罗非鱼鱼肉及组分蛋白酶解产物的抗氧化特性

采用胃蛋白酶、中性蛋白酶、Alcalase2.4L碱性蛋白酶分别酶解罗非鱼肉蛋白,研究比较不同蛋白酶在1、2、4、6、8h对罗非鱼肉蛋白的酶解效果及产物的抗氧化活性,结果表明:3种酶的酶解产物都具有一定的抗氧化活性,中性蛋白酶酶解产物的水解度和蛋白回收率最高,胃蛋白酶酶解产物对DPPH自由基和羟自由基的清除效果最好;综合各项指标选择中性蛋白酶对罗非鱼肉的组分蛋白(肌原纤维蛋白、肌浆蛋白、基质蛋白)进行4h酶解,研究比较不同组分蛋白的酶解效果及产物的抗氧化活性,结果表明:组分蛋白中基质蛋白酶解产物的蛋白回收率最高,为89.8%,肌原纤维蛋白酶解产物的水解度最高,为10.1%,肌浆蛋白酶解产物的抗氧化活性最好,羟自由基和DPPH自由基的IC50值分别为12.352mg/m L和3.554mg/m L。     

大豆蛋白的酶解及其抗氧化活性研究

研究了大豆分离蛋白的酶解条件及其产物的抗氧化活性,分析了酶解过程中蛋白水解度(DH)、TCA-NSI变化.结果表明,碱性蛋白酶用于制备大豆蛋白抗氧化肽具有明显的优势,正交试验优化酶解条件下得到的酶解物羟自由基清除率可达53.43%,清除活性的IC50为1.708 mg/mL,Fe2+螯合率为80.13%,螯合活性的IC50为0.822 mg/mL.酶解物的羟自由基清除活性、Fe2+螯合能力与DH、TCA-NSI之间并不呈线性关系.     

丝胶蛋白酶解产物抗氧化活性的研究

本实验采用六种蛋白酶对丝胶蛋白进行酶解,并分析其酶解产物清除二苯代苦味酰基 (DPPH) 自由基能力.通过脂质过氧化体系、还原力、金属螯合能力评价其酶解4h酶解产物的抗氧化活性.结果表明:各种酶解产物都呈现一定的清除DPPH自由基的能力,其中以碱性蛋白酶最强 (p＜0.05);各种酶解产物都存在抑制脂质过氧化活性,与其他蛋白酶相比碱性蛋白酶的抑制活性显著的高于其他酶 (p＜0.05);各种蛋白酶解产物具有一定的还原力和金属螯合能力.这些结果表明:六种酶解产物都具有显著的抗氧化活性.     

大米蛋白酶解产物抗氧化活性及功能性质研究

采用不同的蛋白酶(木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、精制中性蛋白酶和碱性蛋白酶)水解大米蛋白,以制备抗氧化活性肽.结果发现,精制中性蛋白酶水解大米蛋白得到的产物对DPPH自由基的清除能力最强,而且水解度其清除能力影响显著.同时测定了酶解产物的还原能力、金属离子螯合能力以及在Fe2引发的亚油酸过氧化物体系中的抗氧化活性,结果表明,此酶解产物表现出一定的还原能力,能够抑制由Fe2 引发的亚油酸过氧化物体系中的抗氧化活性,具有一定的金属离子螯合能力.结果表明,这种肽具有一定的抗氧化活性,具有良好的功能特性.     

