量从16 ～167 mg/100 g.结论 乳铁蛋白作为高端进口婴幼儿奶粉中添加的一种营养强化剂,在不同品牌的奶粉中的含量有一定的差异,提醒有关部门、乳品企业和消费者关注.     

肝素亲和柱在乳铁蛋白检测中的应用优化

乳铁蛋白是一种极具营养价值的活性糖蛋白,广泛应用到婴幼儿乳粉中,目前国内外未建立乳铁蛋白测定相关的标准。将肝素亲和柱(HiTrap TM Heparin HP柱)或相当者应用到乳铁蛋白检测前处理的净化过程中,建立一种高效、便捷的食品中乳铁蛋白测定的分析方法。试样中的乳铁蛋白经磷酸氢二钠溶液(0.20 mol/L,p H=8.00±0.5)提取,提取液经肝素亲和柱净化后,用磷酸氢二钠溶液淋洗,磷酸氢二钠-氯化钠溶液洗脱,并定容至3.0 mL。采用反相高效液相色谱柱分离,以紫外或者二极管阵列检测器于280 nm处检测,外标法定量。该方法系首次提出将肝素亲和柱应用到乳铁蛋白检测前处理过程中。该检测方法适合检测机构或乳品企业日常样品中乳铁蛋白的检测。     

超滤浓缩-HPLC法测定乳中乳铁蛋白质量分数及功能性评价

建立了超滤浓缩-高效液相色谱法测定乳中乳铁蛋白的方法。该方法样品处理为样品用磷酸盐缓冲液稀释后,样液先通过肝素免疫亲和柱净化、磷酸氢二钠-氯化钠溶液洗脱,然后采用超滤浓缩后直接测定。采用紫外检测器检测。本方法检出限为0.01 mg/100 g。该法具有样品处理简单方便,灵敏度高,重现性好,分析时间短等优点。该方法测定的为具有活性功能的乳铁蛋白含量,解决了乳铁蛋白质量分数较低的生乳及各类液态乳只采用肝素亲和柱净化后测定灵敏度不能满足测定要求的问题,对评价乳的营养价值提供准确数据。     

骆驼乳及其制品中非热变性乳铁蛋白含量的快速电泳迁移检测

骆驼乳具有丰富的营养价值和保健功能，但其活性蛋白—乳铁蛋白对热处理加工工艺敏感，因此骆驼乳及其制品中非热变性乳铁蛋白含量的快速测定对其生产工艺控制和营养价值评估至关重要。文章研究了乳铁蛋白热变性对DNA结合的影响，发现特异性的DNA序列仅能够结合非热变性驼乳铁蛋白而不结合热变性乳铁蛋白，据此建立了骆驼源乳铁蛋白的快速电泳迁移检测方法，仅需5 min即可完成一个样品检测，检出限为5.45μg/mL。该方法无需肝素亲和柱富集提取等复杂的样品前处理步骤，即可直接检测样品中活性乳铁蛋白含量，可用于包括骆驼乳在内的各种特色乳制品热加工工艺的精准控制及乳制品营养价值的评估。     

微生物法测定婴幼儿奶粉中泛酸含量的研究

目的：优化微生物法测定婴幼儿奶粉中泛酸含量的测定条件,为泛酸检测国标法的后续修订提供试验数据。方法：分析了国标法测定泛酸过程中有待改善的问题,并对检测过程中的菌液制备、前处理及吸光度测定等关键步骤进行重点探讨研究。结果：ATCC和CICC来源的植物乳杆菌均可用于测定泛酸;以直接接种透光率为80%的菌液至测试管中,或以5 mL菌液添加至400 mL灭菌测试培养基,得到的标准曲线及测定的样品结果最佳;直接提取法的结果较水解法高;酶标仪和紫外分光光度法测定结果相对偏差在5%以内,其中酶标仪法测定加标回收率达到了96.9%,相对标准偏差(RSD)为4.95%,更具优势。结论：微生物法测定泛酸的关键步骤经优化后,可简化操作过程,提高测定样品的准确性,其优化条件可作为泛酸检测国标法的后续修订的参考依据。     

胶体金免疫检测水产品中孔雀石绿残留的前处理方法优化

目的优化胶体金免疫检测水产品中孔雀石绿残留的前处理方法。方法采用超静音可调节式气泵代替氮吹仪或空气吹干仪,对商品化孔雀石绿胶体金免疫层析试剂盒前处理方法中的样品用量、提取剂用量、吹干体积量及吹干温度等条件进行优化,并将优化后的前处理方法在10种水产品中进行应用验证。结果在保证原有试剂盒检出限2μg/kg的前提下,减少样品用量和提取剂用量,节约检测成本;不需用大型仪器,降低检测人员操作要求;样品前处理步骤更加简便,单个样品前处理和检测总时间少于15 min;在10种水产品中具有较好的实际适用性。结论优化后的孔雀石绿免疫胶体金层析试剂盒前处理方法更加简便、快捷,可实现水产品中孔雀石绿的基层现场快速检测。     

高效液相色谱法测定奶粉质控样品中三聚氰胺的含量及其不确定度分析

目的 采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)测定奶粉质控样品中三聚氰胺的含量并进行不确定度的分析。方法 以GB/T 22388-2008 《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》第一法为基础, 在实验过程中进行2次提取改良前处理方法测定奶粉质控样品中三聚氰胺含量, 建立数学模型, 分析实验过程中所产生的不确定度的来源, 并进行不确定度的评定分析。结果 通过改进前处理方法, 回收率提高到80%~90%, 稳定性相对标准偏差为1.96%。当k=2(95%置信度)时, 奶粉质控样品中三聚氰胺含量为(0.61±0.021) mg/kg, 质控样品的测试结果为满意。结论 在实验操作过程中, 实验人员应熟练掌握分析技能, 严格按照操作规程进行检测, 以减少检测结果的不确定度, 从而保证检测结果的可靠性。     

电感耦合等离子体质谱直接进样测定奶粉中碘质量浓度

建立了一种快速测定奶粉中碘的方法,称取一定量奶粉样品用质量分数为0.5％乳化剂和10％氨水的混合溶液定容混匀,在线加入Te元素作为内标,使用ICP-MS直接测定,减少了复杂的前处理环节.通过对国家标准物质GBW 10017奶粉的多次测定考察了方法检出限,准确性,加标回收率等指标,同时进行此使用此方法对实际样品进行测定并与国标方法进行方法比对,以上指标和测定结果均能满足实际检测的需要.经过了实验室间比对和大批次长时间的测定的实践,该方法可以作为企业生产中的实时监控手段,有很强的实用价值.     

利用毛细管电泳法测定乳品中乳铁蛋白含量

将样品经样品缓冲液处理,毛细管柱选择为直径50 μm,有效长度400 mm的涂层中性毛细管柱;柱温为40℃;缓冲溶液为柠檬酸缓冲液(pH为3.0±0.2);工作电压为21 kV;检测波长为214nm;进样时间为5s,进行检测.结果乳铁蛋白平均回收率为75%～91%;相对标准偏差(RSD)为1.1%～2.8%;最低检出限位0.003mg/mL.该方法简便,准确,灵敏度高,能快速检测乳品中乳铁蛋白含量.     

不同来源乳中乳铁蛋白含量的高通量毛细管凝胶电泳检测

本研究在前期建立的毛细管凝胶电泳检测牛源乳铁蛋白的基础上，通过筛选分别能够与人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白特异性结合的DNA序列，实现了母乳及羊奶粉中人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白的快速准确定性定量检测。该方法采用非标记DNA探针替代荧光标记的DNA，进一步降低了检测成本，不需要复杂的样品前处理操作，仅需2 min即可完成一个样品的检测，对人源、羊源乳铁蛋白的检出限分别为11.74μg/m L、3.53μg/m L，可作为适用于其他特色生鲜乳（牦牛乳、骆驼乳、驴乳等）中乳铁蛋白含量的一种通用性检测方法。     

乳与乳制品中锡质量浓度检测方法研究

针对锡器具乳与乳制品,建立相应的锡检测方法,为食品安全检测作检测依据。用微波消解处理乳与乳制品样品,原子荧光法测定锡;通过优化还原剂浓度、载流液等实验条件,能达到比较理想的检测乳与乳制品中锡的质量浓度。结果表明,在最优实验条件下,仪器的检出限为0.060μg/L;在0~200μg/L质量浓度范围中,锡的线性相关系数均大于0.999。采用锡标准溶液及不同种类样品进行了精密度测定,结果的相对标准偏差均小于10%,加标回收率在88.7%~115%之间,回收率的RSD皆小于10%。该方法切实可行、样品前处理简单、结果稳定性好,适用乳与乳制品中锡质量浓度的检测。     

高效液相色谱法测定奶粉中双乙酸钠

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定奶粉中双乙酸钠的检测技术,优化样品前处理,既省去水蒸气蒸馏法操作繁琐费时,又保证了试验结果的准确性。试验结果表明:该方法可准确测定奶粉中双乙酸钠含量且在0.05~0.5mg/m L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,方法检出限为5.0 mg/kg,加标回收率为97.4%~103.4%,相对标准偏差在2.84%~3.58%(n=6)。该方法简单快速,灵敏度高。     

不同处理方式对乳中β-内酰胺酶稳定性的影响

利用青霉素酶活性检测试剂盒对乳中β-内酰胺酶的稳定性进行检测,分别对乳中β-内酰胺酶的保存时间、灭菌方法和酸碱处理对其稳定性影响进行了研究,从而对乳中β-内酰胺酶的稳定性进行全面的评估。结果表明,青霉素酶活性检测试剂盒检测乳中的β-内酰胺酶的最低检测限为2 U/m L。样品储存时间越长β-内酰胺酶的活性越小,并且减小程度与温度正相关。常规灭菌方法均不能使β-内酰胺酶彻底失活,酸碱处理对β-内酰胺酶有不同程度的抑制,其中碱性条件下比酸性条件下抑制作用强。     

原料乳及乳粉中水解蛋白掺假检测方法的改进

为了监控原料奶和奶粉中是否掺有水解蛋白,采用人为添加水解蛋白到原料乳和奶粉中的方法,使用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白,其中水解蛋白不会被除去,与饱和苦味酸产生沉淀反应的方法进行准确性和检出限的验证,对原料乳和奶粉中水解蛋白检测方法进行改进,满足对阳性样品的分级判定。该方法对原料乳的最低检出量0．05％,对奶粉的最低检出量为0．5％。     

液相色谱-串联质谱法测定牛乳基婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)测定牛乳基婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量的方法。方法试样中的乳铁蛋白经尿素-碳酸氢铵缓冲液提取,二硫苏糖醇还原,碘乙酰胺烷基化,37℃酶解后,特征肽段用液相色谱-串联质谱正离子模式测定,内标法定量。结果乳铁蛋白在0.00080-0.16 pmol/μL（相当于10~2000 mg/100 g）水平间线性关系良好,相关系数r≥0.9990,检出限为0.0020 pmol/μL,相当于25 mg/100g。检测结果加标回收率为92.00%~101.90%,相对标准偏差2.96%~4.15%。结论该方法准确好、特异性强、灵敏度高,可用于牛乳基婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量的测定。