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。     

8种食用菌蛋白及其酶解产物抗氧化活性研究

目的:综合评价8种食用菌(香菇、平菇、杏鲍菇、红菇、大球盖菇、草菇、白玉菇、蟹味菇)蛋白及其酶解产物的抗氧化活性。方法:采用碱性蛋白酶对8种食用菌蛋白进行酶解,以DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性、Fe2+螯合率和还原力为指标,对8种食用菌蛋白及其碱性蛋白酶酶解产物的抗氧化活性进行评价。结果:SDS-PAGE电泳图谱显示,碱性蛋白酶可以有效地将蛋白质水解为小分子的肽和氨基酸;草菇蛋白酶解产物的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除能力为(5 140.45±5.35) μg Trolox/g,ABTS自由基清除能力为(6.97±0.27) mmol Trolox/L,Fe²⁺螯合率为(79.86±0.45)%,还原力为0.350±0.001,且含有8种必需氨基酸(230.43±5.35) mg/g和较高抗氧化活性的疏水性氨基酸(209.95±4.95) mg/g、负电荷氨基酸(115.89±2.32) mg/g和芳香族氨基酸(57.86±1.74) mg/g。结论:草菇碱性蛋白酶解产物有较好的抗氧化活性且富含必需氨基酸、疏水性氨基酸、负电荷氨基酸及芳香族氨基酸。     

不同蛋白酶对小麦蛋白酶解物抗氧化活性的影响

小麦蛋白是小麦淀粉加工的副产物,酶解是提高小麦蛋白溶解性和功能性的有效方式,而酶解用酶种类可能对酶解产物的功能性如抗氧化活性有一定影响。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种常用的蛋白酶分别对小麦蛋白进行酶解,并对酶解4 h后酶解物的多肽得率、分子质量分布、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率、羟自由基(·OH)清除率等反映水解程度和抗氧化能力的主要指标进行评价。结果表明,风味蛋白酶酶解物中多肽得率最高,达91.44%,且分子质量小于3 000 D的多肽含量达76.9%;酶解物质量浓度为3 mg/m L时,木瓜蛋白酶酶解物对DPPH自由基清除作用最好,清除率为65.12%(P0.01),其次是风味蛋白酶(58.43%)和碱性蛋白酶(55.29%);碱性蛋白酶酶解物对O_2~-·清除率效果最好,清除率为58.68%(P0.01),其次是风味蛋白酶(49.25%);碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解物对·OH清除效果最佳,清除率分别为59.23%和58.16%。结果说明,蛋白酶种类对小麦蛋白酶解物抗氧化活性影响显著,风味蛋白酶对提高蛋白水解程度和生成小分子质量多肽的作用明显,而碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对提高酶解产物抗氧化活性效果较好。     

贻贝蛋白的酶解及其酶解物的抗氧化活性研究

比较了6种不同的蛋白酶(胰蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶)对贻贝粗蛋白的酶解效果,确定碱性蛋白酶为最适用酶。用此酶制备不同水解度(DH 6%、DH 11.5%、DH16%、DH 20%、DH 25%)的贻贝蛋白酶解物,考察不同DH酶解产物的抗氧化活性。试验结果表明:贻贝酶解产物具有较强的抗氧化活性,并呈一定的量效关系;当DH为25%时,贻贝酶解物对DPPH自由基、超氧自由基、羟基自由基的清除率最高,分别为77.4%、75.2%、43.4%,同时具有最强的金属螯合率(64.7%);而DH为16%时,酶解物对亚油酸的过氧化抑制作用较还原型谷胱甘肽强,达65.6%。DH对酶解产物的抗氧化活性有一定的影响,但在不同的抗氧化体系中,影响趋势不一致。     

酸枣仁蛋白的不同蛋白酶酶解产物功能特性及抗氧化活性分析

以酸枣仁为原料,采用碱提酸沉法对酸枣仁蛋白进行提取,用三种不同蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶）对酸枣仁蛋白进行酶解,得到三种酶解物,研究不同酸枣仁蛋白酶解物的功能特性和抗氧化活性。结果表明,与酸枣仁蛋白相比,不同酸枣仁蛋白酶解物的溶解性、持油性、起泡性及其稳定性、乳化性及其稳定性均具有不同程度地提高,其中,木瓜蛋白酶解物的溶解性、持油性、起泡性和乳化性最强,碱性蛋白酶解物的起泡稳定性和乳化稳定性最强;体外抗氧化研究表明,相比于酸枣仁蛋白,不同蛋白酶所得酶解产物的抗氧化活性均明显提高,其中,碱性蛋白酶酶解物的DPPH清除能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子清除率和ABTS自由基清除能力均高于其他酶解产物,当质量浓度为2.5 mg/mL时,DPPH自由基清除率最高为95.87％、超氧阴离子自由基率为44.77％、ABTS自由基清除率为90.84％、羟基自由基清除率为47.77％。本研究表明,酸枣仁蛋白酶解物具有较好的食品加工性能,其抗氧化活性明显增高,可以作为一种潜在的蛋白质资源应用到食品中,为酸枣仁蛋白酶解物在食品行业中的应用提供理论依据。     

鳄鱼皮酶解产物功能特性及抗氧化活性

为了解鳄鱼皮酶解产物功能特性和抗氧化活性,采用2种商业蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶)在各自最适反应条件下分别酶解鳄鱼皮,研究水解度(DH)、酶种类及pH值对酶解产物功能特性及抗氧化活性的影响.结果显示:随着酶解时间延长,鳄鱼皮水解度逐渐增加,鳄鱼皮在碱性蛋白酶酶解作用下水解度较高,水解4h时可达12％;木瓜蛋白酶酶解产物与碱性蛋白酶酶解产物的溶解性差异不显著(P＞0.05).相同水解度下,碱性蛋白酶酶解产物的热稳定性在pH4时优于木瓜蛋白酶酶解产物.酶解时间在1h之内,木瓜蛋白酶酶解物亚铁离子螯合力明显增强;随着时间延长,酶解产物亚铁离子螯合能力变化不显著(P＞0.05).酶解3h后碱性蛋白酶酶解产物亚铁离子螯合能力高于木瓜蛋白酶酶解产物,但木瓜蛋白酶酶解产物具有较强的清除DPPH自由基能力.综上表明,碱性蛋白酶水解作用的鳄鱼皮水解度较高,其酶解产物乳化活性和热稳定性优于木瓜蛋白酶酶解产物;鳄鱼皮酶解产物抗氧化能力较强,有较高的开发利用价值.     

应用电子自旋共振(ESR)法测定猪血浆蛋白水解物抗氧化活性的研究

将猪血浆蛋白(4% 浓度,W/W)用碱性蛋白酶水解0.5～5h。分别用FRAP 法和电子自旋共振(ESR)法测定水解物的还原能力和自由基清除能力。结果显示,水解物的还原能力随着水解度(DH)的增大而显著增强(p ＜ 0.05),并且水解物对DPPH 自由基、羟基自由基以及超氧自由基的清除能力随着水解时间的延长和蛋白浓度的增大而显著增强(p ＜ 0.05)。尽管未水解的猪血浆蛋白也有一定的抗氧化活性,但远远低于水解物的抗氧化活性(p ＜ 0.05)。此外,猪血浆蛋白碱性蛋白酶水解物的抗氧化活性和自由基清除能力与水解度(DH)和蛋白浓度密切相关。由于猪血浆蛋白水解物具有一定的抗氧化活性和自由基清除能力,所以可以作为一种有效的抗氧化剂而应用于食品工业中。     

不同蛋白酶水解高温花生粕和低温花生粕及其水解产物抗氧化活性的对比研究

由于高温花生粕中的花生蛋白在高温压榨过程中高度变性,因此在食品工业中蛋白利用率较低。本研究通过对比高温花生粕和低温花生粕经过不同商业蛋白酶(Alcalase 2.4 L,Neutrase,Papain,Protamex及Flavorzyme 500 MG)水解后水解产物特性的蛋白回收率、水解度、分子量分布及抗氧化活性,确定高温花生粕是否适合采用生物酶解的方式利用其中的蛋白质并筛选合适的蛋白酶。结果表明,高温花生粕经不同蛋白酶水解后,其蛋白质利用率均在60.61~67.86%,与低温花生粕相当;水解度及分子量分布方面,高温花生粕Flavorzyme水解产物的DH最高,高达44.92%,且含有较多的3 ku小分子肽及游离氨基酸;此外,高温花生粕不同酶水解产物的DPPH自由基清除活性均高于低温花生粕,这可能是由于高温花生粕水解产物中含有较多具有供电子的小分子肽、游离氨基酸以及高温压榨过程中生成的美拉德反应产物。     

不同蛋白酶水解棉籽蛋白制备抗氧化多肽的研究

利用6种蛋白酶对棉籽蛋白进行酶解,测定了各酶在水解过程中的水解度及其变化,对酶解产物的抗氧化活性进行了分析比较。研究表明,各蛋白酶在水解的前2h内,水解度迅速增加,2h之后水解曲线变得平缓。其中胃蛋白酶的水解能力最强,其4h水解产物水解度最大,为30.40%;胰蛋白酶的水解能力最差,最终水解产物的水解度为17.61%。中性蛋白酶水解产物的抗氧化活性较强,经测定其DPPH清除能力为54.95%,羟自由基清除能力为68.98%,超氧阴离子自由基清除能力为58.38%。     

猪血浆蛋白水解物抗氧化作用模式的研究

将猪血浆蛋白(4%浓度,W/W)分别用碱性蛋白酶水解0.5～6h。用pH-Stat方法测定其水解度;同时测定水解物还原能力、金属离子(Cu2+和Fe2+)鳌合能力以及对DPPH自由基清除能力来分析猪血浆蛋白水解物的抗氧化作用模式。结果表明,5h的猪血浆蛋白碱性蛋白酶水解物具有较高的还原能力、合成抗氧化剂所没有的金属鳌合能力以及较强的清除自由基的能力。通过比较不同浓度的水解物抗氧化性实验发现,随着水解物浓度的增高,其抗氧化活性显著增强(p＜0.05)。尽管未水解的猪血浆蛋白也有一定的抗氧化活性,但远远低于水解物的抗氧化活性(p＜0.05)。由于猪血浆蛋白水解物具有一定的抗氧化活性,所以可以作为金属离子鳌合剂、氢供体和自由基稳定剂用以抑制脂质氧化。     

蓖麻限制性酶解蛋白功能特性和抗氧化活性研究

目的研究蓖麻限制性酶解蛋白的功能特性和抗氧化活性,为进一步开发利用蓖麻蛋白提供一条新途径。方法以蓖麻子为原料,通过粉碎、脱脂、乙醇洗涤、沸水脱毒、冷冻干燥等操作步骤制备蓖麻浓缩蛋白,再分别用碱性蛋白酶(alcalase)、风味蛋白酶(flavourzyme)、复合蛋白酶(protamex)、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解得到5种蓖麻限制性酶解蛋白,并进行功能性质和抗氧化活性研究。结果蓖麻浓缩蛋白色泽洁白、无异味,其蛋白含量为73.08%,脂肪含量为1.13%,是一种优质的植物蛋白;蓖麻浓缩蛋白经蛋白酶限制性酶解后功能性质和抗氧化活性增加,功能性质大小顺序为:复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶,抗氧化活性大小顺序为:复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶。结论采用复合蛋白酶限制性酶解蓖麻蛋白,可得到功能特性和抗氧化活性都较好的限制性酶解蓖麻蛋白。     

Antihypertensive effect of alcalase generated mung bean protein hydrolysates in spontaneously hypertensive rats

Mung bean protein isolates were hydrolyzed by alcalase and neutrase, respectively, and the angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activities of the enzymatic hydrolysates were determined at different hydrolysis times. The highest ACE inhibitory activity recorded was for a hydrolysate generated by alcalase (IC₅₀: 0.64 mg protein/ml) after 2 h of hydrolysis. A significant decrease in systolic blood pressure was observed in spontaneously hypertensive rats following a single oral administration of this hydrolysate at a dose of 600 mg/kg of body weight.     

双酶法制备马鹿茸降血糖肽工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制效果

为探索制备马鹿茸降血糖肽的最佳工艺条件,以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出两种酶,根据其体外降血糖效果确定酶的作用顺序,再以水解度、α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白质回收率为指标进行单因素试验和正交试验,优化降血糖肽制备工艺条件。结果表明:碱性蛋白酶和风味蛋白酶比中性蛋白酶和胰蛋白酶更适合用于制备马鹿茸降血糖肽。采用碱性蛋白酶-风味蛋白酶顺序对马鹿茸进行水解,所得酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率、蛋白质回收率和水解度较高,分别为21.11%、39.12%、19.88%。通过单因素试验和正交试验确定双酶酶解最佳工艺条件为先用碱性蛋白酶在p H 8.0、60℃、底物质量分数12%、加酶量5 000 U/g条件下酶解3 h,再用风味蛋白酶于p H 6.5、45℃、底物质量分数5%、加酶量6 000 U/g条件下酶解1 h。双酶分步水解终产物的α-葡萄糖苷酶抑制率受质量浓度的影响,当质量浓度为3 mg/m L时,α-葡萄糖苷酶抑制率可达94.09%,IC50值为1.82 mg/m L。碱性蛋白酶-风味蛋白酶双酶分步水解马鹿茸可获得高α-葡萄糖苷酶抑制率的降血糖肽。     

酶水解制备具有潜在免调节活性大豆肽的研究

由于已有的一些研究报道初步表明带正电荷的小分子肽具有免疫调节作用,本研究分别应用Alcalase、Flavourzyme、Protease A和Peptidase R四种商业酶,单独使用或将它们进行组合,分别以大豆分离蛋白（SPI）、可溶性大豆蛋白（SSP）和不溶性大豆蛋白（InSP）为底物,在不同的酶-底物比、底物浓度、pH和温度条件下进行水解大豆蛋白,测定了水解度、水解产物的分子量分布和带正电荷肽的相对含量.结果表明,Alcalase在相同条件下可以获得较高的水解度和较大的水解蛋白平均分子量;以InSP作为底物的水解产物中带正电荷肽的相对含量最高.水解条件对水解度有较明显的影响,但是平均分子量和正电荷肽相对含量的影响较弱。     

Improvement of functional properties and antioxidant activities of cuttlefish (Sepia officinalis) muscle proteins hydrolyzed by Bacillus mojavensis A21 proteases

Functional properties and antioxidant activities of cuttlefish (Sepia officinalis) muscle protein hydrolysates, with different degrees of hydrolysis (DH from 7.3% to 18.8%), obtained by treatment with Bacillus mojavensis A21 alkaline proteases were investigated. Protein contents for all freeze-dried cuttlefish muscle protein hydrolysates (CMPHs) ranged from 80% to 86%. For the functional properties, hydrolysis by A21 proteases increased (p < 0.05) protein solubility to above 78% over a wide pH range (2.0–11.0). However, the interfacial activities (emulsion activity index, emulsion stability index, foaming capacity and foaming stability) decreased with the increase of the DH. All CMPHs exhibited significant metal chelating activity and DPPH free radical-scavenging activity, and inhibited linoleic acid peroxidation. Antioxidant properties of protein hydrolysates increased with protein hydrolysis and the highest activities were obtained at DH of 16%. The IC₅₀ values for DPPH radical-scavenging and metal chelating activities were found to be 0.52 ± 0.01 mg/ml and 0.67 ± 0.13 mg/ml. The obtained results suggested that functional properties and antioxidant activities of cuttlefish muscle protein hydrolysates were influenced by the degree of hydrolysis.The composition of amino acids of undigested and hydrolyzed proteins was determined. CMPHs have a high percentage of essential amino acids such as arginine, lysine, histidine and leucine. They have a high nutritional value and could be used as supplement to poorly balanced dietary proteins.